劉慧娟,張名位,張瑞芬,張雁,魏振承,馬永軒,劉磊,鄧媛元
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不同苦瓜品種皂苷含量組成及其抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶的抑制活性
劉慧娟1,2,張名位2,張瑞芬2,張雁2,魏振承2,馬永軒2,劉磊2,鄧媛元2
(1長江大學生命科學學院,湖北荊州 434020;2廣東省農(nóng)業(yè)科學院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所/農(nóng)業(yè)部功能食品重點實驗室/廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工重點實驗室,廣州 510610)
【目的】比較不同品種苦瓜果肉中皂苷總含量、7種單體組成含量及抗氧化性和α-葡萄糖苷酶抑制活性差異,為明確苦瓜中主要皂苷單體組成含量,篩選高皂苷含量及高活性的苦瓜品種提供科學參考。【方法】采用香草醛-高氯酸法測定13個苦瓜品種皂苷總含量,高效液相法測定7種皂苷單體含量、總抗氧化能力指數(shù)(ORAC),并評價其抗氧化活性,采用4-硝基酚-2-D吡喃葡萄糖苷法測定α-葡萄糖苷酶抑制率,同時分析組成含量和活性之間的相關(guān)性?!窘Y(jié)果】13個不同品種苦瓜果肉皂苷總含量呈顯著性差異,含量變幅為(0.52—1.20)g/100gDW,平均值為0.79 g/100g DW,變異系數(shù)為21.65%。7種皂苷單體含量的平均值依次為:苦瓜苷A(Momorcharaside A)5.32 μg?g-1DW,苦瓜皂苷A(Momordicoside A)25.42 μg?g-1DW,Karaviloside XI 3.96 μg?g-1DW,苦瓜皂苷F2(Momordicoside F2)66.95 μg?g-1DW,苦瓜皂苷K(Momordicoside K)183.70 μg?g-1DW,(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al 40.13 μg?g-1DW,Kuguacin N 3.87 μg?g-1DW。不同品種苦瓜總皂苷ORAC指數(shù)變幅為2 747.76—15 584.07 μmol Trolox?g-1,平均值為8 879.48 μmol Trolox?g-1,變異系數(shù)為34.91%;α-葡萄糖苷酶IC50值變幅為1.55—4.96 mg?mL-1?!窘Y(jié)論】不同品種苦瓜果肉皂苷總含量、單體組成含量、抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制率有顯著差異。皂苷是苦瓜抑制α-葡萄糖苷酶活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ),但并非苦瓜抗氧化活性主要貢獻物質(zhì)。(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al是主要活性單體。
苦瓜;皂苷;抗氧化;α-葡萄糖苷酶
【研究意義】苦瓜又名涼瓜,屬葫蘆科草本植物,是華南特色藥用蔬菜。皂苷是苦瓜中的主要功能成分,具有降血糖、減肥、抗氧化等多種生理活性[1-3]。不同種類植物中皂苷的含量和組成及其活性不盡相同[4]。比較不同品種苦瓜果肉中皂苷的含量、組成及其降糖和抗氧化活性差異,篩選皂苷含量高,活性強的苦瓜品種,有利于指導(dǎo)苦瓜精深加工,開發(fā)以皂苷為主要功能因子的苦瓜健康食品新產(chǎn)品?!厩叭搜芯窟M展】張武君等[5]比較了福建種植的29個苦瓜品種果肉皂苷含量,變幅為0.90%—2.47%,均值為1.28%,根、莖皂苷含量接近或高于果實含量。田力東等[4]比較分析了兩廣地區(qū)主栽的35個苦瓜品種皂苷含量,變幅為1.17%—4.07%,果肉皂苷含量均值為1.96%,并且同一品種苦瓜果肉中皂苷含量大于籽粒。此外,已通過植物化學經(jīng)典分離手段比較了云南玉溪產(chǎn)苦瓜和安寧產(chǎn)苦瓜果肉皂苷類化合物組成差異,均從中分離鑒定新化合物5個[6-7]。到目前為止,從苦瓜中分離得到葫蘆烷型三萜皂苷已經(jīng)有140多個[8]。據(jù)報道有降糖活性的單體14個,包括momordicosides Q、R、S、T和karaviloside XI等[9-12]??寡趸钚詥误w7個,包括taiwacin A、taiwacin B、momordicoside K和3-O-(β-D-glucopyranosyl)-24β-ethyl-5α-chalesta-7, 22,25(27)-trien-3β-ol等[13-14]。【本研究切入點】雖然已有研究分別對不同品種苦瓜皂苷總含量和單個品種皂苷單體組成進行了分析,但極少關(guān)于皂苷單體組成含量在不同品種間的比較,更缺少基于品種皂苷單體組成含量和活性之間的相關(guān)性分析?!緮M解決的關(guān)鍵問題】測定華南地區(qū)栽種的13個品種苦瓜果肉皂苷中的含量相對較多且文獻報道活性相對較好的7種皂苷單體物質(zhì)含量[15],比較皂苷的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,并分析其構(gòu)效和量效關(guān)系,為苦瓜的精深加工和功能食品開發(fā)提供理論依據(jù)和科學指導(dǎo)。
1.1 供試材料
13個不同品種苦瓜種植于廣東省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所廣州市白云基地試驗田。2015年3月播種,7月收獲??喙铣跏鞎r收獲,當天運回廣東省農(nóng)業(yè)科學院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所農(nóng)業(yè)部功能食品重點實驗室。所有苦瓜品種名稱及分類由廣東省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所從事苦瓜品種培育的張長遠研究員提供。
1.2 試驗材料
人參皂苷Rg1標準品購自中國藥品生物制品檢定研究所;Trolox、熒光素鈉鹽、葡萄糖醛酸、α-D-葡萄糖苷酶和對硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖購自美國Sigma公司;其余試劑均為國產(chǎn)分析純。
1.3 儀器設(shè)備
SB-2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本東京理化器械株式會社),TECAN infinite 200酶標儀(瑞士TECAN),LC1200高效液相色譜儀(美國Agilent),EYELA真空冷凍干燥儀(日本東京理化器械株式會社),TAISITE萬能粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司),UV-2450紫外可見分光光度計(日本島津有限公司)。
1.4 試驗方法
1.4.1 苦瓜皂苷的提取制備 苦瓜洗凈去籽切片,在電熱鼓風機單層平鋪,55℃下過夜烘干,萬能粉碎機粉碎過60目篩。準確稱取50.00 g苦瓜干粉按料液比1﹕10加甲醇在80℃下回流提取1 h,4 000 r/min、5 min離心過濾后分別收集濾渣和濾液。濾渣進行同樣條件的二次提取,將兩次提取的濾液合并濃縮至原來體積的1/5,濃縮液用石油醚萃取3次后取水相,再用乙酸乙酯萃取3次,水相最后再用正丁醇萃取3次,萃取均按照1﹕3體積操作。將得到的正丁醇相經(jīng)60℃真空減壓濃縮至浸膏物,用甲醇溶解后定容至100 mL,4℃保存?zhèn)溆肹16-17]。
1.4.2 總皂苷含量的測定 測定方法以人參皂苷Rg1為標品,采用香草醛-高氯酸法[18]。取2 mL苦瓜甲醇溶液,水浴揮干甲醇,香草醛-高氯酸法反應(yīng)后在560 nm下測定吸光值,每個樣品做3個平行。代入標準曲線計算皂苷含量。皂苷含量以每100 g苦瓜粉干重計,表示為g/100g DW。
1.4.3 皂苷單體含量分析
1.4.3.1 待測樣品的制備 苦瓜皂苷甲醇溶液經(jīng)真空抽濾后收集濾液。濾液經(jīng)MCI凝膠柱層析,25%甲醇水溶液600 mL,85%甲醇水溶液1 200 mL和丙酮600 mL依次洗脫。85%甲醇水洗脫部分濃縮得精制皂苷浸膏,并用甲醇溶解定容為待測樣品。
1.4.3.2 混標的繪制 7種皂苷單體標準品名稱及純度分別為:苦瓜苷A(Momorcharaside A)95.759%、苦瓜皂苷A(Momordicoside A)97.728%、karaviloside XI 58.086%、苦瓜皂苷F2(Momordicoside F2)86.041%、苦瓜皂苷K(Momordicoside K)85.729%、Kuguacin N 94.918%、(23E)-3β,7β,25- trihydroxycucubita- 5,23-dien-19-al 97.976%。7種標品的結(jié)構(gòu)如圖1,分別精密稱量上述標準品5.5、5.5、3.5、5.5、5.5、5.5和7 mg于50 mL容量瓶中用甲醇定容。從混標溶液中分別取1、5、10、15和20 μL溶液在HPLC進樣分析,測各濃度標品的峰面積。各濃度進兩針,最后取平均值。
1.4.3.3 HPLC條件 Momorcharaside A、Momordicoside A和karaviloside XI按以下液相條件分析[19]:流動相為乙腈/水(1—16 min,24%;16—20 min,24%—45%;20—45 min,45%—55%;45—60 min,55%—80%);溫度30℃,流速1.0 mL?min-1,檢測波長為203和238 nm,進樣量為20 μL。Momordicoside F2、Momordicoside K、Kuguacin N和(23E)-3β,7β,25-trihydroxy-cucubita- 5,23-dien-19-al的液相條件分析:流動相為乙腈/水(1—50 min,40%;50—68 min,40%—50%;68—88 min,50%—75%);溫度30℃,流速1.0 mL?min-1,檢測波長203 nm,進樣量為20 μL。記錄峰面積,由標準曲線計算出各標品含量。單體組成含量以每g苦瓜粉干重計,表示為μg?g-1DW。
1.5 ORAC值測定
測定方法參考Davalos等[20],略加修改,將苦瓜皂苷甲醇溶液用75 mmol?L-1磷酸緩沖液(pH 7.4)稀釋至一定濃度。在96孔板各孔分別加入20 μL磷酸緩沖液、20 μL不同濃度的Trolox標準品溶液、20 μL皂苷溶液,以及120 μL 0.96 μmol?L-1熒光素工作液,37℃下孵育15 min。然后用多道移液器迅速在各孔加入新鮮配置60 μL的119 mmol?L-1AAPH溶液。啟動酶標儀,在37℃下以激發(fā)波長485 nm,發(fā)射波長538 nm連續(xù)測定各孔的熒光強度。每4.5 min重復(fù)測定,測35個循環(huán)。以磷酸緩沖液作為空白對照,每個孔測3個平行。以Net AUC的數(shù)值與Trolox濃度作標準曲線,以皂苷干基每g樣品中所含Trolox當量(μmol TE?g-1DW)表示。
1.6 α-葡萄糖苷酶抑制活性
皂苷的α-葡萄糖苷酶活性測定按照WU等[21]的方法,略作修改。取苦瓜甲醇溶液20 μL用0.1 mol?L-1磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)稀釋至200 μL,然后取50 μL和25 μL的0.5 U?mL-1α-葡萄糖苷酶于96孔板中,37℃預(yù)孵育10 min。之后再加入25 min 10 mmol?L-1的PNPG,37℃下孵育30 min。孵育結(jié)束后加入100 μL的0.2 mol?L-1Na2CO3溶液終止反應(yīng),405 nm下測吸光度。同時設(shè)置樣品背景對照組、空白對照組,酶活抑制率計算公式如下:
式中,A1為空白的吸光度;A2為背景的吸光度;A3為樣品的吸光度。
1.7 統(tǒng)計分析
Excel和SPSS19.0軟件進行數(shù)據(jù)處理和分析,數(shù)據(jù)結(jié)果以±SD表示,皂苷單體含量與活性之間采用雙變量相關(guān)性分析,品種間差異比較采用LSD法。
2.1 不同品種苦瓜皂苷總含量
13個不同品種苦瓜果肉皂苷總含量如表1所示,品種間具有顯著差異(<0.05)。不同品種苦瓜果肉皂苷的含量變幅為(0.52—1.20)g/100g DW,平均值為0.79 g/100g DW,變異系數(shù)21.65%。皂苷含量最高的是白珍珠,最低的是油綠1302號,兩者含量差異為2.31倍。
表1 不同品種苦瓜果肉皂苷總含量
不同小寫字母表示組間差異顯著(<0.05)。下同 The values marked by different letters are significantly different (<0.05). The same as below
2.2 不同品種苦瓜皂苷單體含量
13個不同品種苦瓜果肉皂苷中7種單體含量如表2所示。單體含量均值最高的是苦瓜皂苷K,為183.70 μg?g-1DW,最少的是Kuguacin N,僅為3.87 μg?g-1DW,前者為后者的47.47倍??喙显碥誎含量變幅84.11—299.17 μg?g-1DW,含量最高的品種是印尼-3號,最低的是印尼-1號。Kuguacin N含量變幅0.27—23.96 μg?g-1DW,含量最高的品種是大頂7號,最低的是印尼-1號。單體總含量變幅為172.96—488.78 μg?g-1DW,均值為329.35 μg?g-1DW,含量最高的品種是大頂7號,最低的是大頂6號。
表2 不同品種苦瓜果肉中皂苷組成及含量
2.3 不同品種苦瓜皂苷的總抗氧化能力指數(shù)
13個不同品種的苦瓜皂苷ORAC指數(shù)如圖2所示。不同品種苦瓜皂苷ORAC指數(shù)變幅為2 747.76— 15 584.07 μmol Trolox?g-1,平均值為8 879.48 μmol Trolox?g-1,變異系數(shù)為34.91%,表明不同品種間的抗氧化能力差異較大,抗氧化活性最高的是油綠1302號,最低的是馬來西亞苦瓜,兩者相差5.67倍。
2.4 不同品種苦瓜皂苷的α-葡萄糖苷酶抑制活性
13個不同品種苦瓜果肉皂苷的α-葡萄糖苷酶如表3所示。α-葡萄糖苷酶抑制活性最強的是印尼-4號,IC50值為1.55 mg?mL-1;活性最弱的是大頂6號,IC50值為4.96 mg?mL-1。
表3 不同品種苦瓜皂苷的α-葡萄糖苷酶IC50值
Table 3 The IC50 value of α-glucosidase of saponin from M. charantia (±SD)
表3 不同品種苦瓜皂苷的α-葡萄糖苷酶IC50值
品名 VarietiesIC50 (mg?mL-1) 油綠1301號Youlv No.13013.77 油綠1302號 Youlv No.13023.11 油綠1303號 Youlv No.13033.39 綠寶石 Lvbaoshi4.40 大頂5號 Dading No.53.68 大頂6號 Dading No.64.96 大頂7號 Dading No.73.47 大頂8號 Dading No.83.86 馬來西亞苦瓜Malaysia3.99 印尼-1號Indonesia No.13.38 印尼-3號Indonesia No.33.52 印尼-4號Indonesia No.41.55 白珍珠 Baizhenzhu2.02
2.5 苦瓜皂苷總含量、單體含量與抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性間關(guān)系
苦瓜果肉中皂苷總含量與ORAC指數(shù)呈顯著負相關(guān)關(guān)系(=-0.693,<0.05),與α-葡萄糖苷酶抑制活性呈顯著正相關(guān)(=0.683,<0.05)。皂苷單體化合物苦瓜苷A與ORAC指數(shù)呈顯著負相關(guān)(=-0.711,<0.05);而苦瓜皂苷A與ORAC指數(shù)呈正相關(guān)(=0.593,>0.05)。(23E)-3β,7β,25- trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al與α-葡萄糖苷酶活性抑制率呈顯著正相關(guān)(=0.659,<0.05),其他6種單體與α-葡萄糖苷酶活性抑制率均無明顯相關(guān)性。此外,抗氧化活性與α-葡萄糖苷酶抑制活性之間也無明顯相關(guān)性(表4)。
3.1 苦瓜品種皂苷含量
目前從苦瓜中分離得到的皂苷類化合物接近150種。按其結(jié)構(gòu)可分為甾體類和三萜類??喙显碥找匀圃碥諡橹?,包括四環(huán)三萜和五環(huán)三萜。不同苦瓜品種由于其基因型和生長環(huán)境差異,皂苷的含量、組成及活性也有差異。曹晶晶等[22]測定了浙江栽培的41個品種苦瓜果肉皂苷含量,變幅為0.521%—5.221%,品種間差異為10倍。田力東等[4]比較兩廣地區(qū)35個品種苦瓜果肉皂苷含量,變幅為1.17%—4.07%,變異系數(shù)為32%。張武君等[5]比較福建產(chǎn)的29個品種苦瓜果肉皂苷含量,變幅為0.75%—2.47%,變異系數(shù)29.04%。本研究比較了目前廣東主栽苦瓜品種和馬來西亞、印尼引進苦瓜品種果肉皂苷含量,發(fā)現(xiàn)其含量平均值為0.79 g/100g DW,品種間皂苷差異為2.31倍。HABICH等[23]報道白苦瓜比其他品種含有更少的三萜皂苷。但本研究中白珍珠苦瓜(白色)皂苷含量最高。田力東等[4]測定的廣西白(白色)苦瓜皂苷含量為1.97%,在測定的35種苦瓜里皂苷含量接近均值(1.96%)。說明皂苷含量與苦瓜果實顏色并無直接關(guān)系,可能更多的取決于遺傳性狀、栽培條件及成熟度等。
目前關(guān)于不同品種苦瓜皂苷單體組成及含量的比較分析較少。僅有張瑜等[19]對山東、河南、河北、江西4個產(chǎn)地苦瓜中皂苷元L含量的分析比較。本研究首次采用HPLC法對13個品種苦瓜果肉皂苷中的7種皂苷單體物質(zhì)進行了定量分析,發(fā)現(xiàn)7種單體含量在不同品種苦瓜間存在顯著性差異。
表4 不同品種苦瓜皂苷含量、單體組成對ORAC指數(shù)和抑制α-葡萄糖苷酶活性的相關(guān)性分析
*不同小寫字母表示在0.05水平上存在顯著差異
*Values with no letters in common in each column are significantly different (<0.05)
3.2 苦瓜品種皂苷含量及組成與活性的相關(guān)性
對不同品種苦瓜皂苷總含量、單體組成含量和ORAC值進行雙變量相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)皂苷含量與ORAC值呈顯著負相關(guān)。油綠1302號皂苷含量最低,其ORAC值最高,皂苷含量最高的白珍珠ORAC值排在倒數(shù)第三。黃龍等[24]曾提出酚類物質(zhì)是苦瓜抗氧化的重要活性物質(zhì)基礎(chǔ)。本研究也證實皂苷并非苦瓜果肉抗氧化活性的主要貢獻物質(zhì)。盡管如此,但苦瓜皂苷仍具有一定的抗氧化活性,其抗氧化能力遠高于苦瓜多糖[25]。進一步相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)苦瓜苷A與ORAC值顯著負相關(guān),而苦瓜皂苷A與ORAC值呈正相關(guān)。苦瓜苷A和苦瓜皂苷A母核結(jié)構(gòu)相同,只是C-3位置鏈接的糖分別為β-D-Galactopyranose-(1→6)- β-D-Ghicopyranosyl和β-D-Glc-(1→6)-β-D-Glcopyranosyl。糖基的不同導(dǎo)致了兩者活性差異顯著。已有研究證實皂苷類化合物的抗氧化活性與皂苷元配基的結(jié)構(gòu)和糖殘基的數(shù)量有關(guān)[17]。BI等[26]提出C-3位置糖鏈的種類和排列順序?qū)钚缘挠绊懼陵P(guān)重要,但糖苷配基中的雙鍵則對活性影響不大;C-3位置上存在β-D- glucopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)]-β-D-glucuronopyranosyl oligosaccharide是太白楤木根皮皂苷抗氧化作用的主要活性單元。此外,皂苷結(jié)構(gòu)中的-OH基團能夠阻止活性氧的產(chǎn)生,也是其抗氧化的重要作用位點[27]。
α-葡萄糖苷酶從低聚糖底物的非還原性末端斷開α-1,4糖苷鍵,釋放葡萄糖或?qū)⒂坞x葡萄糖殘基轉(zhuǎn)移到另一糖底物形成α-1,6糖苷鍵,從而得到非發(fā)酵性低聚異麥芽糖或糖酯、糖肽等[28]。抑制該酶活性,能夠有效控制餐后血糖水平,對2型糖尿病的預(yù)防和治療有非常積極的效果[29]。已有研究證實苦瓜皂苷能夠顯著降低正常小鼠和2型糖尿病小鼠餐后血糖[30]。本研究對不同品種苦瓜皂苷總含量、單體組成含量和α-葡萄糖苷酶抑制率相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),α-葡萄糖苷酶抑制率和皂苷含量呈顯著正相關(guān)。并且α-葡萄糖苷酶抑制率與(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al呈顯著正相關(guān),表明皂苷是苦瓜抑制α-葡萄糖苷酶活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ),(23E)-3β,7β,25-trihydroxy-cucubita- 5,23-dien-19-al是其主要活性單體。Kuguacin N與(23E)- 3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al結(jié)構(gòu)類似,Kuguacin N在C-23有羰基取代,并在C-24和C-25間形成雙鍵;(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23- dien-19-al在C-25有羥基取代,并在C-23和C-24間形成雙鍵。但Kuguacin N與α-葡萄糖苷酶抑制活性無顯著相關(guān)性,α-葡萄糖苷酶與底物結(jié)合時,需要底物有恰當?shù)牧u基構(gòu)象、陽離子、三角形的異頭碳中心,并且有一個共價連接的環(huán)所形成的半椅狀或椅狀構(gòu)型[31]。Kuguacin N與(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucu- bita-5,23-dien-19-al在活性上的差別可能是由于Kuguacin N在C-23羰基的取代影響了其與α-葡萄糖苷酶的結(jié)合;而(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23- dien-19-al在C-25的羥基更加利于其與α-葡萄糖苷酶結(jié)合。此外,雖然數(shù)據(jù)分析顯示α-葡萄糖苷酶抑制率和皂苷含量、(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23- dien-19-al含量之間顯著相關(guān),但其相關(guān)系數(shù)并不是太大(分別為0.683和0.659),因此推測苦瓜果肉皂苷中的7種單體物質(zhì)或皂苷與其他多種營養(yǎng)成分之間還存在協(xié)同作用,有待進一步探討驗證。
13個苦瓜品種果肉皂苷含量、抗氧化值和α-葡萄糖苷酶抑制活性具有顯著的基因型差異。7種單體的含量在品種間也存在差異。皂苷是苦瓜抑制α-葡萄糖苷酶活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ),但并不是苦瓜抗氧化活性主要貢獻物質(zhì)。(23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al是苦瓜抑制α-葡萄糖苷酶活性主要活性單體。研究結(jié)果可為苦瓜的精深加工和以皂苷為主要功能成分的健康食品開發(fā)提供參考。
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(責任編輯 趙伶俐)
Saponion Profiles and Antioxidant Activity, α-Glucosidase Inhibitory Activity ofof Different Varieties
LIU HuiJuan1,2, ZHANG MingWei2, ZHANG RuiFen2, ZHANG Yan2, WEI ZhenCheng2, MA YongXuan2, LIU Lei2, DENG YuanYuan2
(1College of Life Science, Yangtze University, Jingzhou 434020, Hubei;2Sericultura & Agri-Food Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Functional Foods, Ministry of Agriculture/Guangdong Key Laboratory of Agricultural Products Processing, Guangzhou 510610)
【Objective】The content and composition of saponion of 13 differentvarieties as well as the antioxidant activity and inhibitory effect of α-glucosidase were studied. 【Method】Perchloric acid-vanilin-glacial method was used to determine saponin content, while HPLC method was used to measure the contents of 7 saponin components. In addition, their antioxidant activity was evaluated by oxygen radical absorbance capacity (ORAC). The 4-nitrophenyl-2-β-D-glucopyranoside method was used to measure the α-glucosidase inhibitory activity and to analyze the relationship between the components and the corresponding activity. 【Result】There is a significant difference in contents of saponin in 13 different varieties of.The content ranges of saponin were 0.52-1.20 g/100g DW, with an average value being 0.79 g/100g DW, and the coefficient of variability being 21.65%. The average contents of components were as follows: momorcharaside A 5.32 μg?g-1DW, momordicoside A 25.42 μg?g-1DW, karaviloside XI 3.96 μg?g-1DW, momordicoside F2 66.95 μg?g-1DW, momordicoside K 183.70 μg?g-1DW, (23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al 40.13 μg?g-1DW, and kuguacin N 3.87 μg?g-1DW. ORAC values of the 13varieties varied from 2 747.76 to 15 584.07 μmol Trolox?g-1, the average value being 8 879.48 mol Trolox?g-1, the coefficient of variability being 34.91% and the IC50value of alpha glucosidase varied from 1.55 to 4.96 mg?mL-1. 【Conclusion】Significant differences in the components of saponin and the antioxidant activity and the inhibitory effect on α-glucosidase of different varieties ofwere detected. Saponin is the main active basis of α-glucosidase activity in, but not the main antioxidant substance. (23E)-3β,7β,25-trihydroxycucubita-5,23-dien-19-al is the major active compound.
; saponin; antioxidant; α-glucosidase
2017-01-25;接受日期:2017-04-24
廣東省中國科學院全面戰(zhàn)略合作專項資金競爭性分配項目(2013B091100011)、廣東省省級科技計劃項目(2016B070701012,2016A040403081)
劉慧娟,E-mail:lhj8401@163.com。通信作者鄧媛元,E-mail:yuanyuan_deng@yeah.net