太子參多糖對大鼠心肌缺血的保護(hù)作用

福建醫(yī)科大學(xué)福建省立臨床醫(yī)學(xué)院，福建 福州 350000

實(shí)驗(yàn)研究

太子參多糖對大鼠心肌缺血的保護(hù)作用

劉湘湘阮君山
福建醫(yī)科大學(xué)福建省立臨床醫(yī)學(xué)院，福建 福州 350000

目的探討太子參多糖對心肌缺血大鼠心臟功能的保護(hù)作用。方法選擇80只Wistar大鼠為研究對象，隨機(jī)分為空白對照組、陽性對照組、太子參多糖0.23g/kg組、太子參多糖0.46g/kg組、模型組，每組16只，空白對照組與模型組均給予生理鹽水，陽性對照組給予硝酸異山梨酯片5.4g/kg，太子參多糖0.23g/kg組給予0.23g/kg太子參多糖，太子參多糖0.46g/kg組給予0.46g/kg太子參多糖。末次給藥后均采用冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎制備心肌缺血模型。觀察各組大鼠心功能指標(biāo)。結(jié)果模型組、陽性對照組、太子參多糖組大鼠造模后30min，均出現(xiàn)心律失常，太子參多糖組大鼠心律失常發(fā)生時(shí)間同模型組比較，明顯較晚，心律失常持續(xù)時(shí)間同模型組比較，明顯較短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，陽性對照組心律失常發(fā)生時(shí)間與其他各組比較，均明顯較晚，心律失常持續(xù)時(shí)間同其他各比較，均明顯較短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；造模后5h，模型組及太子參多糖組血清肌酸激酶(CK)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)同陽性對照組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但太子參多糖組CK、MDA明顯較模型組低，NO、SOD明顯較模型組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，空白對照組上述指標(biāo)同其他各組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；太子參多糖組心肌梗死范圍同模型組對比明顯較小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，陽性對照組心肌梗死范圍明顯小于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論太子參多糖對大鼠心肌缺血具有保護(hù)作用，可能與其抗應(yīng)激、增強(qiáng)免疫、抗脂質(zhì)過氧化及抗炎作用有關(guān)。

太子參多糖；心肌缺血；動(dòng)物試驗(yàn)

心臟血液灌注減少時(shí)，可導(dǎo)致心臟供氧不足，心肌能量代謝異常，無法支持心臟正常工作，產(chǎn)生心肌缺血。心肌缺血病因復(fù)雜，對健康有極大危害，如何有效防治該癥，一直是研究熱點(diǎn)。中醫(yī)藥在多種疾病治療中均有應(yīng)用，太子參作為常見中藥，其多糖類成分具有增強(qiáng)免疫力、抗應(yīng)激、抗脂質(zhì)過氧化等功效[1]。本研究通過動(dòng)物試驗(yàn)，探討了太子參多糖對大鼠心肌缺血的保護(hù)作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 雄性健康Wistar大鼠80只，體質(zhì)量210～250g，平均體質(zhì)量(236.42±15.67)g，華中科技大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物重型提供，批號(hào)：DK120415。于實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)5d。

1.1.2 藥品 太子參由貴州信邦太子參基地提供，取出雜質(zhì)后稱重。藥材與溶媒(水)以1：10比例進(jìn)行煎煮，每次1h，共3次，合并提取液，抽濾并濃縮至適量。分別選擇正丁醇、乙酸乙酯及石油醚進(jìn)行反復(fù)萃取，沉淀蛋白，分離水層。收集沉淀，依次用95%乙醇、無水乙醇以及丙酮進(jìn)行洗滌，在60℃條件下烘干，得到太子參粗多糖。

1.1.3 試劑與儀器 肌酸激酶試劑盒、一氧化氮試劑盒、丙二醛試劑盒、超氧化物歧化酶試劑盒。離心機(jī)、BL-420型生物機(jī)能系統(tǒng)、721-B型分光光度計(jì)、BH-140型動(dòng)物人工呼吸機(jī)、BI-2000型醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)。

1.2 方法 80只Wistar大鼠經(jīng)隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對照組、陽性對照組、太子參多糖0.23g/kg組、太子參多糖0.46g/kg組、模型組，每組16只。太子參多糖0.23g/kg組給予0.23g/kg太子參多糖，太子參多糖0.46g/kg組給予0.46g/kg太子參多糖，陽性對照組給予硝酸異山梨酯片5.4g/kg，空白對照組與模型組均給予0.02L/kg生理鹽水，灌胃給藥30d，1次/d。末次給藥后30min，麻醉大鼠，于人工呼吸機(jī)輔助下，在胸左側(cè)第3～4肋間開胸，將心包膜剪開并擠出心臟，將冠動(dòng)脈左前降支結(jié)扎(空白對照組不進(jìn)行此操作)，結(jié)扎完成后，將心臟復(fù)位，對胸壁予以縫合，術(shù)中無死亡大鼠。

1.3 觀察指標(biāo) 造模后30min，記錄各組大鼠心律失常發(fā)生時(shí)間及持續(xù)時(shí)間；造模后5h取血，離心分離血清，對血清CK、NO、MDA及SOD進(jìn)行檢測，試劑盒均有南京建成生物工程研究所提供(批號(hào)20081108)，具體方法嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。取血后摘取大鼠心臟，將左室切片，以1%TTC溶液37℃恒溫水浴染色20min，白色為壞死區(qū)(如圖1所示)，計(jì)算梗死范圍(壞死區(qū)質(zhì)量/左心室質(zhì)量×100%)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 心律失常發(fā)生情況對比 模型組與太子參多糖0.23g/kg組、太子參多糖0.46g/kg組、陽性對照組大鼠造模后30min，均出現(xiàn)心律失常，太子參多糖0.23g/kg組、太子參多糖0.46g/kg組大鼠心律失常發(fā)生時(shí)間同模型組比較，明顯較晚，心律失常持續(xù)時(shí)間同模型組比較，明顯較短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，太子參多糖0.23g/kg組與太子參多糖0.46g/kg組上述指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，陽性對照組上述指標(biāo)同其他3組對比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2 心肌功能指標(biāo)對比 造模后5h，模型組、太子參多糖0.23g/kg組及太子參多糖0.46g/kg組血清CK、NO、MDA及SOD同陽性對照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但太子參多糖0.23g/kg組及太子參多糖0.46g/kg組CK、MDA明顯較模型組低，NO、SOD較模型組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，太子參多糖0.23g/kg組及太子參多糖0.46g/kg組各項(xiàng)指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，空白對照組CK、MDA同其他4組對比，明顯較低，NO、SOD同其他4組對比明顯較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

組別例數(shù)心律失常發(fā)生時(shí)間心律失常持續(xù)時(shí)間模型組166 02±0 84# 12 97±1 86# 太子參多糖0 23g/kg組168 57±1 15#?10 13±1 75#? 太子參多糖0 46g/kg組168 92±1 18#?9 89±1 71#?陽性對照組164 12±0 96 5 14±1 25

注：與模型組對比，*P<0.05；與陽性對照組對比，#P<0.05。

組別例數(shù)CK/U/mLNO/μmol/LMDA/nmol/mLSOD/U/mL模型組162 15±0 32?#28 98±4 67?#15 76±2 42?#131 02±9 45?#太子參多糖0 23g/kg組161 58±0 26#▲?43 65±5 24#▲?11 38±2 05#▲? 151 67±9 78#▲?太子參多糖0 46g/kg組161 53±0 23#▲?44 14±5 29#▲?10 95±1 97#▲? 153 87±9 83#▲?陽性對照組161 42±0 20?47 81±5 33?10 01±1 84?157 84±9 92?空白對照組160 91±0 1261 56±7 176 24±1 45189 72±11 67

注：與陽性對照組對比，#P<0.05；與模型組對比，▲P<0.05；與空白對照組對比，*P<0.05。

2.3 心肌梗死范圍對比 由表3可知，太子參多糖0.23g/kg組及太子參多糖0.46g/kg組心肌梗死范圍同模型組對比明顯較小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，太子參多糖0.23g/kg組與太子參多糖0.46g/kg組對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，陽性對照組心肌梗死范圍同其他3組比較明顯較小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

組別例數(shù)心肌梗死范圍模型組1624 13±2 85# 太子參多糖0 23g/kg組1617 58±2 24?#太子參多糖0 46g/kg組1617 49±2 11?#陽性對照組1610 15±1 96

注：與模型組對比，*P<0.05；與陽性對照組對比，#P<0.05。

3 討論

心血管疾病是嚴(yán)重公共衛(wèi)生問題，其中心肌缺血是目前研究熱點(diǎn)[2]。中醫(yī)藥在心血管疾病防治中應(yīng)用廣泛，太子參作為生津潤肺、益氣健脾的傳統(tǒng)中藥，富含三萜皂苷類、環(huán)肽類及多糖類成分。現(xiàn)代藥理研究證實(shí)[3-4]，太子參多糖具有抗應(yīng)激、增強(qiáng)免疫力、抗炎、抗脂質(zhì)過氧化等作用。但目前關(guān)于太子參多糖對心肌保護(hù)的報(bào)道較少。

研究通過對大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支進(jìn)行結(jié)扎，中斷左心血供，復(fù)制心肌缺血模型，觀察大鼠心律失常發(fā)生情況。結(jié)果顯示，在太子參多糖干預(yù)下，該組大鼠心律失常發(fā)生時(shí)間明顯較模型組晚，且持續(xù)時(shí)間明顯較短(P<0.05)，提示太子參多糖在抗心肌缺血性心律失常方面，具有確切作用。研究發(fā)現(xiàn)[5]，氧自由基的產(chǎn)生與增加，是心肌缺血發(fā)生后，心肌損傷發(fā)生的重要機(jī)制。氧自由基可促通過氧化反應(yīng)，引起細(xì)胞代謝紊亂甚至細(xì)胞死亡[6]。且氧自由基可同生物膜上脂類物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性、流動(dòng)性出現(xiàn)改變，加重心肌損傷[7]。本研究中，模型組、陽性對照組及太子參多糖組血清CK、NO、MDA及SOD水平均同空白對照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，進(jìn)一步證實(shí)心肌缺血同氧化應(yīng)激有密切關(guān)聯(lián)，但太子參多糖組CK、MDA明顯較模型組低，NO、SOD較模型組高(P<0.05)，提示太子參多糖可抑制脂質(zhì)過氧化無產(chǎn)生，起到抗應(yīng)激作用，從而改善心肌功能。SOD作為一種活性物質(zhì)，可對機(jī)體內(nèi)氧自由基予以清除，NO具有溶脂性，能夠改善心血管作用機(jī)理，MDA為膜脂過氧化常用指標(biāo)，在心肌梗塞發(fā)生時(shí)，血清CK水平會(huì)迅速升高，因此上述指標(biāo)對評價(jià)心肌功能及脂質(zhì)過氧化狀況有重要作用[8-10]。太子參多糖組大鼠心肌梗死范圍明顯小于模型組大鼠(P<0.05)，表明太子參多糖可抑制心肌細(xì)胞凋亡，減少心肌損傷。

綜上所述，太子參多糖對大鼠心肌缺血具有保護(hù)作用，可預(yù)防心律失常，促進(jìn)氧自由基清除，減少心肌損傷，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。

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R285.5

A

1007-8517(2017)17-0018-03

2017-06-16 編輯：陶希睿)

劉湘湘(1986-)，女，漢族，本科，初級藥師，研究方向?yàn)榕R床藥學(xué)研究。E-mail:helinlin1236@126.com