腦脊液EV71抗體檢測(cè)在重癥手足口病合并腦炎中的意義

劉娜 王先玉 何謝玲 覃亞斌

論 著

腦脊液EV71抗體檢測(cè)在重癥手足口病合并腦炎中的意義

劉娜 王先玉 何謝玲 覃亞斌

目的分析腦脊液腸道病毒71（EV71）抗體在早期預(yù)測(cè)重癥手足口?。℉FMD）并發(fā)腦炎中的價(jià)值。方法 選取我院2015年3月至2017年3月收治的224例重癥HFMD患兒，按照其并發(fā)腦炎情況與類型將其納入未合并腦炎對(duì)照組（n＝72）、合并細(xì)菌性腦炎組（n＝86）和合并病毒性腦炎組（n＝66），對(duì)其血清、腦脊液EV71抗體水平進(jìn)行檢測(cè)，運(yùn)用受試者工作特征曲線（ROC）計(jì)算EV71抗體早期預(yù)測(cè)HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度、特異度，并運(yùn)用Logistic多因素回歸分析，評(píng)價(jià)血清EV71抗體對(duì)重癥HFMD并發(fā)腦炎的影響。結(jié)果細(xì)菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平均高于未合并腦炎對(duì)照組〔血清EV71抗體（μg/L）：403.5±19.6、397.1±20.8比115.9±32.4，腦脊液EV71抗體（μg/L）：427.6±48.4、430.8±49.1比125.9±31.3〕，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），而細(xì)菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。ROC曲線顯示，腦脊液、血清EV71抗體預(yù)測(cè)重癥HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度（87.83%、85.16%）、特異度（90.52%、89.33%）均較高（均P＜0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示，以并發(fā)腦炎為因變量，腦脊液與血清EV71抗體的影響因子均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。結(jié)論重癥HFMD并發(fā)腦炎可損傷患兒腦組織，并引發(fā)腦脊液、血清EV71抗體水平明顯上升，血清EV71抗體檢測(cè)具有簡(jiǎn)便、創(chuàng)傷小的優(yōu)勢(shì)，有望在重癥HFMD并發(fā)腦炎的早期預(yù)測(cè)中發(fā)揮重要作用。

腦脊液EV71抗體； 重癥手足口?。?腦炎； 預(yù)測(cè)價(jià)值

手足口?。╤and-foot-mouth disease，HFMD）是由腸道71型病毒（EV71）和A組柯薩奇病毒A16引發(fā)的傳染性疾病，手、足、口、臀部出現(xiàn)大量水皰疹是本病的主要臨床特征［1-2］。該病好發(fā)于學(xué)齡前兒童，通常預(yù)后良好，但重癥HFMD患兒易出現(xiàn)肺炎、腦水腫、循環(huán)障礙等并發(fā)癥，其中腦炎是重癥HFMD最為嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，盡早識(shí)別并發(fā)腦炎風(fēng)險(xiǎn)并予以科學(xué)診治對(duì)保證患兒生存質(zhì)量具有重要意義［3-4］。然而，目前臨床診斷重癥HFMD并發(fā)腦炎主要借助腰穿腦脊液檢查，該法操作復(fù)雜、耗時(shí)久，無(wú)法滿足早期診治需求［5-6］。本研究選取腦損傷中關(guān)鍵因子——腦脊液EV71抗體，就其早期預(yù)測(cè)重癥HFMD并發(fā)癥腦炎的價(jià)值進(jìn)行了分析，旨在為臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年3月至2017年3月收治的224例重癥HFMD患兒，按照其并發(fā)腦炎情況與類型分為未合并腦炎對(duì)照組（n＝72）、合并細(xì)菌性腦炎組（n＝86）和合并病毒性腦炎組（n＝66），均參照HFMD診治指南確診［7-8］，并排除合并其他類型感染與危重病例。3組患兒年齡、病程、體質(zhì)量、性別比例比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 3組患兒一般臨床資料比較

本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并征得患兒監(jiān)護(hù)人知情同意。

1.2 檢測(cè)方法 抽取患兒入組次日（治療前）空腹肘靜脈血2 mL及腦脊液1.5 mL，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)其血清、腦脊液EV71抗體水平，試劑盒均購(gòu)自上海吉泰依科賽生物科技有限公司，檢測(cè)方法參照相關(guān)文獻(xiàn)［9-10］方法。上述指標(biāo)均由2名檢驗(yàn)科醫(yī)師于雙盲條件下完成檢測(cè)，取其平均值作為測(cè)定結(jié)果。

1.3 研究方法 比較3組血清、腦脊液EV71抗體間差異，運(yùn)用受試者工作特征曲線（ROC）計(jì)算EV71抗體早期預(yù)測(cè)HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度、特異度，并運(yùn)用Logistic多因素回歸分析，評(píng)價(jià)腦脊液及血清EV71抗體對(duì)重癥HFMD并發(fā)腦炎的影響。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 對(duì)本研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，并采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；EV71抗體對(duì)重癥HFMD并發(fā)腦炎的影響研究采用Logistic多因素回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清及腦脊液EV71抗體水平比較 細(xì)菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平均明顯高于未合并腦炎對(duì)照組（均P＜0.05）；而細(xì)菌性腦炎組、病毒性腦炎組血清及腦脊液EV71抗體水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 3組患兒血清、腦脊液EV71抗體水平比較

表2 3組患兒血清、腦脊液EV71抗體水平比較

注：與未合并腦炎對(duì)照組比較，aP＜0.05

2.2 預(yù)測(cè)價(jià)值分析 ROC曲線顯示，腦脊液、血清EV71抗體預(yù)測(cè)重癥HFMD并發(fā)腦炎的靈敏度、特異度均較高（均P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 腦脊液與血清EV71抗體預(yù)測(cè)重癥HFMD合并發(fā)腦炎的臨床價(jià)值分析

2.3 影響因素分析 多因素Logistic回歸分析顯示，以并發(fā)腦炎為因變量，腦脊液與血清EV71抗體的影響因子均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 腦脊液與血清EV71抗體影響重癥HFMD并發(fā)腦炎的多因素回歸分析結(jié)果

3 討論

多數(shù)HFMD患兒病情呈自限性，感染后以發(fā)熱起病，1周內(nèi)即可出現(xiàn)體溫明顯下降、皮疹消退，病情恢復(fù)，但少數(shù)重癥HFMD患兒病情進(jìn)展極為迅速，發(fā)病1～4 d內(nèi)即可出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎等嚴(yán)重并發(fā)癥，病死率較高且存活患兒易遺留多種后遺癥［11-12］。近年來(lái)，我國(guó)多個(gè)省份HFMD出現(xiàn)暴發(fā)流行趨勢(shì)，HFMD防治形式愈發(fā)嚴(yán)峻。

HFMD的常見(jiàn)致病原為EV71病毒和A組柯薩奇病毒A16，均以高度嗜神經(jīng)性為主要特點(diǎn)，也是導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)嚴(yán)重并發(fā)癥的主要原因［13-14］。王喆等［15］發(fā)現(xiàn)，較非重癥HFMD患兒而言，重癥HFMD患兒心動(dòng)過(guò)速、嘔吐、肌肉陣攣、煩躁、嗜睡等癥狀發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)更高，印證了上述結(jié)論。與此同時(shí)，重癥患兒亦具有更高的腦炎發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，而腦干腦炎不僅被認(rèn)為是重癥HFMD進(jìn)展的重要階段，也是肺水腫、肺出血甚至循環(huán)衰竭的前驅(qū)表現(xiàn)。因此，重癥HFMD并發(fā)腦炎的早期診治對(duì)于避免患兒遺留智力缺陷、肢體殘疾具有重要意義。

早期腦炎的病理生理改變以腦血管周?chē)窠?jīng)壞死為主，隨著病程的進(jìn)展，廣泛性神經(jīng)壞死，累及相應(yīng)局部組織是造成腦膜刺激征、頭痛、發(fā)熱等臨床表現(xiàn)的主要原因，而Wormald等［11］發(fā)現(xiàn)，大量炎癥細(xì)胞只有在通過(guò)血管內(nèi)皮系統(tǒng)后方可進(jìn)入腦組織并誘發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)損傷的發(fā)生發(fā)展，因此，作為調(diào)控炎癥細(xì)胞的重要因子，EV71抗體可能在腦炎的發(fā)生發(fā)展中扮演了重要角色。本研究就重癥HFMD、重癥HFDM合并不同類型腦炎患兒血清與腦脊液EV71抗體進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，無(wú)論是合并細(xì)菌性腦炎還是病毒性腦炎，患兒血清與腦脊液EV71抗體水平均明顯上升，且組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明血管內(nèi)皮受損是腦炎的重要發(fā)病機(jī)制之一，而EV71抗體可通過(guò)如下機(jī)制拮抗血管內(nèi)皮直接受損與直接受損后引發(fā)的繼發(fā)性受損：作為血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)特異性的肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子，EV71抗體能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂與增殖，誘導(dǎo)體內(nèi)新生血管生成、增強(qiáng)血管通透性，達(dá)到提升微小血管、側(cè)支循環(huán)建立能力的目的。因此，EV71抗體水平升高表明血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、血腦屏障破壞嚴(yán)重，而Lteif等［13］亦指出，EV71抗體可能參與HFMD合并腦炎的發(fā)病機(jī)制，為腦炎發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的早期預(yù)測(cè)提供一定參考。

通過(guò)ROC曲線與Logistic多因素回歸分析可以發(fā)現(xiàn)，血清與腦脊液EV71抗體是影響重癥HFMD并發(fā)腦炎的危險(xiǎn)因素，且根據(jù)EV71抗體水平變化能夠預(yù)測(cè)患兒腦炎發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，與陳秀麗等［7］觀點(diǎn)一致。同時(shí)，由于血清、腦脊液EV71抗體預(yù)測(cè)重癥HFMD并發(fā)腦炎的能力相仿，加之腰椎穿刺取腦脊液檢查痛苦大、安全性受限等弊端，血清EV71抗體檢測(cè)有望在重癥HFMD并發(fā)腦炎的預(yù)測(cè)中得到更為廣泛的關(guān)注。此外，Stammberger等［9］發(fā)現(xiàn)，血清EV71抗體水平變化與HFMD患兒病情變化存在一定相關(guān)性，為HFMD患兒病情進(jìn)展的預(yù)測(cè)提供了新的思路，關(guān)于EV71抗體與HFMD患兒預(yù)后關(guān)聯(lián)性的研究，有待日后大樣本、多中心分析加以明確。

綜上所述，重癥HFMD并發(fā)腦炎患兒血清、腦脊液EV71抗體水平明顯升高，根據(jù)血清EV71抗體變化能夠有效預(yù)測(cè)患兒并發(fā)腦炎風(fēng)險(xiǎn)，為臨床早期診治提供可靠的參考，值得進(jìn)一步關(guān)注。

1 吳亦棟，陳東，周俊，等.腸道病毒71型重癥手足口病患兒腦脊液IgM抗體測(cè)定的臨床意義［J］.中華兒科雜志，2015，53（5）：355-359.

2 翟凱齊，張麗娜. 2014年某醫(yī)院6 224例手足口病病原學(xué)分析［J］.實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志，2015，7（1）：60-62.

3 郁建江，周劍波，陸忠民. EV71-IgM抗體陽(yáng)性的手足口病患兒免疫球蛋白血糖和腦脊液檢測(cè)結(jié)果分析［J］.職業(yè)與健康，2012，28（20）：封2-封3.

4 周立新,李軼男,麥志廣，等.危重型手足口病合并急性肺水腫患兒的臨床特點(diǎn)［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2015，27（7）：563-567.

5 杜開(kāi)先，董燕，羅予，等. EV71手足口病重癥患兒腦脊液IL-2、IL-6的測(cè)定與意義［J］.中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2014，17（13）：57-58.

6 黃月艷，柳國(guó)勝，韋葉生等.重癥手足口病患兒血清S100B和NSE水平與顱腦MRI的診斷［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2016，28 （11）：1019-1022.

7 陳秀麗，周朱瑛，李光乾，等. EV71腦炎患兒血清和腦脊液IL-1β、IL-1rα的變化及臨床意義［J］.實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2016，23（2）：154-157.

8 翟凱齊，張麗娜，高巍，張漢濤.血清S100β蛋白及NSE聯(lián)合檢測(cè)在手足口病腦損傷診斷中的臨床價(jià)值［J］.實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志，2015，7（3）：173-176.

9 Stammberger HR，Kennedy DW. Paranasal sinuses:anatomic terminology and nomenclature ［J］. Ann Otol Rhinol Laryngol Suppl，1995，167：7-16.

10 王偉群，王孫堯.手足口病患兒血清免疫球蛋白A檢測(cè)的臨床意義［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志，2012，19（1）：42-43.

11 Wormald PJ. The agger nasi cell: the key to understanding the anatomy of the frontal recess［J］. Otolaryngol Head Neck Surg，2003，129（5）：497-507.

12 徐梅先，張軍橋，閆春明.腸道病毒71感染致危重型手足口病的研究進(jìn)展［J］. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志，2013，20（6）：382-384.

13 Lteif AA，Han K，Mather KJ. Obesity, insulin resistance, and the metabolic syndrome: determinants of endothelial dysfunction in whites and blacks ［J］. Circulation，2005，112（1）：32-38.

14 劉雪雁，張昊，王婉奕，等.手足口病合并神經(jīng)系統(tǒng)受累23例臨床分析［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2010，22（4）：246-247.

15 王喆，李穎，任彥.烏司他丁聯(lián)合正壓通氣治療危重型手足口病患兒臨床觀察［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2013，25（3）：177-178.

The significance of cerebrospinal fluid EV71 antibody detection in severe hand-foot-mouth disease and encephalitis

Liu Na, Wang Xianyu, He Xieling, Qin Yabin.
Clinical Laboratory Center, Hunan Children's Hospital, Changsha 410007, Huan, China

ObjectiveTo analyze the value of cerebrospinal fluid enterovirus 71 (EV71) antibody in the early prediction of severe hand-foot-mouth disease (HFMD) complicated with encephalitis.MethodsA total of 224 children with severe HFMD who were treated in our hospital from March 2015 to March 2017 were selected for inclusion in the unrelated encephalitis control group (n = 72) and the combined encephalitis group (n = 86) and combined with viral encephalitis (n = 66). The serum and cerebrospinal fluid EV71 antibody levels were measured and the sensitivity of the EV71 antibody was predicted by the receiver operating characteristic curve (ROC).Specificity, and logistic multivariate regression analysis was used to evaluate the effect of serum EV71 antibody on severe HFMD complicated with encephalitis.ResultsThe level of EV71 antibody in serum and cerebrospinal fluid in patients with bacterial encephalitis and viral encephalitis was higher than that in unrelated encephalitis control group [serum EV71 antibody (μg/L): 403.5±19.6, 397.1±20.8 vs. 115.9±32.4, cerebrospinal fluid EV71 antibody (P ＜ 0.05), while the levels of EV71 antibody in the serum and cerebrospinal fluid of the bacterial encephalitis group and the viral encephalitis group were significantly higher than those in the control group (P ＜ 0.05),and the difference was statistically significant (P ＜ 0.05). The difference was not statistically significant (P ＞ 0.05).ROC curve showed that cerebrospinal fluid and serum EV71 antibody predicted the sensitivity (87.83%, 85.16%)and specificity (90.52%, 89.33%) of severe HFMD complicated encephalitis respectively (all P ＜ 0.05). Multivariate logistic regression analysis showed that the influencing factors of cerebrospinal fluid and serum EV71 antibody were statistically significant (P ＜ 0.05).ConclusionsSevere HFMD complicated with encephalitis can damage thebrain tissue of children, and cause cerebrospinal fluid, serum EV71 antibody level increased significantly. Serum EV71 antibody detection is simple and noninvasive, is expected to play an important role in the early prediction of severe HFMD concurrent encephalitis.

Cerebrospinal fluid EV71 antibody; Severe hand-foot-mouth disease; Encephalitis; Pred iction value

2017-06-21）

（本文編輯：楊程伍 李銀平）

410007 湖南長(zhǎng)沙市，湖南省兒童醫(yī)院檢驗(yàn)中心

Liu Na，Email：hunanzfq@126.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.03.011

Corresponding author: Liu Na, Email: hunanzfq@126.com