• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    咪唑乙煙酸降解菌的分離鑒定及降解條件優(yōu)化

    2017-11-04 06:34:33呂翻洋許澤華毛曉潔孫建光
    生物技術(shù)通報(bào) 2017年10期
    關(guān)鍵詞:煙酸咪唑除草劑

    呂翻洋 許澤華 毛曉潔 孫建光

    (1. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所 農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)微生物資源收集與保藏重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100081;2. 寧夏農(nóng)林科學(xué)院寧夏回族自治區(qū)銀川市 750002)

    咪唑乙煙酸降解菌的分離鑒定及降解條件優(yōu)化

    呂翻洋1許澤華2毛曉潔1孫建光1

    (1. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所 農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)微生物資源收集與保藏重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100081;2. 寧夏農(nóng)林科學(xué)院寧夏回族自治區(qū)銀川市 750002)

    分離、鑒定除草劑咪唑乙煙酸降解菌IM9603并優(yōu)化其降解條件。通過形態(tài)學(xué),生理生化反應(yīng),16S rDNA初步鑒定該菌株分類地位,利用Box-Behnken優(yōu)化該菌株對咪唑乙煙酸的降解條件。結(jié)果顯示,初步鑒定該菌株屬于表短桿菌屬,在條件(pH5.5,溫度26.2℃,接菌量1 mL(OD600=1))下降解能力最強(qiáng),菌株IM9603在咪唑乙煙酸初始濃度為50 mg/L 的條件下在7 d內(nèi)降解率可達(dá)93.08%。分離出的咪唑乙煙酸降解菌屬于Brevibacterium epidermidis菌株,該菌株對咪唑乙煙酸具有較高的降解能力,在環(huán)境修復(fù)方面存在潛在的應(yīng)用前景。

    咪唑乙煙酸;生物降解;短桿菌屬;響應(yīng)面分析

    環(huán)境中除草劑的降解主要有生物降解和非生物降解兩種方法[9],微生物是除草劑降解的主要因素,它可以利用除草劑為碳源或氮源供其自身生長和繁殖,從而達(dá)到降解除草劑的目的。微生物降解除草劑對環(huán)境無污染,安全性較高[10],所以分離篩選能高效降解咪唑乙煙酸的微生物是解決以上問題最為有效的途徑。目前國內(nèi)外有關(guān)咪唑乙煙酸生物降解的報(bào)道較少,Ding[11]分離到一株降解菌BH-1,在72 h內(nèi)能降解咪唑乙煙酸(500 mg/L-1)超過90%,該 菌 鑒 定 為 Alcaligenes sp.。Wang[12]發(fā) 現(xiàn) 菌 株WWX-1 Arthrobacter crystallopoietes可以利用咪唑乙煙酸作為唯一碳源生長。Liu[13]在中國東北黑土地分離到一株高效降解菌Acinetobacter baumannii IB5,并對其降解特性以及代謝產(chǎn)物進(jìn)行了研究。

    本研究利用長期施用咪唑乙煙酸的大豆田土壤樣品,采用富集馴化的方法分離得到1株可利用咪唑乙煙酸為唯一碳源生長同時(shí)可降解咪唑乙煙酸的菌株IM9603,并對其分類地位和降解特性進(jìn)行了研究,同時(shí)優(yōu)化其對咪唑乙煙酸的降解條件,以期為構(gòu)建高效咪唑乙煙酸降解工程菌和降解酶制劑提供菌種資源。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試劑 咪唑乙煙酸標(biāo)準(zhǔn)品(純度99%)購于美國Sigma-Aldrich公司,咪唑乙煙酸原藥(96%)由農(nóng)藥檢定所提供。甲醇和乙腈均為色譜級,實(shí)驗(yàn)中所用其他試劑均為分析純。高效液相色譜檢測所用樣品均用0.45 μm 的有機(jī)相針式過濾。

    1.1.2 培養(yǎng)基 富集培養(yǎng)基(TYC):5 g 胰蛋白胨,5 g 酵母粉,1 g K2HPO4,1 g 葡萄糖,蒸餾水1 000mL。無機(jī)鹽培養(yǎng)基(MSM):1 g NH4NO3,1 g NaCl,0.5 g KH2PO4,1.5 g K2HPO4,0.1 g MgSO4· 7H2O,蒸餾水1 000 mL。

    LB培養(yǎng)基:5 g酵母膏,10 g蛋白胨,10 g NaCl,蒸餾水1 000 mL。

    1.2 方法

    1.2.1 富集,分離咪唑乙煙酸降解菌 稱取10 g長期施用咪唑乙煙酸的大豆田土壤樣品并加入到含有100 mL富集培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中,28℃、160r/min培養(yǎng)24 h,取上清液10 mL置于含100 mg/L咪唑乙煙酸的100 mL液體無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,28℃、160 r/min黑暗培養(yǎng),7 d后取10 mL轉(zhuǎn)接至含200 mg/L咪唑乙煙酸的100 mL無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)7 d。以此類推,連續(xù)富集培養(yǎng)至咪唑乙煙酸終濃度為800 mg/L。吸取100 μL富集液涂布于含800 mg/L咪唑乙煙酸的無機(jī)鹽平板上,28℃培養(yǎng),直到平板上長出肉眼可見的菌落,挑取菌落進(jìn)一步分離純化。共分離到12株形態(tài)差異的菌株。

    將這12株菌株接種于液體LB培養(yǎng)基中,28℃生長24 h,離心收集菌體并用液體無機(jī)鹽培養(yǎng)基清洗菌體,調(diào)節(jié)OD600使OD600值為1,吸取以上菌懸液1 mL于100 mL含50 mg/L咪唑乙煙酸的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中28℃、160 r/min黑暗培養(yǎng),7 d后吸取培養(yǎng)液并用0.45 μm有機(jī)相針式過濾器過濾,用高效液相色譜(HPLC)測定菌株降解率。

    1.2.2 降解菌的鑒定 選取降解率最高的菌株IM9603進(jìn)行下一步研究。通過形態(tài)學(xué),生理生化鑒定[14]及16S rDNA鑒定該菌株。16S rDNA擴(kuò)增引物為通用引物:27F(AGAGTTTGATCCTGGCTCAG)和 1492R(TACGGTTACCTTGTTACGACTT)。 將PCR產(chǎn)物送至上海生工生物公司測序,測得序列提交至NCBI,并在網(wǎng)站EzTaxon 在線比對,采用MEGA 6.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

    1.2.3 咪唑乙煙酸降解菌降解條件優(yōu)化 影響菌株降解的重要因素包括溫度、pH和接菌量[15]。本實(shí)驗(yàn)所采用溫度范圍:20-40℃;pH:5.0-9.0;接菌量:1-3 mL(OD600= 1)。

    采用Box-Behnken統(tǒng)計(jì)學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法對以上3個(gè)影響因素進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表2,試驗(yàn)結(jié)果為菌株IM9603在含有50 mg/L咪唑乙煙酸無機(jī)鹽培養(yǎng)基中生長第7天的降解率。

    應(yīng)用SAS統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件對表2結(jié)果進(jìn)行分析,同時(shí)繪制三維響應(yīng)面圖,從而獲得最優(yōu)降解條件的理論值。二項(xiàng)式如下所示:

    Yi表示除草劑殘余量;Xi,Xj表示可變量;b0表示恒變量;bi表示線性系數(shù);bij表示相互系數(shù);bii表示二項(xiàng)系數(shù)。

    1.2.4 菌株的生長以及咪唑乙煙酸降解率的測定 在最優(yōu)條件(pH5.5,溫度26.2℃,接菌量1mL(OD600=1))下,將菌株IM9603接種于咪唑乙煙酸濃度為50 mg/L的液體無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng),每隔12 h取樣,并用分光光度計(jì)測定600 nm下的吸光值,繪制菌株IM9603的生長曲線。

    在上述最優(yōu)條件下每隔12 h取樣,經(jīng)0.45 μm有機(jī)相針式過濾器過濾,將濾液置于4℃冰箱保存,并用高效液相色譜測定其峰面積。

    高效液相色譜測定條件:Agilent 1100 Series(具有可調(diào)波長紫外分光檢測器),帶色譜工作站;色譜柱:C18 DiamosilTM 反相柱,250 mm×4.6 mm(i.d.),粒徑5 μm(迪馬公司)。流動相:乙腈 ∶水(冰乙酸調(diào)pH3.0)=40∶60檢測波長:258 nm;流速:1.0 mL/min;進(jìn)樣體積:10 μL;柱溫:30℃。

    1.2.5 降解菌對咪唑乙煙酸的降解動力曲線 向100 mL液體無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中加入96%的咪唑乙煙酸,使其終濃度依次為50、100、200、300、400mg/L,各接入 1 mL菌懸液(OD600=1),于 28℃、160 r/min、黑暗條件下培養(yǎng)。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)平行,每12 h之后取樣并測其峰面積計(jì)算降解率。

    2 結(jié)果

    2.1 降解菌的分離和生理生化特性

    從東北大豆田土壤樣品中經(jīng)過富集、篩選共分離到12株形態(tài)不同,具有降解咪唑乙煙酸能力的菌株,選取降解能力最強(qiáng)的菌株IM9603做進(jìn)一步研究。菌株IM9603為革蘭氏陽性菌,在MSM培養(yǎng)基上呈圓形,中間凸,表面光滑,淡黃色,表面潮濕,不透明。生理生化特性測定結(jié)果,見表1。

    2.2 菌株IM9603 16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育分析

    對菌株IM9603進(jìn)行16S rDNA擴(kuò)增并測序,序列在GenBank中的注冊號為(KX098473),經(jīng)過EzTaxon在線比對發(fā)現(xiàn)菌株IM9603的16S rDNA與表皮短桿菌的16S rDNA相似度最高,相似性達(dá)99.19%,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(圖1)。結(jié)合形態(tài)學(xué)特征、生理生化特性和系統(tǒng)發(fā)育樹分析,初步鑒定該菌株為表皮短桿菌(Brevibacterium epidermidis)。

    表1 菌株IM9603 KX098473 生理生化反應(yīng)測定

    2.3 菌株降解條件的優(yōu)化

    應(yīng)用SAS軟件對表2數(shù)據(jù)進(jìn)行了回歸分析,得到咪唑乙煙酸殘留量(Y)對自變量溫度(X1),pH值(X2)和接種量(X3)的二次多項(xiàng)式方程如下:

    結(jié)果分析顯示溫度,pH值對菌株降解咪唑乙煙酸影響顯著(P<0.05),而菌體接種量和各因素之間的相互作用影響不顯著(P>0.05)。

    在接種量為1 mL(OD600=1)的條件下,應(yīng)用Box-Behnken繪制溫度、pH與咪唑乙煙酸殘留量之間的響應(yīng)面圖(圖2)。在駐點(diǎn)處的溫度為26.2℃,pH為5.5時(shí),咪唑乙煙酸殘留量最低。因此得出菌株IM9603降解咪唑乙煙酸的最優(yōu)條件為:溫度26.2℃,pH5.5,接種量為1 mL(OD600=1)。

    2.4 菌株生長和降解能力的測定

    如圖3所示,在最優(yōu)條件下第4天時(shí)菌株IM9603的生長和降解率均達(dá)到了最大值,咪唑乙煙酸的降解率在65%以上。4 d以后駐點(diǎn)開始衰退,降解能力隨之下降。在第7天時(shí)IM9603的降解率達(dá)到了90%以上。

    圖1 菌株IM9603(KX098473)16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育樹

    表2 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    圖2 接菌量為1 mL(OD600 =1),溫度和pH值對菌株IM9603降解咪唑乙煙酸的響應(yīng)面圖

    圖3 最優(yōu)條件下菌株IM9603的生長曲線和咪唑乙煙酸的降解

    2.5 菌株在不同濃度咪唑乙煙酸的降解動力曲線

    在最優(yōu)條件下菌株IM9603的降解動力學(xué)曲線,如圖4所示,在第5天時(shí)咪唑乙煙酸初始濃度為50 mg/L和100 mg/L時(shí),降解率分別達(dá)到了89.98% 和87.05%,咪唑乙煙酸初始濃度為200 mg/L和300 mg/L時(shí)降解率分別達(dá)到77.49% 和 69.43%。然而,咪唑乙煙酸初始濃度為400 mg/L時(shí),降解率只有64.56%。

    圖4 最優(yōu)條件下菌株IM9603對除草劑咪唑乙煙酸的降解動力曲線

    3 討論

    本研究以咪唑乙煙酸為唯一碳源,從土壤樣品中分離得到一株高效降解菌IM9603。經(jīng)過形態(tài)學(xué)特征觀察、生理生化實(shí)驗(yàn)、16S rDNA序列分析,將其鑒定為表皮短桿菌屬。到目前為止,研究者已經(jīng)分離到多種可以降解咪唑乙煙酸的微生物,包括細(xì)菌、真菌和放線菌等[16],其中對細(xì)菌及真菌的研究較為深入。在細(xì)菌降解除草劑的研究中,假單胞菌屬、芽孢菌屬、黃桿菌屬和產(chǎn)堿菌屬等研究較多,對咪唑乙煙酸的降解能力較強(qiáng)[17]。本研究分離得到的表皮短桿菌具有高效降解咪唑乙煙酸的能力,目前尚未見該菌屬對咪唑乙煙酸降解的相關(guān)報(bào)道。

    除草劑的生物降解是目前除草劑降解研究的熱點(diǎn),并且已經(jīng)取得了相當(dāng)大的研究進(jìn)展,但是應(yīng)用微生物進(jìn)行實(shí)際的生物修復(fù)往往受到環(huán)境中很多因素的影響,如環(huán)境樣品中的pH,水分及有機(jī)質(zhì)的含量、溫度等都影響著除草劑的降解[18]。研究表明,不同比例的腐殖酸可以加快咪唑乙煙酸的降解速率[19]。本研究針對性的選擇了pH(5.0-9.0)和溫度(20-40)℃接菌量(1-3 mL)為影響因子通過Box-Behnken響應(yīng)面法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),優(yōu)化菌株IM9603對咪唑乙煙酸在不同溫度以及pH條件下的降解,探究其在不同條件下的降解能力,從而達(dá)到應(yīng)用的潛力。結(jié)果表明在最優(yōu)條件(pH5.5,溫度26.2℃,接菌量1 mL(OD600=1))下,菌株IM9603降解能力最強(qiáng)。

    降解動力學(xué)的研究為實(shí)際生產(chǎn)過程中除草劑的處理提供了理論依據(jù),進(jìn)而達(dá)到減少能耗同時(shí)縮短降解周期的目的[20]。本研究發(fā)現(xiàn)在不同濃度咪唑乙煙酸的降解動力曲線中,菌株IM9603均表現(xiàn)出降解能力,在咪唑乙煙酸含量為50 mg/L降解能力最強(qiáng),降解率可達(dá)93%。在咪唑乙煙酸濃度為400 mg/L時(shí)降解能力最差,降解率僅為64%。因此,在菌株IM9603實(shí)際應(yīng)用過程中可以通過稀釋等方法調(diào)整咪唑乙煙酸的濃度,從而實(shí)現(xiàn)對咪唑乙煙酸的高效降解。

    隨著研究的進(jìn)一步深入以及研究者對除草劑降解規(guī)律的掌握,除草劑的生物降解將會有很大的發(fā)展空間,在除草劑環(huán)境污染的治理過程中將發(fā)揮巨大的作用[21],如何實(shí)現(xiàn)高效、安全、低成本、無二次污染[22]降解是咪唑乙煙酸生物降解未來發(fā)展方向。有關(guān)該菌株對咪唑乙煙酸的代謝產(chǎn)物的測定,其在土壤中的生態(tài)學(xué)行為,以及其降解基因的克隆及調(diào)控和降解酶制劑等相關(guān)研究還待深入。

    4 結(jié)論

    從大豆田土壤樣品中分離到一株高效咪唑乙煙酸降解菌IM9603,經(jīng)形態(tài)學(xué)、生理生化以及16S rDNA初步鑒定為表皮短桿菌Brevibacterium epidermidis?;贐ox-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì),結(jié)合SAS軟件進(jìn)行了響應(yīng)面分析,優(yōu)化得到了菌株IM9603對除草劑咪唑乙煙酸降解的最優(yōu)條件(溫度26.2℃;pH為5.5)在此最優(yōu)條件下,菌株IM9603在7 d時(shí)對50 mg/L濃度的咪唑乙煙酸降解率達(dá)到了90%以上,同時(shí),測定了菌株IM9603在最優(yōu)條件下對咪唑乙煙酸降解的動力學(xué)曲線,結(jié)果表明在低濃度咪唑乙煙酸含量情況下降解率更高。

    [1]Espy R, Pelton E, Opseth A, et al. Potodegradation of the herbicide imazethapyr in aqueous solution:effects of wavelength, pH, and natural organic matter(NOM)and analysis of photoproducts[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2011, 59:7277-7285.

    [2]Kaloumenos N, Capote N, Aguado A, et al. Red rice(Oryza sativa)cross-resistance to imidazolinone herbicides used in resistant rice cultivars grown in northern Greece[J]. Pesticide Biochemistry and Physiology, 2013, 105:177-183.

    [3]Goeiz J, Lavy T, Gbur E. Degradation and field persistence of imazethapyr[J]. Weed Science, 1990, 38 :421-428.

    [4]Singh H, Reager ML, Verma JK, et al. Growth, yield performance and nutrient content as influenced by intercropping and weed control measures in moth bean[J]. Environment and Ecology, 2017, 35 :193-196.

    [5]劉亞光, 龐福德. 咪唑乙煙酸高效降解菌降解性能的研究[J].植物保護(hù), 2009, 35(2):63-66.

    [6]Perez-Iglesias JM, Soloneski S, Nikoloff N, et al. Toxic and genotoxic effects of the imazethapyr-based herbicide formulation Pivot H(R)on montevideo tree frog Hypsiboas pulchellus tadpoles(Anura,Hylidae)[J]. Ecotoxicology and Environmental Safety, 2015,119:15-24.

    [7]García-Garijo A, Palma F, Iribarne C, et al. Alterations induced by imazamox on acetohydroxyacid synthase activity of common bean(Phaseolus vulgaris)depend on leaf position[J]. Pesticide Biochemistry and Physiology, 2012, 104:72-76.

    [8] García-Garijo A, Palma F, Lluch C, et al. Physiological and biochemical responses of common vetch to the imazamox accumulation[J]. Plant Physiology and Biochemistry, 2013, 73:321-325.

    [9]Maria S, Jens A, Sebastian R, et al. Microbial degradation of the benzonitrile herbicides dichlobenil, bromoxynil and ioxynil in soil and subsurface environments—Insights into degradation pathways,persistent metabolites and involved degrader organisms[J].Environmental Pollution, 2008, 154:155-168.

    [10]Aiehele TM, Penner D, Penner D. Adsorption, desorption and degradation of imidazolinones in soil[J]. Weed Technology,2005, 19:154-159.

    [11]Ding W, Cheng Z, Qu JJ, et al. Isolation and identification of imazethapyr degradable bacteria and its degradation characteristics[J]. Huan Jing Ke Xue, 2008, 29 :1359-1362.

    [12] Wang X, Liu X, Wang H, et al. Utilization and degradation of imazaquin by a naturally occurring isolate of Arthrobacter crystallopoietes[J]. Chemosphere, 2007, 67 :2156-2162.

    [13]Liu CG, Yang X, Lai Y, et al. Imazamox microbial degradation by common clinical bacteria:Acinetobacter baumannii IB5 isolated from black soil in China shows high potency[J]. Journal of Integrative Agriculture, 2016, 15:1798-1807.

    [14]東秀珠, 蔡妙英. 常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊[M]. 北京:科學(xué)出版社, 2001:267-273.

    [15]Zhang C, Wang SH, Yan YC. Isomerization and biodegradation of beta-cypermethrin by Pseudomonas aeruginosa CH7 with biosurfactant production[J]. Bioresource Technology, 2011,102:7139-7146.

    [16]陳玉潔, 束長龍, 劉新剛. 咪唑乙煙酸降解菌分離、鑒定及降解特性研究[J]. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào), 2011, 13(4):387-389.

    [17] Diamond ML, de Wit CA, Molander S, et al. Exploring the planetary boundary for chemical pollution[J]. Environment International,2015, 78:8-15.

    [18]Gangadharan D, Sivaramakrishnan S, Nampoothiri KM, et al.Response surface methodology for the optimization of alpha amylase production by Bacillus amyloliquefaciens[J]. Bioresource Technology, 2008, 99:4597-4602.

    [19]Huang X, Pan J, Liang B, et al. Isolation, characterization of a strain capable of degrading imazethapyr and its use in degradation of the herbicide in soil[J]. Current Microbiology, 2009, 59 :363-367.

    [20]洪昌紅, 黃本勝, 邱靜等. 對硝基酚在超高交聯(lián)吸附樹脂NDA-701 上的脫附行為研究[J]. 環(huán)境科學(xué), 2011, 32:1388-1393.

    [21]Villaverde J, Rubio-Bellido M, Merchan F, et al. Bioremediation of diuron contaminated soils by a novel degrading microbial consortium[J]. Journal of Environmental Management, 2017,188:379-386.

    [22]陳玉潔, 張浩, 張杰. 咪唑乙煙酸降解菌研究進(jìn)展[J]. 公共植保與綠色防控, 2010, 3:208-213.

    Isolation and Identification of an Imazethapyr-degrading Bacterium,and Optimization of Biodegradation Conditions

    Lü Fan-yang1XU Ze-hua2MAO Xiao-jie1SUN Jian-guang1
    (1. Key Laboratory of Microbial Resources,Ministry of Agriculture / Institute of Agricultural Resources and Regional Planning,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081 ;2. Germplasm Resources Institute,Ningxia Academy of Agriculture and forestry Sciences,Yinchuan 750002)

    This work aims to isolate and identify the strain IM9603 degrading herbicide imazethapyr,and optimize the degradation condition. IM9603 was identified as Brevibacterium sp. based on morphological,physio-biochemical characteristics,and analysis of 16S rDNA.Response surface methodology Box-Behnken was applied to optimize the degradation conditions. As results,strain IM9603 degraded 93.08% of the initial 50 mg/L supply of imazethapyr under the optimal condition(pH5 and 26.2℃)within 7 days,which was its best degradability. The isolated imazethapyr-degrading strain was Brevibacterium epidermidis,and presented high degradability to imazethapyr,suggesting that is owns a great potential in the environmental rehabilitation caused by imazethapyr.

    imazethapyr;biodegradation;Brevibacterium sp.;response surface methodology

    10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0076

    咪唑酮類除草劑從20世紀(jì)80年代開始被廣泛應(yīng)用于大豆田化學(xué)除草[1]。該類除草劑主要通過抑制植物乙酰乳酸合酶(ALS)合成,阻斷植物必需氨基酸的合成從而使植物死亡[2],目前已經(jīng)被證實(shí)該類除草劑殘留時(shí)間較長,不僅對后茬作物造成嚴(yán)重危害,導(dǎo)致輪作困難,同時(shí)還給環(huán)境帶來了嚴(yán)重的污染[3]。

    咪唑乙煙酸(imazethapyr)是咪唑酮類除草劑的種類之一,它具有殺草譜廣、選擇性強(qiáng)、活性高等優(yōu)點(diǎn)[4]。在20世紀(jì)90年代它曾是美國大豆田的第一大除草劑品種,目前主要在中國東北地區(qū)大豆田中使用[5],主要用來控制一年生及多年生闊葉雜草。該類除草劑有效期長,在土壤中的吸附系數(shù)較低,而且在水中的溶解度較大,不僅對下茬敏感作物產(chǎn)生要害,同時(shí)有可能對地下水造成一定程度的污染[6]。García-Garijo[7-8]發(fā)現(xiàn)咪唑乙煙酸可以快速積累在下茬作物中,如大豆和野豌豆中,在植物組織中抑制ALS的產(chǎn)生。鑒于咪唑乙煙酸的廣泛使用和相關(guān)風(fēng)險(xiǎn),快速有效去除農(nóng)田土壤中咪唑乙煙酸殘留物是至關(guān)重要的問題。

    2017-02-13

    公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201203045)

    呂翻洋,女,碩士研究生,研究方向:環(huán)境微生物;E-mail:lvfanyang150@163.com

    孫建光,男,博士后,研究員,研究方向:農(nóng)業(yè)微生物資源,環(huán)境污染修復(fù);E-mail:jgsun@caas.ac.cn

    (責(zé)任編輯 狄艷紅)

    猜你喜歡
    煙酸咪唑除草劑
    益氣養(yǎng)陰方聯(lián)合甲巰咪唑片治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥的臨床觀察
    封閉式除草劑什么時(shí)間噴最合適
    如何正確選擇使用農(nóng)藥及除草劑
    左咪唑與丙硫苯咪唑驅(qū)豬體內(nèi)寄生蟲的效果對比試驗(yàn)
    普萘洛爾與甲巰咪唑?qū)卓哼M(jìn)癥的臨床治療效果觀察
    相轉(zhuǎn)移催化合成2-氨基異煙酸
    玉米田除草劑的那些事
    營銷界(2015年23期)2015-02-28 22:06:18
    鋱-2-甲硫基煙酸摻雜配合物的合成及熒光性質(zhì)研究
    右美托咪定聯(lián)合咪唑安定鎮(zhèn)靜在第三磨牙拔除術(shù)中的應(yīng)用
    加拿大:擬修訂除草劑Pyroxasulfone的最大殘留限量
    男女免费视频国产| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲专区字幕在线| 午夜视频精品福利| 国产精品一二三区在线看| av在线播放精品| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产一区二区三区av在线| 日韩视频在线欧美| 老司机亚洲免费影院| 777米奇影视久久| 大香蕉久久成人网| 黄频高清免费视频| 国产精品二区激情视频| 十八禁网站网址无遮挡| 欧美97在线视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 午夜福利视频在线观看免费| 国产深夜福利视频在线观看| 成人国产一区最新在线观看| 成人国产一区最新在线观看| 少妇精品久久久久久久| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 少妇被粗大的猛进出69影院| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 日韩有码中文字幕| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧美日韩黄片免| 一区二区日韩欧美中文字幕| 天天操日日干夜夜撸| 国产一区二区在线观看av| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 秋霞在线观看毛片| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 欧美日韩视频精品一区| 欧美另类一区| 97精品久久久久久久久久精品| 国产成人系列免费观看| 亚洲,欧美精品.| 丝袜喷水一区| 丝袜人妻中文字幕| 久久久久国内视频| 99香蕉大伊视频| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产三级黄色录像| 十八禁网站免费在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 99精品欧美一区二区三区四区| 90打野战视频偷拍视频| 久久 成人 亚洲| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 满18在线观看网站| 精品国产乱码久久久久久男人| av有码第一页| 搡老岳熟女国产| 三上悠亚av全集在线观看| 精品久久久久久电影网| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产一区二区三区综合在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美黑人欧美精品刺激| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 成人国产av品久久久| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 欧美久久黑人一区二区| av不卡在线播放| 新久久久久国产一级毛片| 女性生殖器流出的白浆| 99热网站在线观看| 国产在视频线精品| 无遮挡黄片免费观看| 大陆偷拍与自拍| 一级毛片女人18水好多| 高清av免费在线| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 手机成人av网站| 女性被躁到高潮视频| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 一本色道久久久久久精品综合| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品欧美一区二区三区在线| svipshipincom国产片| 9色porny在线观看| 美国免费a级毛片| 国产精品国产三级国产专区5o| 午夜福利一区二区在线看| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲精品国产一区二区精华液| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | av天堂在线播放| 91成年电影在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| h视频一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av | 99精品久久久久人妻精品| 日日爽夜夜爽网站| 极品少妇高潮喷水抽搐| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲免费av在线视频| 精品久久久精品久久久| 久久久精品免费免费高清| 老鸭窝网址在线观看| 欧美中文综合在线视频| 婷婷色av中文字幕| videosex国产| 欧美一级毛片孕妇| 一级黄色大片毛片| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲av男天堂| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久天堂一区二区三区四区| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产亚洲精品一区二区www | 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产有黄有色有爽视频| 久久久久精品国产欧美久久久 | 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲伊人久久精品综合| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 亚洲人成电影观看| 久久综合国产亚洲精品| 欧美+亚洲+日韩+国产| 午夜福利在线免费观看网站| 首页视频小说图片口味搜索| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲成人国产一区在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲精华国产精华精| 精品一区在线观看国产| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 黄色视频,在线免费观看| 国产成人免费观看mmmm| 九色亚洲精品在线播放| 精品少妇黑人巨大在线播放| 99热网站在线观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产91精品成人一区二区三区 | 国产男女内射视频| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美另类一区| 亚洲精品av麻豆狂野| √禁漫天堂资源中文www| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 大码成人一级视频| 久久久精品94久久精品| xxxhd国产人妻xxx| 五月天丁香电影| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 搡老岳熟女国产| 国产精品.久久久| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 狂野欧美激情性xxxx| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一二三四在线观看免费中文在| 97在线人人人人妻| www.av在线官网国产| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 狂野欧美激情性xxxx| 国产精品久久久久久精品电影小说| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产深夜福利视频在线观看| 麻豆av在线久日| 欧美精品av麻豆av| av在线app专区| 亚洲av欧美aⅴ国产| 中文字幕最新亚洲高清| 免费看十八禁软件| 亚洲一区二区三区欧美精品| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 99九九在线精品视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 黄片小视频在线播放| 69av精品久久久久久 | 搡老岳熟女国产| 亚洲性夜色夜夜综合| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲色图综合在线观看| 欧美日韩黄片免| 精品乱码久久久久久99久播| 1024视频免费在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 国产一级毛片在线| 一本一本久久a久久精品综合妖精| a级毛片在线看网站| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| av一本久久久久| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 国产深夜福利视频在线观看| 考比视频在线观看| 天天添夜夜摸| 久久免费观看电影| 亚洲精华国产精华精| 亚洲国产av新网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久久精品区二区三区| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲国产av影院在线观看| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲成人国产一区在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲五月色婷婷综合| 女性生殖器流出的白浆| 搡老乐熟女国产| 18禁观看日本| 一级,二级,三级黄色视频| 窝窝影院91人妻| tube8黄色片| 国产黄色免费在线视频| 咕卡用的链子| 欧美激情 高清一区二区三区| bbb黄色大片| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久这里只有精品19| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 欧美国产精品一级二级三级| www.自偷自拍.com| 久久精品亚洲av国产电影网| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 在线永久观看黄色视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 飞空精品影院首页| 亚洲一区二区三区欧美精品| 欧美性长视频在线观看| 黄色视频不卡| www.精华液| 成人国产一区最新在线观看| 成人手机av| 老司机深夜福利视频在线观看 | 欧美日韩国产mv在线观看视频| 他把我摸到了高潮在线观看 | 一级毛片女人18水好多| 国产精品久久久人人做人人爽| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 一区二区三区四区激情视频| 午夜福利乱码中文字幕| 色婷婷av一区二区三区视频| 热re99久久精品国产66热6| 大陆偷拍与自拍| 亚洲国产精品一区三区| 男人添女人高潮全过程视频| 操出白浆在线播放| 国产视频一区二区在线看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 男女高潮啪啪啪动态图| 啦啦啦免费观看视频1| 久9热在线精品视频| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲熟女精品中文字幕| 国产精品99久久99久久久不卡| 成人免费观看视频高清| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 午夜免费成人在线视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 岛国毛片在线播放| 青青草视频在线视频观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 成人免费观看视频高清| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 他把我摸到了高潮在线观看 | 一本久久精品| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 欧美国产精品一级二级三级| 国产日韩欧美在线精品| 国产成人av教育| 久热爱精品视频在线9| 久久国产精品大桥未久av| 男女国产视频网站| 在线观看一区二区三区激情| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲专区国产一区二区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久天堂一区二区三区四区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产又爽黄色视频| 成人国语在线视频| 丝瓜视频免费看黄片| 国产精品 国内视频| 热re99久久国产66热| 久久天堂一区二区三区四区| av网站在线播放免费| 午夜视频精品福利| 制服诱惑二区| 国产亚洲av高清不卡| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 免费在线观看日本一区| 亚洲精品一二三| av网站在线播放免费| 午夜免费成人在线视频| 99久久国产精品久久久| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久九九热精品免费| 岛国在线观看网站| 国产有黄有色有爽视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产在线视频一区二区| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 69av精品久久久久久 | 亚洲精品一区蜜桃| 一区二区av电影网| 久久久久久久大尺度免费视频| 男女边摸边吃奶| 一本大道久久a久久精品| 美女高潮到喷水免费观看| 成人影院久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲欧洲日产国产| 中文字幕色久视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 在线观看www视频免费| 久久免费观看电影| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲黑人精品在线| 超碰成人久久| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲av片天天在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久中文看片网| www.精华液| 亚洲第一av免费看| 成年女人毛片免费观看观看9 | 久久青草综合色| 国产又色又爽无遮挡免| 多毛熟女@视频| 午夜福利视频在线观看免费| 日韩大片免费观看网站| 无遮挡黄片免费观看| 国产麻豆69| 亚洲精品国产av蜜桃| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲欧美激情在线| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 麻豆乱淫一区二区| 桃红色精品国产亚洲av| 久久久精品区二区三区| 69av精品久久久久久 | 一个人免费看片子| 桃花免费在线播放| 久久精品国产a三级三级三级| 国产熟女午夜一区二区三区| 久久久久久久大尺度免费视频| 成年人黄色毛片网站| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 亚洲精品自拍成人| 狂野欧美激情性bbbbbb| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 水蜜桃什么品种好| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 精品高清国产在线一区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日日爽夜夜爽网站| videosex国产| 久久精品国产综合久久久| 午夜福利免费观看在线| 亚洲av成人一区二区三| 黑丝袜美女国产一区| 中文字幕av电影在线播放| 高清视频免费观看一区二区| 精品少妇久久久久久888优播| 男女床上黄色一级片免费看| 天堂8中文在线网| 亚洲,欧美精品.| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 亚洲国产精品一区二区三区在线| a级毛片黄视频| 69av精品久久久久久 | 日韩视频在线欧美| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 久久久国产成人免费| 亚洲精品中文字幕在线视频| 最黄视频免费看| 久久久久久久大尺度免费视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产成人欧美| av福利片在线| 好男人电影高清在线观看| 免费观看a级毛片全部| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 99香蕉大伊视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 一区二区av电影网| 亚洲成人免费av在线播放| 操美女的视频在线观看| 91成人精品电影| 99久久精品国产亚洲精品| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 国产xxxxx性猛交| 成人国产av品久久久| 两个人免费观看高清视频| 夫妻午夜视频| 亚洲视频免费观看视频| 久久热在线av| 欧美激情极品国产一区二区三区| 9191精品国产免费久久| 日本a在线网址| 午夜福利影视在线免费观看| 69av精品久久久久久 | 18禁观看日本| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 精品一区二区三卡| 成人影院久久| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美中文综合在线视频| 国产精品国产av在线观看| 精品一区在线观看国产| 91精品三级在线观看| 精品少妇久久久久久888优播| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲成人手机| 亚洲欧美精品自产自拍| 少妇 在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 动漫黄色视频在线观看| 老司机福利观看| 亚洲少妇的诱惑av| 最新在线观看一区二区三区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲久久久国产精品| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 成人免费观看视频高清| 我要看黄色一级片免费的| 51午夜福利影视在线观看| 女性被躁到高潮视频| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲精品国产区一区二| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲国产成人一精品久久久| bbb黄色大片| 亚洲全国av大片| 成人手机av| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 青草久久国产| 蜜桃国产av成人99| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 男女午夜视频在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频 | 亚洲av美国av| 窝窝影院91人妻| 亚洲人成77777在线视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 黄色毛片三级朝国网站| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产在视频线精品| 中亚洲国语对白在线视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 免费观看a级毛片全部| 亚洲精品一区蜜桃| 色综合欧美亚洲国产小说| 两个人免费观看高清视频| 国产成人av激情在线播放| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 一区二区三区乱码不卡18| 久久精品国产亚洲av高清一级| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产av又大| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产成人欧美在线观看 | 伊人久久大香线蕉亚洲五| 夜夜夜夜夜久久久久| h视频一区二区三区| 2018国产大陆天天弄谢| 久久av网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 曰老女人黄片| 制服诱惑二区| 丝袜喷水一区| 久久影院123| 久久久久精品人妻al黑| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产成人影院久久av| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产欧美日韩一区二区三 | 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 制服人妻中文乱码| 一个人免费在线观看的高清视频 | 性高湖久久久久久久久免费观看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 伊人亚洲综合成人网| 麻豆乱淫一区二区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| av欧美777| 91老司机精品| 免费高清在线观看日韩| 欧美日韩精品网址| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| www.自偷自拍.com| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 国产精品 欧美亚洲| 少妇被粗大的猛进出69影院| 午夜福利视频精品| 国产成人精品无人区| 婷婷色av中文字幕| 国产区一区二久久| 久久久欧美国产精品| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av男天堂| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 欧美日韩福利视频一区二区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产片内射在线| videosex国产| 手机成人av网站| 99精品久久久久人妻精品| 日本欧美视频一区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 成在线人永久免费视频| 又黄又粗又硬又大视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 日本a在线网址| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| av超薄肉色丝袜交足视频| 国产精品1区2区在线观看. | 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 夜夜夜夜夜久久久久| 涩涩av久久男人的天堂| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 99久久人妻综合| 日韩大片免费观看网站| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 777米奇影视久久| 久久亚洲精品不卡| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产欧美日韩一区二区三 | 激情视频va一区二区三区| 波多野结衣一区麻豆| 久久久久久久大尺度免费视频| 视频区图区小说| 国产深夜福利视频在线观看| 国产97色在线日韩免费| 少妇精品久久久久久久| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 男人添女人高潮全过程视频| 欧美中文综合在线视频| 国产91精品成人一区二区三区 | 国精品久久久久久国模美| 欧美日本中文国产一区发布| 色播在线永久视频| 国产有黄有色有爽视频| 手机成人av网站| a在线观看视频网站| 妹子高潮喷水视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 99久久人妻综合| 成年女人毛片免费观看观看9 | 日韩中文字幕欧美一区二区| 操美女的视频在线观看| 亚洲av美国av| 欧美人与性动交α欧美软件| 久9热在线精品视频| av欧美777| 丁香六月欧美| 亚洲精品自拍成人| videos熟女内射| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲av日韩在线播放| 老熟妇仑乱视频hdxx| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产精品九九99| 久久久久国产精品人妻一区二区| 日本vs欧美在线观看视频| 18禁国产床啪视频网站| 人妻人人澡人人爽人人| 后天国语完整版免费观看| 波多野结衣av一区二区av| 国产99久久九九免费精品| av网站免费在线观看视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产精品一区二区在线不卡| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲天堂av无毛| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 午夜两性在线视频| 99国产综合亚洲精品| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲九九香蕉| 亚洲av片天天在线观看| 久久女婷五月综合色啪小说|