持續(xù)寡照對(duì)冬季日光溫室黃瓜生長(zhǎng)及抗氧化酶活性的影響*

熊 宇，刁家敏，薛曉萍，呂學(xué)梅，張繼波

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持續(xù)寡照對(duì)冬季日光溫室黃瓜生長(zhǎng)及抗氧化酶活性的影響*

熊 宇1，刁家敏1，薛曉萍2**，呂學(xué)梅3，張繼波2

（1.南京信息工程大學(xué)氣象災(zāi)害預(yù)報(bào)預(yù)警與評(píng)估協(xié)同創(chuàng)新中心，南京 210044；2.山東省氣候中心，濟(jì)南 250031；3.臨沂市氣象局，臨沂 276000）

選取黃瓜品種‘德瑞特L108’（L. cv.）為試材，在日光溫室中利用遮陽網(wǎng)設(shè)計(jì)不同寡照（PAR＜200μmol·m-2·s-1）持續(xù)日數(shù)（1、3、5、7、9d）及正常光照條件下的恢復(fù)試驗(yàn)，觀測(cè)黃瓜植株的生長(zhǎng)指標(biāo)以及葉片中抗氧化酶活性的變化。結(jié)果表明：（1）持續(xù)寡照使黃瓜葉片SPAD（相對(duì)葉綠素）值增加，凈光合速率下降，持續(xù)寡照日數(shù)越長(zhǎng)，黃瓜葉片凈光合速率越小，光合恢復(fù)能力越差。（2）寡照7d以上對(duì)黃瓜植株的形態(tài)指標(biāo)影響顯著，株高、莖粗及單株葉面積均低于CK，且經(jīng)過9d正常光照恢復(fù)后，以上指標(biāo)均無法恢復(fù)到正常水平；且持續(xù)寡照使黃瓜果實(shí)產(chǎn)量和商品性均下降。（3）寡照脅迫下黃瓜葉片中SOD（超氧化物歧化酶）、POD（過氧化物酶）活性增加，CAT（過氧化氫酶）活性先增加后減小，MDA（丙二醛）含量持續(xù)增加，持續(xù)寡照日數(shù)越長(zhǎng)，黃瓜葉片受膜脂過氧化損傷越嚴(yán)重，持續(xù)寡照7d以上，黃瓜葉片代謝功能難以恢復(fù)至正常水平。

寡照；日光溫室；黃瓜；形態(tài)指標(biāo)；產(chǎn)量；酶活性

黃瓜（L.）是中國(guó)設(shè)施栽培面積最大的蔬菜種類，屬葫蘆科甜瓜屬，喜溫喜濕，忌高溫，且對(duì)光照強(qiáng)度有較高要求[1-2]。黃瓜的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、保健功能、美容功能等越來越受到人們的重視[3]，在設(shè)施蔬菜生產(chǎn)中占有重要地位[4]。長(zhǎng)期觀測(cè)表明，雪、霧、霾造成的寡照已經(jīng)成為設(shè)施黃瓜生產(chǎn)中最為主要的氣象災(zāi)害，常導(dǎo)致日光溫室內(nèi)溫度難以回升，設(shè)施作物受到傷害。隨著霾日發(fā)生頻率的增加，寡照將進(jìn)一步嚴(yán)重威脅設(shè)施農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[5-7]。

葉片是植株主要的感光器官，也是對(duì)光照敏感的部位，弱光可直接影響葉片的發(fā)育和光形態(tài)建成，導(dǎo)致葉片光合能力下降[8-10]。近年來，關(guān)于設(shè)施環(huán)境對(duì)黃瓜光合及生理生態(tài)特性的影響已有一定報(bào)道，目前研究結(jié)論較一致，均認(rèn)為弱光使作物凈光合速率下降，從而影響干物質(zhì)的形成。Ody[11]研究發(fā)現(xiàn)弱光使植物凈光合速率下降，下降幅度受溫度、CO2濃度和相對(duì)濕度等其它環(huán)境因素的影響；還有研究認(rèn)為，弱光低溫不僅影響PSI的活性，PSII的活性也會(huì)受到影響[12-13]。錢芝龍等[14]對(duì)辣椒幼苗活性氧代謝變化的研究表明，一定范圍內(nèi)，逆境脅迫會(huì)使葉片中抗氧化酶活性升高，從而達(dá)到清除過量活性氧自由基的目的。國(guó)內(nèi)許多學(xué)者也認(rèn)識(shí)到弱光逆境已成為日光溫室生產(chǎn)中最普遍的限制因素，其與低溫相伴，給設(shè)施農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來嚴(yán)重危害，針對(duì)弱光低溫對(duì)作物影響的研究報(bào)道已取得不少成果。陳青君等[15]利用人工氣候箱對(duì)黃瓜苗期葉綠素含量、葉面積、光合及酶活性變化進(jìn)行研究，認(rèn)為光照強(qiáng)度對(duì)黃瓜的生長(zhǎng)起主導(dǎo)作用；艾希珍等[16-19]研究表明弱光亞適溫脅迫下黃瓜植株生長(zhǎng)速度明顯減慢，葉片受脅迫后光合功能7d內(nèi)可基本恢復(fù)正常。馬德華等[20]在黃瓜上的研究表明，黃瓜在弱光環(huán)境下POD活性明顯增強(qiáng)，MDA含量均有不同程度的提高，酶帶數(shù)量明顯增加；楊廣東等[21]研究認(rèn)為，黃瓜植株在弱光環(huán)境下超氧自由基產(chǎn)生速率、H2O2和MDA含量降低。周艷虹等[22]以設(shè)施栽培黃瓜“津春3號(hào)”為試材，發(fā)現(xiàn)低溫弱光處理過程中SOD和POD活性上升，在恢復(fù)過程中抗氧化酶的活性均能恢復(fù)至對(duì)照水平；POD活性在弱光處理5d后迅速上升，恢復(fù)期間下降，MDA持續(xù)積累。相關(guān)研究說明葉片膜保護(hù)酶的活性對(duì)于引發(fā)植物體內(nèi)膜脂過氧化的逆境脅迫的反應(yīng)很靈敏。

針對(duì)某一氣象災(zāi)害如低溫、寡照對(duì)設(shè)施農(nóng)業(yè)的影響，以往相關(guān)研究主要集中在對(duì)溫室內(nèi)蔬菜生長(zhǎng)發(fā)育的影響。對(duì)于黃瓜，更多的是開展了苗期葉片光合作用和葉綠素?zé)晒馓匦缘葏?shù)的影響研究，而就花果期遭遇連續(xù)寡照對(duì)黃瓜的生長(zhǎng)和產(chǎn)量的影響鮮有研究報(bào)道。實(shí)際生產(chǎn)中，溫室外氣象條件是通過影響溫室內(nèi)的光合有效輻射和溫度，從而影響黃瓜的光合作用、器官干物質(zhì)積累與分配以及產(chǎn)量品質(zhì)形成。同時(shí)，由于氣象條件對(duì)溫室內(nèi)小氣候的影響具有一定的滯后性，前期溫室內(nèi)外的氣象因子對(duì)其亦存在一定的制約作用。國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究主要集中在利用人工氣候箱研究恒定光強(qiáng)對(duì)盆栽苗期黃瓜生理特性的影響，試驗(yàn)環(huán)境與實(shí)際溫室環(huán)境有一定差距，試驗(yàn)結(jié)果的應(yīng)用受到限制。為此，本研究利用遮陽網(wǎng)在日光溫室中模擬持續(xù)寡照環(huán)境，在黃瓜花果期進(jìn)行試驗(yàn)，研究持續(xù)寡照對(duì)日光溫室黃瓜生長(zhǎng)及抗氧化酶活性的影響，以期為黃瓜溫室栽培環(huán)境管理提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2015年12月-2016年5月在山東省臨沂市設(shè)施農(nóng)業(yè)氣象試驗(yàn)站日光溫室內(nèi)進(jìn)行。溫室頂高4.6m，寬10.0m，長(zhǎng)68.0m，溫室覆蓋棚膜為聚乙烯無滴膜，膜厚0.6mm，透光率為75%。黃瓜品種為“德瑞特L108”。2015年12月25日，選取長(zhǎng)勢(shì)茁壯且一致的黃瓜幼苗定植，壟寬95cm，走道80cm，行距50cm，株距31cm，種植密度為4.42株·m-2，定植緩苗后覆蓋地膜，田間管理按高產(chǎn)栽培要求進(jìn)行。試驗(yàn)前期觀測(cè)表明，陰雨（雪）天氣時(shí)日光溫室內(nèi)光合有效輻射為100～200μmol·m-2·s-1，因此，試驗(yàn)時(shí)用遮陽網(wǎng)覆蓋（陰雨天氣不遮，多云天氣遮一層，晴天遮兩層），模擬連續(xù)陰天寡照環(huán)境，使溫室內(nèi)光合有效輻射保持在200μmol·m-2·s-1以下。于黃瓜花果期（2016年2月20日），在溫室中設(shè)置6個(gè)小區(qū)，每個(gè)處理5壟，設(shè)置6個(gè)連續(xù)寡照日數(shù)處理：0、1、3、5、7、9d，分別以CK、T1、T3、T5、T7、T9表示，寡照處理結(jié)束后繼續(xù)于溫室內(nèi)進(jìn)行正常光照恢復(fù)試驗(yàn)，恢復(fù)期為9d，試驗(yàn)時(shí)間持續(xù)一個(gè)月，測(cè)定黃瓜植株的月產(chǎn)量。試驗(yàn)前期進(jìn)行的預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與前人研究結(jié)果[23]表明，短期遮陰（＜7d）對(duì)設(shè)施作物的影響在恢復(fù)正常光照條件后能迅速恢復(fù)，一周內(nèi)基本能夠恢復(fù)到正常水平，因此試驗(yàn)對(duì)恢復(fù)后的處理不再取樣測(cè)定指標(biāo)。進(jìn)行寡照處理期間溫室內(nèi)及時(shí)通風(fēng)，保證溫室內(nèi)溫度不高于28℃。

1.2 項(xiàng)目測(cè)定與方法

1.2.1 氣象數(shù)據(jù)測(cè)定

日光溫室內(nèi)氣象數(shù)據(jù)由數(shù)據(jù)采集器（WatchDog 2000，USA）自動(dòng)采集，采集內(nèi)容包括1.5m處空氣溫度和冠層相對(duì)濕度。采集頻率為每10s 1次，存儲(chǔ)每30min的平均值。

2016年試驗(yàn)期間日光溫室外部日平均溫度和空氣相對(duì)濕度變化如圖1所示，日光溫室內(nèi)部日平均溫度和空氣相對(duì)濕度變化如圖2所示。

處理當(dāng)天（2016年2月20日）至恢復(fù)期結(jié)束（2016年3月9日）用手持式數(shù)字照度計(jì)（Lux Meter AR813A，HK）測(cè)量各處理的光照強(qiáng)度，掛好遮陽網(wǎng)當(dāng)天和每次取樣當(dāng)日10：00-11：00（揭網(wǎng)后）進(jìn)行。2016年2月20日-3月9日室外及各處理冠層光照強(qiáng)度日變化情況見圖3。

注：試驗(yàn)共設(shè)置5個(gè)寡照處理，T1、T3、T5、T7 和T9分別為持續(xù)1、3、5、7、9天的寡照，CK為正常光照下的處理

Note: T1,T3,T5,T7 and T9 is low irradiation treatments inside greenhouse for 1 day, 3 days, 5 days, 7days and 9 days, respectively. CK is normal irradiation

1.2.2 葉片光合參數(shù)的測(cè)定

（1）凈光合速率

利用LI-6400便攜式光合作用測(cè)定系統(tǒng)（LI-COR Biosciences Inc.，USA）在寡照處理結(jié)束當(dāng)日9：00-11：00，對(duì)葉片凈光合速率（Pn，μmol·m-2·s-1）進(jìn)行測(cè)量，進(jìn)入恢復(fù)期后隔一天測(cè)量一次，每個(gè)處理選擇長(zhǎng)勢(shì)均勻的植株重復(fù)測(cè)定3次，取平均值。

（2）葉綠素

利用SPAD-502型葉綠素計(jì)（Soil and Plant Analyzer Development，Japan）在9：00-11：00測(cè)定不同葉位葉片的SPAD值，與光合速率同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)處理隨機(jī)選擇3株長(zhǎng)勢(shì)均勻的植株，每個(gè)植株分別測(cè)定從上往下數(shù)第3-5片展開葉，每片葉測(cè)定6次，取平均值。

1.2.3 形態(tài)指標(biāo)及產(chǎn)量測(cè)定

每個(gè)處理隨機(jī)選定3株長(zhǎng)勢(shì)均勻的黃瓜植株進(jìn)行破壞性取樣，分別使用精度為1cm米尺測(cè)定樣本植株的株高，用精度為1mm量程為30cm的刻度尺測(cè)量葉長(zhǎng)和葉寬，用精度為0.02mm游標(biāo)卡尺測(cè)定莖粗。

葉長(zhǎng)：黃瓜葉片主脈的長(zhǎng)度。

葉寬：黃瓜葉片垂直于主脈最寬處的長(zhǎng)度。

測(cè)產(chǎn)按照農(nóng)業(yè)氣象觀測(cè)規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，每個(gè)處理選定10株黃瓜掛牌定株采收，每隔3d采收一次，記錄單果重、單株果實(shí)數(shù)、次果數(shù)、病果數(shù)、果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑等產(chǎn)量結(jié)構(gòu)項(xiàng)目。

1.2.4 抗氧化酶活性測(cè)定

（1）酶液的配制

每個(gè)處理隨機(jī)選取長(zhǎng)勢(shì)相當(dāng)?shù)狞S瓜植株采集3片功能葉片迅速于液氮中冷凍后置于冰箱冷凍層中保存。測(cè)定時(shí)稱取0.4g鮮樣，加入磷酸緩沖液（0.05mol·L-1，pH＝7.8）冰浴研磨，于0℃冷凍離心20min（10500rpm），冷藏保存。

（2）SOD活性的測(cè)定

SOD的測(cè)定參考李合生的氮藍(lán)四唑（NBT）法于分光光度計(jì)560nm下比色[24]。SOD酶活性（units·g-1FW）的計(jì)算式為

式中，W為樣重（g），V為樣液總體積（mL），Vt為測(cè)定時(shí)酶液用量（mL），ACK為對(duì)照管的吸光度，AE為樣品管的吸光度。

（3）POD活性的測(cè)定

POD的測(cè)定參考李合生的愈創(chuàng)木酚法于分光光度計(jì)中470nm下比色，POD酶活性（△OD470·min-1·g-1FW）的計(jì)算式為

式中，A為樣品管的吸光度值，W為鮮樣重（g），V為樣液總體積（mL），Vt為測(cè)定時(shí)酶液用量（mL），t為反應(yīng)時(shí)間。

（4）CAT活性的測(cè)定

CAT活性（△OD240·min-1·g-1FW）的測(cè)定參考李合生的方法于分光光度計(jì)中240nm下比色，CAT酶活性的計(jì)算式為

式中，A 為樣品管的吸光度值，W為鮮樣重（g），V為樣液總體積（mL），Vt為測(cè)定時(shí)酶液用量（mL），t為反應(yīng)時(shí)間。

（5）MDA活性的測(cè)定

MDA活性（μmol·g-1FW）的測(cè)定參考李合生的硫代巴比妥酸比色法在600、532、450nm共3個(gè)波長(zhǎng)下比色[22]。

式中，A600、A532和A450分別為樣品在600nm、532nm和450nm處的吸光度值，W為鮮樣重（g），V為樣液總體積（mL）。

（6）可溶性蛋白含量的測(cè)定

可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)-250法測(cè)定。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2007及SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析與圖表繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 持續(xù)寡照對(duì)溫室黃瓜葉片光合參數(shù)的影響

由圖4a可見，未經(jīng)寡照的處理（CK），整個(gè)分析時(shí)段內(nèi)葉片綠度值（SPAD值）一直處于相對(duì)較低的水平，保持在42.9～44.0范圍內(nèi)，而持續(xù)寡照結(jié)束后第1天，除T1處理外，黃瓜葉片SPAD值均明顯高于CK，且持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng)數(shù)值越高，說明寡照處理3～9d會(huì)使葉片SPAD值升高。從各寡照處理結(jié)束后恢復(fù)時(shí)段內(nèi)葉片綠度值的變化曲線可見，恢復(fù)的第2天均有明顯峰值且經(jīng)歷寡照時(shí)間越長(zhǎng)反彈的峰值越高，T9處理的峰值最大，與CK相比增加了9.5%；從第3天開始，SPAD值逐漸降低，至第3-9天（T1恢復(fù)3d、T3恢復(fù)5d、T5-T9恢復(fù)9d）達(dá)到與CK一致的水平?？梢?，持續(xù)寡照在短時(shí)間內(nèi)會(huì)明顯提高葉片綠度值。不同日數(shù)寡照處理結(jié)束后，恢復(fù)時(shí)段內(nèi)，除T1處理恢復(fù)的3d內(nèi)、T3處理恢復(fù)的第3、4天外，其它恢復(fù)日所測(cè)葉片綠度值均明顯高于CK；而且寡照處理時(shí)間越長(zhǎng)、恢復(fù)期內(nèi)葉片綠度值越高，T9處理中黃瓜葉片SPAD值增加最多。

由圖4b可見，整個(gè)分析時(shí)段內(nèi)CK的葉片凈光合速率（Pn）一直處于相對(duì)較高的水平，保持在18.8～22.2μmol·m-2·s-1范圍內(nèi)，隨著持續(xù)寡照日數(shù)的增加黃瓜葉片的凈光合速率逐漸下降。寡照1d對(duì)葉片凈光合速率的影響較小，寡照處理結(jié)束后黃瓜葉片的凈光合速率下降1.0%；寡照9d黃瓜葉片的凈光合速率為15.21μmol·m-2·s-1，比CK低28.6%，說明寡照處理3d以上會(huì)使葉片凈光合速率下降。從各寡照處理結(jié)束后恢復(fù)時(shí)段內(nèi)葉片凈光合速率的變化曲線可見，恢復(fù)正常光照后，T3、T5、T7和T9處理的黃瓜葉片凈光合速率均逐漸增大，且經(jīng)歷寡照持續(xù)時(shí)間越短，上升曲線越平緩。T3處理恢復(fù)5d、T5處理恢復(fù)9d后葉片凈光合速率均能達(dá)到CK水平。T7和T9處理恢復(fù)9d后黃瓜葉片的凈光合速率仍未恢復(fù)至CK水平，與CK相比分別低23.5%和28.6%。

注：短線表示均方差，下同

Note:The bar is MSE.The same as below

2.2 持續(xù)寡照對(duì)溫室黃瓜形態(tài)指標(biāo)的影響

從圖5可以看出，整個(gè)分析時(shí)段內(nèi)，各處理黃瓜的株高和莖粗持續(xù)增加，且各寡照處理株高和莖粗均低于CK。持續(xù)寡照1～5d，黃瓜的株高和莖粗與CK 相比，差異均不顯著；持續(xù)寡照7d，黃瓜的株高、莖粗分別比CK低8.1%、11.9%，而持續(xù)寡照9d，黃瓜的株高、莖粗分別比CK低9.6%、21.4%?？梢?，7d 以上持續(xù)寡照會(huì)使黃瓜植株的株高和莖粗生長(zhǎng)減緩。寡照處理結(jié)束后的恢復(fù)時(shí)段內(nèi)，各寡照處理黃瓜株高和莖粗生長(zhǎng)率逐漸增加，受寡照小于5d的處理，其株高和莖粗在恢復(fù)正常光照9d后均能恢復(fù)到正常生長(zhǎng)水平，而T7和T9處理的植株株高和莖粗恢復(fù)9d后仍低于CK水平，說明寡照7d以上黃瓜株高和莖粗生長(zhǎng)受到抑制，且短期內(nèi)難以恢復(fù)。

由圖6可見，未經(jīng)寡照的處理中，整個(gè)分析時(shí)段內(nèi)，黃瓜單株葉面積持續(xù)增長(zhǎng)，各寡照處理黃瓜單株葉面積也均持續(xù)增加，但均低于CK。持續(xù)寡照9d后，黃瓜植株的單株葉面積為2219.8cm2，與CK相比下降了28.0%?；謴?fù)正常光照后，各處理黃瓜植株的葉面積增長(zhǎng)率均有提升。恢復(fù)期（9d）結(jié)束后，T1、T3、T5處理的單株葉面積增長(zhǎng)率接近CK水平，T7和T9處理仍分別比CK低13.1%和11.2%，說明持續(xù)寡照7d以上對(duì)黃瓜葉面積增長(zhǎng)造成的影響短期內(nèi)難以恢復(fù)到正常水平。

2.3 持續(xù)寡照對(duì)溫室黃瓜葉片抗氧化酶活性的影響

如圖7a所示，隨著持續(xù)寡照時(shí)間的增加，溫室黃瓜葉片中SOD活性均保持一個(gè)較好的增長(zhǎng)趨勢(shì)。寡照7d后的黃瓜葉片SOD活性最大，達(dá)到233.2U·g-1（FW），與CK處理的163.5U·g-1相比，增加了42.6%；寡照9d處理比7d處理葉片中SOD活性略有降低，為228.6U·g-1，與CK相比增加了26.1%。

如圖7b所示，隨著寡照天數(shù)的增加，黃瓜葉片中POD活性逐漸增大。寡照處理3d后黃瓜葉片中POD活性顯著增長(zhǎng)；T5和T7處理黃瓜葉片中POD活性分別為12.7 和15.7U·min-1·g-1，與CK相比分別增加了96.6%和127.4%；黃瓜葉片POD活性在持續(xù)寡照9d后達(dá)到最大，為16.1U·min-1·g-1，與CK相比增加了74.7%。

由圖7c可見，在整個(gè)寡照處理過程中，各處理溫室黃瓜葉片中CAT活性均呈先增大后減小的變化趨勢(shì)。持續(xù)寡照3d，溫室黃瓜葉片中CAT的活性增加了34.4%，達(dá)到28.2U·min-1·g-1；在持續(xù)寡照7d后，黃瓜葉片中CAT活性達(dá)到峰值，為43.3U·min-1·g-1，與CK相比增加了98%；T9處理的黃瓜葉片CAT活性較T7略有降低，為40.7U·min-1·g-1，與CK相比增加了76.8%。

由圖7d可見，持續(xù)寡照下各處理溫室黃瓜葉片中MDA的含量逐漸增加，持續(xù)寡照9d后MDA增長(zhǎng)速率降低。T7和T9處理的黃瓜葉片中MDA含量與CK相比分別增加90.1%和96.8%，達(dá)到4.26和4.37μmol·g-1。

圖8a、8b、8c和8d分別為恢復(fù)期間溫室黃瓜葉片中SOD、POD、CAT活性和MDA含量的變化情況。由圖可見，恢復(fù)正常光照后，溫室黃瓜葉片中SOD、POD、CAT活性和MDA含量均逐漸下降。持續(xù)寡照1d和3d后的黃瓜葉片，3種酶的活性在恢復(fù)光照后均能較快恢復(fù)至CK水平；寡照處理5d后的黃瓜葉片在恢復(fù)正常光照9d后也逐漸恢復(fù)至正常水平；持續(xù)寡照7d處理后的黃瓜葉片，其保護(hù)酶的活性和MDA含量在恢復(fù)期間也逐漸減小，但9d之內(nèi)很難恢復(fù)到寡照處理前的水平?；謴?fù)結(jié)束時(shí)，持續(xù)寡照9d后的黃瓜葉片中3種酶的活性分別為206.3、10.8、32.4U·min-1·g-1，MDA含量為3.0μmol·g-1，與CK相比分別增加16.6%、38.6%、29.2%和62.2%。說明持續(xù)寡照7d以上對(duì)黃瓜葉片中保護(hù)酶活性和MDA含量影響較大，短期內(nèi)難以恢復(fù)至正常水平。

2.4 持續(xù)寡照對(duì)溫室黃瓜葉片中可溶性蛋白含量的影響

如圖9所示，隨著寡照天數(shù)的持續(xù)增加，黃瓜葉片中可溶性蛋白的含量逐漸降低。寡照處理1d和3d的黃瓜葉片中可溶性蛋白含量較CK分別減少5.3%和13.9%；T5處理，黃瓜葉片中可溶性蛋白含量下降幅度較大，結(jié)束時(shí)為407.8mg·g-1，與CK相比減少30.4%；T7處理，黃瓜葉片中可溶性蛋白含量為414.9mg·g-1，比T5處理略高；T9處理的黃瓜葉片中可溶性蛋白含量降幅最大，僅320.4mg·g-1，比CK相比減少了43.1%?；謴?fù)正常光照后，黃瓜葉片中可溶性蛋白含量均持續(xù)增長(zhǎng)。T1和T3處理很快恢復(fù)至正常水平；T5處理恢復(fù)9d后，其含量達(dá)到558.6mg·g-1，與CK相比僅減少8.9%，基本恢復(fù)至正常水平；T7和T9處理在恢復(fù)期間，黃瓜葉片中可溶性蛋白含量持續(xù)增加，恢復(fù)9d后分別為502.1mg·g-1和489.2mg·g-1，但均未達(dá)到CK水平，與CK相比分別減少12.3%和18.5%。說明持續(xù)寡照7d以上造成黃瓜葉片中可溶性蛋白含量的升高在短期內(nèi)難以恢復(fù)至正常水平。

2.5 持續(xù)寡照對(duì)黃瓜產(chǎn)量和商品性的影響

試驗(yàn)在寡照處理1個(gè)月后開始測(cè)定單株產(chǎn)量，延續(xù)測(cè)產(chǎn)1個(gè)月?lián)Q算成當(dāng)月產(chǎn)量，結(jié)果見圖10。由圖可見，正常光照下的黃瓜植株產(chǎn)量最大，為28900.5kg·hm-2；寡照處理導(dǎo)致黃瓜產(chǎn)量下降，且寡照持續(xù)日數(shù)越長(zhǎng)，產(chǎn)量越低。寡照日數(shù)小于3d，各處理間差異不顯著；寡照日數(shù)大于5d，黃瓜植株月產(chǎn)量下降明顯，各處理間差異顯著。T9處理的黃瓜植株產(chǎn)量最小，為18100.5kg·hm-2，與CK相比減小了37.3%。

注：小寫字母表示處理間在0.05水平上的差異顯著性

Note：Lowercase indicates the difference significance among treatments at 0.05 level

黃瓜的外觀品質(zhì)包括形狀、顏色、大小、缺陷等，是黃瓜品質(zhì)的重要組成部分，直接影響銷售。將各處理黃瓜果實(shí)根據(jù)其形狀、顏色、大小以及缺陷等特點(diǎn)進(jìn)行3個(gè)等級(jí)的分類，分類結(jié)果見表1。一級(jí)果應(yīng)具備瓜條長(zhǎng)棒形，順直，縱徑達(dá)到27cm以上，個(gè)頭大小均勻，果皮深綠光澤好，刺瘤中等大小且均勻等特征，且無大肚、尖嘴、蜂腰等其它缺陷，從表1可以看出，隨著寡照日數(shù)的增加，一級(jí)果占采收總量的的比率逐漸下降，三級(jí)果的比率逐漸增加，壞果率也逐漸增加，二級(jí)果的變化規(guī)律則不明顯；寡照持續(xù)5d以上，果實(shí)開始出現(xiàn)灰霉病癥狀，花蒂部呈水漬狀軟化，表面密生灰色霧，且寡照時(shí)間越長(zhǎng)壞果越多，T9處理黃瓜果實(shí)的壞果率達(dá)到25%。

表1 不同處理各級(jí)別果實(shí)所占比例統(tǒng)計(jì)（%）

3 結(jié)論與討論

持續(xù)寡照致使日光溫室內(nèi)溫度難以回升，往往造成弱光亞適溫逆境，黃瓜在花果期對(duì)弱光低溫十分敏感，光合作用受到抑制。前人研究表明，葉片SPAD值與葉綠素含量成正比，因此，SPAD值可以反映寡照脅迫引起的黃瓜葉片中葉綠素含量的變化[25-26]。本文研究結(jié)果表明，持續(xù)寡照使溫室黃瓜葉片SPAD值增加，葉色加深，葉片凈光合速率減小，光合能力減弱。解除寡照逆境后，黃瓜葉片凈光合速率逐漸增大，光合能力逐漸恢復(fù)，SPAD值下降；持續(xù)寡照7d后的黃瓜植株，其葉片光合恢復(fù)能力減弱，短時(shí)間內(nèi)難以恢復(fù)至正常水平。持續(xù)寡照1～5d對(duì)黃瓜植株的形態(tài)指標(biāo)影響不大，持續(xù)寡照7d以上，黃瓜的株高、莖粗及單株葉面積均顯著低于CK，且持續(xù)寡照日數(shù)越長(zhǎng)，黃瓜植株的外觀形態(tài)受影響越大，恢復(fù)能力越差。從黃瓜的外觀品質(zhì)來看持續(xù)寡照使黃瓜壞果比例增加，且寡照時(shí)間越長(zhǎng)，壞果率越大。不同持續(xù)日數(shù)的寡照引起各處理黃瓜單果重不同程度的降低，單株產(chǎn)量下降，從而導(dǎo)致產(chǎn)量下降，寡照持續(xù)日數(shù)越長(zhǎng)，黃瓜產(chǎn)量越小。

弱光逆境對(duì)黃瓜葉片的影響是通過影響膜上酶的活性來影響酶系統(tǒng)，使活性氧積累，造成黃瓜葉片細(xì)胞膜脂過氧化程度提高，使膜脂受到傷害，從而影響體內(nèi)的代謝過程。SOD、POD和CAT統(tǒng)稱活性氧清除劑，SOD是植物抗氧化系統(tǒng)的第一道防線，可以使活性氧轉(zhuǎn)化成H2O2和O2，然后通過POD、CAT清除體內(nèi)的H2O2，有效阻止活性氧和H2O2相互作用，從而維持體內(nèi)活性氧代謝平衡[27-28]。而MDA是膜脂過氧化作用的最終產(chǎn)物之一，可以抑制蛋白質(zhì)的合成[29]，其含量在一定程度能夠較好地鑒定黃瓜葉片細(xì)胞膜的損傷程度和對(duì)逆境反應(yīng)的強(qiáng)弱[30]。本文研究結(jié)果表明，持續(xù)寡照使黃瓜葉片中SOD、POD活性升高，CAT活性先升高后降低，MDA含量持續(xù)增加，這與Hu等[31-32]研究結(jié)果一致。說明低溫弱光可誘導(dǎo)SOD和POD活性提高，并在一定程度上防御或減輕膜脂過氧化傷害，從而保護(hù)黃瓜葉片光合膜不受傷害，這可能是黃瓜適應(yīng)不良光溫環(huán)境的一種保護(hù)反應(yīng)。隨著寡照天數(shù)的持續(xù)增加，CAT活性逐漸下降，可能是由于葉片內(nèi)部物質(zhì)通過部分阻斷CAT活性，從而激發(fā)體內(nèi)的抗性機(jī)制，提高植物的抗逆性的一種保護(hù)措施。葉片MDA含量隨著寡照天數(shù)的持續(xù)增加而增大，反映了黃瓜葉片在逆境中隨著持續(xù)寡照天數(shù)的增加，葉片受損傷程度越大?；謴?fù)正常光照條件后，葉片中MDA含量持續(xù)減少，T1、T3、T5黃瓜葉片中SOD、POD 和CAT的活性很快恢復(fù)至正常水平，代謝功能得以恢復(fù)。持續(xù)寡照7d以上，黃瓜葉片各項(xiàng)指標(biāo)短時(shí)間內(nèi)均不能恢復(fù)至正常水平。

通過研究不同持續(xù)寡照日數(shù)對(duì)日光溫室中黃瓜花果期葉片的光合和抗氧化酶活性的影響，證實(shí)持續(xù)寡照使黃瓜葉片SPAD值增加，凈光合速率下降，植株生長(zhǎng)受抑制，果實(shí)產(chǎn)量和商品性均下降；SOD、POD活性升高，CAT活性先升高后降低，MDA含量持續(xù)增加。持續(xù)寡照日數(shù)小于7d，對(duì)黃瓜葉片光合和抗氧化酶活性有影響，但在正常光溫條件下能很快恢復(fù)；持續(xù)寡照7d以上，葉片光合和抗氧化酶活性在短時(shí)間內(nèi)難以恢復(fù)至正常水平，因此，實(shí)際生產(chǎn)中可將持續(xù)寡照7d作為寡照災(zāi)害的臨界值。然而，從前人大量不一致甚至互相矛盾的結(jié)果可以看出，植物耐低溫和弱光的機(jī)制是相當(dāng)復(fù)雜的，溫室實(shí)際生產(chǎn)條件下整個(gè)黃瓜生長(zhǎng)發(fā)育階段的耐低溫弱光特性以及低溫弱光對(duì)黃瓜產(chǎn)量品質(zhì)的影響仍需進(jìn)一步研究。

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Effects of Continuous Overcast Weather on Cucumber Growth and Antioxidant Enzyme Activities in Glasshouse

XIONG Yu1, DIAO Jia-min1, XUE Xiao-ping2, LV Xue-mei3, ZHANG Ji-bo2

(1.Collaborative Innovation Center on Forecast and Evaluation of Meteorological Disasters, Nanjing University of Information Science & Technology, Nanjing 210044, China; 2.Shandong Climate Center, Jinan 250031; 3. Linyi Meteorological Bureau, Linyi 276000)

In order to investigate the effects of overcast weather on cucumber (L. cv.) growth in glasshouse, the experiment was conducted under two levels of photosynthetic active radiation(PAR): normal irradiation and low irradiation (＜200μmol·m-2·s-1photon), respectively. Five durations of continuous low irradiation were designed (1, 3, 5, 7 and 9 days), then both groups of plants were transferred under normal irradiation to recover for 9 days. The growth index and the activity of antioxidant enzymes in cucumber leaves were observed. The results showed that: (1) the SPAD value in cucumber leaves increased while the net photosynthesis rate decreased under low irradiation. The longer the duration, the smaller the net photosynthetic rate in cucumber leaves, and the worse on the recovery ability in cucumber leaves. (2) The morphological index of cucumber were significantly affected by low irradiation, and the height, the stem diameter and the leaf-area per plant were smaller under low irradiation after 7 and 9 days than the control respectively, and they could not return to the control level after 9 days under normal irradiation. The cucumber yield and the commercial character decreased with the continuous low irradiation. The activities of SOD, POD were increased and the CAT activity increased at the beginning and then decreased while the content of MDA continuous increased. The longer the duration of low irradiation, the cucumber suffered more by membrane lipid peroxidation. The metabolic function of cucumber leaves was difficult to recover when continuous low irradiation for more than 7 days.

Overcast weather; Glasshouse; Cucumber; Morphological index; Yield; Enzyme activities

2016-12-27

“十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國(guó)家科技計(jì)劃子課題“氣象服務(wù)信息平臺(tái)關(guān)鍵技術(shù)集成與示范”（2014BAD10B07）；山東省氣象局“日光溫室小氣候要素適宜度定量評(píng)價(jià)技術(shù)研究”（2016sdqxm03）；山東省2013年度農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新課題“新型雙屋面日光溫室及高效種植模式研究”

熊宇（1991-），女，碩士，主要研究方向?yàn)樵O(shè)施農(nóng)業(yè)氣象災(zāi)害預(yù)警。E-mail：245712378@qq.com

10.3969/j.issn.1000-6362.2017.09.001

**通訊作者。E-mail：xxpdhy@163.com

熊宇,刁家敏,薛曉萍,等.持續(xù)寡照對(duì)冬季日光溫室黃瓜生長(zhǎng)及抗氧化酶活性的影響[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)氣象,2017,38(9):537-547