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    化痰通絡(luò)湯對MCAO大鼠腦保護(hù)作用及HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路的影響*

    2017-09-28 08:18:27姚欣艷王迎春高曉峰
    中國中醫(yī)急癥 2017年9期
    關(guān)鍵詞:通絡(luò)中風(fēng)腦組織

    姚欣艷 王迎春 高曉峰 劉 侃

    (1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,湖南 長沙,410007;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南 長沙410208)

    化痰通絡(luò)湯對MCAO大鼠腦保護(hù)作用及HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路的影響*

    姚欣艷1△王迎春2高曉峰2劉 侃2

    (1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,湖南 長沙,410007;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南 長沙410208)

    目的 基于HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路探討化痰通絡(luò)湯對腦缺血再灌注(MCAO)大鼠腦保護(hù)作用。方法 將54只SD大鼠隨機分成假手術(shù)組、模型組、化痰通絡(luò)湯組,其中模型組及化痰通絡(luò)湯組行MCAO術(shù),各組均于灌胃1 d、3 d、7 d后取材;比較各組大鼠神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、腦含水量、腦組織高遷移率族蛋白 l(HMGB1)、Toll樣受體 4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表達(dá)及炎癥因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)含量。 結(jié)果 各時間點神經(jīng)功能缺損評分比較顯示,化痰通絡(luò)湯組較模型組有明顯下降,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01);腦梗死體積比較顯示,化痰通絡(luò)湯組在各時間點腦梗死體積均小于模型組,組間比較具有明顯差異(P<0.01);化痰通絡(luò)湯組1 d、3 d、7 d腦組織HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)均低于模型組,組間比較有明顯差異(P<0.05或P<0.01);化痰通絡(luò)湯組1 d、3 d、7 d腦組織炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量均低于模型組,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01);結(jié)論 化痰通絡(luò)湯對MACO大鼠的腦保護(hù)作用機制可能是通過抗炎癥反應(yīng)、阻斷HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路實現(xiàn)的。

    缺血性中風(fēng) 化痰通絡(luò)湯 HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路

    缺血性腦血管病具有高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率。了解其病理生理變化,對研究中藥及其復(fù)方防治缺血性腦病具有重要意義[1]。筆者采用化痰通絡(luò)湯治療缺血性中風(fēng)屢獲良效,臨床隨機對照研究發(fā)現(xiàn)化痰通絡(luò)湯能明顯降低腦卒中患者神經(jīng)功能缺損評分及中醫(yī)證候積分,總有效率達(dá)到94.29%[2]。在急性腦缺血病發(fā)生后,局部缺血會刺激高遷移率族蛋白l(HMGB1)的釋放,其參與并擴大炎癥反應(yīng)[3]。Toll樣受體 4(TLR4)可通過識別侵入體內(nèi)的微生物進(jìn)而激活免疫細(xì)胞的應(yīng)答,其與炎癥有關(guān),并且參與了腦缺血的過程。腦缺血后核因子-κB(NF-κB)的過度表達(dá)又可調(diào)節(jié)促炎細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子等相關(guān)基因,使其高表達(dá)[4]。HMGB1與TLR4結(jié)合后相互作用,從而促進(jìn)下游信號NF-κB的激活,進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)及腦缺血損傷[5]。因此,HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路是導(dǎo)致炎癥反應(yīng)激活、加重腦組織損傷的重要途徑[6]。本實驗主要采用Longa改良線栓法制造大鼠MCAO模型,通過觀察化痰通絡(luò)湯對MCAO大鼠HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路及炎癥介質(zhì)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-lβ)、白介素-6(IL-6)含量的影響,探討其在腦缺血后調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)較為確切的作用途徑,為缺血性中風(fēng)的急性期早期使用具有腦保護(hù)作用的中藥制劑提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物 雄性健康SPF級SD大鼠54只,體質(zhì)量(260±20)g,購于湖南中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心,許可證號SYXK(湘)2014-0003,飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)SPF級實驗動物中心,許可證號SYXK(湘)2009-0001。自然籠養(yǎng),室溫控制在22℃,12 h光照/黑暗循環(huán),自由進(jìn)水進(jìn)食。適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后開始實驗。

    1.2 實驗藥物 化痰通絡(luò)湯(陳皮10 g,法半夏9 g,茯苓 10 g,枳實 10 g,竹茹 10 g,膽南星 6 g,天麻 10 g,僵蠶 10 g,全蝎 5 g,地龍 10 g,雞血藤 15 g,熟大黃 3 g,甘草6 g,蜈蚣1條)。藥材購自湖南省中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,一煎加水500 mL煎汁150 mL;二煎加水300 mL煎汁150 mL;煎1 h后,取2次煎汁混合,熬成膏狀(含生藥2 g/mL),冷藏備用。灌胃液體量為1.4 mL/100 g大鼠,其濃度及等效劑量按體表面積折算。

    1.3 試劑與儀器 眼科解剖鑷、眼科手術(shù)剪、無創(chuàng)微動脈夾、持針器、血管鉗、天平稱 (千分之一克)、2,3,5-氯化三苯基四氮唑、10%水合氯醛、4%多聚甲醛、-80℃冰箱、Bio-rad凝膠成像分析儀(上海醫(yī)療儀器廠)、臺式離心機(杭州匯爾儀器廠)、超薄組織切片機(北京冠普佳科技有限公司)、ELISA試劑盒(上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司)。1.4 模型制備 采用血管腔內(nèi)插線法即Longa法[7]制備大鼠MACO模型:動物禁水、食后采用10%水合氯醛(0.35 mL/kg)腹腔注射麻醉,然后頸部腹側(cè)正中切口暴露頸總動脈,分離頸內(nèi)動脈和頸外動脈分叉處,結(jié)扎頸內(nèi)動脈和頸外動脈近端,然后在頸總動脈稍遠(yuǎn)端剪一約0.2 mm小孔,將直徑0.20 mm的單股魚線(頭端預(yù)先加熱成直徑約0.26~0.30 mm的圓頭)緩慢插入頸內(nèi)動脈大約18~20 mm,感覺到有輕微的阻力,此時插線源頭到達(dá)Willis環(huán)頸內(nèi)動脈末端分叉處,阻塞大腦中動脈起始部位。術(shù)中保持大鼠肛溫37℃。模型制作如遇麻醉、蛛網(wǎng)膜下腔出血和手術(shù)操作等原因造成的動物死亡,隨機補充體質(zhì)量近似的大鼠。手術(shù)完畢后,將大鼠單籠飼養(yǎng),蓋上墊料、調(diào)高室溫,讓其自然清醒。插線2 h后再次將大鼠麻醉,用直頭鑷夾住露出皮膚的栓線尾部柔和緩慢的抽出,當(dāng)栓線球前端遇到頸內(nèi)動脈結(jié)扎線時會有阻力,即停止拔線,剪除栓線的殘余末端。大鼠清醒后可以自由進(jìn)食、進(jìn)水。

    1.5 分組及給藥 本實驗共分為假手術(shù)組、模型組、化痰通絡(luò)湯組,將造模成功后的大鼠按隨機數(shù)字表法分為模型組、化痰通絡(luò)湯組。假手術(shù)組除不插線外,全過程同其他各組。各組按處死時間分為缺血再灌注后1 d、3 d、7 d 3個時相組,每個組每個時相保證造模成功6只動物。假手術(shù)組、模型組予灌胃等量蒸餾水,化痰通絡(luò)湯組予化痰通絡(luò)湯灌胃。中藥劑量根據(jù)成人每日服用145 g生藥劑量進(jìn)行體表面積比值換算,灌藥體積均為20 mL/kg,每日灌胃1次。經(jīng)過預(yù)實驗已證明本方中藥劑量因素對藥效的影響無顯著性差異,因此實驗中只選用臨床常規(guī)使用的中藥劑量。

    1.6 標(biāo)本采集與檢測

    1.6.1 神經(jīng)功能缺損評分 各組于動物清醒后2 h后及處死前采用改良大鼠神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度評分量表(m-NSS)[7-8]進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分,各指標(biāo)評分 3次取均值納入結(jié)果。

    1.6.2 腦梗死體積測定 采用TTC染色法[9]。大鼠處死后迅速取出腦組織,從前囟前2 mm處,每隔2 mm做一冠狀切片,共切取5個層面。將切片浸泡于2%TTC溶液中,37℃,30 min,每5min輕輕震蕩數(shù)次。采用Image J圖像分析軟件計算每片腦組織梗死面積,總梗死體積=總梗死面積×腦片厚度(2 mm),并通過修正公式計算腦梗死體積百分比:梗死體積百分比(%)={[總梗死體積-(梗死側(cè)半球體積-梗死對側(cè)半球體積)]/梗死對側(cè)半球體積}×100%[10]。

    1.6.3 腦含水量測定 按不同時相斷頭取腦,左右半腦分開,用濾紙吸干表面水分,分別稱量左右腦濕質(zhì)量,放置烤箱95℃烘烤48 h至恒重,精確稱量干質(zhì)量后,依據(jù)下式計算腦水含量:腦水含量=(濕質(zhì)量-干質(zhì)量)/濕質(zhì)量×100%。

    1.6.4 Western Blot法檢測腦組織HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路中蛋白表達(dá) 取各組凍存于-80℃冰箱的腦組織,加入細(xì)胞裂解液后采用超聲勻漿15 min,離心5 min,取上清,BCA試劑盒檢測蛋白濃度。各組取上清制備50 μg蛋白,聚丙烯酰胺凝膠電泳,轉(zhuǎn)NC膜, 分別加入 HMGB1、TLR4、NF-κB 一抗抗體,37 ℃孵育2 h;TBST洗膜3次,分別加入辣根酶標(biāo)記二抗,37℃孵育1 h,TBST洗膜,ECL發(fā)光液顯色。以βaction 作為內(nèi)參計算各組 HMGB1、TLR4、NF-κB 條帶的灰度比值。

    1.6.5 ELISA 法檢測腦組織 IL-1β、IL-6、TNF-α 含量收集各組缺血腦組織,研磨成勻漿,加0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)至 5 mL,3000 r/min 離心 3 min,取上清液進(jìn)行檢測。采用ELISA法檢測上清液IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。實驗步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

    1.7 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件。符合正態(tài)分布及方差分析,計量資料以(±s)表示,兩樣本均數(shù)的比較采用成組t檢驗,多個樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析,檢驗水準(zhǔn)取α=0.05。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 各組大鼠神經(jīng)功能缺損評分比較 見表1。與治療前比較,模型組及化痰通絡(luò)湯組在各時間點神經(jīng)功能缺損評分均有下降,組內(nèi)前后比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)。與模型組同時間點比較顯示,化痰通絡(luò)湯組在給藥后第1、3、7天神經(jīng)功能缺損評分下降更顯著,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。

    表1 各組不同時間點神經(jīng)功能缺損分值比較(分s)

    表1 各組不同時間點神經(jīng)功能缺損分值比較(分s)

    與本組治療前比較,*P<0.05,**P<0.01;與模型組比較,△P<0.05,△△P<0.01。 下同。

    組 別 給藥3 d 給藥7 d假手術(shù)組 0 0治療前 給藥1 d 0 0模型組 8.01±0.71** 6.87±0.64**n 6 6 10.00±0.71 9.16±0.56*化痰通絡(luò)湯組 6 9.87±0.83 8.03±0.86*△ 7.00±0.75**△ 5.19±0.76**△△

    2.2 各組大鼠腦梗死體積百分比比較 見表2。腦梗死體積比較顯示,給藥后化痰通絡(luò)湯組腦梗死體積百分比小于模型組,組間比較具有明顯差異(P<0.05或P<0.01)。

    表2 各組大鼠腦梗死體積百分比比較(%s)

    表2 各組大鼠腦梗死體積百分比比較(%s)

    組 別 給藥3 d 給藥7 d假手術(shù)組 0 0給藥1 d 0模型組 45.34±4.21 42.73±2.27 n 6 6 50.34±4.69化痰通絡(luò)湯組 6 46.04±2.83*△ 41.01±2.79**△△ 35.06±2.61**△△

    2.3 各組大鼠腦組織含水量比較 見表3。與模型組相比,給藥后化痰通絡(luò)湯組腦組織含水量小于模型組,組間比較有顯著差異(P<0.05或P<0.01)。

    表3 各組大鼠腦組織含水量比較(%s)

    表3 各組大鼠腦組織含水量比較(%s)

    組 別 給藥3 d 給藥7 d假手術(shù)組 72.23±6.71 72.12±3.91給藥1 d 71.12±5.50模型組 83.13±7.42* 82.40±6.31*n 6 6 80.41±6.32*化痰通絡(luò)湯組 6 74.80±5.81*△ 77.60±8.13*△ 77.31±3.42*△

    2.4 各組大鼠HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)比較見表 4,圖 1。 假手術(shù)組 HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白在各時間點表達(dá)均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),組內(nèi)各時間點比較顯示,模型組、化痰通絡(luò)湯組給藥1 d、3 d及7 d HMGB1、TLR4、NF-κB 表達(dá)逐漸降低,組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)?;低ńj(luò)湯組與模型組相應(yīng)時間點組間比較顯示,化痰通絡(luò)湯組HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白在各時間點表達(dá)均低于模型組,組間比較有明顯差異(P<0.05或P<0.01)。

    表 4 各組大鼠 HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白表達(dá)比較(s)

    表 4 各組大鼠 HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白表達(dá)比較(s)

    組 別 時 間 NF-κB假手術(shù)組 1 d 0.11±0.01 HMGB1 TLR4 0.14±0.02 0.21±0.04(n=6) 3 d 0.09±0.01 0.15±0.02 0.19±0.03 7 d 0.15±0.01 0.20±0.04 0.10±0.01模型組 1 d 1.17±0.10**0.87±0.13** 1.20±0.10**(n=6) 3 d 0.98±0.08**&&0.53±0.10**&& 0.60±0.08**&7 d 0.40±0.04**&& 0.50±0.06**&& 0.72±0.06**&&化痰通絡(luò)湯組 1 d 0.66±0.03**△△ 0.67±0.05**△ 0.62±0.05**△△(n=6) 3 d 0.43±0.06**△△&&0.49±0.06**△△&&0.53±0.06**△△&&7 d 0.32±0.02**△△&&0.39±0.07**△△&&0.45±0.07**△△&&

    圖1 各組大鼠腦組織HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)

    2.5 各組大鼠 TNF-α、IL-lβ、IL-6含量比較 見表5。 假手術(shù)組 TNF-α、IL-lβ、IL-6含量在各時間點差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);模型組大鼠患側(cè)腦組織炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6均明顯升高?;低ńj(luò)湯組與模型組相應(yīng)時間點組間比較顯示,化痰通絡(luò)湯組TNF-α、IL-1β、IL-6含量在各時間點均低于模型組,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。

    表 5 各組大鼠 TNF-α、IL-1β、IL-6 含量比較(pg/gs)

    表 5 各組大鼠 TNF-α、IL-1β、IL-6 含量比較(pg/gs)

    組 別 時間 IL-6假手術(shù)組 1 d 36.44±18.57*TNF-α IL-lβ 72.00±10.96**42.47±11.31*(n=6) 3 d 36.41±17.97*71.88±10.93**42.49±11.29*7 d 72.03±10.91**42.50±10.89* 35.94±17.82*模型組 1 d 72.10±27.54 136.88±24.60 88.15±11.50(n=6) 3 d 71.90±25.34 137.18±25.80 87.25±13.80 7 d 135.37±23.80 86.75±13.76 72.23±26.66化痰通絡(luò)湯組 1 d 82.35±14.50**53.87±10.53**42.53±8.69*(n=6) 3 d 81.15±13.76**52.07±11.06**42.44±9.60*7 d 80.32±17.53**51.21±13.07**41.94±7.62*

    3 討 論

    腦缺血再灌注損傷后早期產(chǎn)生的炎癥因子構(gòu)成了缺血性損傷向炎癥性損傷轉(zhuǎn)變的基礎(chǔ),其在缺血級聯(lián)反應(yīng)中的作用越來越受到重視[11]。近年來,隨著臨床和實驗研究的進(jìn)展,已經(jīng)證明多種炎癥因子在缺血性腦損傷發(fā)病過程中起十分重要的作用[12]。研究發(fā)現(xiàn):腦缺血損傷炎癥病理與HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路相關(guān)炎癥因子密切相關(guān),其中HMGBl由細(xì)胞核釋放至胞外,與細(xì)胞膜上的Toll樣受體結(jié)合,通過不同途徑激活 NF-κB,誘生炎癥因子 TNF-α、IL-1β、IL-6 等的表達(dá)以及HMGB1的進(jìn)一步釋放,刺激趨化因子、細(xì)胞因子和黏附分子的釋放,破壞上皮屏障,介導(dǎo)炎癥反應(yīng)并導(dǎo)致炎癥反應(yīng)擴大[13]。

    本實驗采用線栓法制造大鼠MCAO模型,通過比較各組大鼠給藥后神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死范圍、腦含水量、腦組織HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)及炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量,探討了化痰通絡(luò)湯對MCAO大鼠腦組織中信號通路、炎癥因子的影響。結(jié)果顯示:假手術(shù)組在無炎癥刺激狀態(tài)下,各細(xì)胞因子均處于低水平表達(dá);而模型組大鼠再灌注后缺血側(cè)腦組織出現(xiàn)明顯的梗死灶(P<0.01)、缺血側(cè)腦組織含水量明顯增多 (P<0.01)、 缺血區(qū)腦組織 HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)明顯增多 (P<0.01)、缺血區(qū)腦組織TNF-α、IL-1β、IL-6 含量明顯增多(P<0.01),證實炎癥級聯(lián)反應(yīng)參與腦缺血再灌注損傷;化痰通絡(luò)湯對MACO大鼠的影響為:化痰通絡(luò)湯可減少MACO大鼠腦梗死范圍、減輕MACO大鼠腦水腫程度、減少缺血側(cè) HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白的表達(dá)及減少 TNF-α、IL-1β、IL-6的釋放。

    中醫(yī)理論認(rèn)為缺血性中風(fēng)的病位在腦,與心肝脾腎密切相關(guān)。其病機則不外“風(fēng)、痰、火、氣、瘀、虛”六端,臨床研究發(fā)現(xiàn),痰濁和瘀血是缺血性中風(fēng)的主要病理產(chǎn)物和致病因素,而中風(fēng)之痰瘀又與病理狀態(tài)下人體免疫系統(tǒng)及凝血系統(tǒng)等異常反應(yīng)密切相關(guān)[14]。急性腦缺血時 TNF-α、IL-1β、IL-6炎性細(xì)胞因子表達(dá),局部活化的炎癥反應(yīng)及出血、凝血反應(yīng)等可能均屬于中醫(yī)痰瘀證范疇?,F(xiàn)代臨床及實驗研究顯示:痰瘀同治法對急性缺血性中風(fēng)痰瘀阻絡(luò)型的臨床療效確切[15]?;低ńj(luò)湯由陳皮、法半夏、茯苓、枳實、竹茹、膽南星、天麻、僵蠶、全蝎、地龍、雞血藤、熟大黃、甘草、蜈蚣組成。方中以法半夏燥濕化痰,陳皮理氣化痰,二者為君藥合用,增強燥濕化痰之力,體現(xiàn)治痰先理氣,氣順則痰消之意。佐以茯苓健脾利濕,健脾以杜生痰之源,利濕以助化痰之力;膽南星清熱化痰,既助半夏化痰,又息風(fēng)定驚;竹茹善于滌痰,與法半夏相伍,一涼一溫,化痰和胃、除煩止嘔;地龍、蜈蚣、全蝎、僵蠶為蟲類藥,搜風(fēng)通絡(luò)之力極強,均能化痰息風(fēng)、通絡(luò)止痙,其中地龍、蜈蚣、全蝎長于活血通絡(luò),僵蠶長于化痰息風(fēng),合而用之,力專而效著;再佐酒大黃通腑、活血逐瘀,腑氣暢通,痰火得以清化;枳實辛苦微寒,消痰除痞、降氣導(dǎo)滯,枳實與陳皮相和,亦為一溫一涼,而理氣化痰之力增強,且與熟大黃合用蕩滌腸胃;再添天麻祛風(fēng),雞血藤養(yǎng)血活血、通經(jīng)活絡(luò);甘草益氣健脾,以固其本,使?jié)駸o所聚,痰無所生,兼能調(diào)和諸藥[16]。綜合全方,溫涼兼進(jìn),共奏具有化痰祛瘀、息風(fēng)通絡(luò)之良效。因此,化痰通絡(luò)湯可以減少缺血性中風(fēng)急性發(fā)作時瘀、痰等病理產(chǎn)物,從而達(dá)到對缺血性中風(fēng)的腦保護(hù)作用。

    綜上所述,化痰通絡(luò)湯可能是通過阻斷HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路,抑制炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表達(dá),從而發(fā)揮腦保護(hù)作用。

    [1]李小玲,李水琴.中西醫(yī)結(jié)合治療缺血性中風(fēng)后偏癱臨床觀察[J].湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2016,18(5):69-70.

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    Effects of Huatan Tongluo Decoction on HMGB1-TLR4-NF-κB Signal Pathway in Rats with Cerebral Protection in MCAO Rats

    YAO Xinyan,WANG Yingchun,GAO Xiaofeng,et al.The First Affiliated Hospital

    of Hunan University of Chinese Medicine,Hunan,Changsha 410007,China.

    Objective: To explore the protective effect of Huatan Tongluo Decoction on cerebral ischemia reperfusion(MCAO) rats,based on the HMGB1-TLR4-NF-κB signaling pathway.Methods: 54 SD rats were randomly divided into the sham operation group,the model group,Huatan Tongluo Decoction group.The model group and Huatan Tongluo Decoction group

    MCAO operation,and were drawn on 1 d,3 d and 7 d after gavage.The neurological deficit score,cerebral infarction volume,cerebral water content,brain tissue HMGB1,the expression of TLR4,NF-κB and inflammatory factor kappa TNF-α,IL-lβ and IL-6 content were compared.Results: The comparison of the neurological deficit scores at each time point showed that Huatan Tongluo Decoction group decreased significantly,compared with the model group,and there was significant difference between groups (P<0.05 or P<0.01).The comparison of infarction volume showed that the cerebral infarction volume of Huatan Tongluo Decoction group at each time point were less than that of the model group;the comparison between groups had statistical differences (P<0.01).The expression of HMGB1,TLR4 and NF-κB protein of Huatan Tongluo Decoction group on 1 d,3 d and 7 d were lower than that of the model group,and there was significant difference between groups (P<0.05 or P<0.01);inflammatory factor TNF-α,IL-lβ and IL-6 content of Huatan Tongluo Decoction group on 1 d,3 d and 7 d was lower than that of the model group,and there was significant difference between groups (P<0.05 or P<0.01).Conclusion: The protective mechanism of Huatan Tongluo Decoction on the brain of MACO rats may be achieved by the anti-inflammatory reaction and blocking the HMGB1-TLR4-NF-κB signaling pathway.

    Ischemic stroke;Huatan Tongluo Decoction;HMGB1-TLR4-NF-κB signaling pathway

    R285.5

    A

    1004-745X(2017)09-1536-05

    10.3969/j.issn.1004-745X.2017.09.010

    2017-05-06)

    中醫(yī)內(nèi)科學(xué)湖南省部共建教育部重點實驗室(ZYNK201508)

    △通信作者(電子郵箱:734060164@qq.com)

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