• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一種新獸用止瀉中藥復(fù)方制劑對大鼠的亞慢性毒性

    2017-10-27 13:12:58姜玲玲陳鴻宇史開志
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年16期

    姜玲玲 陳鴻宇 史開志

    摘要:為申報(bào)一種新獸用止瀉復(fù)方制劑,對其臨床用藥的安全性進(jìn)行了檢測,對該復(fù)方制劑進(jìn)行了亞慢性毒性研究。采用80只Wistar大鼠隨機(jī)分為4組,經(jīng)口給藥,劑量分別為3 000、1 500、750、0 mg/kg體質(zhì)量,連續(xù)灌胃30 d。試驗(yàn)期間觀察一般臨床狀況,每周測量大鼠體質(zhì)量并據(jù)此調(diào)整染毒劑量。試驗(yàn)結(jié)束后測定試驗(yàn)動物血常規(guī)、血清生化指標(biāo),并進(jìn)行病理解剖及病理組織學(xué)觀察。結(jié)果表明,除高劑量組個(gè)別大鼠心、肺、睪丸([XZ(15#]♂[XZ)])出現(xiàn)輕度瘀血外,其他各劑量組的實(shí)質(zhì)器官未發(fā)現(xiàn)異常變化;血液學(xué)指標(biāo)中除了高劑量組的嗜中性細(xì)胞絕對值水平顯著升高(P<005)和單核細(xì)胞絕對值、單核細(xì)胞比率、紅細(xì)胞壓積水平顯著下降(P<005)外,其余各組各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi),與對照組無顯著差異。在本試驗(yàn)條件下,未發(fā)現(xiàn)該制劑對大鼠的生長發(fā)育產(chǎn)生影響,短期重復(fù)應(yīng)用至少在1 500 mg/kg體質(zhì)量飼喂條件下無亞慢性毒性。

    關(guān)鍵詞:獸用中藥;多葉勾兒茶;復(fù)方制劑;大鼠;亞慢性毒性

    中圖分類號: S85374文獻(xiàn)標(biāo)志碼:

    文章編號:1002-1302(2017)16-0148-04

    收稿日期:2016-04-07

    基金項(xiàng)目:貴州省重大專項(xiàng)(編號:黔科合重大專項(xiàng)字[2013]6014);貴州省農(nóng)業(yè)類工程技術(shù)研究中心項(xiàng)目(編號:黔科合農(nóng)G字[2015]4001);貴州省科技廳、貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院聯(lián)合基金(編號:黔科合LH字[2014]7701號)。

    作者簡介:姜玲玲(1987—),女,河南項(xiàng)城人,碩士,助理研究員,主要從事基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究。E-mail:2056253464@qqcom。

    通信作者:卜仕金,博士,教授,從事獸醫(yī)藥理與毒理學(xué)研究。E-mail:pushijin@aliyuncom。

    動物腹瀉是集約化生產(chǎn)條件下一種典型的多因素性疾病,各種動物均可發(fā)病,尤其見于仔豬、犢牛、羔羊等,給養(yǎng)殖業(yè)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失??股仡愃幬锏闹委煵粌H導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性越來越嚴(yán)重,而且其殘留引起的畜產(chǎn)品質(zhì)量安全問題給社會帶來嚴(yán)重影響。中草藥以無殘留、不易產(chǎn)生耐藥性、價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn),在疾病防治和高質(zhì)量的肉產(chǎn)品生產(chǎn)中發(fā)揮著重要的作用。

    筆者所在課題組前輩根據(jù)中醫(yī)辯證施治理論,結(jié)合當(dāng)?shù)靥厣兴帯嗳~勾兒茶[1-2],對祖方改進(jìn)后,研制出以多葉勾兒茶為主,以地榆、烏藥等為輔的獸用止瀉新復(fù)方制劑,在臨床治療仔豬腹瀉、牛羊腹瀉中取得理想療效。結(jié)合前期工作,對該復(fù)方制劑毒理學(xué)進(jìn)行研究,為該復(fù)方制劑的推廣提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    11受試藥物

    止瀉復(fù)方制劑由貴州省畜牧獸醫(yī)研究所中獸醫(yī)研究室提供,按制劑臨床治療比例稀釋為1 mL含成品藥03 g,換算為生藥,1 mL含生藥13 g,棕褐色液體,氣味微苦。

    12試驗(yàn)動物及試驗(yàn)條件

    清潔級Wistar大鼠,由揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供,大鼠為4周齡、體質(zhì)量80~120 g,合格證號:SCXK(蘇)2012-0004,使用許可證號:SYXK(蘇)2012-0004。試驗(yàn)動物飼養(yǎng)于揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心動物房內(nèi),室溫為(24±2) ℃,人工白晝24 h。

    13儀器

    電子天平(感量01 g)、灌胃針、手術(shù)剪、手術(shù)刀等常規(guī)解剖器械;日立7150全自動生化分析儀;Sysmex KX-21血細(xì)胞分析儀;光學(xué)顯微鏡;LeicaVT1000S手動輪轉(zhuǎn)切片機(jī);HPX-9162MBE電熱恒溫培養(yǎng)箱;其他病理學(xué)檢查常用儀器試劑等。

    14方法

    141染毒劑量及試驗(yàn)分組

    80只大鼠隨機(jī)分成對照組和受試物高、中、低劑量組,每組20只,雌雄各半(雌雄分開飼養(yǎng),每籠飼養(yǎng)5只),組內(nèi)動物個(gè)體體質(zhì)量相差不超過平均體質(zhì)量的10%,組間平均體質(zhì)量相差不超過5%。結(jié)合急性毒性試驗(yàn)的結(jié)果,同時(shí)考慮亞慢性毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)原則,各組染毒劑量分別為3 000、1 500、750 mg/kg體質(zhì)量,染毒時(shí)各組染毒體積控制在05~10 mL/100 g體質(zhì)量范圍內(nèi),對照組按 10 mL/100 g 體質(zhì)量經(jīng)口灌服潔凈自來水。30 d染毒試驗(yàn)采用經(jīng)口染毒,每天1次,連續(xù)經(jīng)口灌服染毒30 d。試驗(yàn)期間每周定時(shí)稱體質(zhì)量,依據(jù)大鼠的體質(zhì)量變化調(diào)整染毒劑量。

    染毒期間每天觀察試驗(yàn)鼠健康狀況、采食及飲水變化。對出現(xiàn)異常的大鼠及時(shí)記錄、分析大鼠的中毒癥狀表現(xiàn)及出現(xiàn)各癥狀的先后次序、時(shí)間。每周稱體質(zhì)量和飼料各1次,并計(jì)算平均攝食量、增質(zhì)量及飼料轉(zhuǎn)化率(耗料/增質(zhì)量)。

    142檢測指標(biāo)

    最后一次染毒結(jié)束后撲殺所有大鼠,采用2%戊巴比妥鈉溶液以4 mL/kg體質(zhì)量腹腔注射麻醉后經(jīng)腹主動脈采血進(jìn)行血液學(xué)及血清生化指標(biāo)檢測。血液學(xué)指標(biāo)包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞壓積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板(PLT)等。血液生化檢測包括丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLu)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血清鉀(K)、血清鈉(Na)、血清氯(Cl)、血清鈣(Ca)等。

    143病理檢查

    1431大體剖檢

    試驗(yàn)結(jié)束時(shí),對所有大鼠進(jìn)行剖檢,采用肉眼檢查。做好記錄,并將主要器官和組織用10%福爾馬林溶液固定保存,以備進(jìn)一步顯微檢查。

    1432臟器稱質(zhì)量

    在大體剖檢的同時(shí)稱取大鼠體質(zhì)量及各主要臟器(包括心、肝、脾、肺、腎、胃、睪丸、卵巢和子宮)的質(zhì)量并記錄。計(jì)算各臟器的相對質(zhì)量(臟器質(zhì)量與體質(zhì)量的比值),即臟器系數(shù)。

    1433組織病理學(xué)檢查

    剖檢時(shí)先對高劑量組及對照組中所有大鼠的主要臟器進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。若發(fā)現(xiàn)高劑量組內(nèi)大鼠臟器出現(xiàn)明顯病變后,再對較低劑量組大鼠的相應(yīng)器官及組織進(jìn)行檢查。其中心、肝、肺、腎、脾、胃、睪丸及卵巢和子宮的組織病理學(xué)檢查為必測項(xiàng)目。

    15數(shù)據(jù)處理

    各處理組數(shù)據(jù)以x[TX-5]±s表示。用SPSS應(yīng)用軟件進(jìn)行組間數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)。采用t-檢驗(yàn)比較試驗(yàn)組與對照組間增質(zhì)量、臟器系數(shù)、血液生化等指標(biāo)的顯著性分析。

    [BT1-5][STHZ]2結(jié)果

    21臨床表現(xiàn)

    各組大鼠連續(xù)灌服染毒30 d期間,各處理組中大鼠臨床表現(xiàn)正常。試驗(yàn)期間復(fù)方制劑對大鼠生長發(fā)育的影響結(jié)果見表1。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,各處理組中雌雄大鼠體質(zhì)量變化無明顯差異(P>005)。

    注:同行數(shù)據(jù)各試驗(yàn)組與對照組分別進(jìn)行t-檢驗(yàn)(雙尾檢驗(yàn)),n=10,“”表示P<005,差異顯著;“”表示P<001,差異極顯著。下表同。

    22血液學(xué)及血清生化指標(biāo)

    大鼠連續(xù)經(jīng)口灌服染毒30 d后,各組血液學(xué)指標(biāo)測定結(jié)果見表2。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,與對照組相比,復(fù)方制劑高劑量組嗜中性細(xì)胞絕對值水平明顯升高(P<005);單核細(xì)胞絕對值、單核細(xì)胞率、紅細(xì)胞壓積水平顯著下降(P<005)。復(fù)方制劑中、低劑量組血液生化指標(biāo)變化不顯著(P>005)。

    大鼠連續(xù)染毒30 d后,各組血清生化指標(biāo)測定結(jié)果見表3。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,與對照組相比,復(fù)方制劑高劑量組天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶水平顯著升高(P<005)。

    23臟器系數(shù)

    大鼠連續(xù)經(jīng)口灌服染毒30 d后,各組臟器系數(shù)指標(biāo)測定結(jié)果見表4。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,與對照組相比,復(fù)方制劑高劑量組雌鼠的肝、腎的臟器系數(shù)水平明顯升高(P<005)。

    24病理學(xué)變化

    對經(jīng)口連續(xù)灌服染毒30 d后宰殺的大鼠剖檢后,對照組中所有大鼠經(jīng)肉眼觀察均未發(fā)現(xiàn)任何異常和可疑病變,對照組所有大鼠的心、肝、腎、脾、肺、胃、睪丸([XZ(15#]♂[XZ)])及子宮(♀)等組織進(jìn)行的組織病理學(xué)切片檢查,均未發(fā)現(xiàn)任何異常和可疑病變,表明30 d染毒試驗(yàn)飼養(yǎng)條件控制符合要求。高劑量組中所有大鼠經(jīng)肉眼觀察亦均未發(fā)現(xiàn)任何異常和可疑病變,對高劑量組所有大鼠的心、肝、腎、脾、肺、胃、睪丸([XZ(15#]♂[XZ)])及子宮(♀)等組織進(jìn)行組織病理學(xué)切片檢查,除高劑量組個(gè)別大鼠心(圖1、圖2)、肺(圖3、圖4)、睪丸([XZ(15#]♂[XZ)])(圖5、圖6)出現(xiàn)輕度瘀血外,各劑量組中的大鼠肝、腎、心、脾和肺等組織亦均未發(fā)現(xiàn)異常的組織病理學(xué)變化。

    3討論與分析

    本中藥復(fù)方制劑是由獲得國家發(fā)明專利技術(shù)成果“一種獸用止瀉中藥制劑及其制備方法”進(jìn)行熟化與轉(zhuǎn)化而得,主要針對動物腹瀉下痢,臨床療效穩(wěn)定,本研究參照《中藥、天然藥物長期毒性指導(dǎo)原則》[4],連續(xù)給藥1個(gè)月,旨在觀察Wistar大鼠長期灌胃該制劑提取液后可能出現(xiàn)的毒性反應(yīng)、毒性效應(yīng)關(guān)系,找出無毒反應(yīng)劑量,為臨床使用劑量和主要觀察指標(biāo)等提供參考依據(jù)。

    亞慢性毒性試驗(yàn)是指在試驗(yàn)動物部分生存期內(nèi),每天反復(fù)接觸受試物后在一定時(shí)期內(nèi)所引起的不良反應(yīng)。本試驗(yàn)通過觀察灌胃藥物后大鼠的臨床表現(xiàn)、血液學(xué)、生化指標(biāo)及組織切片等幾個(gè)方面試驗(yàn)來考察復(fù)方制劑的毒性。各組大鼠連續(xù)灌服染毒30 d期間,各組大鼠臨床表現(xiàn)正常,與空白對照組比較復(fù)方制劑各劑量組大鼠體質(zhì)量無明顯變化,說明對大鼠的正常生長無影響。

    血液學(xué)及血清生化指標(biāo)是毒理學(xué)試驗(yàn)中經(jīng)常用于測評的指標(biāo),通過衡量機(jī)體血液成分在受試藥物作用下有無改變,從而[CM(25]確定受試藥物的毒性大小[8]。本試驗(yàn)血液學(xué)指標(biāo)結(jié)果顯示,復(fù)方制劑中、低劑量組與對照組均無顯著差異;高劑量嗜中性細(xì)胞絕對值水平顯著升高(P<005);單核細(xì)胞絕對值、單核細(xì)胞率、紅細(xì)胞壓積水平顯著下降(P<005);但缺乏劑量相關(guān)性,臨床意義不大。血清生化指標(biāo)中、低劑量組與對照組均無顯著性差異,高劑量組天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)水平顯著升高(P<005)。AST、ALT、LDH是用來評價(jià)肝損傷的重要血清酶指標(biāo)[9-11],血清酶檢查的基本原理在于肝損害時(shí)酶由細(xì)胞內(nèi)大量釋放入血,導(dǎo)致血清中的含量升高[12]。齊云等報(bào)道SPF級11周齡Wistar雄性大鼠AST值為(1517±133) U/L,雌性大鼠為(1966±245) U/L;詹純列等也報(bào)道普通級Wistar大鼠AST為(315±134) U/L,SPF級大鼠為(324±238) U/L[14]。本試驗(yàn)高劑量組AST指標(biāo)(14450±1856) U/L雖然高于對照組,但組織學(xué)觀察無明顯異常,且數(shù)值在正常范圍值以內(nèi)。LDH常作為心肌異常診斷的參數(shù),結(jié)合組織病理學(xué)切片檢查發(fā)現(xiàn)高劑量組中1/5大鼠心臟出現(xiàn)輕度瘀血,而LDH偏高可能與其心臟組織輕度瘀血有關(guān),表明復(fù)方制劑高劑量可能對大鼠的心臟有影響。

    臟器系數(shù)和病理學(xué)檢測顯示,中、低劑量組與對照組均未發(fā)現(xiàn)任何異常和可疑病變,高劑量組雌鼠的肝、腎的臟器系數(shù)

    顯著高于對照組(P<005),但這2個(gè)組織的組織病理學(xué)檢查未見明顯異常,表明連續(xù)給藥30 d對上述組織尚無實(shí)質(zhì)性的影響,這可能與給藥時(shí)間較短,且藥物對臟器功能的影響往往先于形態(tài)學(xué)的影響有關(guān),更長時(shí)間給藥是否會導(dǎo)致肝臟和腎臟的形態(tài)學(xué)改變還有待進(jìn)一步研究。組織病理學(xué)切片檢查中,除高劑量組個(gè)別大鼠心、肺、睪丸出現(xiàn)輕度瘀血外,各劑量組中的大鼠肝、腎、心、脾和肺等組織亦均未發(fā)現(xiàn)異常的組織病理學(xué)變化。

    4小結(jié)

    亞慢性毒性試驗(yàn)顯示,中、低劑量組大鼠血液學(xué)及血清生化指標(biāo)和臟器組織與對照組無顯著性差異,綜合分析,該制劑中劑量組對大鼠的生長發(fā)育未產(chǎn)生影響,短期重復(fù)應(yīng)用至少在1 500 mg/kg飼喂條件下無亞慢性毒性。

    參考文獻(xiàn):

    多葉勾兒茶、慶豐霉素治療仔豬白痢[J] 農(nóng)業(yè)科技簡報(bào),1979(12):33

    梁應(yīng)林,李仲佰,楊茂生 貴州止瀉草藥對預(yù)防仔豬腹瀉效果的影響[J] 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2013(22):5535-5538

    [3]鄭筱萸 化學(xué)藥品和治療用生物制品研究指導(dǎo)原則(試行)[M] 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2002

    [4]農(nóng)業(yè)部獸藥評審中心獸藥研究技術(shù)指導(dǎo)原則匯編(2006—2011年)[M]北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2006:84-87

    [5]陳奇 中藥藥理研究方法學(xué)[M] 北京:人民衛(wèi)生出版社,1993

    [6]郭迎春,邸靜,胡松華,等 人參葉口服液對大鼠的亞慢性毒性試驗(yàn)[J] 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2011,32(5):59-63

    [7]李勝坤,王勝義,崔東安,等 烏錦顆粒劑的急性毒性與亞慢性毒性試驗(yàn)研究[J] 中國畜牧獸醫(yī),2015,42(5):1203-1210

    [8]劉霆,陳玉祥,趙顏忠,等 銀杏內(nèi)酯軟膠囊毒理學(xué)研究[J] 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2003,13(6):24-27

    [9]唐嬌,趙敏,譚劍斌,等 三七的經(jīng)口急性毒性及亞慢性毒性研究[J] 華南預(yù)防醫(yī)學(xué),2015,41(6):521-526

    [10]Hor S Y,Ahmad M,F(xiàn)arsi E,et al Acute and subchronic oral toxicity of Coriolus versicolor standardized water extract in Sprague-Dawley rats[J] Journal of Ethnopharmacology,2011,137(3):1067-1076

    [11]Ihsan A,Wang X,Huang X J,et al Acute and subchronic toxicological evaluation of Mequindox in Wistar rats[J] Regulatory Toxicology and Pharmacology,2010,57(2/3):307-314

    [12]譚毓治 藥物毒理學(xué)[M] 北京:科學(xué)出版社,2010

    [13]齊云,蔡潤蘭,王敏,等 新藥長毒試驗(yàn)動物血液生化測定規(guī)化研究系列之六——SPF級Wistar大鼠血液生化參考值的建立[J] 中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2006(4):197-200

    [14]詹純列,肖育華,李新春,等 普通級、SPF級SD、Wistar大鼠血液生化常值的測定與比較[J] 中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2004(2):94-97

    欧美中文综合在线视频| 无人区码免费观看不卡 | 纵有疾风起免费观看全集完整版| 69av精品久久久久久 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久国产精品人妻蜜桃| 老司机福利观看| 精品久久蜜臀av无| 亚洲成国产人片在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品国产一区二区精华液| 欧美另类亚洲清纯唯美| 正在播放国产对白刺激| 精品第一国产精品| 国精品久久久久久国模美| 亚洲午夜理论影院| 99国产精品一区二区三区| 一边摸一边抽搐一进一出视频| av免费在线观看网站| 97人妻天天添夜夜摸| 国产精品国产高清国产av | 五月天丁香电影| av不卡在线播放| 热99国产精品久久久久久7| 成年人午夜在线观看视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 麻豆成人av在线观看| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲精品一二三| h视频一区二区三区| 宅男免费午夜| 国产午夜精品久久久久久| 丝袜美腿诱惑在线| 国产成人精品久久二区二区91| 国产精品偷伦视频观看了| 日本一区二区免费在线视频| av片东京热男人的天堂| 亚洲avbb在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久人人爽av亚洲精品天堂| xxxhd国产人妻xxx| 丰满迷人的少妇在线观看| 午夜免费鲁丝| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 露出奶头的视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 男人操女人黄网站| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产男女内射视频| 久久久久久久久免费视频了| netflix在线观看网站| 美女国产高潮福利片在线看| 999久久久精品免费观看国产| 嫩草影视91久久| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲精品在线美女| 欧美日韩黄片免| 757午夜福利合集在线观看| 欧美日韩av久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 日本五十路高清| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲久久久国产精品| 久久中文字幕一级| 日韩制服丝袜自拍偷拍| avwww免费| av有码第一页| 久久久久久久久久久久大奶| 国产精品偷伦视频观看了| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产亚洲欧美精品永久| 高清在线国产一区| 国精品久久久久久国模美| 五月天丁香电影| 悠悠久久av| 国产xxxxx性猛交| 国产精品免费一区二区三区在线 | 国产免费av片在线观看野外av| 久久精品人人爽人人爽视色| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲avbb在线观看| 久久这里只有精品19| 免费观看a级毛片全部| 久久久国产一区二区| 看免费av毛片| 成年人午夜在线观看视频| 久久久久久久国产电影| 国产免费av片在线观看野外av| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 老鸭窝网址在线观看| 三级毛片av免费| 欧美大码av| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 美女视频免费永久观看网站| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 香蕉国产在线看| 欧美一级毛片孕妇| 啦啦啦在线免费观看视频4| 超碰成人久久| 999精品在线视频| 波多野结衣av一区二区av| 人妻一区二区av| 黄频高清免费视频| 免费在线观看黄色视频的| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲午夜理论影院| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美av亚洲av综合av国产av| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产伦人伦偷精品视频| 操出白浆在线播放| 欧美成人免费av一区二区三区 | 大码成人一级视频| 正在播放国产对白刺激| 日韩免费高清中文字幕av| 少妇粗大呻吟视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲,欧美精品.| 在线看a的网站| 99热国产这里只有精品6| 亚洲欧洲日产国产| 午夜日韩欧美国产| 又紧又爽又黄一区二区| 国产男靠女视频免费网站| 一二三四社区在线视频社区8| 久久精品91无色码中文字幕| 成人国语在线视频| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产在线视频一区二区| 久久免费观看电影| e午夜精品久久久久久久| 淫妇啪啪啪对白视频| 欧美日韩精品网址| 乱人伦中国视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久久久久久精品吃奶| 精品久久久久久电影网| 久久久精品94久久精品| 无限看片的www在线观看| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 99国产综合亚洲精品| 亚洲人成77777在线视频| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 美女主播在线视频| 91大片在线观看| 不卡av一区二区三区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 日本精品一区二区三区蜜桃| 大型av网站在线播放| 三级毛片av免费| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲一区中文字幕在线| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲久久久国产精品| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 怎么达到女性高潮| 麻豆成人av在线观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 午夜福利免费观看在线| 国产黄色免费在线视频| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲国产欧美网| 美女视频免费永久观看网站| 国产真人三级小视频在线观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 99国产精品免费福利视频| 老鸭窝网址在线观看| 老司机福利观看| 欧美人与性动交α欧美软件| 丝瓜视频免费看黄片| 欧美激情 高清一区二区三区| 免费观看人在逋| 国产麻豆69| 日日夜夜操网爽| 久久久久久免费高清国产稀缺| 日韩精品免费视频一区二区三区| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 一进一出抽搐动态| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲精品国产区一区二| 他把我摸到了高潮在线观看 | 成年人午夜在线观看视频| 精品亚洲成国产av| 久久久国产精品麻豆| 亚洲天堂av无毛| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | www.自偷自拍.com| 在线观看免费视频网站a站| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 成年人黄色毛片网站| 我的亚洲天堂| 中文亚洲av片在线观看爽 | 日韩欧美三级三区| 大型av网站在线播放| 欧美一级毛片孕妇| 咕卡用的链子| av线在线观看网站| 99re6热这里在线精品视频| 欧美日韩成人在线一区二区| av一本久久久久| 9热在线视频观看99| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 法律面前人人平等表现在哪些方面| av电影中文网址| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品.久久久| 99香蕉大伊视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 热re99久久精品国产66热6| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 99国产精品一区二区蜜桃av | 午夜久久久在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美午夜高清在线| 亚洲五月婷婷丁香| 91老司机精品| 热re99久久精品国产66热6| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 99国产精品一区二区蜜桃av | 国产成人av激情在线播放| 国产成人欧美| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 欧美日韩视频精品一区| 黄色怎么调成土黄色| 久久久久久久国产电影| 天天添夜夜摸| 婷婷丁香在线五月| 9热在线视频观看99| 亚洲精品一二三| 操出白浆在线播放| 国产亚洲精品一区二区www | 考比视频在线观看| 亚洲av国产av综合av卡| 91老司机精品| 日本五十路高清| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产片内射在线| 动漫黄色视频在线观看| 大香蕉久久网| 亚洲国产欧美在线一区| 久久久久网色| 午夜福利,免费看| 免费在线观看黄色视频的| 中文字幕精品免费在线观看视频| 成年动漫av网址| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久 成人 亚洲| 国产日韩欧美亚洲二区| 天天操日日干夜夜撸| 搡老乐熟女国产| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲av电影在线进入| 操美女的视频在线观看| 岛国在线观看网站| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 老司机影院毛片| 亚洲伊人久久精品综合| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 十八禁高潮呻吟视频| 天堂中文最新版在线下载| 搡老乐熟女国产| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 91大片在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 叶爱在线成人免费视频播放| 午夜成年电影在线免费观看| 中文亚洲av片在线观看爽 | 另类亚洲欧美激情| 国产欧美日韩一区二区精品| 丁香六月欧美| 丝袜喷水一区| 精品福利永久在线观看| 9色porny在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 51午夜福利影视在线观看| 国产人伦9x9x在线观看| 两个人免费观看高清视频| 少妇的丰满在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 成人手机av| 曰老女人黄片| 久久精品国产亚洲av高清一级| 大片免费播放器 马上看| 午夜福利,免费看| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 成人国产av品久久久| 久久精品亚洲av国产电影网| 日韩一区二区三区影片| 最新的欧美精品一区二区| 老司机亚洲免费影院| 国产精品一区二区在线观看99| 精品少妇久久久久久888优播| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 操美女的视频在线观看| 午夜免费成人在线视频| 性少妇av在线| 乱人伦中国视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 成人av一区二区三区在线看| 后天国语完整版免费观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 精品福利永久在线观看| 精品福利观看| 一夜夜www| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲中文av在线| 黄片播放在线免费| 国产精品免费一区二区三区在线 | 99精品在免费线老司机午夜| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲视频免费观看视频| 搡老乐熟女国产| 人妻 亚洲 视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| videos熟女内射| 久久这里只有精品19| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 99在线人妻在线中文字幕 | 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲熟女精品中文字幕| 成人av一区二区三区在线看| 日韩有码中文字幕| 丝袜在线中文字幕| 国产熟女午夜一区二区三区| 久久久久久久大尺度免费视频| 青草久久国产| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 日韩大码丰满熟妇| 热re99久久精品国产66热6| 丝袜人妻中文字幕| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲av国产av综合av卡| 天堂俺去俺来也www色官网| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产亚洲精品一区二区www | av网站在线播放免费| 少妇精品久久久久久久| 成人三级做爰电影| 国产淫语在线视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 久久中文看片网| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 国产一区二区 视频在线| 蜜桃在线观看..| 国产片内射在线| 热99久久久久精品小说推荐| av天堂久久9| 18禁国产床啪视频网站| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产99久久九九免费精品| 亚洲熟妇熟女久久| 热re99久久国产66热| 91成年电影在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 欧美日本中文国产一区发布| 丁香六月欧美| 国产av精品麻豆| 搡老熟女国产l中国老女人| 黑丝袜美女国产一区| 99九九在线精品视频| 黄色视频,在线免费观看| 成人精品一区二区免费| 精品久久久久久久毛片微露脸| 精品国产国语对白av| 日韩视频一区二区在线观看| 无限看片的www在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲一码二码三码区别大吗| 在线观看66精品国产| 国产黄色免费在线视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 人人妻人人澡人人看| 好男人电影高清在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码| 免费黄频网站在线观看国产| 欧美黄色淫秽网站| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 成人三级做爰电影| 欧美午夜高清在线| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲人成77777在线视频| 香蕉久久夜色| 久久久久久久精品吃奶| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 自线自在国产av| 国产一区二区在线观看av| 在线观看人妻少妇| 久久久国产一区二区| 人妻 亚洲 视频| 欧美精品av麻豆av| 天堂动漫精品| 精品卡一卡二卡四卡免费| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 老司机在亚洲福利影院| a在线观看视频网站| 国产亚洲一区二区精品| 99热国产这里只有精品6| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲免费av在线视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| svipshipincom国产片| 国产精品免费一区二区三区在线 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产高清激情床上av| 男女高潮啪啪啪动态图| 捣出白浆h1v1| 久久精品国产综合久久久| 香蕉丝袜av| 色婷婷久久久亚洲欧美| 麻豆av在线久日| 热re99久久精品国产66热6| 精品熟女少妇八av免费久了| videos熟女内射| 久久久国产一区二区| 久久天堂一区二区三区四区| 99精品在免费线老司机午夜| 日韩欧美免费精品| 黄色视频在线播放观看不卡| tocl精华| 精品亚洲成a人片在线观看| 老司机福利观看| 国产欧美日韩一区二区三| 黄片播放在线免费| 午夜福利在线免费观看网站| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 啪啪无遮挡十八禁网站| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 狠狠狠狠99中文字幕| 一级黄色大片毛片| 欧美日韩福利视频一区二区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 成人18禁在线播放| 日本黄色日本黄色录像| 日韩免费高清中文字幕av| av网站免费在线观看视频| 动漫黄色视频在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲第一av免费看| 高清在线国产一区| 国产三级黄色录像| 老司机亚洲免费影院| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 女性生殖器流出的白浆| 免费日韩欧美在线观看| 青草久久国产| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲综合色网址| a级片在线免费高清观看视频| av国产精品久久久久影院| 久久中文字幕人妻熟女| 在线观看66精品国产| 中文字幕人妻熟女乱码| 天天影视国产精品| 最近最新中文字幕大全电影3 | 精品福利永久在线观看| 老汉色∧v一级毛片| e午夜精品久久久久久久| 一区二区日韩欧美中文字幕| 免费在线观看日本一区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 欧美日韩精品网址| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久国产精品男人的天堂亚洲| av天堂久久9| 国产免费现黄频在线看| 欧美激情久久久久久爽电影 | 色在线成人网| av天堂久久9| 国产免费现黄频在线看| 黄色视频在线播放观看不卡| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产xxxxx性猛交| 黄片播放在线免费| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 性少妇av在线| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美在线一区亚洲| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 久久久久国产一级毛片高清牌| 日韩欧美三级三区| 香蕉久久夜色| www日本在线高清视频| 亚洲五月婷婷丁香| 涩涩av久久男人的天堂| 久久午夜综合久久蜜桃| 黄色视频,在线免费观看| av免费在线观看网站| 麻豆国产av国片精品| 国产精品久久久av美女十八| 黄色a级毛片大全视频| 91av网站免费观看| 午夜两性在线视频| 女人精品久久久久毛片| 亚洲,欧美精品.| 丰满少妇做爰视频| 国产成人影院久久av| 老熟女久久久| 欧美精品av麻豆av| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| bbb黄色大片| 男女无遮挡免费网站观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日本a在线网址| 婷婷成人精品国产| 老司机福利观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲av成人一区二区三| 中国美女看黄片| 欧美+亚洲+日韩+国产| 多毛熟女@视频| 国产三级黄色录像| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久亚洲精品不卡| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 天天操日日干夜夜撸| 日本黄色视频三级网站网址 | av不卡在线播放| 制服诱惑二区| 精品国产一区二区三区四区第35| 国精品久久久久久国模美| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久久久久久国产电影| 黑人猛操日本美女一级片| 色94色欧美一区二区| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 精品久久久久久电影网| 黄片小视频在线播放| 国产在视频线精品| 两性夫妻黄色片| 日本欧美视频一区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲 国产 在线| 多毛熟女@视频| 老司机影院毛片| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产单亲对白刺激| 欧美日本中文国产一区发布| 下体分泌物呈黄色| 国产一区二区在线观看av| 宅男免费午夜| 99国产精品一区二区三区| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 极品少妇高潮喷水抽搐| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产亚洲精品久久久久5区| 老司机靠b影院| 亚洲欧洲日产国产| 大陆偷拍与自拍| 超碰97精品在线观看| 亚洲综合色网址| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲精品美女久久av网站| 手机成人av网站| 午夜老司机福利片| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 我要看黄色一级片免费的| 最黄视频免费看| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 黄网站色视频无遮挡免费观看| 老司机午夜福利在线观看视频 | 精品第一国产精品| 男女免费视频国产| www.自偷自拍.com| 9色porny在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲精品在线观看二区| 黄色a级毛片大全视频| 久久亚洲真实| 精品人妻1区二区| 怎么达到女性高潮| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 中文字幕av电影在线播放| 日韩大码丰满熟妇| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久九九热精品免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产熟女午夜一区二区三区| 在线永久观看黄色视频| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲人成电影免费在线| 国产精品免费一区二区三区在线 | 免费在线观看影片大全网站|