蟲蛀川芎揮發(fā)油成分GC-MS研究

鄭瀟瀟，李濘汐，余梅，胡擎麗，王瀟霖，連艷，蔣桂華

蟲蛀川芎揮發(fā)油成分GC-MS研究

鄭瀟瀟，李濘汐，余梅，胡擎麗，王瀟霖，連艷，蔣桂華

目的：研究蟲蛀川芎的資源利用價(jià)值和建立區(qū)分蟲蛀川芎與未蟲蛀川芎的方法。方法：用GC-MS測(cè)定蟲蛀川芎與未蟲蛀川芎中揮發(fā)油組分及相對(duì)含量，并比較其結(jié)果。結(jié)果：蟲蛀川芎與未蟲蛀川芎的揮發(fā)油在組成成分和某些共有成分的相對(duì)含量上有差別。結(jié)論：蟲蛀川芎仍然有資源利用價(jià)值,未蟲蛀川芎中存在某些成分有可能作為區(qū)分蟲蛀川芎與未蟲蛀川芎的指標(biāo)性成分。

川芎；蟲蛀；GC-MS

川芎為傘形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根莖，具有活血行氣，祛風(fēng)止痛的作用，用于治療胸痹心痛，胸脅刺痛，跌撲腫痛，月經(jīng)不調(diào)，閉經(jīng)痛經(jīng)，癥瘕腹痛，頭痛，風(fēng)濕痹痛。[1]

川芎含有多糖類成分，在高溫高濕的條件下極易出現(xiàn)蟲蛀，在采收曬干的過程中，就有蟲蛀霉變的趨勢(shì)，如果沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn)迅速處理，在短時(shí)間內(nèi)就能變得非常嚴(yán)重，蟲蛀發(fā)生后，就更難處理，蟲蛀后的川芎不能繼續(xù)作為藥用，只能丟棄，造成資源浪費(fèi)。雖然川芎蟲蛀后在藥材或是飲片狀態(tài)下容易識(shí)別，但是如果將其打粉后用于投料或是出售則難以分辨，食用蟲蛀的中藥材會(huì)對(duì)人體造成傷害，因此建立能夠區(qū)分二者的方法非常重要。

川芎揮發(fā)油為川芎的主要活性成分之一，具有改善微循環(huán)，降低血壓，抗凝血等作用。本實(shí)通過用GC-MS研究川芎的揮發(fā)油組分，以研究蟲蛀后的川芎是否還有作為藥用資源的價(jià)值，以減少一些在加工或是貯藏中的失誤而造成的損失，以及是否存在能夠鑒別出蟲蛀川芎的方法，更好的保障用藥安全。

1 材料

1.1 藥材

實(shí)驗(yàn)所用藥材分為蟲蛀川芎組和未蟲蛀川芎組。

1.1.1 蟲蛀川芎組（第1-6批） 于2007年3月24日購(gòu)于四川都江堰川芎GAP基地，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)蔣桂華教授鑒定均為傘形科植物L(fēng)igusticum chuanxiong Hort.川芎的干燥根莖。經(jīng)過在常溫養(yǎng)護(hù)室貯藏9年后，選取6批蟲蛀川芎藥材樣品，6批蟲蛀川芎藥材樣品均被嚴(yán)重蟲蛀，出現(xiàn)蛀粉或蛀空的現(xiàn)象。

1.1.2 未蟲蛀川芎組（第11-20批） 于2015年5月18日購(gòu)于四川都江堰川芎GAP基地，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)蔣桂華教授鑒定均為傘形科植物L(fēng)igusticum chuanxiong Hort.川芎的干燥根莖。低溫貯藏1年，10批藥材均未出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象。

1.2 試藥

超純水、二甲苯、正己烷。

1.3 儀器

Agilent Technologies 7890A GC System,Agilent Technologies 5975C inert MSD with Triple-Axis Detector、KQ-50B型超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、十萬分之一電子分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司）、微型植物試樣粉碎機(jī)FZ102型（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品的制備

分別稱取6批蟲蛀川芎藥材、10批未蟲蛀川芎藥材粉末（過二號(hào)篩）約50g，加入超純水350mL，浸泡過夜。按照《中國(guó)藥典》2015版四部附錄揮發(fā)油提取法(通則2204)中乙法進(jìn)行供試品溶液的制備。

2.2 GC-MS分析條件

色譜條件：安捷倫H P-5 M S毛細(xì)管柱（30m×250μm×0.25μm），質(zhì)譜檢測(cè)器。

進(jìn)樣口溫度230℃，20:1分流，進(jìn)樣量：1μL。程序升溫：初始50℃，每分鐘10℃升至120℃；每分鐘5℃升至180℃；每分鐘20℃升至260℃，保持5min。載氣：高純氦氣；載氣流速：1.0mL．min-1。

質(zhì)譜條件：EI離子源，掃描范圍50～350amu。離子源溫度：230℃；GC-MS輔助加熱溫度：260℃；MS四級(jí)桿溫度：150℃；溶劑延遲：5min。

2.3 結(jié)果

川芎揮發(fā)油樣品經(jīng)過氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，得總離子流圖，蟲蛀川芎揮發(fā)油總離子流圖，如圖1；未蟲蛀川芎揮發(fā)油總離子流圖，如圖2。經(jīng)NIST11庫自動(dòng)檢索，得出蟲蛀川芎揮發(fā)油的化學(xué)成分，見表1；未蟲蛀川芎揮發(fā)油的化學(xué)成分，見表2。

圖1 蟲蛀川芎揮發(fā)油總離子流圖

圖2 未蟲蛀川芎揮發(fā)油總離子流圖

表1 蟲蛀川芎揮發(fā)油組分及相對(duì)含量

（注：-表示未檢出）

表2 未蟲蛀川芎揮發(fā)油組分及相對(duì)含量

2.4 蟲蛀組川芎與未蟲蛀組川芎揮發(fā)油組分比較

將6批蟲蛀組川芎均檢出的組分與10批未蟲蛀組川芎均檢出的組分相比較，并對(duì)兩組均檢出的共有成分的相對(duì)含量做比較，結(jié)果見表3。

表3 蟲蛀組樣品與未蟲蛀組樣品揮發(fā)油組分及相對(duì)含量比較

3 結(jié)論與討論

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典.2015年版.一部[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015.

[2] 王海,嚴(yán)鑄云,何冬梅,等.川產(chǎn)川芎揮發(fā)性組分的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用比較分析[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2013,24(9):2070.

[3] 劉曉芬.中藥川芎飲片效期相關(guān)因素研究[D].四川:成都中醫(yī)藥大學(xué),2014.

通過比較蟲蛀川芎與未蟲蛀川芎的GC-MS結(jié)果，可以得出以下結(jié)論：

(1) (-)-a-蛇床烯只在蟲蛀組檢出，檜烯只在未蟲蛀組中檢出，但是從其它文獻(xiàn)中可知[2-3]，(-)-a-蛇床烯存在于川芎揮發(fā)油中，因此，只有檜烯有可能作為區(qū)別蟲蛀川芎與非蟲蛀川芎的定性指標(biāo)性成分；

(2) 3-亞丁基-1(3H)-異苯并呋喃酮呋喃酮在蟲蛀組與未蟲蛀組中的相對(duì)含量差異明顯，可以用該成分的相對(duì)含量區(qū)別蟲蛀川芎與非蟲蛀川芎；

(3) 還有一些成分在在兩組中均可以檢出，則可以考慮從蟲蛀川芎中提取出這些成分繼續(xù)利用，尤其是蟲蛀川芎樣品中明顯還存在大量川芎的活性成分藁本內(nèi)酯，蟲蛀組某些樣品中該成分的含量甚至與未蟲蛀組某些樣品中該成分的含量接近，說明蟲蛀川芎仍有作為藥用資料的價(jià)值。

（責(zé)任編輯：胡慧玲）

Research on the component in volatile oil in Chuanxiong damaged by worms/

ZHENG Xiao-xiao, LI Lin-xi, YU Mei, HU Qin-li, WANG Xiao-lin, LIAN Yan, JIANG Gui-hua//(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine;Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan )

Objective:To research the value of Chuanxiong damaged by worms and the method to distinguish Chuanxiong which was damaged by worms from normal ones.Method:The total volatile oil in worm damaged Chuanxiong and normal Chuanxiong was detected by GC-MS, and made a comparison between them in components and relative amount.Resul:There were some differences in the component and relative amount of worm damaged Chuanxiong and normal Chuanxiong.Conclusion:Chuanxiong damaged by worms still has value, and there are some components in normal Chuanxiong have the potential to be as the target components which help to distinguish Chuanxiong which are damaged by worms from normal ones.

Chuanxiong; damaged by worms; GC-MS

R 282

A

1674-926X(2017)03-003-04

國(guó)家自然基金（國(guó)家基礎(chǔ)科學(xué)人才培養(yǎng)基金）：中藥飲片調(diào)劑包裝貯藏養(yǎng)護(hù)技術(shù)研究（J1310034-07）；四川省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)計(jì)劃課題：基于太赫茲時(shí)域光譜的4種川產(chǎn)道地藥材鑒別研究（重點(diǎn)）(2016JY0076)

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 61113

鄭瀟瀟（1990-），女（漢族），湖北荊州人，在讀碩士研究生，主要從事中藥品種與質(zhì)量的研究工作 Email:1204189289@qq.com

蔣桂華（1970-），女（漢族），四川成都人，現(xiàn)任成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院教授，博士學(xué)位，主要從事中藥品種與質(zhì)量的研究工作

Email:11469413@qq.com

2016-12-20