沙門氏菌優(yōu)化檢測方法在預(yù)防性體檢肛拭子檢驗中的應(yīng)用

鄭少梅

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.20.087

[摘要] 目的 探析沙門氏菌的優(yōu)化檢測方法對于預(yù)防性體檢流程中的肛拭子檢驗項目的應(yīng)用價值。方法 方便選取2016年4—9月于該中心接受預(yù)防性體檢的500名食品衛(wèi)生業(yè)從業(yè)者的肛拭子標(biāo)本為研究對象，在相同環(huán)境下進(jìn)行常規(guī)SF+SS檢驗及優(yōu)化SBG+XLD檢驗，對比常規(guī)檢驗的檢出率和優(yōu)化檢驗的檢出率。 結(jié)果 SBG聯(lián)合XLD優(yōu)化檢測法檢出率為2.60%（13/500），SF聯(lián)合SS常規(guī)檢測法的檢出率為0.80%（4/500），優(yōu)化檢測法檢驗效果優(yōu)于常規(guī)檢測法，同時組間對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 相較于SF聯(lián)合SS常規(guī)檢測法，SBG聯(lián)合XLD優(yōu)化檢測法在沙門氏菌預(yù)防性體檢肛拭子檢驗中具有顯著優(yōu)良性，更值得應(yīng)用，可予以推廣。

[關(guān)鍵詞] 沙門氏菌；優(yōu)化檢測方法；預(yù)防性體檢；肛拭子檢驗

[中圖分類號] R446.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）07（b）-0087-03

Application of Salmonella Detection Optimization Method in Testing the Preventive Physical Examination Anal Swab

ZHENG Shao-mei

Hanjiang District Disease Preventive and Control Center， Putian， Fujian Province， 351111 China

[Abstract] Objective To study the application value of salmonella detection optimization method in testing the preventive physical examination anal swab. Methods Convenient selection 500 cases of anal swab specimens of food hygiene practitioners with predictive physical examination in our center from April to September 2016 were selected and tested by the routine SF+SS and optimized SBG+XLD under the same environment， and the test rate of the two test methods was compared. Results The test rate of SBG and XLD was better than that of SF and SS[2.60%（13/500）vs 0.80%（4/500）]， and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The SBG and XLD optimized test in testing the preventive physical examination anal swab is obviously better than that of SF and SS， which is worth promotion and application.

[Key words] Salmonella； Optimized test method； Preventive physical examination； Anal swab test

沙門氏菌，作為一種常見病原菌，其感染者極易發(fā)生食源性腹瀉[1]，在我國，該病菌原因?qū)е碌氖澄镏卸驹诖祟惣?xì)菌性事件中占據(jù)首位[2]。我國在食品安全法中已頒布相關(guān)條令，明確規(guī)定各個級別的疾病預(yù)防控制中心須對餐飲及其他公共場所從業(yè)者作預(yù)防性體檢，其中沙門氏菌被清楚制定為必檢內(nèi)容之一，該手段對于遏制沙門氏菌傳播與相關(guān)疾病蔓延都有顯著作用。為探析沙門氏菌常規(guī)與優(yōu)化檢測方法對于預(yù)防性體檢流程中肛拭子檢驗所發(fā)揮的效用，現(xiàn)以2016年4—9月于該中心接受預(yù)防性體檢的500名食品衛(wèi)生業(yè)從業(yè)者的肛拭子標(biāo)本為研究對象，同時給予常規(guī)檢測與優(yōu)化檢測，實驗結(jié)果顯示，相較于SF+SS常規(guī)檢驗法，SBG+XLD優(yōu)化檢驗法效果更優(yōu)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取于該中心接受預(yù)防性體檢的500名食品衛(wèi)生業(yè)從業(yè)者的肛拭子標(biāo)本為研究對象，其中男280名，女220名，年齡區(qū)間18～63歲，平均年齡為（40.81±12.53）歲。

1.2 檢驗方法

常規(guī)檢測法具體流程如下：每個體檢人員同時規(guī)范采集2根肛拭子標(biāo)本，將其中1根接種到增菌液SF內(nèi)，在37℃環(huán)境內(nèi)做增菌培養(yǎng)，待18～24 h后，于該增菌培養(yǎng)液中挑取一環(huán)接種于SS瓊脂平板，在37℃環(huán)境內(nèi)持續(xù)培養(yǎng)24 h，其后，將無色、半透明狀、濕潤、中心呈黑色以及邊緣呈光滑狀的可疑菌落一一挑取出來，將其接種至三糖鐵瓊脂及賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基，其后于37℃環(huán)境內(nèi)持續(xù)培養(yǎng)24 h，在必要時可將培養(yǎng)時間延長至48 h。三糖鐵的反應(yīng)：斜面（K），底層（A），產(chǎn)氣（+/-），H2S（+/-）。賴氨酸脫羧酶的反應(yīng)則為（+/-）。根據(jù)三糖鐵瓊脂與賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基的最終反應(yīng)結(jié)果，來判定是否為可疑沙門氏菌，如為可疑沙門氏菌，則將其轉(zhuǎn)種到營養(yǎng)瓊脂平板處，待37℃環(huán)境內(nèi)持續(xù)培養(yǎng)24 h后，以生理鹽水制備濁度適當(dāng)?shù)木鷳乙?，將之接種至API20E，通過APILAB PLUS細(xì)菌鑒定操作軟件系統(tǒng)予以鑒定，與此同時，以沙門氏菌菌體“O”抗原和鞭毛“H”抗原做血清凝集，鑒定菌種具體類型。endprint

優(yōu)化檢測法具體流程如下：將另一根肛拭子同時接種于增菌液SBG內(nèi)，在37℃環(huán)境內(nèi)做增菌培養(yǎng)，待18～24 h后，從該增菌培養(yǎng)液內(nèi)挑取一環(huán)劃線接種于XLD瓊脂平板，繼續(xù)放置在37℃環(huán)境作為期24 h的菌落培養(yǎng)，其后，將淡紅色或無色、濕潤、邊緣光滑、中心黑色以及中等大小特征的可疑菌落全部挑取出來，接種至三糖鐵瓊脂與賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基，后續(xù)操作同上述常規(guī)檢測法。

1.3 評價指標(biāo)

比較兩種檢測方法在沙門氏菌方面的檢出情況。

1.4 統(tǒng)計方法

兩組肛拭子樣本資料及檢驗結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析，帶有[n（%）]的計數(shù)資料行χ2檢驗法，帶有標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）的計量資料行t檢驗法，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究中優(yōu)化檢測法共檢出沙門氏菌感染者13例，常規(guī)檢測法共檢出沙門氏菌感染者4例。最終檢出結(jié)果具體如表1。

3 討論

沙門氏菌可人畜共患，人體可被直接感染，倘若食用感染該病菌的動物及其動物產(chǎn)品，也可發(fā)生食物中毒，也有部分感染者感染病菌潛伏期較長，即便不曾表現(xiàn)出沙門氏菌感染癥狀，但其體內(nèi)卻已攜帶此病原菌體，一旦該類人群從事食品、飲用水等行業(yè)的生產(chǎn)加工，就很可能導(dǎo)致沙門氏菌流行與大范圍傳播。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)可知，由腸道致病性病菌感染所引發(fā)的各種消化道疾病帶有多發(fā)性，尤其是近年來臨床發(fā)病率一直居高不下且連年增長，該種現(xiàn)象成因可能復(fù)雜多樣，其中源自食品加工及飲用水等行業(yè)從業(yè)者原因造成的污染在疾病傳播中占較大比例，故此，加強該類行業(yè)從業(yè)者的人員管理，對于疾病傳播率的有效控制與進(jìn)一步降低至關(guān)重要、不容忽視[3]，其中主要防范措施之一就是針對這些從業(yè)者，定期、定時開展預(yù)防性體檢活動[4]。

預(yù)防性體檢的現(xiàn)實目的就是要篩選出人群中的病原體攜帶者，進(jìn)而避免他人感染，在眾多預(yù)防性體檢病原體中，沙門氏菌最具常見性和重要性。沙門氏菌，被歸類于革蘭陰性菌群范疇內(nèi)，無莢膜，大部分生有鞭毛，可存活于糞便當(dāng)中，存活時間通常為1～2個月。調(diào)查顯示，在我國所有食源性質(zhì)的各類食物中毒事件當(dāng)中，沙門氏菌病原體感染者在數(shù)量上列舉首位[5]。當(dāng)人類感染了沙門氏菌之后，在臨床上一般有3個類型[6]。①傷寒型，該型主要由傷寒沙門氏菌或者副傷寒沙門氏菌所引起的；②敗血癥型，大多是由豬霍亂沙門氏菌，或鼠傷寒沙門氏菌，或腸炎沙門氏菌的感染原因造成的；③胃腸炎型，通常而言，胃腸炎型感染中常見率最高的感染事件包括沙門氏菌感染性食物中毒與腹瀉，皆是食品貯藏沙門氏菌并不斷繁殖，進(jìn)而侵入人體腸道，在腸道內(nèi)繼續(xù)繁殖，同時釋放出數(shù)量龐大的腸毒素，最終導(dǎo)致嚴(yán)重胃腸炎疾病。如若未能控制好沙門氏菌各相應(yīng)類型的感染，就極其容易引發(fā)爆發(fā)或流行。

在沙門氏菌檢測中，傳統(tǒng)常規(guī)應(yīng)用辦法是先增菌、后分離[7]，在該次研究中，將沙門氏菌增菌、分離所需的培養(yǎng)基經(jīng)過重新組合優(yōu)化后，應(yīng)用SBG聯(lián)合XLD瓊脂平板法進(jìn)行了檢測，并以檢測結(jié)果對該種搭配組合的優(yōu)良性給予了實驗證實。在研究中，500名樣本中，SBG聯(lián)合XLD優(yōu)化檢測法檢出率為2.60%（13/500），SF聯(lián)合SS常規(guī)法檢出率為0.80%（4/500）；優(yōu)化檢測法檢出率常規(guī)檢測法檢出率，同時組間對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。由此可見，相較于SF聯(lián)合SS常規(guī)檢測法，SBG聯(lián)合XLD優(yōu)化檢測法在沙門氏菌預(yù)防性體檢肛拭子檢驗中具有顯著優(yōu)良性，更值得應(yīng)用，可予以推廣，該結(jié)論與敖琴芳[8]研究相類似。

常規(guī)與優(yōu)化法最終檢測結(jié)果出現(xiàn)明顯差異，經(jīng)分析，一方面可能與在不同增菌液中細(xì)菌生長至峰值所需的時間不同有關(guān)；另一方面則可能是由于主要靠觀察在瓊脂平板處沙門氏菌菌落特殊形態(tài)來找出可疑菌落，而在不同的選擇性培養(yǎng)基上沙門氏菌可疑菌落在識別難易程度上存在一定差異；此外，也可能因增菌液中所含成份不同，以致對沙門氏菌的增菌效果以及對沙門氏菌以外的其他菌抑制程度不同。

4 結(jié)語

綜上所述，為有效預(yù)防食物中毒及疾病傳播事件的發(fā)生，有必要加強對食品生產(chǎn)加工及飲用水生產(chǎn)等行業(yè)從業(yè)者的檢查管理，其中沙門氏菌SBG聯(lián)合XLD優(yōu)化檢測法兼具操作簡易、檢出率高的優(yōu)質(zhì)性，于預(yù)防性體檢的肛拭子檢驗領(lǐng)域獲得較好的應(yīng)用效果，故可予以推廣。

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[8] 敖琴芳.沙門氏菌優(yōu)化檢測方法在預(yù)防性體檢便樣檢驗中的作用[J].口岸衛(wèi)生控制，2016，21（2）：55-57.

（收稿日期：2017-04-17）endprint