• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    降脂藥物篩選方法的研究進展

    2017-10-18 01:07:02陳雪嬌
    關(guān)鍵詞:降脂藥高脂高脂血癥

    紀 旭,陳雪嬌,2,*,羅 丹,2,李 潔

    (1 中國科學(xué)院 昆明植物研究所,植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室,昆明 650201;2 中國科學(xué)院大學(xué) 存濟醫(yī)學(xué)院,北京 101407)

    降脂藥物篩選方法的研究進展

    紀 旭1,陳雪嬌1,2,*,羅 丹1,2,李 潔1

    (1 中國科學(xué)院 昆明植物研究所,植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室,昆明 650201;2 中國科學(xué)院大學(xué) 存濟醫(yī)學(xué)院,北京 101407)

    指出了高脂血癥是心腦血管疾病的主要危害因素之一,容易誘發(fā)動脈粥樣硬化、冠心病、腦卒中等多種疾病,嚴重威脅人類健康. 通過文獻調(diào)研,對近年來國內(nèi)外降血脂藥物的作用靶點和篩選方法進行了綜述,為降血脂活性成分的篩選研究提供參考.

    高脂血癥;藥用靶點;篩選方法

    AbstractHyperlipidemia is one of the main risk factors of cardiovascular and cerebrovascular disease, and it may trigger serious diseases, such as atherosclerosis, coronary heart disease and stroke etc., which represent a substantial global threat to human health. In this review, the pharmacological targets and screening methods of hypolipidemic drugs developed in recent years have been reviewed, which will provide references for further research of hypolipidemic drugs.

    Keywordshyperlipidemia ; pharmacological targets ; screening methods

    1 降脂藥物篩選方法建立的背景及意義

    隨著人們生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的改變,高脂血癥的發(fā)病率呈逐年上升趨勢[1]. 高脂血癥是體內(nèi)脂類代謝紊亂導(dǎo)致血脂水平增高的一種疾病,是指各種原因?qū)е碌难獫{中膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、極低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)升高、和(或)高密度脂蛋白(HDL)降低的一種全身脂代謝異常疾病[2]. 高脂血癥是心腦血管疾病的主要危害因素之一,容易誘發(fā)動脈粥樣硬化、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、腦卒中等多種心腦血管疾病. 最近,有研究顯示高脂血癥對認知障礙也有影響. 高脂血癥已經(jīng)嚴重威脅著人類的健康[3].

    現(xiàn)在臨床常用的降血脂藥物,療效低且常伴有一定副作用. 因此,尋找更加安全、有效的降脂藥物一直是醫(yī)藥工作者的研究熱點. 對于新藥物的研究,合適的藥物作用靶點和篩選方法顯得至關(guān)重要,不僅有助于縮短藥物的研發(fā)時間,也能節(jié)約人力物力資源. 本文將對目前已上市或正在研發(fā)的降脂藥物及其篩選方法進行綜述,目的是幫助科研人員在了解該領(lǐng)域研究進展的基礎(chǔ)上,建立一種快速、簡便、低成本且能實現(xiàn)高內(nèi)涵、高通量篩選的藥物篩選方法.

    2 降脂藥物的主要作用靶點

    目前治療高脂血癥的藥物主要有以下幾大類:膽酸鰲合劑類(樹脂類)、煙酸及其衍生物類、多烯脂肪酸類(魚油類)、苯氧芳酸類(貝特類)和羥甲基戊二酰輔酶A (HMG-CoA)還原酶抑制劑類(他汀類)[4]. 雖然這些藥物降脂效果明顯,但長期服用具有較大的毒副作用. 因此,國內(nèi)外越來越重視對中藥降脂作用的研究. 近年來,用中藥治療高脂血癥已成為該領(lǐng)域研究的熱點,很多中藥被證實具有很好的降脂作用,如:山楂、絞股藍、人參、大黃、何首烏、決明子、澤瀉、丹參及大豆等[5]. 此外,還有一些新靶點和作用機制的藥物,如微粒體三酰甘油轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑、?;o酶A-膽固醇?;D(zhuǎn)移酶抑制劑等. 表1是目前已有的和正在研發(fā)的降脂藥物及其作用靶點.

    表1 已有和正在研發(fā)的降脂藥物及其作用靶點

    3 目前已建立的降脂藥物篩選方法

    對于降血脂功效成分的篩選和降血脂藥物研發(fā),國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)進行了廣泛的研究和探討. 本文將從分子水平、細胞水平和整體動物水平對已有的降脂藥物篩選方法進行劃分.

    3.1基于分子水平的篩選方法

    基于分子水平的篩選方法就是以相關(guān)酶和蛋白為藥物作用靶點,尋找其抑制劑. 目前研究較多的參與脂質(zhì)代謝的酶與蛋白質(zhì)主要有:脂蛋白脂肪酶、肝脂酶、卵磷脂膽固醇?;D(zhuǎn)移酶、羥甲基戊二酰輔酶 A (HMG-CoA)還原酶、膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白等[34].

    HMG-CoA還原酶是膽固醇生物合成的限速酶,也是目前最主要的高血脂癥臨床藥物的作用靶點. 對HMG-CoA還原酶抑制劑的研究主要有以下4種方法: (1)分光光度法.采用分光光度法,李鵬等[35]比較了國產(chǎn)降血脂藥血脂康與洛伐他汀、辛伐他汀對 HMG-CoA還原酶的抑制作用. 結(jié)果表明,分光光度法于波長 339 nm處測定 NADPH 光吸收的下降可代表酶活力大小及反應(yīng)速度. (2)同位素標(biāo)記法.如以[14C]- 乙酸、D,L -[14C]HMG-CoA、 D,L -[14C]甲羥戊酸等同位素標(biāo)記的合成前體作為反應(yīng)底物,反應(yīng)后測定形成的固醇中同位素的摻入率,樣品抑制固醇脂質(zhì)合成能力可以通過與對照組數(shù)據(jù)對比求得[36]. (3)薄層色譜法.胡海峰等[37]建立了體外酶反應(yīng)系統(tǒng),采用薄層色譜法分析膽固醇的合成量,篩選真菌次級代謝產(chǎn)物. (4)液相色譜法.吳瓊等[38]利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(UPLC-MS /MS) 檢測酶促反應(yīng)體系中NADPH濃度變化,建立了快速篩選HMG-CoA還原酶抑制劑的方法.

    脂肪酶是催化體內(nèi)甘油三酯水解的關(guān)鍵酶,能將血液脂蛋白中的甘油三酯水解成游離脂肪酸,脂肪酶抑制劑篩選已成為降血脂藥物研究的重要方向. 目前,脂肪酶抑制劑的篩選方法主要包括:(1)均相溶液酶法.將游離酶和底物以及酶抑制劑共同孵育, 通過檢測溶液酶的活性,來評估抑制劑對酶的抑制效果[39]. Nakai 等[40]選擇4-甲基傘形酮油酸酯作為底物,將酶與底物孵育后,通過熒光檢測的方法評估待測物對脂肪酶的抑制活性. (2)固定化酶法.將酶固定在某種合適的載體上,利用酶與抑制劑之間的親和作用,篩選具有酶抑制活性的化合物[41]. 陳錐等[42]采用磁珠收集與液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS) 結(jié)合的方法從枳殼提取物中篩選潛在的脂肪酶抑制劑. 近年來,基于薄層色譜的生物自顯影方法被發(fā)展用于脂肪酶抑制劑的篩選,在最新研究中,以β-萘酚為底物和固藍B鹽(FBB)為指示劑來提高該方法檢測的靈敏度和特異性[43].

    3.2基于細胞水平的篩選方法

    基于細胞水平的篩選方法是以各種細胞為研究材料,在活細胞自然條件下研究藥物對生命體功能的影響。目前根據(jù)不同的降脂途徑,可將基于細胞水平的篩選方法分為兩大類:一類方法與受體相關(guān),另一類方法與膽固醇代謝相關(guān).

    3.2.1 與受體相關(guān)的細胞模型

    目前研究較多的受體主要是低密度脂蛋白受體(LDLR)和過氧化物酶增殖物激活受體(PPAR). 唐建華等[44]構(gòu)建了“LDLR/Luc報告基因系統(tǒng)”的細胞篩選模型,并應(yīng)用該模型對500 余種中藥提取物進行了篩選,決明子、澤瀉、穿龍薯蕷等提取物顯示陽性, 與過去報道采用動物模型研究的結(jié)果一致. 馬晶晶等[45]構(gòu)建了一種人過氧化物酶體增殖物激活受體 α(hPPARα) 配體藥物篩選細胞模型,采用hPPARα 轉(zhuǎn)基因結(jié)合熒光素酶報告基因原理,將重組質(zhì)粒 phPPARα-IRES2-EGFP、報告質(zhì)粒 ptk-PPRE×3-luc 共轉(zhuǎn)染 293T 細胞,人工模擬 hPPARα 信號通路,并用貝特類降脂藥對建立的藥物篩選細胞模型進行了應(yīng)用能力評價.

    3.2.2 與膽固醇代謝相關(guān)的細胞模型

    從目前的研究來看,與膽固醇代謝相關(guān)的細胞模型可歸納為兩大類:一類將藥物直接作用于細胞,檢測相關(guān)指標(biāo)來評價藥物的作用;另一類通過建立高脂細胞模型篩選藥物. 第一類方法常選用3T3-L1 脂肪細胞、血管平滑肌細胞源性荷脂細胞和Caco-2細胞等為模型,不同濃度的待測物直接作用于細胞,通過檢測細胞內(nèi)膽固醇的含量來評價待測物的降脂活性,采用的檢測方法有高效液相色譜法、同位素標(biāo)記法和膽固醇氧化酶終點法等[46-48]. 對于高脂細胞模型的建立,大多數(shù)研究通過分別加入游離脂肪酸、高濃度血清、醫(yī)用脂肪乳注射劑和氧化的低密度脂蛋白等刺激細胞建模,在建模的同時加入待測物,以細胞內(nèi)脂滴積累情況、TG和TC的水平為指標(biāo)評價待測物的降脂活性[49-52].

    3.3基于整體動物水平的篩選方法

    在國內(nèi)外的研究中,用于高血脂研究的動物有小鼠、大鼠、兔、鵪鶉、豬、猴等,在實際應(yīng)用中,小鼠、大鼠、兔等實驗動物具有比較廉價、便于飼養(yǎng)、遺傳背景明確等特點,從而應(yīng)用最為廣泛[53]. 目前,建立高脂血癥動物模型常用的方法有:高脂飼料法、高脂乳劑法、注射法等,其中高脂飼料法是最常用的造模方法. (1)高脂飼料法.謝慧臣等[54]通過喂飼高脂飼料建立高脂血癥大鼠模型,發(fā)現(xiàn)降脂合劑對血脂異常有較好的調(diào)節(jié)作用. Sutar等[55]以高脂飲食喂飼SD大鼠21 d,建立了高脂血癥大鼠模型.(2) 高脂乳劑法. 周星等[56]用兩種不同濃度脂肪乳劑以灌胃法建立大鼠高脂模型,結(jié)果表明,高濃度脂肪乳劑可以成功建立SD大鼠高脂血癥模型,低濃度脂肪乳劑不適合用于建立SD大鼠高脂血癥模型. (3)注射法.劉凱等[57]將大鼠腹腔注射 75%蛋黃乳液,24 h即可復(fù)制出高膽固醇血癥模型,與傳統(tǒng)造型方法所得到的結(jié)果相同. Schurr等通過尾靜脈注射表面活性劑TritonWR-1339來建立高脂大鼠模型,并提出注射前禁食有利于高脂方法的建立[58]. 近年來,一些研究者通過腹腔注射TritonWR-1339建立高脂大鼠模型,評估樣品降血脂的效果[59].

    4 現(xiàn)有的降脂藥物篩選方法優(yōu)缺點

    從實驗方面來看,上述篩選方法大體可以分為兩大類:體內(nèi)實驗和體外實驗. 基于分子、細胞水平的篩選方法都屬于體外實驗,具有使用耗材少、實驗周期短、能實現(xiàn)高通量篩選、且藥物作用靶點和作用機制相對明確等優(yōu)點. 但體外實驗不能模擬在體環(huán)境,無法對化合物的生物活性進行綜合評價. 而基于整體動物水平的篩選方法屬于體內(nèi)實驗,是傳統(tǒng)的篩選方法,能直接反應(yīng)藥物的治療效果、不良反應(yīng)和毒性作用. 但該方法一般實驗周期長、篩選效率低、動物成本高,且存在個體差異性,不能實現(xiàn)大規(guī)模篩選.

    此外,就篩選模式而言,可將上述篩選方法分為:分子靶點篩選和表型篩選. 基于分子水平的篩選和與受體相關(guān)的細胞模型都屬于分子靶點篩選,該方法首先確定與疾病相關(guān)的靶點,隨后開展試驗基于該靶點高通量篩選先導(dǎo)化合物,并對其進行優(yōu)化用于后期的藥物開發(fā). 而基于整體動物水平的篩選和高脂細胞模型屬于表型篩選,一般而言,一種與疾病相關(guān)的表征被發(fā)展建立篩選模型,高通量篩選得到活性先導(dǎo)化合物,之后再確定相關(guān)的分子靶點. 在過去20年,基于分子靶點的篩選方法已成為早期藥物發(fā)現(xiàn)的主要手段,相比于表型篩選有一些明顯優(yōu)點,如已知分子靶點有助于化合物的優(yōu)化和構(gòu)效關(guān)系的研究等. 但有研究發(fā)現(xiàn),近10年來FDA批準的小分子藥物,通過表型篩選得到的28個已超過基于分子靶點篩選得到的17個[60]. 此外,一些經(jīng)典的藥物,如:阿司匹林、鈣通道拮抗劑等都是通過早期的表型篩選發(fā)現(xiàn)的,但其作用機制和分子靶點都是在FDA批準后很長一段時間才得以確定[61, 62]. 由此可見,表型篩選仍是一種重要的篩選方法,而且隨著實驗技術(shù)的發(fā)展,目前的表型篩選已在模式動物、細胞、篩選通量等方面取得了較大的進展,將引領(lǐng)一個先導(dǎo)化合物發(fā)現(xiàn)的新時代.

    5 結(jié)語

    高脂血癥引發(fā)的心腦血管類疾病是危害人類健康的三大疾病之一,尋找有效、安全的降脂藥物一直是該領(lǐng)域研究的熱點. 不同篩選途徑相互結(jié)合、多靶點綜合考慮是降血脂功效成分篩選的趨勢,同時基于降脂新機制、作用新靶點的篩選方法正在不斷地研究和完善.

    [1] 蘇 蓉,于德水. 高脂血癥的危害及防治[J]. 中國當(dāng)代醫(yī)藥,2009,16(8):128-129.

    [2] 孫麗英,焦亞斌,康廣盛. 高脂血癥的病因病機研究進展[J]. 中醫(yī)藥學(xué)報,2004,32(2):70-71.

    [3] Lu D, Ren S, Zhang J, et al. Vascular risk factors aggravate cognitive impairment in first-ever young ischaemic stroke patients[J]. European Journal of Neurology, 2016, 23(5): 940-947.

    [4] 畢 楠,陳保生. 藥物治療脂質(zhì)異常新靶點的研究進展[J]. 中國藥物應(yīng)用與監(jiān)測,2004,(4):58-61.

    [5] 孫吉葉,蔡旭東,康秀娟,等.治療高脂血癥的新藥研究進展[J]. 現(xiàn)代藥物與臨床,2012,27(5):435-441.

    [6] Stancu C,Sima A. Statins: mechanism of action and effects[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2001,5(4): 378-387.

    [7] 王德河,王 斯. 他汀類藥物治療高脂血癥的研究進展[J]. 臨床薈萃,2012,27(17):1562-1564.

    [8] Kersten S. Integrated physiology and systems biology of PPARalpha[J]. Molecular Metabolism, 2014,3(4): 354-371.

    [9] Liu Z M, Hu M, Chan P, et al. Early investigational drugs targeting PPAR-a for the treatment of metabolic disease [J]. Expert Opin Investig Drugs, 2015, 24(5): 1-11.

    [10] Burnett J R, Huff M W. Cholesterol absorption inhibitors as a therapeutic option for hypercholesterolaemia [J]. Expert Opinion on Investigational Drugs, 2006, 15(11): 1337-1351.

    [11] Davis H R,Veltri E P. Zetia: Inhibition of Niemann-Pick C1 like 1 (NPC1L1) to reduce intestinal cholesterol absorption and treat hyperlipidemia [J]. Journal of Atherosclerosis and Thrombosis, 2007, 14(3): 99-108.

    [12] Meuwese M C, de Groot E, Duivenvoorden R, et al. ACAT inhibition and progression of carotid atherosclerosis in patients with familial hypercholesterolemia the CAPTIVATE randomized trial [J]. Jama-Journal of the American Medical Association, 2009, 301(11): 1131-1139.

    [13] Ohshiro T, Matsuda D, Sakai K, et al. Pyripyropene A, an acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase 2-selective inhibitor, attenuates hypercholesterolemia and atherosclerosis in murine models of hyperlipidemia [J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2011, 31(5): 1108-1115.

    [14] Burnett J R, Watts G F. MTP inhibition as a treatment for dyslipidaemias: time to deliver or empty promises [J].Expert Opinion on Therapeutic Targets, 2007, 11(2): 181-189.

    [15] Hewing B, Parathath S, Mai C K, et al. Rapid regression of atherosclerosis with MTP inhibitor treatment [J]. Atherosclerosis, 2013,227(1): 125-129.

    [16] Perry C M. Lomitapide: A review of its use in adults with homozygous familial hypercholesterolemia [J]. American Journal of Cardiovascular Drugs, 2013, 13(4): 285-296.

    [17] Kolovou G D, Anagnostopoulou K K, Kostakou P M, et al. Cholesterol ester transfer protein (CETP), postprandial lipemia and hypolipidemic drugs [J]. Current Medicinal Chemistry, 2009, 16(33): 4345-4360.

    [18] Neeli H, Rader D J. Cholesteryl ester transfer protein (CETP) inhibitors: Is there life after torcetrapib [J]. Cardiology Clinics, 2008, 26(4): 537-541.

    [19] Thomas T, Ginsberg H. Targeting ApoB as a therapeutic approach for the treatment of dyslipidemia the potential role of mipomersen [J]. Future Medicine, 2010, 5(4): 457-464

    [20] Vogt A, Parhofer K G. The potential of mipomersen, an ApoB synthesis inhibitor, to reduce necessity for LDL-apheresis in patients with heterozygous familial hypercholesterolemia and coronary artery disease [J]. Expert Opinion on Pharmacotherapy, 2013,14(6): 691-697.

    [21] Della Badia L A, Elshourbagy N A, Mousa S A.Targeting PCSK9 as a promising new mechanism for lowering low-density lipoprotein cholesterol [J]. Pharmacol Ther, 2016,164: 183-194.

    [22] Verbeek R, Stoekenbroek R M, Hovingh G K. PCSK9 inhibitors: Novel therapeutic agents for the treatment of hypercholesterolemia [J]. European Journal of Pharmacology, 2015,763: 38-47.

    [23] McKenney J M, Sica D. Role of prescription omega-3 fatty acids in the treatment of hypertriglyceridemia [J]. Pharmacotherapy, 2007,27(5): 715-728.

    [24] Braeckman R A, Manku M S, Bays H E, et al. Icosapent ethyl, a pure EPA omega-3 fatty acid: Effects on plasma and red blood cell fatty acids in patients with very high triglyceride levels (results from the MARINE study) [J]. Prostaglandins Leukotrienes and Essential Fatty Acids, 2013,89(4): 195-201.

    [25] Yin W D, Tsutsumi K. Lipoprotein lipase activator NO-1886 [J]. Cardiovascular Drug Reviews, 2003, 21(2):133-142.

    [26] Kusunoki M, Tsutsumi K, Sato D, et al. Activation of lipoprotein lipase increases serum high density lipoprotein 2 cholesterol and enlarges high density lipoprotein 2 particles in rats [J]. European Journal of Pharmacology, 2011, 668(1-2): 337-339.

    [27] Chiesa G,Sirtori C R. Apolipoprotein A-I-Milano: current perspectives [J]. Current Opinion in Lipidology, 2003,14(2): 159-163.

    [28] Parolini C, Marchesi M, Lorenzon P, et al. Dose-related effects of repeated ETC-216 (recombinant apolipoprotein A-I-Milano/1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidylcholine complexes) administrations on rabbit lipid-rich soft plaques -invivoassessment by intravascular ultrasound and magnetic resonance imaging [J]. Journal of the American College of Cardiology, 2008, 51(11): 1098-1103.

    [29] King A J, Judd A S, Souers A J. Inhibitors of diacylgly- cerol acyltransferase: a review of 2008 patents [J]. Expert Opinion on Therapeutic Patents, 2010, 20(1): 19-29.

    [30] Denison H, Nilsson C, Lofgren L, et al. Diacylglycerol acyltransferase 1 inhibition with AZD7687 alters lipid handling and hormone secretion in the gut with intolerable side effects: a randomized clinical trial [J]. Diabetes Obes Metab, 2014,16(4): 334-343.

    [31] Nomura D K, Casida J E. Lipases and their inhibitors in health and disease [J]. Chem Biol Interact, 2016, 259(Pt B): 211-222.

    [32] Bryson A, de la Motte S, Dunk C. Reduction of dietary fat absorption by the novel gastrointestinal lipase inhibitor cetilistat in healthy volunteers [J]. Br J Clin Pharmacol, 2009, 67(3): 309-315.

    [33] Cai A, Zheng D, Qiu R, et al. Lipoprotein-associated phospholipase A2 (Lp-PLA(2)): a novel and promising biomarker for cardiovascular risks assessment [J]. Dis Markers, 2013, 34(5): 323-331.

    [34] 陳繼承,盧曉鳳,何國慶. 降血脂功效成分體外篩選方法研究進展[J]. 食品科學(xué),2010,31(13):287-291.

    [35] 李 鵬,陳蘭英. 血脂康抑制豬肝HMG-CoA還原酶的活力[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床,2003,23(5):531-534.

    [36] 曹曉鋼,王立軍,于 剛. 降血脂實驗方法研究進展[J]. 中國實用醫(yī)藥,2008,3(26):185-186.

    [37] 胡海峰,朱寶泉,龔炳永. 生物活性物質(zhì)的篩選與新藥研究[J]. 國外醫(yī)藥(抗生素分冊),1998,19(6):403-406.

    [38] 吳 瓊,王世聰,馬俊鋒,等. 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法快速篩選 3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶 A 還原酶抑制劑[J]. 分析化學(xué),2013,41(7):1013-1018.

    [39] Shimura S, Tsuzuki W, Suzuki T. Determination of lipase activity in organic solvent using fluorescent substrate and its application to the screening of lipase inhibitor [J]. Analytical Sciences, 1991, 7(1):15-18.

    [40] Nakai M, Fukui Y, Asami S, et al. Inhibitory effects of oolong tea polyphenols on pancreatic lipaseinvitro[J]. Agricultural and Foodchemistry, 2005, 53(11):4593-4598.

    [41] Ferrance J P. Gellan beads as a transparent media for protein immobilization and affinity capture [J]. Journal of Chromatography A, 2007, 1165(1-2): 86-92.

    [42] Chen Z, Tao Y, Wang Y, et al. Rapid screening of lipase inhibitors from fructus aurantii using lipase-immobilized magnetic beads coupled with high-performance liquid chromatography-mass spectrometry [J]. Chemical Journal of Chinese Universities, 2012,33(12): 2692-2696.

    [43] Tang J H, Zhou J G, Tang Q J, et al. A new TLC bioautographic assay for qualitative and quantitative estimation of lipase inhibitors[J]. Phytochemical Analysis, 2016, 27(1): 5-12.

    [44] 唐建華,高小平,張義正. 低密度脂蛋白受體/報告基因系統(tǒng)建立及中藥降脂藥物的篩選[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2005,17(3):316-319.

    [45] 馬晶晶,張 潛,方 寧,等. 基于人PPARα為靶標(biāo)的藥物篩選細胞模型的建立與應(yīng)用評價[J]. 中國藥學(xué)雜志,2011,46(23):1798-1804.

    [46] 匡雙玉,庹勤慧,朱炳陽,等. 姜黃素對血管平滑肌細胞源性荷脂細胞膽固醇代謝及SREBP-1表達的影響[J]. 南華大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2006,34(3):317-319.

    [47] 于碧蓮,趙水平,謝湘竹,等. 煙酸對3T3-L1脂肪細胞膽固醇流出的影響[J]. 中國動脈硬化雜志,2007,15(4):289-292.

    [48] 張 露,謝作權(quán),宋懷光,等. 銀杏葉提取物GBE50對培養(yǎng)細胞內(nèi)膽固醇代謝的影響[J]. 中國藥理學(xué)通報,2008,24(3):313-317.

    [49] Yan D, Dou Q L, Wang Z, et al. Establishment of a hepatocyte steatosis model using Chang liver cells [J]. Genet Mol Res, 2015,14(4): 15224-15232.

    [50] Chavez-Tapia N C, Rosso N,Tiribelli C.Invitromodels for the study of non-alcoholic fatty liver disease [J]. Current Medicinal Chemistry, 2011,18(7): 1079-1084.

    [51] 胡啟蒙,陳朝銀,莊馨英,等.建立L-02肝細胞脂肪變模型方法比較及脂肪乳誘導(dǎo)脂變條件的優(yōu)化[J].中國醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志,2015,32(4):469-473.

    [52] Orekhov A N, Sobenin I A, Revin V V, et al. Develop- ment of antiatherosclerotic drugs on the basis of natural products using cell model approach [J]. Oxid Med Cell Longev, 2015, 2015: 463797-463808.

    [53] 寧 娜,韓建軍. 實驗動物高脂血癥模型研究進展[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2013,9(1):66-69.

    [54] 謝慧臣,劉 芬,田春漫,等. 降脂合劑對高脂血癥大鼠LDL-C氧化易感性及肝細胞LDL-R基因表達的影響[J]. 中國實驗方劑學(xué)雜志,2013,19(7):245-249.

    [55] Sutar G V, Das K, Einstein J W.Screening of different leaf extracts ofCassiafistulaLinn for investigation of hypolipidemic activity in two different rat models[J]. International Letters of Natural Sciences, 2015,3(30): 30-43.

    [56] 周 星,劉黎明,孫海濤,等. 脂肪乳劑建立大鼠高脂血癥模型的研究[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2012,19(10):1085-1088.

    [57] 劉 凱,李傳富,申冬珠. 大鼠高膽固醇血癥快速造型法初篩降脂中草藥[J]. 徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1990,10(4):260-262.

    [58] Schurr P E, Schultz J R, Parkinson T M. Triton-induced hyperlipidemia in rats as an animal model for screening hypolipidemic drugs [J]. LIPIDS, 1971,7(1): 68-74.

    [59] Rony K A, Ajith T A, Nima N, et al. Hypolipidemic activity ofPhellinusrimosusagainst triton WR-1339 and high cholesterol diet induced hyperlipidemic rats [J]. Environ Toxicol Pharmacol, 2014,37(2): 482-492.

    [60] Swinney D C, Anthony J. How were new medicines discovered [J]. Nat Rev Drug Discov, 2011,10(7): 507-519.

    [61] Vane J R, Botting R M. The mechanism of action of aspirin[J]. Thromb Res, 2003, 110(5-6): 255-258.

    [62] Elliott W J, Ram C V. Calcium channel blockers[J]. J Clin Hypertens,2011, 13(9): 687-689.

    ResearchProgressofScreeningModelsforLipidLoweringDrugs

    JiXu1,ChenXuejiao1,2,LuoDan1,2,LiJie1

    (1 State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources in West China, Kunming Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Kunming, Yunnan 650201, China;2 Savaid Medical School, University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 101407, China)

    Q493.5;TQ469;R965.1

    A

    1672-4321(2017)03-0043-06

    紀 旭(1979-),男,研究員,博士,研究方向:心血管藥物的篩選及其作用機制,E-mail: jixu@mail.kib.ac.cn

    國家自然科學(xué)基金資助項目(81300609),云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計劃項目(2014FB170),中國科學(xué)院青年創(chuàng)新促進會科研項目,植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室自主課題(Y3728211Z1)

    猜你喜歡
    降脂藥高脂高脂血癥
    勘誤
    高脂血標(biāo)本對臨床檢驗項目的干擾及消除對策
    降低血脂是持久戰(zhàn),沒有捷徑可走
    吃降脂藥對“油”有要求
    運動降低MG53表達及其在緩解高脂膳食大鼠IR中的作用
    他汀類降脂藥致肝損害的診斷研究進展
    高脂血癥對生化檢驗項目的干擾及消除
    食物不耐受與高脂血癥的關(guān)系
    高脂飲食誘導(dǎo)大鼠生精功能障礙
    社區(qū)健康促進模式降低老年高脂血癥的效果
    国产久久久一区二区三区| 久久热精品热| 国产欧美日韩精品亚洲av| 91久久精品国产一区二区成人| 99热这里只有是精品在线观看 | 成年女人永久免费观看视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| 日本一本二区三区精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 少妇丰满av| 极品教师在线免费播放| 欧美3d第一页| 成人一区二区视频在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 人人妻人人澡欧美一区二区| 我要看日韩黄色一级片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 中文字幕高清在线视频| 国产精品综合久久久久久久免费| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲国产色片| 麻豆一二三区av精品| 身体一侧抽搐| 国产三级黄色录像| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 99热这里只有是精品50| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| АⅤ资源中文在线天堂| 日韩 亚洲 欧美在线| 天堂网av新在线| 麻豆成人av在线观看| 精品国产三级普通话版| 最后的刺客免费高清国语| 国产久久久一区二区三区| 白带黄色成豆腐渣| avwww免费| 最近中文字幕高清免费大全6 | 级片在线观看| 日本黄大片高清| 国产精品一区二区三区四区久久| 成人av在线播放网站| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 99在线视频只有这里精品首页| 国产成人a区在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久久成人免费电影| 久久午夜福利片| 国产精品永久免费网站| 999久久久精品免费观看国产| 99热只有精品国产| 青草久久国产| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲第一区二区三区不卡| 在线免费观看的www视频| 村上凉子中文字幕在线| 深爱激情五月婷婷| 欧美成人免费av一区二区三区| 日本熟妇午夜| 少妇人妻一区二区三区视频| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲美女搞黄在线观看 | 欧美+日韩+精品| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲一区二区三区不卡视频| 欧美bdsm另类| 禁无遮挡网站| 国产精品人妻久久久久久| 国产av在哪里看| 精品久久国产蜜桃| 久久久国产成人精品二区| 国产探花极品一区二区| 我的女老师完整版在线观看| 一级作爱视频免费观看| 国产精品亚洲美女久久久| 无遮挡黄片免费观看| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲五月天丁香| 久久伊人香网站| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲熟妇熟女久久| 国产单亲对白刺激| 麻豆一二三区av精品| 在线天堂最新版资源| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲内射少妇av| 可以在线观看的亚洲视频| 免费av观看视频| 亚洲自拍偷在线| 精品免费久久久久久久清纯| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 国产精品综合久久久久久久免费| 日本免费a在线| 人妻久久中文字幕网| av福利片在线观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 99视频精品全部免费 在线| 国产成年人精品一区二区| 国产欧美日韩一区二区精品| 韩国av一区二区三区四区| 五月伊人婷婷丁香| 在现免费观看毛片| 欧美潮喷喷水| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 天天躁日日操中文字幕| 99热精品在线国产| 国产一区二区在线观看日韩| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成人欧美大片| 一级a爱片免费观看的视频| 老鸭窝网址在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产一区二区三区视频了| 国产三级黄色录像| 不卡一级毛片| 少妇丰满av| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 精品福利观看| 国产午夜福利久久久久久| 日本成人三级电影网站| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 校园春色视频在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 级片在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 国产乱人视频| 欧美午夜高清在线| 国产伦人伦偷精品视频| 日韩有码中文字幕| 久久伊人香网站| 一个人看视频在线观看www免费| 悠悠久久av| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲av一区综合| 热99re8久久精品国产| 男女那种视频在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲欧美日韩无卡精品| 最后的刺客免费高清国语| 国产av麻豆久久久久久久| 免费看a级黄色片| 99国产精品一区二区蜜桃av| 欧美最黄视频在线播放免费| 在线观看一区二区三区| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产野战对白在线观看| 日本一二三区视频观看| 91狼人影院| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 国产91精品成人一区二区三区| av女优亚洲男人天堂| 亚洲一区二区三区不卡视频| 精品午夜福利在线看| 一级黄片播放器| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产三级黄色录像| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 人人妻人人看人人澡| 最新中文字幕久久久久| 最近在线观看免费完整版| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美3d第一页| 日韩欧美 国产精品| 性色av乱码一区二区三区2| 国产在视频线在精品| 久久热精品热| 十八禁人妻一区二区| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 搡老岳熟女国产| 国产精华一区二区三区| 国产毛片a区久久久久| 日本精品一区二区三区蜜桃| 免费看日本二区| 亚洲中文字幕日韩| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲av免费在线观看| 免费在线观看成人毛片| 亚洲一区二区三区色噜噜| 深爱激情五月婷婷| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产真实伦视频高清在线观看 | 真实男女啪啪啪动态图| 一级a爱片免费观看的视频| 一本一本综合久久| 亚洲色图av天堂| 99在线人妻在线中文字幕| 夜夜夜夜夜久久久久| 在线观看免费视频日本深夜| 午夜亚洲福利在线播放| 国产激情偷乱视频一区二区| 免费电影在线观看免费观看| 人妻久久中文字幕网| 成人av一区二区三区在线看| 国产精品久久视频播放| 国产探花极品一区二区| a级毛片免费高清观看在线播放| 内地一区二区视频在线| 国产高清视频在线播放一区| 一本久久中文字幕| 亚洲欧美日韩东京热| 波多野结衣高清作品| 首页视频小说图片口味搜索| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲无线观看免费| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲av电影不卡..在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产欧美日韩精品一区二区| 日韩欧美三级三区| www.熟女人妻精品国产| 91av网一区二区| 国产真实乱freesex| 99久久九九国产精品国产免费| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 欧美国产日韩亚洲一区| 深夜a级毛片| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久人人精品亚洲av| 久久午夜亚洲精品久久| 成人精品一区二区免费| 久久国产乱子伦精品免费另类| 青草久久国产| 网址你懂的国产日韩在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 乱码一卡2卡4卡精品| 精品人妻视频免费看| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 欧美一级a爱片免费观看看| 五月伊人婷婷丁香| 99久久精品国产亚洲精品| 国产一区二区三区视频了| 69av精品久久久久久| 午夜日韩欧美国产| 免费高清视频大片| av在线老鸭窝| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产视频内射| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久久色成人| 精品国产亚洲在线| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲无线观看免费| 国产av不卡久久| 亚洲美女搞黄在线观看 | ponron亚洲| 嫩草影院入口| 看十八女毛片水多多多| 亚洲av第一区精品v没综合| 免费一级毛片在线播放高清视频| 深夜精品福利| 午夜久久久久精精品| 无遮挡黄片免费观看| 麻豆成人午夜福利视频| 永久网站在线| 青草久久国产| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产高清有码在线观看视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 亚洲无线在线观看| 国产精品野战在线观看| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲人成网站在线播| 大型黄色视频在线免费观看| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 亚洲电影在线观看av| 岛国在线免费视频观看| 国产精品人妻久久久久久| 日韩欧美三级三区| 九色国产91popny在线| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜激情福利司机影院| 亚洲精品亚洲一区二区| 午夜福利视频1000在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 欧美zozozo另类| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久久久久国产a免费观看| 久久人妻av系列| 久久精品国产自在天天线| 国产日本99.免费观看| 我的老师免费观看完整版| 国产精品久久视频播放| 在线观看66精品国产| 日本免费a在线| 日韩欧美在线乱码| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 麻豆国产97在线/欧美| 国产成人a区在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产精品永久免费网站| www.色视频.com| 亚洲avbb在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 性欧美人与动物交配| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 99精品久久久久人妻精品| 日本黄色视频三级网站网址| 青草久久国产| 一区二区三区激情视频| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲av二区三区四区| 性色av乱码一区二区三区2| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产 一区 欧美 日韩| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲欧美精品综合久久99| av中文乱码字幕在线| 亚洲人与动物交配视频| 国产乱人视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 色哟哟哟哟哟哟| 99riav亚洲国产免费| 婷婷精品国产亚洲av| 日韩av在线大香蕉| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 两个人视频免费观看高清| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲七黄色美女视频| 特级一级黄色大片| 午夜亚洲福利在线播放| 国产成+人综合+亚洲专区| 综合色av麻豆| 18+在线观看网站| 亚洲无线在线观看| 中文资源天堂在线| 欧美性猛交黑人性爽| av专区在线播放| www.999成人在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久精品国产亚洲av天美| av欧美777| 亚洲男人的天堂狠狠| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美3d第一页| 亚洲国产精品999在线| 最新在线观看一区二区三区| 久久国产乱子伦精品免费另类| 最新在线观看一区二区三区| 美女免费视频网站| 精品午夜福利视频在线观看一区| 日本 av在线| 欧美另类亚洲清纯唯美| 一区福利在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 校园春色视频在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲不卡免费看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日韩欧美在线二视频| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 一区二区三区免费毛片| 日本黄色视频三级网站网址| 久久九九热精品免费| 日本黄色视频三级网站网址| 国产淫片久久久久久久久 | 桃红色精品国产亚洲av| 悠悠久久av| 欧美日韩福利视频一区二区| 精品人妻1区二区| 两人在一起打扑克的视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | av国产免费在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产一区二区在线观看日韩| 国产精品永久免费网站| 亚洲av美国av| 国产精品电影一区二区三区| 最近视频中文字幕2019在线8| 搡老熟女国产l中国老女人| 日韩欧美免费精品| 亚洲色图av天堂| 欧美成人一区二区免费高清观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 天天一区二区日本电影三级| 欧美成人a在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 精品欧美国产一区二区三| 亚洲成人久久性| 99精品久久久久人妻精品| ponron亚洲| bbb黄色大片| 日韩欧美国产一区二区入口| 成年女人毛片免费观看观看9| 嫩草影视91久久| 精品无人区乱码1区二区| 久久久久亚洲av毛片大全| 久久99热6这里只有精品| 91av网一区二区| 精品午夜福利视频在线观看一区| 3wmmmm亚洲av在线观看| www.熟女人妻精品国产| 我的女老师完整版在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| or卡值多少钱| 国产探花极品一区二区| 18美女黄网站色大片免费观看| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 日韩有码中文字幕| 色在线成人网| 色尼玛亚洲综合影院| 久久精品国产清高在天天线| 男女那种视频在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 欧美日韩国产亚洲二区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 婷婷精品国产亚洲av| 青草久久国产| 久久欧美精品欧美久久欧美| 人妻久久中文字幕网| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产探花在线观看一区二区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 日韩国内少妇激情av| 精品久久久久久久末码| 三级国产精品欧美在线观看| 少妇人妻精品综合一区二区 | 精品人妻熟女av久视频| 亚洲自拍偷在线| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产精品,欧美在线| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 欧美性猛交黑人性爽| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久亚洲真实| 国产午夜福利久久久久久| 国产成人av教育| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久伊人香网站| 男女床上黄色一级片免费看| netflix在线观看网站| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产午夜福利久久久久久| 少妇人妻精品综合一区二区 | 免费搜索国产男女视频| 在线观看66精品国产| 禁无遮挡网站| 亚洲真实伦在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 他把我摸到了高潮在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 51午夜福利影视在线观看| 一个人看的www免费观看视频| 男人的好看免费观看在线视频| 久久热精品热| 成熟少妇高潮喷水视频| 男女床上黄色一级片免费看| 韩国av一区二区三区四区| 久久亚洲真实| 老熟妇仑乱视频hdxx| 欧美中文日本在线观看视频| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产高清有码在线观看视频| 国产午夜福利久久久久久| 国产中年淑女户外野战色| 一a级毛片在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 90打野战视频偷拍视频| 国产乱人伦免费视频| 久久久色成人| 久久国产乱子免费精品| 国产色爽女视频免费观看| a级毛片a级免费在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日本一二三区视频观看| 人人妻人人澡欧美一区二区| av黄色大香蕉| 成年女人永久免费观看视频| 黄色一级大片看看| 日韩亚洲欧美综合| 丁香欧美五月| 午夜精品一区二区三区免费看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 色在线成人网| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美性感艳星| 又紧又爽又黄一区二区| 三级毛片av免费| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲三级黄色毛片| 51午夜福利影视在线观看| 一区二区三区激情视频| 欧美3d第一页| 亚洲精品色激情综合| 在线播放无遮挡| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久精品人妻少妇| 别揉我奶头 嗯啊视频| 久久久久久国产a免费观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产精品亚洲美女久久久| 男人的好看免费观看在线视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品三级大全| 国产黄片美女视频| 午夜激情欧美在线| www.色视频.com| 午夜日韩欧美国产| 日韩欧美精品免费久久 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 九色成人免费人妻av| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产乱人视频| www.熟女人妻精品国产| 九九热线精品视视频播放| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 在现免费观看毛片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲av第一区精品v没综合| h日本视频在线播放| 在线免费观看不下载黄p国产 | 97热精品久久久久久| 悠悠久久av| 中文字幕免费在线视频6| 长腿黑丝高跟| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日韩有码中文字幕| 99久久精品热视频| 色综合婷婷激情| 午夜老司机福利剧场| 神马国产精品三级电影在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲av一区综合| 不卡一级毛片| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 精品久久久久久久久av| 亚洲经典国产精华液单 | www日本黄色视频网| 一区二区三区激情视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 一级av片app| 少妇的逼好多水| 一个人看的www免费观看视频| 99热6这里只有精品| 村上凉子中文字幕在线| 国产色婷婷99| 亚洲国产精品成人综合色| 中文字幕av成人在线电影| 国产亚洲欧美98| 波多野结衣高清作品| 欧美不卡视频在线免费观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产欧美日韩一区二区三| 国产成+人综合+亚洲专区| 99在线视频只有这里精品首页| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 丁香欧美五月| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 十八禁人妻一区二区| 91av网一区二区| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 日韩欧美精品免费久久 | 观看免费一级毛片| 亚洲七黄色美女视频| 好男人电影高清在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 国产综合懂色| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲人成网站高清观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 最好的美女福利视频网| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 免费大片18禁| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 我要搜黄色片| 中文字幕av成人在线电影| 国产综合懂色| 99国产精品一区二区蜜桃av| 婷婷精品国产亚洲av在线| 久久久精品大字幕| 欧美成人a在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产精品电影一区二区三区| 最后的刺客免费高清国语| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲成av人片在线播放无| 国产欧美日韩一区二区精品|