國家標準法在食品鄰苯二甲酸酯空白值測定中的應用

□ 張 卓 山西農(nóng)業(yè)大學信息學院

國家標準法在食品鄰苯二甲酸酯空白值測定中的應用

□ 張 卓 山西農(nóng)業(yè)大學信息學院

本文運用國家標準方法，測定食品鄰苯二甲酸酯（PAEs）空白值，就凝膠滲透色譜儀（GPC）系統(tǒng)中溶劑、溶劑的儲留時間等因素對空白值的影響進行探討與分析。最終結果得知，在常規(guī)操作狀態(tài)下，依照國家標準方法做系統(tǒng)空白分析，可檢測到DEHP、DIBP、DMP、DBP、DEP，空白值均＜10 μg/L。表明GPC系統(tǒng)中溶劑、溶劑的儲留時間，是對空白值造成影響的主要因素。

國家標準法；鄰苯二甲酸酯；空白值；影響

鄰苯二甲酸酯（PAEs）作為一種液體增塑劑，無味且無色，且還是一類擾亂內(nèi)分泌的環(huán)境雌激素。在食品生產(chǎn)中（果凍、飲料等），經(jīng)常會添加食用乳化劑，用此來防止產(chǎn)品發(fā)生油水分層狀況。因鄰苯二甲酸酯類增塑劑當中的鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）在增稠、乳化效果方面，與棕櫚油相似，因而許多不法商家為了一己私利，用DEHP替換棕櫚油，而當作食用乳化劑，使得許多用此種乳化劑的酵素飲品、果汁等遭受污染。本文依照我國于2008年發(fā)布的《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》（GB/T21911-2008）標準，對食品中鄰苯二甲酸酯空白值進行檢測，并探討了對空白值造成影響的各類因素，提出了減小空白值的具體方案。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

①氣相色譜-質譜聯(lián)用儀，內(nèi)置有基于氣相色譜儀（Varian450-GC）的1200L三重四極桿質譜儀（Varian，USA）；②離子源（ESI源）；③N2-濃縮儀（由美國Associates公司生產(chǎn)，N-EVAP型）；④色譜柱，VF-5ms柱（Agilent，USA）；⑤凝膠滲透色譜儀（GPC）（由美國J2Scientific公司產(chǎn)）；⑥其他：超純水器、玻璃移液管、微量注射器。

1.1.2 試劑

無水硫酸鈉；正己烷；石油醚；乙酸乙酯與丙酮；鄰苯二甲酸酯混合標準溶液：鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、己酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯（DCHP）、鄰苯二甲酸二己酯（DHXP）、鄰苯二甲酸二（2-乙氧基）、鄰苯二甲酸二（BMPP）等；混合內(nèi)標溶液：D4-DNOP、D4-DBP、D4-DEP、D4-DCHP、D4-DPRP；異辛烷溶劑，20 mg/L；系列標準溶液：分別取鄰苯二甲酸酯標準溶液 0 μL、20 μL、50 μL、100 μL、200 μL與500 μL（1 mg/L），另取混合內(nèi)標溶液10 μl（20 mg/L），稀釋（用正己烷）后，至1 mL，混勻，最后鋁箔紙隔離，瓶蓋密封，保存于冰箱中（-20℃）[1]。

1.2 實驗方法

依據(jù)《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》（GB/T21911-2008）當中的樣品溶液制備標準，分別取乙酸乙酯、環(huán)己烷各10 mL，以1:1比例混勻，GPC凈化處理，待5.0～16.0 min時，收集50 mL流出液，減壓、旋轉式蒸發(fā)干可停，將正己烷（1.0 mL）加入，復溶，等待后續(xù)進行GC-MS分析。

1.2.1 氣相色譜條件

①色譜柱。石英毛細管色譜柱（VF-5ms），內(nèi)徑0.25 mm，柱長為30 m，膜厚0.25 μm；②升溫程序。初溫控制在60 ℃，持續(xù)60 s，后以20 ℃/min的遞增溫度，持續(xù)升至220 ℃，且持續(xù)60 s，最后以5 ℃/min溫度，增加至280 ℃，持續(xù)10 min。③載氣，即高純氦氣。恒流模式，控制流速，即1.0 mL/min。④進樣方式。柱上進樣不分流。另外，傳輸線溫度控制在280 ℃；進樣量控制在1 μL。

1.2.2 質譜參考條件

采取電子轟擊源（EI）的電離方式，電離能量維持在70 eV，四級桿溫度控制在145 ℃，離子源溫度控制在225℃，溶劑延遲為5 min，選用離子掃描（SIM）。用內(nèi)標法計算各鄰苯二甲酸酯化合物相應含量。監(jiān)測離子、保留時間及內(nèi)標物見表1。

表1 鄰苯二甲酸酯的回收率、質譜參數(shù)與保留時間（部分）

2 結果與討論

2.1 回收率、檢出限與線性范圍

基于特定條件下，各組于10～500 g/L范圍內(nèi)，線性關系較好，r大于0.999，依照S/N（3:1）的儀器方法的檢出限進行計算，即加標水平為20 g/L時，平均回收率在89%～91.1%，標準偏差小于12.0%，與空白值定性定量分析需要相滿足。見表1。

2.2 背景值考察

《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》（GB/T21911-2008）對含油脂樣品進行分析與檢測，是通過環(huán)己烷、乙酸乙酯來進行提取的，采用凝膠滲透色譜法（GPC）實施凈化操作后，再進行GC/MS檢測，所以，溶劑與系統(tǒng)為空白值的主要來源。經(jīng)過GPC之后而得到的餾分收集液，其總體積為50 mL，針對如此大體積的溶劑，對其進行旋轉濃縮之后，其對空白值所產(chǎn)生的影響值得關注。

為深入考察流動相在GPC系統(tǒng)中儲留時間與鄰苯二甲酸酯空白值增加之間所存在的關系，可進行如下操作：GPC持續(xù)停機90 h，然后開機，依照國家標準操作程序，上樣操作，對餾分進行收集，開展GC-MS分析檢測。對于GPC系統(tǒng)而言，其經(jīng)流動相浸泡（持續(xù)90 h）后，能夠檢測到的為DEHP、DBP、DIBP、DEP與 DMP，而未檢測到的是DINP、DNOP、DCHP、BBP、DPP、BMPP、DMEP、DNP、DPHP、DBEP、DHXP、DEEP。其中，第3收集點時，即49.0 min時，DMP為最大值（3. 25 μg/L），在第4收集點（65 min）時，DEP為最大值，即4.97 μg/L，在第3收集點時（49.0 min），DIBP為最大值，即31.3 μg/L，DEHP最大值出現(xiàn)在第3收集點（49.0 min），即3.90 μg/L，DBP最大值也出現(xiàn)在第收集點，即24.3 μg/L。由最終實驗結果可知，在GPC系統(tǒng)中，流動相的儲留，可能會造成鄰苯二甲酸酯的遷入，由于GPC系統(tǒng)回路的體積約為250 mL，而流動相的常規(guī)流速為5 mL/min，由于前段時間（前50 min）所收集到的餾分，均系統(tǒng)當中經(jīng)過儲留，因此，針對前50 min的檢出值來講，其乃是伴隨時間而持續(xù)增高的，而之后會隨之下降，主要因為GPC系統(tǒng)儲留的流動相大部分已流出[2]。

3 降低空白值的具體對策

①實驗中，不得食用塑料制品，以玻璃器皿為宜。在使用玻璃器皿前，先用洗液全面浸泡。然后用純凈水進行淋洗，經(jīng)晾干出后，方能使用。②全部試劑、溶液均需保存于玻璃試劑瓶當中，在轉移或者量取有機溶劑時，不可用瓶口分配器，在配置各種溶液時，可選用玻璃微量注射器，或者玻璃移液管。③如果GPC系統(tǒng)在一定時間內(nèi)未使用，在開機后，需先排空系統(tǒng)中的流動相，才能進行上樣分析。

4 結語

在系統(tǒng)中的儲留，流動相可能會造成DEHP、DBP、DIBP、DMP的遷入，進而增高空白值。歐盟2007/19/EC指令指出，塑料食品包裝所用材料中，DBP控制在0.3 mg/kg，而本次研究DBP的空白值達24.3 μg/L，由此表明，如若樣品檢出具有較低含量的DBP，則需慎重下結論。

[1]肖家勇,李莉,丁利,等.凝膠滲透色譜-高效液相色譜-串聯(lián)質譜法測定食品中鄰苯二甲酸酯類化合物的含量[J].食品安全質量檢測學報,2016(1):91-96.

[2]張春雨,王輝,張曉輝,等.凝