CL-2000i全自動免疫發(fā)光分析FT3、FT4、TSH參考區(qū)間驗證

李佐祥，李玲，顧桉菁，張莎，宋聚友，張春濤

1.貴州省第三人民醫(yī)院檢驗科，貴州貴陽 550081；2.貴州黔東南職業(yè)技術學院醫(yī)學檢驗技術，貴州貴陽 550081

CL-2000i全自動免疫發(fā)光分析FT3、FT4、TSH參考區(qū)間驗證

李佐祥1，李玲1，顧桉菁1，張莎1，宋聚友1，張春濤2

1.貴州省第三人民醫(yī)院檢驗科，貴州貴陽 550081；2.貴州黔東南職業(yè)技術學院醫(yī)學檢驗技術，貴州貴陽 550081

目的驗證廠家提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間是否適用于該地區(qū)，建立該地區(qū)的甲狀腺功能三項指標的生物學參考區(qū)間，為該地區(qū)篩查及診斷甲狀腺疾病提供依據(jù)。方法參照美國臨檢實驗室標準化委員（NccLs）C28-A2文件中涉及到的有關參考定義，調(diào)查，驗證的描述，采用邁瑞全自動化學發(fā)光儀及其配套試劑、校準品、質控品，對3 172名健康人群的甲狀腺功能三項指標進行檢測，檢測結果按性別差異進行統(tǒng)計學分析處理。所得結果與試劑說明書提供參考區(qū)間，《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第4版提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間比較。結果該次驗證不包括50歲以上人群，留取男性 2273 例進行數(shù)據(jù)分析，得出男性 TSH：0.64～5.56 μIU/mL，16～30 歲，F(xiàn)T3：3.53～5.65 pmol/L、FT4：7.06～15.38 pmol/L， 31～50 歲，F(xiàn)T3：3.58～5.78 pmol/L、FT4：6.69～14.81 pmol/L，女性 899 名得出：TSH：0.9～6.74 μIU/mL，16～30 歲，F(xiàn)T3：3.14～5.43 pmol/L、FT4：5.72～14.22 pmol/L，31～50 歲，F(xiàn)T3：3.03～5.23 pmol/L、FT4：5.51～13.93 pmol/L，研究結果分別與試劑說明書和《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第4版提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間進行χ2檢驗，為差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論試劑說明書和《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第4版提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間均不適用于該地區(qū)該實驗室，建議使用該研究結果作為該地區(qū)實驗室參考區(qū)間。

FT3；FT4；TSH；健康；生物參考區(qū)間

生物參考區(qū)間是檢驗結果常用的一項評價指標，為患者疾病的診斷、治療、預后和篩查提供信息。游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離甲狀腺激素（FT4）、促甲狀腺激素（TSH）是反映甲狀腺功能最常用的檢測指標，常稱為“甲狀腺功能三項”。FT3、FT4、TSH以往主要采用放射免疫法和酶聯(lián)免疫法測定技術。目前實驗室大多采用免疫標記的方法直接測定血清中的激素濃度。隨著免疫測定技術的發(fā)展，競爭性熒光免疫分析法、化學發(fā)光免疫法和電化學發(fā)光免疫法已能靈敏、特異、快速和準確地用于臨床血清激素的測定。許多實驗室一般參照試劑說明書或者全國臨床檢驗操作規(guī)程設定參考區(qū)間，在實際工作中，發(fā)現(xiàn)這些參考區(qū)間并不適合臨床應用，其生物參考區(qū)間是解釋檢驗結果分析檢驗信息是一個基本尺度和依據(jù)，實驗室只有給臨床檢驗項目提供可靠的生物參考區(qū)間，才能使臨床醫(yī)生對患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[2]。雖然不同廠家的檢測系統(tǒng)提供了各自參考區(qū)間，但由于地域、人群等因素的差異，為了更好地服務于臨床，提高這些指標對甲狀腺疾病符合率，有必要對廠家提供的生物參考區(qū)間進行驗證或進一步重新設定，這也ISO015189《醫(yī)學實驗室質量和能力認可提準則》及醫(yī)院等級評審中所要求的內(nèi)容之一。按照CLSI文件C28-P3《醫(yī)學實驗室參考區(qū)間的定義、建立和確認》中的推薦方法，參考IS015189：2003（E）《醫(yī)學實驗室一質量和能力的專用要求》條款要求，根據(jù)參考區(qū)間正確、科學的確定方法，按照建立參考區(qū)間的具體操作程序，保證參考區(qū)間的可靠、適用。該研究通過2015—2016年調(diào)查該地區(qū)3 172名體檢者，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取到該院健康體檢者3 172名，年齡16～78歲，年齡：（32.02±8.99）歲；其中：男性 2 273名，年齡：（32.65±8.98）歲；女性 899 名，年齡：（30.42±8.47）歲。 按年齡分為 3組：①Ⅰ組：16～30 歲；②Ⅱ組 31～50歲；③Ⅲ組：51～78歲。入選標準：①沒有任何影響檢測結果的生理特征；②未服用任何藥物并空腹；發(fā)育精神正常，無心血管、肺、腎等器質性疾患；③3個月內(nèi)無輸血史和手術史；④婦女不在月經(jīng)期、妊娠期、哺乳期；無酗酒史，并按不同年齡段及性別比例；⑤排除高血壓、肝病、胃病、腎病、糖尿病等影響血清FT3、FT4、TSH濃度的疾病，人群職業(yè)分布包括學生、公務員、工人、服務人員、高退休人員等合格標本。入選者均填寫“知情同意書”和“健康參考個體資料調(diào)查表”。最終3127名納入標準。晨起空抽腹抽取靜脈血3 mL，3 500 r/min離心分離血清，排除溶血、脂血標本。采用邁瑞（化學發(fā)光免疫分析法）試劑（FT3、FT4、TSH），按照說明書設置參數(shù)在邁瑞CL-2000i全自動化學發(fā)光儀2 h內(nèi)完成測定，每日開機后先使用配套質控物進行室內(nèi)質控，室內(nèi)質控在控后，選擇參考個體，建立參考區(qū)間計劃進行參數(shù)數(shù)據(jù)分析。

表2 參考范圍的建立

1.2 儀器與試劑

邁瑞CL-2000i全自動化學發(fā)光免疫分析儀；邁瑞原裝FT3、FT4、TSH配套試劑。邁瑞免疫定值質空控品（水平 1 批品：IA2638，水平 2 批號：IA2639）。

1.3 方法

2 h內(nèi)離心標本取血清上機檢測，采用邁瑞（化學發(fā)光免疫分析法）試劑，按照說明書設置參數(shù)在邁瑞CL-2000i全自動化學發(fā)光免疫分析儀上2 h內(nèi)完成測定，選擇參考個體，建立參考區(qū)間計劃，進行參考數(shù)據(jù)分析，確定參考數(shù)據(jù)是否需要繼續(xù)分組參照NCCLS C28-A2文件。

1.4 統(tǒng)計方法

應用 SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率或構成比表示，采用 χ2檢驗；計量資料以（±s）表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

該研究通過統(tǒng)計調(diào)查建立該地區(qū)化學發(fā)光免疫法測定FT3、FT4、TSH參考區(qū)間，現(xiàn)將結果報道如下。

2.1 不同性別間的比較

FT3（poml/L）:男性（4.82±0.59）、女性（4.23±0.58）（t=25.14，P=0.000）；FT4（poml/L）：男性（10.99±2.13）、女性（9.88±2.19）（t=13.05，P=0.000）；TSH(μIU/mL):男性（2.46±1.58）、女性（2.92±1.95）（t=-6.93，P=0.000）。

2.2 不同年齡組的比較

FT3（poml/L）:I組（4.74±0.36）、Ⅱ組（4.54±0.64）、Ⅲ組（4.34±0.96）（P=0.000）；FT4（poml/L）:I組（10.83±2.21）、Ⅱ組（10.49±2.14）、Ⅲ組 10.23±2.64（P=0.000）；TSH(μIU/mL)：I 組（2.16±1.64）、Ⅱ組（2.56±1.79）、Ⅲ組（2.75±1.77）（P=0.000）由此可以得出：男女之間 FT3、FT4、TSH 結果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），不同年齡分組組間結果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），進一步做不同性別年齡結果分析如下。

表1 不同性別與年齡組比較

由表1可以得出：不同性別不同年齡組間兩兩比較結果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），從而按照不同性別、不同年齡段分別建立參考區(qū)間如下。

3 討論

目前臨床上對甲亢或甲減患者仍采用經(jīng)驗性治療的原則，對治療過程中用藥的劑量及周期沒有一個明確、統(tǒng)一的標準和界定，在加上個體差異的影響，稍有不慎及易將甲亢治療成甲減、甲減治療成甲亢，從而給患者帶來巨大的經(jīng)濟負擔和心理壓力，由于該疾病的發(fā)生沒有固定的年齡段，在診斷方面，除了一些有明顯體征的患者，甲狀腺功能檢測得結果是臨床診斷與鑒別診斷的重要依據(jù)，因此，設置準確的生物參考區(qū)間是病情分級及制定治療計劃的前提。因此，我們認為調(diào)查該地區(qū)甲狀腺功能三項指標的正常的生物參考區(qū)間是十分重要和必要的。

FT4和FT3的臨床意義與TT4和TT3相同，但因不受血清TBG影響，而代表具有生物活性的甲狀腺激素的含量，因而具有更重要的臨床價值，甲狀腺功能亢進對于診斷甲亢來說，F(xiàn)T4、FT3均較靈敏，甲亢時FT3、FT4升高但TSH減低，F(xiàn)T4 FT3的價值更大，甲狀腺功能減退大多數(shù)口服T4治療的患者，在服藥后1～6 h血中FT4濃度達到高峰，其升高程度與服藥劑量有關。FT4時甲狀腺素替代性治療時很好的檢測指標。妊娠孕婦的血中TBG明顯增加，因此，F(xiàn)T4 FT3的檢測較TT4 TT3更為準確[3]。

該研究所得男性 FT3:3.66～5.98 pmol/L、FT4：6.82～15.16 pmol/L、TSH：0.64～5.56 μIU/mL，女性：FT3:3.10～5.37 pmol/L、FT4：5.59～14.17 pmol/L、TSH：0.90～6.74 uIU/mL，經(jīng)統(tǒng)計學分析男女間具有差異性，F(xiàn)T3、FT4男性明顯高于女性,TSH女性高于男性，該研究與四川地區(qū)部分健康人群血清甲狀腺激素參考區(qū)間的調(diào)查[4]FT3、FT4男性明顯高于女性,TSH女性高于男性，結果相一致。

結果與邁瑞廠家提供的說明書參考區(qū)間不一致，該研究用的試劑是廣東地區(qū)醫(yī)院350名健康人血清樣本檢測分析，統(tǒng)計得出男性與女性95%參考區(qū)間為FT3：2.3～4.0 pg/mL、FT4：0.6～1.2 ng/dL、TSH：0.5～7.3 μIU/mL，可能是地域與人群的不同，所致參考區(qū)間的差異性[5]。

該次研究結果與第4版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》比較[6]，具有差異性，第4版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》參考區(qū)間 FT3:1.71～3.70 ng/L、FT4：0.70～1.48 ng/L、TSH：0.2～7.0 μIU/mL，可能使用儀器與檢測方法學法的不一致所導致，該研究使用的深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供的試劑與第4版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》用的方法都是化學發(fā)光法，但深圳邁瑞廠家用的是堿性磷酸酶來標記T3、T4、TSH，《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第四版中用的則是吖叮脂標記T3、T4、TSH，可能導致參考區(qū)間具有差異性。

綜上所述，生物參考區(qū)間是診斷疾病的參考依據(jù)準確的參考區(qū)間是臨床診療的關鍵由于性別、年齡、環(huán)境、生活習慣、實驗室檢測系統(tǒng)、方法學等方面的差異，各地區(qū)的生物參考區(qū)間會有所不同，因此建議該地區(qū)的各實驗室有必要驗證并建立自己的生物參考區(qū)間[7]，同時要加強與臨床溝通，做好定期比對審核及生物參考區(qū)間的驗證，從而為甲狀腺功能相關疾病的準確診斷和治療提供依據(jù)。

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R7

A

1672-5654（2017）09（a）-0175-03

2017-06-09）

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.25.175

李佐祥（1981-），男，貴州余慶人，本科，主管檢驗技師，主要從事臨床生化與免疫檢驗研究工作。