動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)采樣中存在的問題及注意事項(xiàng)

廖康瓊

摘 要：隨著畜牧產(chǎn)業(yè)的規(guī)?；?、集約化程度地提高，為促進(jìn)動(dòng)物疫病控制，縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)能力逐步得到提升，現(xiàn)不僅能開展凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、試管凝集實(shí)驗(yàn)等血清學(xué)檢測(cè)，隨著分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的建立，可以開展聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。因?yàn)楸O(jiān)測(cè)任務(wù)的加大，各養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）及基層獸醫(yī)人員在采樣送樣中因技術(shù)水平、思想認(rèn)識(shí)等方面的原因，存在不少問題，影響檢測(cè)效果和疫病診斷，筆者根據(jù)多年來(lái)在獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室工作的經(jīng)驗(yàn)，針對(duì)當(dāng)前動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)采樣中存在的一些問題并提出相應(yīng)注意事項(xiàng)，以便保證采樣質(zhì)量，促進(jìn)動(dòng)物疫病診斷工作。

關(guān)鍵詞： 動(dòng)物疫??；監(jiān)測(cè)采樣；問題；注意事項(xiàng)

中圖分類號(hào)：S852.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20170932107

1 采集樣品中存在的問題

1.1 采集血樣中存在的問題

溶血，是實(shí)驗(yàn)室收取血樣中最常出現(xiàn)的問題，是因放置不穩(wěn)、倒置或送樣中受到劇烈震蕩、采血管受污染等原因所致；腐敗變質(zhì)，因未冷藏保存、未及時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室引起；血清不析出，在牛、雞血樣品中易出現(xiàn)這種現(xiàn)象；呈膠凍狀，血清分離放置后呈膠凍狀，可能因?yàn)椴杉呵皠?dòng)物剛剛采食或血液中脂肪含量過高等原因所致；采血量不足3mL甚至更少，分離出的血清量難以進(jìn)行檢測(cè)。

1.2 棉拭子采樣中存在的問題

棉拭子一般采用2mL離心管保存，往往出現(xiàn)離心管中未加保存液、或離心管蓋沒扣緊保存液流失、禽流感、雞新城疫監(jiān)測(cè)采樣未按規(guī)定采集咽喉和泄殖腔雙拭子及保存不當(dāng)?shù)葐栴}。

1.3 組織病料采集中常存在的問題

采集的組織病料沒有代表性、病畜禽死亡過久采集的病料不新鮮、采集的病料已受污染、采集的病料體積過大、多個(gè)組織病料混在一起等。

1.4 采樣記錄不規(guī)范不完整

采樣前準(zhǔn)備不充分，不帶采樣登記表或采樣登記表記錄不規(guī)范、不完整，未按要求進(jìn)行樣品編號(hào)等。

2 樣品采集應(yīng)注意的事項(xiàng)

2.1 做好采樣前的準(zhǔn)備工作

根據(jù)采樣目的，準(zhǔn)備好采樣所需的器械、采樣記錄用品、樣品保存液、防護(hù)用品等。

2.2 血樣采集應(yīng)注意的事項(xiàng)

2.2.1 注意采血目的和用途

用于制備血清時(shí)，一般使用一次性不加抗凝劑的真空采血管，雞血不好分離血清可采用加枸緣酸鈉的采血管；用于制備血漿時(shí)，應(yīng)使用加抗凝劑的采血管，采血后，來(lái)回?fù)u動(dòng)幾次，以便使抗凝劑和血液充分混合。

2.2.2 掌握好采血時(shí)間和免疫間隔時(shí)間

用于免疫抗體檢測(cè)的血樣采集應(yīng)注意各種疫苗免疫后抗體產(chǎn)生的時(shí)間，如高致病性禽流感、雞新城疫、口蹄疫、豬瘟、小反芻獸疫等一般在免疫21d采血，高致病性豬藍(lán)耳病在免疫28d后采血。采血前應(yīng)提前通知養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）主，血液樣品采集前動(dòng)物一般禁食8h。

2.2.3 注意采集血樣的方法

不同種類的動(dòng)物采血方法不同。雞采用心臟或翼下靜脈采血；鴨一般采用跖內(nèi)側(cè)靜脈采血；牛、羊一般采用頸靜脈采血，奶牛、奶山羊可采用乳房靜脈采血；豬一般采用耳靜脈或前腔靜脈采血。

2.2.4 注意樣品的標(biāo)記和采樣記錄的規(guī)范性

采血結(jié)束后，應(yīng)立即在采血管上做好標(biāo)記，在采樣登記表上標(biāo)明樣品順序號(hào)、采血管編號(hào)、畜禽標(biāo)識(shí)號(hào)，必須一一對(duì)應(yīng)。采樣登記表上的其他內(nèi)容也必須填寫完整、規(guī)范，送樣前采樣登記表要復(fù)印1份自行留存?zhèn)洳椤?/p>

2.3 采集棉拭子應(yīng)注意的事項(xiàng)

高致病性禽流感、雞新城疫、H7N9流感等監(jiān)測(cè)采樣應(yīng)采集咽喉和泄殖腔雙拭子，取無(wú)菌棉簽，插入雞喉頭內(nèi)或泄殖腔轉(zhuǎn)動(dòng)3圈取出，插入離心管中剪去露出部分，蓋緊瓶蓋，做好標(biāo)記，密封低溫保存；豬腔拭子、咽拭子、肛拭子采集用滅菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉、肛門的分泌物；羊小反芻獸疫應(yīng)采集口鼻分泌物拭子。拭子應(yīng)密封低溫保存，其常用的保存液為含抗生素的PBS液或30%甘油鹽水緩沖液。

2.4 采集組織病料應(yīng)注意的事項(xiàng)

懷疑炭疽病的動(dòng)物嚴(yán)禁剖檢；采樣時(shí)應(yīng)從胸腔到腹腔，先采實(shí)質(zhì)臟器后采腔腸器官，盡量做到無(wú)菌；采取的病料必須有代表性，采取的臟器組織應(yīng)為病變明顯部位；病料最好在使用治療藥物前采取，死亡動(dòng)物的內(nèi)臟病料采取，最遲不超過死后6h，否則尸體腐敗，難以采到合格的病料。

2.5 樣品的保存及送樣應(yīng)注意的事項(xiàng)

血液樣品如不能現(xiàn)場(chǎng)分離血清，應(yīng)冷藏保存，必須在48h內(nèi)用冷藏箱送往實(shí)驗(yàn)室，血清低溫保存；棉拭子、組織病料采集后應(yīng)迅速用冷藏箱送往實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，如不能立即檢測(cè)，應(yīng)低溫保存。

參考文獻(xiàn)

[1]喬麗.淺談獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室工作幾點(diǎn)注意事項(xiàng)[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2016（12）.endprint