參芪扶正注射液聯(lián)合胸腺五肽對卵巢癌腹腔熱化療大鼠細胞免疫功能的影響

李波 陳曉慶 張曉光 韓麗維

參芪扶正注射液聯(lián)合胸腺五肽對卵巢癌腹腔熱化療大鼠細胞免疫功能的影響

李波 陳曉慶 張曉光 韓麗維

目的探討參芪扶正注射液聯(lián)合胸腺五肽對經(jīng)腹腔熱化療治療的卵巢癌大鼠免疫功能的影響。方法42只卵巢癌大鼠成功建模后隨機分為對照組和觀察組, 每組21只。兩組大鼠均進行腹腔熱化療(順鉑)并同時給予胸腺五肽治療, 在此基礎(chǔ)上給予觀察組大鼠參芪扶正注射液, 共進行3 周。比較兩組大鼠治療前后細胞免疫功能變化。結(jié)果治療前兩組大鼠體重比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；治療后兩組大鼠體重均明顯高于治療前, 但觀察組(153.48±23.54)g低于對照組(166.57±16.54)g, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。兩組大鼠治療前CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；兩組大鼠治療后血清CD3、CD4與CD4/CD8有所降低、CD8有所升高, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；治療后觀察組大鼠的血清CD3、CD4、CD4/CD8水平明顯高于對照組、CD8明顯低于對照組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結(jié)論卵巢癌大鼠行腹腔熱化療后給予參芪扶正注射液聯(lián)合胸腺五肽, 對于改善卵巢癌大鼠的細胞免疫功能有一定幫助。

卵巢癌；參芪扶正注射液；胸腺五肽；腹腔熱化療；免疫功能

卵巢癌早期臨床癥狀不明顯, 而患者到晚期死亡率很高, 在婦科所有惡性腫瘤之中死亡率居首。往往采取手術(shù)結(jié)合放化療等綜合治療來治療卵巢癌, 但是效果仍然不理想, 因此需要尋找新的方案［1］。腹腔熱化療(intraperitoneal hyperthermic chemotherapy, IPHC)近年來常用于配合手術(shù)治療腹腔惡性腫瘤, 因卵巢癌患者發(fā)生腹腔內(nèi)浸潤轉(zhuǎn)移率較高,并且對熱化療敏感［2］, 所以作者選擇了腹腔熱化療進行研究,現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源 選用近交系健康雌性Fischer344大鼠42只,周齡8~10 周, 體重120~150 g；NuTu19卵巢癌細胞株(上海紀寧生物科研有限公司)。喂養(yǎng)普通顆粒飼料, 自由取食飲水,人工控溫20~26℃, 12 h光照, 12 h黑暗。

1.2 細胞培養(yǎng)方法 在RPMI-1640培養(yǎng)液(含10%小牛血清)中接種NuTu-19細胞, 并置于CO2培養(yǎng)箱中、溫度37℃。

1.3 建立Fischer344大鼠上皮性卵巢癌動物模型方法 用胰酶消化所培養(yǎng)出來的對數(shù)生長期NuTu-19細胞并調(diào)整細胞計數(shù), 將細胞(5×106/只)注射入大鼠腹腔中, 然后再SPF條件飼養(yǎng), 飼養(yǎng)3周后進行分組治療處理［3］。本組42只大鼠均建模成功, 隨機分為觀察組與對照組, 各21只。

1.4 腹腔熱化療治療方案 根據(jù)NuTu-19細胞的生物學特征［3］, 以及體外細胞藥敏實驗證實對順鉑敏感性高［半抑制濃度(IC50)值=0.83μg/ml］, 因此可將將腹腔順鉑注射液用生理鹽水調(diào)整為濃度0.83μg/ml。每日給予兩組大鼠腹腔注射輔助性的免疫增強劑［胸腺五肽1 mg/(kg·d)］、20 ml 的順鉑(0.83μg/ml )一次性腹腔灌注(每周三進行, 1次/周),灌注液溫度維持在43℃, 連續(xù)進行以上給藥方案3周。觀察組在對照組基礎(chǔ)上給予參芪扶正注射液［每天腹腔給予注射參芪扶正注射液3 ml/(kg·d)］腹腔注射。

1.5 觀察指標 測定細胞免疫指標, 使用流式細胞儀細胞計數(shù)儀檢測兩組治療前后外周血T細胞亞群(CD3、CD4、CD8)的水平, 并計算CD4/CD8數(shù)值；比較兩組治療前后體重水平。

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差表示, 采用t檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組大鼠治療前后體重比較治療前兩組大鼠體重比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；治療后兩組大鼠體重均明顯高于治療前, 但觀察組(153.48±23.54)g低于對照組(166.57±16.54)g, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組大鼠治療前后體重比較, g)

表1 兩組大鼠治療前后體重比較, g)

注：與治療前比較,aP＜0.05；與對照組比較,bP＜0.05

組別 只數(shù) 治療前 治療后對照組 21 142.32±19.49166.57±16.54a觀察組 21 148.57±20.34 153.48±23.54ab

2.2 兩組大鼠治療前后細胞免疫功能比較兩組大鼠治療前CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；兩組大鼠治療后血清CD3、CD4與CD4/CD8有所降低、CD8有所升高, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；治療后觀察組大鼠的血清CD3、CD4、CD4/CD8水平明顯高于對照組、CD8明顯低于對照組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組大鼠治療前后細胞免疫功能比較

表2 兩組大鼠治療前后細胞免疫功能比較

注：與治療前比較,aP＜0.05；與對照組比較,bP＜0.05

測量指標 組別 只數(shù) 治療前 治療后CD3(%) 對照組 21 73.27±10.2362.43±9.78a觀察組 21 72.92±9.56 67.32±9.43abCD4(%) 對照組 21 44.78±6.5432.47±5.78a觀察組 21 45.32±7.76 37.32±4.74abCD8(%) 對照組 21 31.54±4.4334.34±4.48a觀察組 21 31.32±3.63 32.48±4.38abCD4/CD8 對照組 21 1.42±0.31 1.03±0.21a觀察組 21 1.46±0.21 1.22±0.23ab

3 討論

約有90%的卵巢惡性腫瘤來源于上皮細胞, 早期臨床癥狀不明顯, 發(fā)現(xiàn)時已進入晚期, 因此腹腔轉(zhuǎn)移率高, 5年生存率(約30%)較低, 腫瘤的分化程度、病理類型是影響其惡性程度的重要原因［4］。腹腔熱化療適用于Ⅱ期以上卵巢癌的治療。盆腔種植轉(zhuǎn)移與播散是卵巢癌主要轉(zhuǎn)移途徑, 手術(shù)困難且創(chuàng)面較大, 因腹腔熱化療在臨床上廣泛使用, 在治療術(shù)后復(fù)發(fā)患者中有著較好的臨床療效［5］。順鉑使用歷史較悠久,且臨床效果較好, 但是該藥不良反應(yīng)(骨髓抑制、胃腸反應(yīng)為主)較多限制了該藥的臨床使用［6］。參芪扶正注射液是一類含有抗腫瘤的生物活性物質(zhì), 大量研究顯示：該物質(zhì)具有多種抗腫瘤活性, 能誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡與抑制新生血管的生成, 且能增強機體自身免疫功能, 臨床廣泛使用［7］。胸腺五肽屬于人工合成的免疫調(diào)節(jié)劑, 能通過調(diào)節(jié)T淋巴細胞亞群的分化比例來調(diào)節(jié)免疫［8-10］。

T淋巴細胞主要負責細胞免疫反應(yīng), 而由于腫瘤細胞浸潤與化療手術(shù)的創(chuàng)傷造成惡性腫瘤患者外周血清淋巴細胞與白細胞濃度降低, 惡性腫瘤患者被臨床研究證實外周血清T淋巴細胞亞群濃度降低［11,12］。本實驗結(jié)果顯示：兩組CD3、CD4與CD4/CD8于治療后有所降低(P＜0.05), 而CD8于治療后有所升高(P＜0.05)；觀察組治療后CD3、CD4與CD4/CD8高于對照組(P＜0.05), 而CD8低于對照組(P＜0.05), 說明兩組大鼠化療后的體液免疫與細胞免疫均有所降低, 而在此基礎(chǔ)上給予了參芪扶正注射液的觀察組, 能夠明顯的提高大鼠的細胞免疫功能。

［1］ 邢堃, 孔為民.卵巢癌放療的現(xiàn)狀和進展.現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展,2015, 24(1):69-71.

［2］ 尹艷英.腹腔熱化療對大鼠卵巢癌血清CA125表達水平影響的研究.齊齊哈爾醫(yī)學院學報, 2010, 31(22):3529-3532.

［3］ Gurkan ZC, Eylem SAP.Hyperthermia in gynecologic cancers.European Journal of Gynaecological Oncology, 2003, 24(3-4):282.

［4］ Conti M, De GU, Tazzari V, et al.Clinical pharmacology of intraperitoneal cisplatin-based chemotherapy.J Chemother, 2004,16 (Suppl 5):23-25.

［5］ Hildebrandt B, Wust P, Ahlers O, et al.Thecellular and mo-lecular basis of hyperthermia.Crit Rev Oncol Hematol, 2002, 43(1):33-56.

［6］ 池麗芬, 李民駒.順鉑腹腔熱灌注化療與其他用藥方式藥代動力學比較.實用腫瘤雜志, 2000, 15(3):179-182.

［7］ 劉孟娟, 周陳西, 王增, 等.參芪扶正注射液在卵巢上皮癌術(shù)后化療中的骨髓功能保護作用.中國藥房, 2011, 22(4):340-341.

［8］ 李剛.胸腺五肽對胃癌化療患者CD4+CD25+Treg細胞的影響及臨床意義.中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學專業(yè)), 2011, 13(13):244-245.

［9］ 趙偉, 姜勇, 曹龍濱, 等.胸腺五肽對腎癌患者圍手術(shù)期細胞免疫功能的影響.山東醫(yī)藥, 2016(1):47-48.

［10］ 謝婧, 張長平, 王詠梅.胸腺五肽輔助用藥的臨床有效性循證評價.中國新藥雜志, 2015(22):2599-2605.

［11］ 陸春偉, 佟海俠, 王秋實.惡性腫瘤患者外周血淋巴細胞亞群和調(diào)節(jié)性T細胞的檢測及臨床意義.醫(yī)學臨床研究, 2011,28(1):17-19.

［12］ Jemal A, Bray F, Center MM, et al.Global cancer statistics.CA Cancer J Clin, 2011, 62 (2):69-90.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.18.111

2017-07-17］

121000 武警遼寧省總隊錦州市支隊衛(wèi)生隊(李波)；錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院(陳曉慶)；武警遼寧省總隊朝陽市支隊衛(wèi)生隊(張曉光)；武警遼寧省總隊醫(yī)院醫(yī)務(wù)處(韓麗維)