唾液腺特異性表達(dá)木聚糖酶轉(zhuǎn)基因豬檢測

王德化李洋

（1，廣東省乳源瑤族自治縣畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局 512600；2，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 510642）

唾液腺特異性表達(dá)木聚糖酶轉(zhuǎn)基因豬檢測

王德化1李洋2*

（1，廣東省乳源瑤族自治縣畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局 512600；2，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 510642）

研究分別測定11頭唾液腺特異性表達(dá)木聚糖酶（xynB）轉(zhuǎn)基因豬的飼料表觀消化率和38頭木聚糖酶（xynB）轉(zhuǎn)基因豬的生長性能指標(biāo)。結(jié)果表明，與非轉(zhuǎn)基因豬相比，轉(zhuǎn)xynB基因豬對飼料營養(yǎng)成分的表觀消化率和生長性能均無顯著差異。

木聚糖酶；轉(zhuǎn)基因豬；表觀消化率；生長性能

近年來，隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的迅速發(fā)展和國家對環(huán)保排放要求的提高，各種與提高生豬消化率相關(guān)的基因正在被研究鑒定和改造，用于生產(chǎn)出能有效減少氮磷排放的環(huán)境友好型轉(zhuǎn)基因豬育種新材料，不僅能從根源上解決養(yǎng)豬業(yè)造成的環(huán)境污染問題，也將大幅度提高我國畜牧科技的自主創(chuàng)新和國際競爭力，為我國豬種改良和種質(zhì)資源創(chuàng)新提供技術(shù)支撐。本研究通過檢測F1代轉(zhuǎn)xynB基因豬飼料消化代謝和對其生長性能的影響，為驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因豬的實(shí)際效果提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 消化代謝試驗(yàn)

將體重大小一致、健康的11頭轉(zhuǎn)xynB基因杜洛克公豬和8頭試驗(yàn)對照非轉(zhuǎn)基因豬分別放入代謝籠中，使用未添加木聚糖酶制劑的全價(jià)飼糧預(yù)飼，預(yù)飼期1周，正式試驗(yàn)期5d，每天記錄每頭豬的采食量。采用全收糞法，每天取尿液1/10體積收集記錄，并把糞尿置于-20℃冰箱保存。試驗(yàn)結(jié)束后，分別檢測糞尿中能量、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、水分、干物質(zhì)、鈣和磷。

1.2 生長性能測定

參考《全國種豬遺傳評估方案》，再根據(jù)實(shí)際測定條件共測定11組性狀。分別是初生重、眼肌面積、肌肉厚度、料肉比、體重、體高、體長、管圍、乳頭數(shù)、校正100kg體重日齡、校正100kg體重背膘厚。

2 結(jié)果與分析

2.1 消化代謝試驗(yàn)結(jié)果

由圖1可以看出，轉(zhuǎn)xynB基因903504家系和950901家系轉(zhuǎn)基因組與非轉(zhuǎn)基因組在能量、氮、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、Ca、P的表觀消化率之間均沒有顯著差異（P＞0.05）。

2.2 生長性能測定結(jié)果

由表2可以看出，除轉(zhuǎn)xynB基因公豬的體長顯著高于非轉(zhuǎn)基因豬外（P＜0.05），其余指標(biāo)均無顯著差異。轉(zhuǎn)xynB基因母豬與非轉(zhuǎn)基因母豬在11個(gè)生長性能指標(biāo)上均無顯著差異。

圖2 轉(zhuǎn)xynB基因的質(zhì)粒結(jié)構(gòu)圖

表1 試驗(yàn)飼料營養(yǎng)有效成分

表2 轉(zhuǎn)木聚糖酶基因公豬和母豬30～100kg生長性能測定指標(biāo)數(shù)據(jù)分析

3 討論

本研究所使用的轉(zhuǎn)xynB基因豬是利用豬的腮腺分泌蛋白（PSP）基因調(diào)控區(qū)構(gòu)建豬腮腺組織表達(dá)載體制備而成 (圖2)。本試驗(yàn)所選的豬采用的PSP啟動(dòng)子僅為轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游10Kb區(qū)域，在其上游或下游可能存在尚未發(fā)現(xiàn)的增強(qiáng)子等重要調(diào)控元件序列，這也許是轉(zhuǎn)入基因木聚糖酶表達(dá)水平低的重要原因。此外，其密碼子沒有根據(jù)豬密碼子偏好性優(yōu)化，而影響該基因在豬體內(nèi)的轉(zhuǎn)錄效率。另外也有可能與日糧的設(shè)計(jì)有關(guān)，曾有報(bào)道利用含植酸磷53%的豆粕作為唯一磷來源的飼料飼喂轉(zhuǎn)植酸酶基因斷奶仔豬和生長豬，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因斷奶仔豬和生長豬的糞磷含量與非轉(zhuǎn)基因豬相比分別減少75%和56%[1]。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的日糧營養(yǎng)成分表（見附表），滿足豬的生長需求，在未添加木聚糖酶的情況，兩者表觀消化率和生長性能并無顯著差異。

[1]Golovan S P,Meidinger R G,Ajakaiye A,et al.Pigs expressing salivary phytase produce low-phosphorus manure[J].Nature Biotechnology,2001,19(8):741-745.

*通訊作者：李洋（1989-)，男，碩士，從事動(dòng)物遺傳育種與繁殖工作。