山茱萸多糖對(duì)血管性癡呆大鼠皮層腦電圖的影響*

高 方，李永格，張士鋒

(1.南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科一病區(qū)，河南 南陽(yáng) 473000； 2.南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)部，河南 南陽(yáng) 473000)

·實(shí)驗(yàn)研究·

山茱萸多糖對(duì)血管性癡呆大鼠皮層腦電圖的影響*

高 方1，李永格2，張士鋒2

(1.南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科一病區(qū)，河南 南陽(yáng) 473000； 2.南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)部，河南 南陽(yáng) 473000)

目的：研究山茱萸多糖對(duì)血管性癡呆大鼠皮層腦電圖的影響。方法：將30只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型對(duì)照組、山茱萸多糖組3組。除假手術(shù)組外，另兩組制備血管性癡呆模型。山茱萸多糖組給予山茱萸多糖0.28 g/kg體質(zhì)量灌胃，假手術(shù)組和模型對(duì)照組給予等容積生理鹽水，持續(xù)4周。灌胃結(jié)束后，采用RM6240生物信號(hào)采集系統(tǒng)分別記錄和分析各組皮層腦電圖。結(jié)果：①與假手術(shù)組對(duì)比，模型對(duì)照組δ波頻段明顯增多，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，α波以及β波頻段明顯減少(P<0.05)，θ波頻段無(wú)明顯改變(P>0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，山茱萸多糖組δ波頻段明顯減少(P<0.05)，α波以及β波頻段明顯增多(P<0.05)，θ波頻段無(wú)明顯改變(P>0.05)。②與假手術(shù)組對(duì)比，模型對(duì)照組除δ波振幅明顯降低之外(P<0.05)，其他各頻段振幅沒(méi)有明顯變化(P>0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，山茱萸多糖組除δ波振幅明顯升高之外(P<0.05)，其他各頻段振幅沒(méi)有明顯變化(P>0.05)。結(jié)論：山茱萸多糖可能通過(guò)改變皮層腦電δ波頻段與振幅來(lái)改善血管性癡呆大鼠腦功能。

山茱萸多糖/藥效學(xué)；血管性癡呆；皮層腦電圖；動(dòng)物；大鼠

血管性癡呆(vascular dementia，VD)是一種因腦血管病所導(dǎo)致的智能及認(rèn)知障礙為主的臨床綜合征[1]，主要與缺血性腦病有關(guān)，是一種慢性進(jìn)行性疾病，嚴(yán)重影響患者的工作和生活。皮層腦電圖(electrocorticogram，EEG)是一項(xiàng)經(jīng)典的記錄腦容積導(dǎo)體綜合電變化的技術(shù)，是腦神經(jīng)細(xì)胞電生理活動(dòng)在大腦皮層表面的總體反映，對(duì)VD的早期診斷有價(jià)值，亦可作為判定VD療效的一個(gè)重要參考指標(biāo)[2]。山茱萸多糖為山茱萸提取物，筆者既往研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)VD有治療作用[3]，但是否會(huì)引起EEG特征性變化，國(guó)內(nèi)外尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)RM6240生物信號(hào)采集系統(tǒng)采集和分析各組大鼠EEG變化，以期為臨床VD早期防治及藥物篩選提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng) 物

健康清潔級(jí)雄性SD大鼠，SPF級(jí)，30只，體質(zhì)量150～250 g，購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，生產(chǎn)合格證號(hào)為20130711。

1.2 藥品、試劑與儀器

山茱萸多糖由南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供，臨用前用蒸餾水配制成0.05 g/mL溶液；水合氯醛，購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20120810。江灣Ⅱ型腦立體定位儀，四川成都泰盟儀器公司產(chǎn)品；RM6240生物信號(hào)采集系統(tǒng)，四川成都儀器廠產(chǎn)品。

1.3 動(dòng)物分組與模型的建立

將30只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型對(duì)照組、山茱萸多糖組3組，每組各10只。除假手術(shù)組外，另兩組按照馬大勇等[4]改良方法制備VD模型。手術(shù)后第二天開(kāi)始灌胃，山茱萸多糖組給予山茱萸多糖0.28 g/kg體質(zhì)量灌胃，假手術(shù)組和模型對(duì)照組給予等容積生理鹽水，持續(xù)4周。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

灌胃結(jié)束后，進(jìn)行皮層腦電采集與分析。以100 g/L水合氯醛(3.5 mL/g)腹腔注射麻醉大鼠，俯臥位固定于大鼠腦立體定位儀上。沿大鼠正中矢狀線切開(kāi)皮膚，暴露顱骨及前后囟，剝離骨膜。采用《大鼠腦立體定位圖譜》[5]對(duì)位置定位。EEG記錄用不銹鋼螺絲電極，參比用小腦顱骨不銹鋼螺絲電極，具體位置：記錄電極于P 6.0～6.5 mm，R或L 4.0～4.5 mm；參比電極于前囟后7.0～7.5 mm處正中。電極連接至RM 6240生物信號(hào)采集系統(tǒng)，調(diào)節(jié)參數(shù)，記錄EEG。將采集的腦電信號(hào)進(jìn)行頻譜分析，使信號(hào)按照α波(8-13 Hz)、θ波(4-7 Hz)、β波(14-30 Hz)、δ波(0.5-3 Hz)[6]4個(gè)頻率范圍分解，并獲得不同頻段信號(hào)占總信號(hào)的百分比；分別截取各組大鼠30 s EEG信號(hào)，分析各頻段信號(hào)的平均振幅。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠皮層腦電活動(dòng)頻率對(duì)比

正常大鼠皮層自發(fā)腦電活動(dòng)節(jié)律包括α波(8-13 Hz)、θ波(4-7 Hz)、β波(14-30 Hz)、δ波(0.5-3 Hz)4個(gè)頻率。麻醉狀態(tài)下大鼠EEG活動(dòng)以δ波為主，其次是α波、β波、θ波。本實(shí)驗(yàn)中，假手術(shù)組大鼠EEG活動(dòng)與正常大鼠相符。與假手術(shù)組對(duì)比，模型對(duì)照組δ波頻段明顯增多，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，α波以及β波頻段明顯減少(P<0.05)，θ波頻段無(wú)明顯改變(P>0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，山茱萸多糖組δ波頻段明顯減少(P<0.05)，α波和β波頻段明顯增多(P<0.05)，θ波頻段無(wú)明顯改變(P>0.05)。見(jiàn)表1。結(jié)果提示：山茱萸多糖能夠提高VD模型大鼠快波組分，使皮層腦電慢波轉(zhuǎn)化為快波。

組 別δ波(0.5-3Hz)α波(8-13Hz)β波(14-30Hz)θ波(4-7Hz)假手術(shù)組36.15±3.2128.16±1.8521.12±2.3514.57±1.23模型對(duì)照組58.56±5.62*15.16±1.35*13.13±1.65*13.15±1.23山茱萸多糖組45.13±4.32#23.23±2.12#19.16±2.03#12.48±1.56

注：與假手術(shù)組對(duì)比，*P<0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比， #P<0.05

2.2 各組大鼠皮層腦電各頻段振幅對(duì)比

與假手術(shù)組對(duì)比，模型對(duì)照組除δ波振幅明顯降低之外(P<0.05)，其他各頻段振幅沒(méi)有明顯變化(P>0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，山茱萸多糖組除δ波振幅明顯升高之外(P<0.05)，其他各頻段振幅沒(méi)有明顯變化(P>0.05)。見(jiàn)表2。結(jié)果提示：山茱萸多糖能夠提高慢波EEG振幅，以δ波頻段尤為明顯。

組 別δ波(0.5-3Hz)α波(8-13Hz)β波(14-30Hz)θ波(4-7Hz)假手術(shù)組173.15±9.1842.23±4.767.12±0.75118.73±9.38模型對(duì)照組101.26±8.72*39.23±4.566.53±0.65100.36±10.35山茱萸多糖組125.36±11.26#41.19±3.287.16±0.78112.56±9.02

注：與假手術(shù)組對(duì)比，*P<0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比， #P<0.05

3 討 論

皮層腦電圖是被臨床廣泛使用的電生理檢查項(xiàng)目，可反映由各種原因造成的大腦電生理變化和功能性異常，是腦細(xì)胞功能的最直接反映，對(duì)了解腦功能及病情變化有著重要價(jià)值[7]。正常腦電圖的波形不規(guī)則，主要依據(jù)頻率不同分為4種基本波形：α、β波為快波，θ、δ波為慢波。從神經(jīng)電生理角度解釋：θ、δ波功率增多被解釋為覺(jué)醒度不足或激活性下降。α波是生理波的主要成分，功率減少可見(jiàn)于局部或普遍性的腦功能降低。VD由于腦循環(huán)障礙、腦組織受損而致腦神經(jīng)生物電改變，從而表現(xiàn)EEG的異常。據(jù)國(guó)外報(bào)道[8]，當(dāng)局部腦血流量減少至180 μL/(g·min)時(shí)，即可出現(xiàn)腦電快活動(dòng)減少;當(dāng)局部腦血流量減少至150μL/(g·min)時(shí)，則出現(xiàn)慢波頻率增多。因此，腦功能狀態(tài)的損害在EEG上表現(xiàn)為θ、δ波功率增多和α波減少，而腦功能改善表現(xiàn)為θ、δ波功率減少和α波增多；EEG慢化程度代表著腦組織損害程度，腦部病變?cè)絿?yán)重，慢波周期越長(zhǎng)、波幅越低、電靜息或平坦提示病變?cè)絿?yán)重。本研究中，模型對(duì)照組大鼠腦電活動(dòng)表現(xiàn)為慢波δ波頻段周期延長(zhǎng)，波幅降低；通過(guò)山茱萸多糖干預(yù)作用后，δ波頻段周期減慢，波幅升高。此說(shuō)明山茱萸多糖對(duì)VD大鼠腦組織損害具有治療作用。

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1001-6910(2017)10-0067-03

R749.1+3

B

10.3969/j.issn.1001-6910.2017.10.28

河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項(xiàng)目計(jì)劃(15B310009)；南陽(yáng)市科技攻關(guān)項(xiàng)目(2012GG050)

2017-04-11；

2017-09-14

(編輯 陶 珠)