9013例輸血者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果及意義

吳 迪

(首都醫(yī)科大學附屬北京朝陽醫(yī)院輸血科， 北京 100020)

·臨床研究·

9013例輸血者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果及意義

吳 迪*

(首都醫(yī)科大學附屬北京朝陽醫(yī)院輸血科， 北京 100020)

目的分析9 013例輸血者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果，并探討不規(guī)則抗體篩查的臨床意義。方法回顧性分析自2013年7月至2016年8月于首都醫(yī)科大學附屬北京朝陽醫(yī)院接受輸血的病人9 013例，應(yīng)用微柱凝膠技術(shù)篩查不規(guī)則抗體，并進行鑒定。統(tǒng)計分析不規(guī)則抗體的陽性率、分布及不同科室中不規(guī)則抗體的陽性率，另外分析性別及輸血/妊娠史對不規(guī)則抗體陽性率的影響。結(jié)果9 013例輸血者的血液標本中不規(guī)則抗體的陽性率為0.63%(57/9 013)，主要為Rh型，占42.11%(24/57)；其次為MNS型，占24.56%(14/57)；其他類型及所占比例分別為Lewis系統(tǒng)(10.53%)、Kidd系統(tǒng)(8.77%)。P系統(tǒng)(5.26%)及其他(8.77%)。外科輸血者不規(guī)則抗體檢出率為1.06%(14/1 321)，高于其他科室的0.59%(43/7 692),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。女性輸血者中不規(guī)則抗體的陽性率為0.94%(30/3 187)，明顯高于男性病人的0.46%(27/5 826)，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。有輸血/妊娠史輸血者的血漿中不規(guī)則抗體的陽性率為0.85%(34/3 986)，顯著高于無輸血/妊娠史輸血者的0.46%(23/5 027)(P<0.05)。結(jié)論輸血前對不規(guī)則抗體進行篩查對于提高輸血安全性具有重要意義，為篩查呈陽性病人提供適合的血型，從而降低臨床免疫溶血事件的發(fā)生，提高輸血的有效性。

輸血；不規(guī)則抗體；篩查

輸血是臨床上常規(guī)的治療方式，具有重要的作用，但是血液制品中含有多種復(fù)雜的成分，其安全性受到臨床醫(yī)師的重視[1]。血型抗體可以分為規(guī)則和不規(guī)則抗體，規(guī)則抗體主要是ABO型血型中的抗體，隨著血型檢測技術(shù)和輸血前精確的檢測，規(guī)則抗體引起的溶血反應(yīng)已經(jīng)顯著減少[2-3]，不規(guī)則抗體指的是除ABO型以外的其他類型的抗體，由不規(guī)則抗體導(dǎo)致的輸血不良反應(yīng)發(fā)生率越來越高，輕者會導(dǎo)致輸血失敗，嚴重的情況可能致使病人喪失生命，目前隨著臨床對輸血安全性的重視，在輸血前對不規(guī)則抗體進行篩查與鑒定具有重要意義，輸血前需要進行不規(guī)則抗體篩查[4]。不規(guī)則抗體又可以分為紅細胞血型同種抗體和自身抗體兩大類，其中主要類型為IgG類， 還存在一部分IgM類，不規(guī)則抗體的產(chǎn)生、分布及類型等原因受到多種因素的影響[5]。對輸血者不規(guī)則抗體進行深入了解，對于減少輸血時產(chǎn)生的溶血反應(yīng)和提高輸血的安全性具有重要作用[6-7]。

1 資料與方法

1.1樣本來源

回顧性分析自2013年7月至2016年8月于首都醫(yī)科大學附屬北京朝陽醫(yī)院住院部和門診接受輸血的病人9 013例，其中男性5 826例，女性3 187例；年齡5～65歲，平均年齡(48.64±4.26)歲；有輸血/妊娠史病人3 986例，無輸血/妊娠史者5 027例；單次輸血量為200～3 000 mL，平均為(1 053.24±72.51)mL。在進行輸血前1 d，抽取病人肘靜脈血2 mL置于涂有肝素的采血管中，常溫狀態(tài)下靜置20 min后，以轉(zhuǎn)速 4 500 r/min離心10 min，分離血漿并待查。

1.2試劑與儀器

Diana Gel Coombs卡，由北京佰利申科貿(mào)有限公司提供；Ⅰ～Ⅲ 0.8%(質(zhì)量分數(shù))的不規(guī)則抗體篩查紅細胞、各種抗體血清(包括抗C、D、E、M、N、S、c、e及PI)、Kidd血清、lewis血清、抗人球蛋白試劑、抗AI 血清均由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供?？笰、抗B單克隆抗體由長春博德公司提供。

WADiana 全自動血型鑒定儀、DG Spin離心機、Diana 恒溫孵育器均購自西班牙Grifol公司；血型血清學離心機購自臺灣貝索公司。

1.3篩查方法

不規(guī)則抗體篩查的方法為微柱凝膠技術(shù)。第一步將所有的樣品和試劑平衡至室溫，在微柱凝膠抗人球蛋白卡的相應(yīng)位置進行標記，分別標記為1、2、3，相應(yīng)地加入50 μL Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號0.8%(質(zhì)量分數(shù))的不規(guī)則抗體篩查紅細胞；第二步，每個孔中加入25 μL病人的血漿，并將這個微柱凝膠抗人球蛋白卡置于37 ℃ Diana 恒溫孵育器中，孵育時間為15 min；第三步，使用DG Spin細胞洗滌離心機離心2次，第一次離心4 min，離心速度為900 r/min，第二次離心5 min，離心速度為100 r/min，共計10 min，離心半徑為7 cm。離心后將樣品置于白色背景處進行觀察，統(tǒng)計分析病人的不規(guī)則抗體的檢出率。

1.4鑒定方法[8]

對不規(guī)則抗體的鑒定方法有3種，分別為菠蘿酶法、抗人球蛋白以及鹽水法。鑒定結(jié)束后，采用標準譜細胞進行對照，最終確定抗體的特異性，對不同類型的抗體檢測方法均按照對應(yīng)的研究和方法進行檢測。

1.5判定標準[2]

結(jié)果評價標準參考：陽性，紅細胞呈現(xiàn)凝聚和懸浮狀態(tài)，主要分布在凝膠柱的上端或中部；陰性：游離的紅細胞數(shù)量較多，并且都集中在凝膠柱的底部。應(yīng)用1、11號譜細胞進行鑒定并了解不規(guī)則抗體的特異性，如果結(jié)果一致，表明抗體呈陽性。

1.6統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.19013例輸血者中不規(guī)則抗體的檢出情況

在9 013例輸血者的血液標本中檢出的不規(guī)則抗體的例數(shù)為57例，陽性率為0.63%。其中占比重最大的類型是Rh型，占42.11%(24/57)，排在第二位的是MNS型，占24.56%(14/57)；其他類型及占比分別為Lewis系統(tǒng)(10.53%)、Kidd系統(tǒng)(8.77%)、P系統(tǒng)(5.26%)及其他(8.77%)，具體情況如表1所示。

2.2不同科室輸血者不規(guī)則抗體的檢出情況

不同科室輸血者不規(guī)則抗體檢出情況如表2所示，外科輸血者不規(guī)則抗體檢出率為1.06%(14/1 321)，高于其他科室的0.59%(43/7 692),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.3不同性別輸血者中不規(guī)則抗體的檢出情況分析

女性輸血者中不規(guī)則抗體的陽性率為0.94%(30/3 187)，而男性輸血者中不規(guī)則抗體的陽性率為0.46%(27/5 826)。女性輸血者中不規(guī)則抗體的陽性率明顯高于男性病人，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，詳見表3。

表1 9 013例輸血者中不規(guī)則抗體的檢出情況Tab.1 The irregular antibody screening results of 9 013 cases of blood transfusion n(%)

表2 不同科室輸血者不規(guī)則抗體的檢出情況Tab.2 The irregular antibody screening results of blood transfusion patients in different departments

表3 不同性別輸血者不規(guī)則抗體檢出情況Tab.3 The irregular antibody screening results of bloodpatients in different gender

2.4比較輸血史/妊娠史對不規(guī)則抗體檢出情況的影響

有輸血/妊娠史輸血者的血漿中不規(guī)則抗體的陽性率為0.85%(34/3 986)，顯著高于無輸血/妊娠史輸血者的0.46%(23/5 027)，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，詳見表4。

表4 輸血史/妊娠史對不規(guī)則抗體檢出情況影響Tab.4 The influence of blood transfusion/pregnancy history toirregular antibody screening results

3 討論

不規(guī)則抗體的出現(xiàn)并無規(guī)律可循，可以引起輸血失敗和遲發(fā)型輸血不良反應(yīng)，尤其是對于反復(fù)輸血的病人，如果接受輸血的病人體內(nèi)存在相應(yīng)的抗原，就會逐步破壞輸入血液的紅細胞，誘發(fā)慢性溶血反應(yīng)[9]，同時并不會明顯提高血管活性物質(zhì)的釋放量和凝血系統(tǒng)的活化程度，導(dǎo)致輸血病人出現(xiàn)的出血現(xiàn)象并未明顯好轉(zhuǎn)，不僅增加病人的經(jīng)濟負擔，更重要的是貽誤了救治病人的最佳時機[10]。在我國，約有超過10%的輸血反應(yīng)是由不規(guī)則抗體引起的，多數(shù)的不規(guī)則抗體為IgG類，當體內(nèi)存在較低滴度的不規(guī)則抗體時，由于交叉配血試驗的靈敏度差，給病人輸入不完全匹配的血液樣品，易誘發(fā)溶血性輸血性反應(yīng)[11-12]。對輸血者進行不規(guī)則抗體的篩查已經(jīng)成為管理輸血質(zhì)量的重要措施之一，從而降低可能發(fā)生的輸血不良反應(yīng)。對于存在不規(guī)則抗體的輸血病人，應(yīng)該在進行交叉配血反應(yīng)的同時，相應(yīng)的抗原呈現(xiàn)陽性的紅細胞進行灌注，病人在進行大型手術(shù)前，需要提前1 d對抗體進行篩選，保證不規(guī)則抗體呈陽性的病人能夠得到最佳的血液制品，保證手術(shù)的順利進行[13-14]。

根據(jù)國內(nèi)的相關(guān)研究[15]報道，不規(guī)則抗體的檢出率在輸血者中的檢出率較低，通常在0.3%～2.0%之間，本研究對9 013例輸血者的血液標本繼續(xù)檢測，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體的陽性率為0.63%(52/9 013)，符合國內(nèi)的不規(guī)則抗體檢出情況，略低于劉艷輝等[16]報道的0.74%陽性率，高于李慧等[17]報道的0.31%(137/44 194)，這可能是由于區(qū)域因素導(dǎo)致的。在檢出的不規(guī)則抗體類型中占比重最大的類型是Rh型，占42.11%(24/57)，提示其是引起免疫性溶血性輸血的主要抗體類型，在Rh亞型中占比例最高的是抗-E抗體[17.54%(10/57)]，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的主要原因是漢族血型中E抗原呈陽性的比例將近50%，此外，國內(nèi)的醫(yī)院已將D抗原的檢測列入常規(guī)的檢測項目中，而E抗原的檢測尚未進入常規(guī)檢測項目中[3]。醫(yī)院可以在輸血前對Rh血液系統(tǒng)進行分型，選擇合適的血液制品進行輸注。排在第二位的是MNS型，其中主要的抗體類型為抗-M抗體[10.53(6/57)]，當病人處于低溫麻醉的狀態(tài)下，抗-M抗體通過激活補體，使得冷抗體在適當?shù)姆磻?yīng)溫度范圍內(nèi)出現(xiàn)溶血反應(yīng)，因此可以選擇與M抗原呈陰性的血液制品，避免出現(xiàn)不良反應(yīng)[18]。不同科室中不規(guī)則抗體檢出率不同，本研究顯示不規(guī)則抗體檢出率外科明顯高于其他科室，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是由于外科接受輸血的情況較多，且經(jīng)常反復(fù)輸血，從而產(chǎn)生免疫性抗體，尤其是本院外科病人中接受腎移植和肝移植的病人數(shù)量較多，手術(shù)過程中出血較多，而且移植的器官容易產(chǎn)生特異性抗原導(dǎo)致機體出現(xiàn)不規(guī)則抗體，因此需要在術(shù)前對移植器官進行不規(guī)則抗體檢查，術(shù)后嚴密觀測。

對不同因素對不規(guī)則抗體的陽性率影響的研究顯示，女性輸血者中不規(guī)則抗體的陽性率明顯高于男性病人，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，主要是由于女性病人在非正常狀態(tài)下，如妊娠或流產(chǎn)，容易受到免疫因素的刺激，另外還會受到輸血和免疫的雙重刺激影響[19]。本研究還顯示，有輸血/妊娠史輸血者的血漿中不規(guī)則抗體的陽性率為0.85%(34/3 986)，顯著高于無輸血/妊娠史輸血者的0.46%(23/5 027)，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，以上結(jié)果說明有輸血/妊娠史的輸血者在輸血前更需要進行不規(guī)則抗體篩查，女性病人在妊娠過程中，容易產(chǎn)生不規(guī)則抗體，輸血過程也會提高輸血者接觸異型抗原的概率[2]。

綜上所述，本院從2013年至2016年的4年間有一定的不規(guī)則抗體的陽性率，因此在輸血前對不規(guī)則抗體進行篩查和鑒定，規(guī)范相應(yīng)的科室的輸血流程，對容易出現(xiàn)不規(guī)則抗體的輸血者進行嚴密監(jiān)督，提供合適的血液制品，是保證臨床輸血有效性和安全性的有效措施。

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Screeningresultsandsignificanceof9013casesoftransfusionirregularantibody

Wu Di*

(DepartmentofTransfusion,BeijingChaoyangHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100020,China)

ObjectiveTo analyze screening results of 9 013 cases of transfusion irregular antibody, and to explore the clinical significance of the irregular antibody screening.MethodsTotally 9 013 cases of patients underwent blood transfusion from July 2013 to August 2016 in Beijing Chaoyang Hospital, Capital Medical University were analyzed retrospectively. The irregular antibody screening and identification were applied with micro-column gel technology. The positive rate of irregular antibody, distribution and irregular antibody positive rate in the different departments were analyzed statistically. In addition, the influence of gender and blood transfusion/history of pregnancy on irregular antibody positive rate.ResultsThe irregular antibody positive rate of 9 013 cases of transfusion of blood specimen was 0.63% (57/9 013), in which mainly for the Rh, was accounted for 42.11% (24/57); Second of MNS type, which was accounting for 24.56% (14/57); Other type and proportion were Lewis system (10.53%), Kidd system (8.77%), P (5.26%) and other (8.77%), respectively. The irregular antibody rate in surgery department was 1.06% (14/1 321), significantly higher than other department 0.59% (43/7 692), with significant difference (P<0.05). The irregular antibody positive rate of women transfusion was 0.94% (30/3 187), which was significantly higher than the 0.46% of male patients (27/5 826), and the difference was statistically significant (P<0.05). The irregular antibody positive rate of patients with blood transfusion/pregnancy history was 0.85% (34/3 986), which was significantly higher than that with no history of transfusion blood transfusion/pregnancy[0.46% (23/5 027)] (P<0.05).ConclusionThe irregular antibody screening before blood transfusion is of great significance for the improvement of blood transfusion safety, which provides suitable for screening patients with positive blood type. It can reduce clinical immune hemolysis events in order to increase the effectiveness of blood transfusion.

blood transfusion; irregular antibody; screening

*Corresponding author， E-mail：wdclaie@163.com

時間：2017-10-14 16∶29

http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.3662.R.20171014.1629.050.html

10.3969/j.issn.1006-7795.2017.05.023]

R457

2017-01-09)

編輯 孫超淵