基于UHPLC/Q-TOF/MS分析羊耳菊有效組分的入血成分

鞏仔鵬，陳亭亭，侯靖宇，吳林霖，李 梅，李月婷，陳思穎，蘭燕宇

(貴州醫(yī)科大學(xué) 1. 貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、2. 民族藥與中藥開(kāi)發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心、3. 藥學(xué)院、4. 國(guó)家苗藥工程研究中心，貴州 貴陽(yáng) 550004)

◇中藥藥理學(xué)◇

基于UHPLC/Q-TOF/MS分析羊耳菊有效組分的入血成分

鞏仔鵬1,2,3,4，陳亭亭1,2,3,4，侯靖宇1,2,3,4，吳林霖1,2,3,4，李 梅1,2,3,4，李月婷1,2,3,4，陳思穎1,2,3,4，蘭燕宇1,2,3,4

(貴州醫(yī)科大學(xué) 1. 貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、2. 民族藥與中藥開(kāi)發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心、3. 藥學(xué)院、4. 國(guó)家苗藥工程研究中心，貴州 貴陽(yáng) 550004)

目的應(yīng)用UHPLC/Q-TOF/MS技術(shù)和血清藥物化學(xué)研究手段，分析檢測(cè)羊耳菊有效組分的入血成分。方法大鼠灌胃給予羊耳菊有效組分提取物后，腹主動(dòng)脈抗凝采血，血漿經(jīng)甲醇二次沉淀蛋白處理。采用Eclipse Plus C18RRHD色譜柱(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)，0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B)做流動(dòng)相梯度洗脫，流速0.3 mL·min-1。負(fù)離子檢測(cè)模式，同時(shí)結(jié)合布魯克道爾頓公司的Metabolite Tools軟件，鑒定和表征其血中的移行成分。結(jié)果給藥后，在大鼠血漿中共檢測(cè)到16個(gè)代謝產(chǎn)物，包括9個(gè)原型成分和7個(gè)代謝物，代謝方式主要以咖啡?；鼘幩犷?lèi)化合物的異構(gòu)化、甲基化及甲基葡萄糖醛酸化的復(fù)合反應(yīng)為主。結(jié)論本研究較為全面地闡釋了羊耳菊活性部位提取物在大鼠血中的入血成分，為進(jìn)一步研究羊耳菊藥材的體內(nèi)過(guò)程和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供了一定的參考。

羊耳菊；血漿；入血成分；UHPLC/Q-TOF/MS；血清藥物化學(xué)；代謝物

羊耳菊(Inulacappa) 為貴州苗族常用藥材，苗族名“Bex nioux dant”(近似譯為“白牛膽”)，常用于病毒性感冒、癰瘡、乳癰、風(fēng)濕疼痛等癥，收載于《苗族醫(yī)藥學(xué)》、《中國(guó)民族藥志》等著作[1-2]。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道的羊耳菊藥材主要成分有木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-蕓香糖苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸乙酯苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-5-O-β-D-葡萄糖苷等黃酮類(lèi)[3]、1,5-O-二咖啡?；鼘幩帷?,3,5-O-三咖啡?；鼘幩帷?,5-O-二咖啡?；鼘幩峒柞ァ?,4-O-二咖啡?；鼘幩峒柞ァ?,4-O-二咖啡?；鼘幩嵋阴?、4,5-O-二咖啡酰基奎寧酸乙酯、3,5-O-二咖啡?；鼘幩?、3,4-O-二咖啡?；鼘幩岬确铀犷?lèi)[4]，以及香豆素、揮發(fā)油等[5]。近年來(lái)，對(duì)羊耳菊及其制劑的抗炎、抗微生物、抗病毒藥理活性[6-7]也有部分報(bào)道，但對(duì)于其在體內(nèi)的直接活性物質(zhì)基礎(chǔ)并未有明確闡釋。在中藥復(fù)雜成分的研究中，普遍認(rèn)為，中藥只有被吸收入血的成分才有可能是中藥發(fā)揮藥效的活性成分，因此，準(zhǔn)確快速分析中藥口服入血成分，也是深入研究中藥作用機(jī)制的重要基礎(chǔ)[8]。本文采用UHPLC/Q-TOF/MS法，結(jié)合血清藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)大鼠給藥后的血漿樣品進(jìn)行檢識(shí)，比較分析空白血漿、含藥血漿和差異圖譜，結(jié)合相關(guān)代謝軟件和對(duì)照品，對(duì)所得代謝物進(jìn)行結(jié)構(gòu)確認(rèn)，推測(cè)出羊耳菊有效組分中主要化合物可能的代謝途徑，為羊耳菊藥材的體內(nèi)過(guò)程研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料

1.1儀器超高效液相色譜-四級(jí)桿-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜儀(Agilent Technologies 1290 Infinity液相色譜系統(tǒng)，布魯克道爾頓四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀)；Allegra 64R低溫高速離心機(jī)(Beckman Coulter)；MTN-2800D氮吹儀(天津奧特塞恩斯儀器有限公司)。

1.2藥物與試劑木犀草苷、綠原酸對(duì)照品(批號(hào)：111720-201408、110753-201415)均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院；新綠原酸、隱綠原酸、1,3-O-二咖啡?；鼘幩帷?,4-O-二咖啡?；鼘幩帷?,5-O-二咖啡?；鼘幩帷?,5-二-O-咖啡?；鼘幩釋?duì)照品(批號(hào)：X20-20141012、Y58-20141012、1384-101215、1384-101215、S34-110121、1384-101215)均購(gòu)于中藥固體制劑制造技術(shù)國(guó)家工程研究中心；羊耳菊藥材購(gòu)自貴州龍里縣，由貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室龍慶德副教授鑒定為菊科植物羊耳菊Inulacappa(Buch.-Ham.ex D.Don)DC.的干燥全草。

1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康SD大鼠，♀♂兼用，體質(zhì)量為(250±20) g，由重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)：SCXK (渝)2015-0001。

2 方法

2.1色譜條件色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18RRHD(2.1 mm×100 mm,1.8μm)；柱溫：40℃；流動(dòng)相：0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)；進(jìn)樣體積為5 μL。梯度洗脫條件：0～1 min，5%～10%(A)；1～13 min，10%～28%(A)；13～16 min，28%～100% (A)，16～17 min，100%～100%(A)，17～18 min，100%～5%(A)。

2.2質(zhì)譜條件電噴霧離子源；掃描方式為正、負(fù)離子掃描(ESI+、ESI-，m/z 50～1 000)；毛細(xì)管電壓：ESI-(3.5 kV)、ESI+ (4 kV)；離子源溫度: 200℃；霧化氣(N2)壓力：1.2 bar；干燥氣溫度：200 ℃；氣體體積流量：6 L·min-1；準(zhǔn)確質(zhì)量測(cè)定采用甲酸鈉校正標(biāo)準(zhǔn)液；校正模式選用：Enhanced Quadratic；數(shù)據(jù)分析：Data Analysis軟件、Metabolite Tools?、質(zhì)量虧損過(guò)濾(MDF)等。

2.3羊耳菊有效組分提取物的制備通過(guò)實(shí)驗(yàn)室前期藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)篩選，確定羊耳菊有效組分的提取方式。取羊耳菊藥材12 kg，充分混勻，取10倍量體積分?jǐn)?shù)為0.6的乙醇，提取3次，每次1 h，合并3次濾液，減壓濃縮，回收乙醇，得12 L濃縮液。上述濃縮液用D101大孔樹(shù)脂吸附(徑高比1 ∶4)，加水洗脫至流出液無(wú)顏色后，再用體積分?jǐn)?shù)為0.6的乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，得浸膏，微波真空干燥即得，得膏率為7%。經(jīng)測(cè)定，羊耳菊提取物中東莨菪苷、木犀草苷、1,3-二咖啡?；鼘幩?、3,4-二咖啡酰基奎寧酸、3,5-二咖啡酰基奎寧酸、4,5-二咖啡?；鼘幩帷⑿戮G原酸、綠原酸、隱綠原酸的含量依次為0.29%、0.74%、2.01%、3.82%、3.56%、3.87%、2.17%、0.99%、3.36%。-4℃條件干燥保存，備用。

2.4供試液樣品的制備稱(chēng)取提取物粉末1 g，精密稱(chēng)定，加入10 mL體積分?jǐn)?shù)為0.5的甲醇水，超聲10 min，15 000 r·min-1離心 10 min，取上清液即得，備用。

2.5標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備分別精密稱(chēng)取綠原酸等8種對(duì)照品，于10 mL容量瓶中，加甲醇超聲溶解，定容。得綠原酸(0.740 g·L-1)、新綠原酸(1.032 g·L-1)、隱綠原酸(1.026 g·L-1)、1,3-二咖啡?；鼘幩?1.064 g·L-1)、木犀草苷(1.014 g·L-1)、3,4-二咖啡酰基奎寧酸(1.032 g·L-1)、3,5-二咖啡酰基奎寧酸(1.194 g·L-1)、4,5-二咖啡酰基奎寧酸(1.204 g·L-1)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。置冰箱(-20 ℃)保存，備用。

2.6樣品處理方法取大鼠血漿1 mL，加入50 μL體積分?jǐn)?shù)為0.001的甲酸水，加2 mL甲醇，渦混3 min，超聲5 min，15 000 r·min-1離心10 min，上清液于37℃下N2吹干，殘?jiān)尤? mL甲醇2次沉淀，最后殘?jiān)尤?00 μL 體積分?jǐn)?shù)為0.5的甲醇水溶解，15 000 r·min-1離心10 min，取上清液2 μL，進(jìn)樣分析。

2.7空白血漿及含藥血漿樣品的制備健康SD大鼠6只，分組，給藥前禁食12 h，自由飲水。按照 10 mL·kg-1分別灌服蒸餾水和羊耳菊有效組分提取物(給藥劑量為100 g·kg-1生藥量)，每日2次， 連續(xù)給藥3 d，末次給藥后15 min每只大鼠腹主動(dòng)脈采血，4℃、6 000 r·min-1離心 10 min，取上清液，得空白和給藥血漿樣品。

3 結(jié)果

3.1UHPLC/Q-TOF/MS色譜采集根據(jù)建立的方法，對(duì)提取物樣品、空白血漿、血漿樣品進(jìn)行分析，各成分在ESI-模式下得到信號(hào)響應(yīng)較好，同時(shí)Metabolite軟件得到空白血漿和血漿樣品的差異圖譜，各樣品總離子流圖見(jiàn)Fig 1。

Fig 1 Base peak chromatograms of Inula cappa extractmetabolites in plasma sample in negative mode

A: Blank plasma; B: Plasma sample; C: Different chromatograms of A and B; D:Inulacappaextract sample

3.2入血成分分析根據(jù)精確相對(duì)分子質(zhì)量、同位素豐度比、分子碎片峰、對(duì)照品和提取物樣品色譜保留時(shí)間，結(jié)合以往文獻(xiàn)報(bào)道[9-12]，共檢測(cè)到16個(gè)代謝產(chǎn)物，其中包括9個(gè)原型成分，見(jiàn)Tab 1。

3.2.1原型成分分析 化合物M1～M5、M7～M9：保留時(shí)間分別為2.6、3.7、3.9、5.2、7.9、8.8、9.1、10.1 min。他們的準(zhǔn)分子離子峰分別為m/z 353.0887[M-H]-、m/z 353.0862[M-H]-、m/z 353.0876[M-H]-、m/z 515.1175[M-H]-、m/z 447.0942[M-H]-、m/z 515.1193[M-H]-、m/z 515.1171[M-H]-、m/z 515.1180[M-H]-，保留時(shí)間和質(zhì)譜碎片分別與新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、1,3-O-二咖啡酰基奎寧酸、木犀草苷、3,4-O-二咖啡?；鼘幩?、3,5-O-二咖啡?；鼘幩岷?,5-O-二咖啡?；鼘幩釋?duì)照品一致，故確定M1～M5、M7～M8為原型成分新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、1,3-二咖啡?；鼘幩?、木犀草苷、3,4-二咖啡酰基奎寧酸、3,5-二咖啡?；鼘幩岷?,5-二咖啡酰基奎寧酸。

化合物M6：保留時(shí)間8.1 min，產(chǎn)生的準(zhǔn)分子離子峰為m/z 461.0786 [M-H]-，丟失176 u后產(chǎn)生m/z 285.0477的碎片離子，與提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷原型成分保留時(shí)間、分子式和碎片離子一致，故推測(cè)其可能為原型成分木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷。

3.2.2代謝產(chǎn)物分析 結(jié)合Metabolite Tools代謝物數(shù)據(jù)處理軟件，對(duì)代謝物可能的結(jié)構(gòu)和可能的代謝途徑進(jìn)行推測(cè)，代謝物結(jié)構(gòu)列表見(jiàn)Tab 1。

M10～M12：保留時(shí)間分別為2.8、4.2、4.7 min。它們的準(zhǔn)分子離子峰分別為m/z 353.089[M-H]-、m/z 353.0899[M-H]-、m/z 353.0878[M-H]-，裂解后產(chǎn)生的碎片離子分別為m/z 173.0518、m/z 191.0581、m/z 191.0526。雖然碎片離子與單咖啡?；恢?，但難以確定取代基位置，故推測(cè)M10～M12可能為單咖啡?；鼘幩岚l(fā)生酯基位置異構(gòu)而產(chǎn)生的。

M13～M15：保留時(shí)間為5.6、6.0、6.2 min，產(chǎn)生的準(zhǔn)分子離子峰分別為m/z 367.1018 [M-H]-、m/z 367.1037[M-H]-、m/z 367.1042 [M-H]-，比單咖啡酰基奎寧酸多1個(gè)CH2，它們能裂解產(chǎn)生m/z 193.0506、m/z 193.0508、m/z 193.0496的碎片離子。m/z 193比咖啡酸負(fù)離子m/z 179多1個(gè)CH2，因此推測(cè)甲基結(jié)合位點(diǎn)在咖啡酸。故推測(cè)M13～M15均為單咖啡酰基奎寧酸的甲基化產(chǎn)物。

M16：保留時(shí)間為9.5 min，產(chǎn)生m/z 719.1823的準(zhǔn)分子離子峰，經(jīng)過(guò)裂解后，中性丟失176 u，產(chǎn)生m/z 543.1493的碎片，說(shuō)明該化合物為葡萄糖醛酸結(jié)合物，且m/z 543.1493比二咖啡?；鼘幩岫?個(gè)C2H4，繼續(xù)丟失CH2，得到m/z 515.1191的碎片，說(shuō)明存在兩個(gè)CH2，故推測(cè)化合物M16為二甲基化二咖啡酰基奎寧酸的葡萄糖醛酸結(jié)合產(chǎn)物。

3.3主要入血成分結(jié)構(gòu)和可能的代謝途徑分析羊耳菊有效組分在血漿中主要的代謝途徑可能為單咖啡?；鼘幩岬孽ユI異構(gòu)和甲基化，由于取代基位置不能確定，且提取物中存在大量的單咖啡?；鼘幩岷投Х弱；鼘幩?，故異構(gòu)化和甲基化的單咖啡?；鼘幩嵋部赡苁怯啥Х弱；鼘幩崴舛鴣?lái)。同時(shí)還存在二咖啡?；鼘幩岬碾p甲基葡萄糖醛酸化反應(yīng)，以綠原酸和3,4-O-二咖啡?；鼘幩釣槔?，推測(cè)它們可能的代謝途徑分別見(jiàn)Fig 2、3。

Fig 2 Possible biotransformation pathways of chlorogenic acid1: Methylate

Tab 1 Identification of metabolites of plasma of Inula cappa extract

Fig 3 Possible biotransformation pathways of 3,4-O-dicaffeoylquinic acid2: Hydrolyze; 3: Dimethylation; 4: Glucuronidation or glucosidation

4 討論

前期實(shí)驗(yàn)室預(yù)實(shí)驗(yàn)中，大鼠灌胃羊耳菊有效組分提取物后，分別考察5、15、30、45 min血清和血漿的質(zhì)譜信息，通過(guò)對(duì)不同樣品的色譜圖峰強(qiáng)度、峰數(shù)目及入血峰面積等結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，最終確定灌胃后的最佳采血時(shí)間點(diǎn)為15 min，且血漿樣品優(yōu)于血清。同時(shí)考察了乙腈、乙酸乙酯、甲醇等多種樣品處理方法，結(jié)果采用甲醇2次沉淀蛋白得到的樣品色譜圖信息量較大，干擾少。同時(shí)，預(yù)實(shí)驗(yàn)中血漿處理時(shí)還考察了是否加酸，結(jié)果表明血漿處理加入50 μL體積分?jǐn)?shù)為0.001的甲酸水后，所得到的入血成分更多，且響應(yīng)值有明顯提高。

大鼠灌胃羊耳菊有效組分提取物后，共檢測(cè)到9個(gè)原型成分，包括2個(gè)黃酮類(lèi)成分和7個(gè)咖啡酰基奎寧酸類(lèi)成分。通過(guò)與對(duì)照品比對(duì)，其中的8個(gè)成分分別是新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、1,3-O-二咖啡?；鼘幩帷⒛鞠蒈?、3,4-O-二咖啡?；鼘幩?、3,5-O-二咖啡?；鼘幩岷?,5-O-二咖啡?；鼘幩?，通過(guò)質(zhì)譜碎片信息、保留時(shí)間與提取物對(duì)比，推測(cè)另一個(gè)黃酮類(lèi)原型成分為木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷。且代謝產(chǎn)物僅檢測(cè)到單咖啡?；鼘幩岬孽セ恢卯悩?gòu)、甲基化產(chǎn)物和二咖啡?；鼘幩岬募谆咸烟侨┧峄a(chǎn)物。因此，提示異構(gòu)化、甲基化和葡萄糖醛酸化是咖啡?；鼘幩犷?lèi)成分在大鼠體內(nèi)的3條重要代謝途徑。

有研究報(bào)道，綠原酸的5-位咖啡?；谌梭w內(nèi)可以通過(guò)分子內(nèi)酯鍵轉(zhuǎn)移向3-和4-位轉(zhuǎn)化[13]，所以推測(cè)大鼠體內(nèi)的綠原酸等成分也發(fā)生了類(lèi)似的轉(zhuǎn)移。單咖啡?；鼘幩犷?lèi)成分在大鼠體內(nèi)發(fā)生的甲基化反應(yīng)可能與體內(nèi)存在的兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶(catechol-O-methyltransferas, COMT)有關(guān)，兒茶酚結(jié)構(gòu)中的間位羥基是COMT催化發(fā)生甲基化反應(yīng)的主要部位[14]。在代謝產(chǎn)物中檢測(cè)到的單咖啡?；鼘幩岬募谆投Х弱；鼘幩岬碾p甲基葡萄糖醛酸化產(chǎn)物，與其底物相比，極性發(fā)生改變，這將有助于它們從膽汁和尿液中排出。

相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，單咖啡酰基奎寧酸即綠原酸類(lèi)成分，具有明顯的抗菌、抗病毒、抗炎、清除自由基、降血糖、降血脂等作用[15]。木犀草苷類(lèi)黃酮成分，也具有保護(hù)心血管、抗癌、抗菌、抗炎、抗氧化等作用[16]。因此，血漿中存在的綠原酸類(lèi)成分及其酯基異構(gòu)化代謝產(chǎn)物和黃酮類(lèi)成分，可能是體內(nèi)直接藥效物質(zhì)，有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

大多數(shù)多酚類(lèi)化合物都含有兒茶酚結(jié)構(gòu)，一般來(lái)說(shuō)，兒茶酚結(jié)構(gòu)中的鄰二酚羥基容易被氧化成醌。已經(jīng)知道有很多藥物及內(nèi)源性的雌激素/兒茶酚胺在體內(nèi)會(huì)轉(zhuǎn)化成醌類(lèi)物質(zhì)，它們通過(guò)誘導(dǎo)氧化還原循環(huán)反應(yīng)產(chǎn)生超氧化自由基，或通過(guò)與細(xì)胞的親核成分作用而發(fā)揮細(xì)胞毒作用[17]。但有些多酚類(lèi)物質(zhì)并未在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成醌類(lèi)物質(zhì)，而只發(fā)生甲基化反應(yīng)。在本實(shí)驗(yàn)中，血漿中并未發(fā)現(xiàn)咖啡?；?lèi)成分氧化成醌類(lèi)物質(zhì)生成，說(shuō)明這類(lèi)成分可能是具有獨(dú)特代謝特點(diǎn)、毒副作用小的一類(lèi)化合物。

本實(shí)驗(yàn)采用UHPLC/Q-TOF/MS技術(shù)，對(duì)羊耳菊藥材口服后在大鼠血漿中可能的成分進(jìn)行了初步分析，獲得的羊耳菊藥材中含量較高的咖啡酰基奎寧酸類(lèi)成分的信息，對(duì)這類(lèi)化合物的生物轉(zhuǎn)化以及對(duì)羊耳菊藥材的進(jìn)一步藥理活性和藥代動(dòng)力學(xué)研究具有重要的參考價(jià)值，也為中藥潛在活性物質(zhì)研發(fā)以及臨床應(yīng)用提供了重要的研究思路和理論參考。

(致謝：本實(shí)驗(yàn)的研究工作是在貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室完成，向幫助實(shí)驗(yàn)的各位老師和同學(xué)致以最誠(chéng)摯的謝意！)

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AnalysisofcomponentsinplasmafromeffectivefractionsofInulacappabasedonUHPLC/Q-TOF/MS

GONG Zi-peng1,2,3,4, CHEN Ting-ting1,2,3,4, HOU Jing-yu1,2,3,4, WU Lin-lin1,2,3,4, LI Mei1,2,3,4, LI Yue-ting1,2,3,4, CHEN Si-ying1,2,3,4,LAN Yan-yu1,2,3,4

[1.GuizhouProvincialKeyLabofPharmaceutics, 2.EngineeringResearchCenterfortheDevelopmentandApplicationofEthnicMedicineandTCM(MinistryofEducation), 3.SchoolofPharmacy, 4.NationalEngineeringResearchCenterofMiao’sMedicines,GuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,China]

AimTo analyze the main components of effective fractions ofInulacappain rat plasma with UHPLC/Q-TOF/MS technology and serum pharmacochemistry theory.MethodsAfter gavage administration withInulacappaextracts, blood was collected from abdominal aorta, and the protein in plasma sample was precipitated by methanol. Eclipse Plus C18RRHD (2.1 mm × 100 mm, 1.8 μm) was used, with 0.1% formic acid agueous solution(A)-0.1% formic acid and acetonitrile (B) as the mobile phase for gradient elution, and the flow rate was 0.3 mL·min-1. Detected at negative ion mode, and with the help of Metabolite Tools software from Bruker Corporation, components in plasma were defined.ResultsA total of 16 compounds were identified, including 9 prototypes and 7 metabolites. Main metabolites were isomerization, methylation, glucuronidation and recombination of caffeoylquinic acid.ConclusionsTherefore, our study has comprehensively expoundedInulacappaextracts’ constituents migrating to rat plasma, and provided a reference for further studies forinvivometabolic process and effective material base ofInulacappa.

Inulacappa; plasma; effective fraction; UHPLC/Q-TOF/MS; serum pharmacochemistry; metabolites

A

1001-1978(2017)11-1605-06

R-332；R282.71；R284.1；R289.5；R446.11；R969.1

時(shí)間：2017-10-10 10:05 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20171010.1005.050.html

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.11.025

2017-06-23,

2017-07-20

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81360680)；貴州省優(yōu)青項(xiàng)目[黔科合人字(2015)11號(hào)]；貴州省教育廳“民族藥與中藥開(kāi)發(fā)應(yīng)用產(chǎn)學(xué)研基地建設(shè)”項(xiàng)目(黔科合KY字[2013]122)；貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目[黔科合LH字(2015)7362]；貴州省研究生卓越人才計(jì)劃項(xiàng)目(黔教研合ZYRC字[2014]012)；貴州省中醫(yī)藥管理局項(xiàng)目(No QZZY-2015-078)

鞏仔鵬(1985-)，男，博士，副教授，研究方向：中藥藥代動(dòng)力學(xué)，Tel：0851-86908468，E-mail: gzp4012607@126.com; 蘭燕宇(1958-)，女，教授，研究方向：中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及新藥開(kāi)發(fā)，通訊作者，Tel： 0851-6908899， E-mail: yanyu626@126.com