靈芝枇杷花復(fù)方口服液的研制

陳 嬋，張 平，賴騰強(qiáng)，黃曉梅，熊世英

(福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，福建 福州 350119)

靈芝枇杷花復(fù)方口服液的研制

陳 嬋，張 平，賴騰強(qiáng)，黃曉梅，熊世英

(福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，福建 福州 350119)

以福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院栽培的枇杷靈芝為主要原料，配以枇杷花、紅棗、枸杞等輔料，添加適量的穩(wěn)定劑研制而成枇杷靈芝復(fù)方口服液。結(jié)果表明：紫芝為生產(chǎn)口服液的適宜品種，口服液配方最優(yōu)組合為靈芝用量2.5%、輔料用量2%、冰糖用量1%。0.01% β-CD可消除靈芝的苦澀味，改善口服液風(fēng)味同時(shí)提高其穩(wěn)定性。

靈芝；枇杷花；口服液

靈芝是我國傳統(tǒng)名貴中藥，也是我國目前研究和開發(fā)較多的藥用菌?，F(xiàn)代藥理研究表明，靈芝具有扶正固本，防治呼吸道疾病，調(diào)節(jié)血脂，保護(hù)心腦血管，調(diào)節(jié)血糖，減輕、延緩糖尿病并發(fā)癥，提高免疫力，輔助治療腫瘤等功效[1-4]。福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院張平等[5-6]利用枇杷枝、葉為培養(yǎng)基栽培出來的靈芝為枇杷靈芝，兼具靈芝與枇杷兩者的功效，提高了靈芝的品質(zhì)和藥用功效。枇杷花含有豐富的類黃酮、胡蘿卜素、齊墩果酸、熊果酸等生物活性成分，其提取液具有止渴下氣、利肺、止吐逆、去焦熱、潤五臟，以及治頭風(fēng)、鼻涕清涕等功效，具有較高的藥用價(jià)值和保健功能[7-8]。

目前，市場上的靈芝產(chǎn)品主要是靈芝切片，靈芝孢子粉或以靈芝為輔料的口服液產(chǎn)品[9-14]。功效多以健脾和胃、寧心安神、改善睡眠功效、增強(qiáng)免疫力等為主。此外，靈芝還可以開發(fā)成飲料[15-16]、酸奶等食品，如李廣富等[17]研究了靈芝功能成分酸奶營養(yǎng)品質(zhì)與風(fēng)味物質(zhì)分析，結(jié)果表明：靈芝酸、靈芝多糖酸奶中風(fēng)味物質(zhì)種類增加，功能品質(zhì)提高。本研究以枇杷靈芝為主要原料，配以枇杷花、紅棗、枸杞等輔料，添加適量的穩(wěn)定劑、調(diào)味劑研制而成枇杷靈芝口服液。通過研究篩選適合口服液的枇杷靈芝品種，并通過單因素和正交試驗(yàn)，結(jié)合食品分析相關(guān)評(píng)定手段，研究枇杷靈芝口服液的產(chǎn)品配方。以期為枇杷靈芝口服液的工業(yè)化生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)促進(jìn)靈芝及枇杷花的開發(fā)。

1 材料與方法

1.1 主要原料與儀器

枇杷靈芝：由福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院食用菌實(shí)驗(yàn)室栽培[5-6]提供。

枇杷花、紅棗、枸杞采購于永惠藥店；冰糖、β-環(huán)狀糊精(β-cyclodextrin，β-CD)、異VC-Na、檸檬酸鈉、六偏磷酸鈉、乙基麥芽酚均為市售；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(Aladdin chemistry Co. Ltd，蕓香葉苷，分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%)；熊果酸(由中國藥品生物制品鑒定所提供)，高氯酸、乙醇、冰醋酸、香草醛、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、三氯乙酸、硫代巴比妥酸無水乙醇、硫酸、蒽酮等所用試劑均為分析純。

AB204-N電子天平，由梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司生產(chǎn)；電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱，由上海陽光實(shí)驗(yàn)儀器有限公司生產(chǎn)；722S可見分光光度計(jì)，由上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；LDZX-40A不銹鋼立式滅菌器，由上海隆拓儀器設(shè)備廠生產(chǎn)；DHP-9052電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海申賢恒溫設(shè)備廠生產(chǎn)。

1.2 枇杷靈芝品種的篩選

將福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院培育的園8、無孢靈芝、紫芝、日紅芝、119號(hào)等枇杷靈芝，分別清洗干燥后粉碎，稱取一定質(zhì)量沸水提取1 h，過濾后，濾渣再次用沸水提取1 h，合并2次濾液，過濾后測定不同靈芝水提液多糖、總黃酮、三萜化合物含量，并通過感官鑒別的手段評(píng)價(jià)不同靈芝的口感。

1.3 工藝流程

1.3.1 枇杷靈芝浸提液工藝 靈芝→清洗→干燥→粉碎→一定體積比100 ℃浸提1 h(200目篩過濾)→濾渣再用一定體積比100 ℃浸提1 h→200目篩過濾→合并2次浸提液→40 μm孔徑濾網(wǎng)過濾→合并2次靈芝浸提液。

1.3.2 輔料浸提工藝 枇杷花∶紅棗∶枸杞按照1∶5∶3的比例→一定體積比沸水浸提30 min→40 μm孔徑濾網(wǎng)過濾→濾渣再用一定體積比沸水浸提30 min→40 μm孔徑濾網(wǎng)過濾→合并2次輔料浸提液。

1.3.3 口服液總體工藝流程 具體工藝流程見圖1。

圖1 口服液總體工藝流程

1.4 枇杷靈芝口服液生產(chǎn)配方試驗(yàn)

1.4.1 枇杷靈芝用量對(duì)口服液的影響 分別將1.0%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%靈芝粉加入一定量的水，沸水浸提1 h，用40 μm孔徑濾網(wǎng)過濾，濾渣再用一定量沸水浸提1 h后用40 μm孔徑濾網(wǎng)過濾，合并2次靈芝浸提液，利用折光儀測定可溶性固形物含量，在輔料用量為1.5%、冰糖用量為2.0%基礎(chǔ)上，將靈芝浸提液制作成口服液，感官評(píng)價(jià)其風(fēng)味，靈芝水提物提取率為浸提液多糖含量占靈芝粉質(zhì)量的比例。

1.4.2 輔料用量對(duì)口服液的影響 分別將0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3%輔料(枇杷花∶紅棗∶枸杞=1∶5∶3)加入一定量的水，沸水浸提30 min，用200目篩過濾，濾渣再用沸水浸提30 min后用200目篩過濾，合并2次濾液，利用折光儀測定可溶性固形物含量，在靈芝用量為2.5%、冰糖用量為2.0%基礎(chǔ)上，配制成口服液，感官評(píng)價(jià)口服液風(fēng)味。輔料提取率為輔料可溶性固形物占輔料質(zhì)量的比例。

1.4.3 冰糖用量對(duì)口服液的影響 在靈芝用量為2.5%、輔料用量為2.0%時(shí)，討論0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%冰糖用量對(duì)口服液風(fēng)味口感的影響。

1.4.4 枇杷靈芝口服液生產(chǎn)配方優(yōu)化正交試驗(yàn) 在感觀評(píng)定的基礎(chǔ)上，根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，本試驗(yàn)以靈芝用量、輔料用量、冰糖用量3個(gè)因素進(jìn)行L9(34)正交因素水平表，考察各因素對(duì)枇杷靈芝口服液的綜合影響，得出最佳配方。

1.4.5 β-CD對(duì)枇杷靈芝口服液的影響 在枇杷靈芝提取液、輔料提取液、冰糖用量固定的情況下，研究未添加、添加0.01%、0.02% β-CD對(duì)靈芝口服液苦味和穩(wěn)定性的影響。

1.5 產(chǎn)品感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 為保證感官評(píng)定的可靠性和客觀性，由來自不同地域、不同年齡、不同性別的30位技術(shù)人員組成評(píng)審組，所有評(píng)價(jià)員具有一定的專業(yè)知識(shí)、良好的感覺敏銳性及基本的感官評(píng)定知識(shí)與技巧，并在評(píng)定之前，對(duì)評(píng)價(jià)員做評(píng)價(jià)培訓(xùn)。由評(píng)審組依據(jù)色澤、香味、口感、組織形態(tài)等感官綜合評(píng)定[18-19]，感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1 枇杷靈芝口服液感觀評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)表

1.6 指標(biāo)測定

(1)多糖的測定：以葡萄糖為對(duì)照品采用蒽酮-硫酸法[20]，在625 nm進(jìn)行吸光度測定得出線性回歸方程為y=5.3269x+0.0025(R2=0.9999)，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)三萜化合物的測定[19]：以齊墩果酸為對(duì)照品，采用香草醛-冰醋酸法，在546 nm波長處測定吸光度，得出線性回歸方程為y=9.7404x-0.0029(R2=0.9998)，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(3)總黃酮的測定[18]：以蘆丁為對(duì)照品，采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法，在510 nm處測定吸光度。y=0.0277x+0.0013(R2=0.9994)，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(4)可溶性固形物含量：采用折光儀測定。(5)產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)[19]：感官指標(biāo)：對(duì)口服液的色澤、滋味、香氣、沉淀進(jìn)行描述。理化指標(biāo)：對(duì)口服液的多糖含量、總黃酮、可溶性固形物含量進(jìn)行測定。微生物指標(biāo)：菌落總數(shù)的測定按GB/T 4789.2—2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定》進(jìn)行。大腸菌群的測定按GB/T 4789.3—2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測定》進(jìn)行。

1.7 數(shù)據(jù)處理

采用DPS軟件對(duì)正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 枇杷靈芝品種對(duì)靈芝口服液的影響

將園8、無孢靈芝、紫芝、日紅芝、119號(hào)等枇杷靈芝分別清洗干燥后粉碎，稱取一定質(zhì)量粉未按照1.2的方法浸提枇杷靈芝，測定水提液多糖、總黃酮、三萜化合物含量，并通過感官鑒別的手段評(píng)價(jià)不同靈芝的口感。

由表2可知，5種不同菌種以同樣的栽培方法培育的枇杷靈芝中紫芝的多糖含量最高，119菌株的靈芝三萜化合物含量最高，幾種菌種總黃酮含量差異不大，相對(duì)而言紫芝中含量最高。由于三萜化合物含量高，水提液苦味較突出，制成口服液后口感大多數(shù)人較難接受，因此，選用多糖與總黃酮含量最高的紫芝作為栽培品種，以枇杷枝條代料栽培紫芝作為口服液的主要原料。并通過添加枇杷花、紅棗等輔料增強(qiáng)口服液中多糖與總黃酮的含量。

2.2 枇杷靈芝用量對(duì)靈芝口服液的影響

根據(jù)1.4.1的方法研究枇杷靈芝用量對(duì)靈芝口服液的影響。由表3可知，在靈芝用量為1%～3%時(shí)，靈芝水提物提取率為3.4%左右，未隨靈芝用量的變化而發(fā)生明顯變化，當(dāng)靈芝用量增加到3.5%時(shí)，靈芝水提物的提取率反之下降，可能由于料液比不適宜，造成有效成分未被完成浸提。在提取率差異不大的情況下，靈芝用量明顯影響靈芝口服液的風(fēng)味，當(dāng)靈芝用量過低時(shí)，口服液中靈芝風(fēng)味不足，而過多時(shí)口服液苦澀味過重，適口性較差。對(duì)于以靈芝為主要原料的口服液，應(yīng)保留一定的靈芝苦澀味，從而使產(chǎn)品的保健作用得到最佳效果，經(jīng)測定當(dāng)靈芝用量為2.5%，靈芝水提物提取率可達(dá)3.52%，風(fēng)味較好，苦澀味較易接受。

表3 靈芝用量對(duì)靈芝提取率及口服液風(fēng)味的影響

2.3 輔料用量對(duì)靈芝口服液的影響

口服液以靈芝為主要原料，含有獨(dú)特的靈芝風(fēng)味，但單一的靈芝風(fēng)味略單薄，有一定的苦澀味，多數(shù)人不喜歡，本研究選用枇杷花、紅棗與枸杞作為輔料，一方面，可以通過枇杷花增效口服液中類黃酮的含量，并改善靈芝的香氣；另一方面，通過紅棗與枸杞的甜味減輕靈芝的苦澀味。根據(jù)1.4.2的方法研究輔料用量對(duì)靈芝口服液的影響。表4結(jié)果表明：輔料的水提物提取率在21.4%～24.8%之間，當(dāng)輔料用量在0.5%～2.5%之間時(shí)，各處理間無較明顯差異，輔料用量為2.0%時(shí)，調(diào)配后的口感最佳。當(dāng)輔料用量增加到3%以上時(shí)，輔料水提物的提取率開始下降，可能原因是料液比不恰當(dāng)，輔料中有效物質(zhì)未被完全浸提出來。

表4 輔料用量對(duì)輔料提取率及口服液風(fēng)味的影響

2.4 冰糖用量對(duì)口服液的影響

靈芝口服液以功能保健定位，故宜低糖口味，雖配方中的紅棗與枸杞均有甜味，然而其甜味較甜膩。因此，本次試驗(yàn)選用口感清爽的冰糖作為甜味劑適當(dāng)改善其口感。根據(jù)1.4.3的方法研究冰糖用量對(duì)口服液的影響。結(jié)果表明：冰糖的用量以1.5%為宜，用量太低，口服液苦味無法掩蓋；用量太高，口服液過甜，同時(shí)影響口服液中靈芝特有風(fēng)味(表5)。

表5 冰糖用量對(duì)口服液影響

2.5 靈芝口服液最佳配方優(yōu)化正交試驗(yàn)

枇杷靈芝口服液的風(fēng)味口感與靈芝用量、輔料用量和冰糖用量之間的配比有密切關(guān)系。本試驗(yàn)以靈芝用量、輔料用量、冰糖用量為因素，設(shè)計(jì)三因素三水平，以感官評(píng)價(jià)為指標(biāo)，作L9(34)正交試驗(yàn)，通過正交試驗(yàn)獲得最佳配方。正交試驗(yàn)結(jié)果見表6。

從表6正交試驗(yàn)結(jié)果顯示：影響感官評(píng)價(jià)的因素大小依次為A>B>C，最佳組合為A3B2C1，即靈芝用量2.5%、輔料用量2.0%、冰糖用量1.5%時(shí)，口服液的風(fēng)味最佳。通過表7方差分析看出：靈芝用量(A)、白茶用量(B)、白砂糖用量(C)3個(gè)因素各水平的差異顯著。對(duì)于口服液口感影響最大的是靈芝的用量。

表6 正交試驗(yàn)結(jié)果

表7 正交試驗(yàn)方差分析

注：F0.05(2,2)=19.00,F0.01(2,2)=99.00。

2.6 β-CD對(duì)靈芝口服液的影響

本試驗(yàn)利用β-環(huán)狀糊精(β-CD)的包埋和緩釋能力，在一定程度上掩蓋靈芝的苦澀味，同時(shí)利用β-CD的環(huán)狀空腔結(jié)構(gòu)，保留枇杷花、紅棗以及枸杞的香味，且提高靈芝口服液的穩(wěn)定性[21]。根據(jù)1.4.5的方法研究β-CD對(duì)靈芝口服液的影響，表8結(jié)果表明：0.01% β-CD可一定程度上減輕靈芝口服液中的苦味，用量低于0.01%則效果不明顯。此外，β-CD對(duì)靈芝口服液的穩(wěn)定性起到一定的作用。

3 產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)

3.1 感官指標(biāo)

色澤：褐色。滋味與氣味：具有靈芝與枇杷花的香味，稍有苦澀味，有靈芝、紅棗、枸杞以及枇杷花的綜合口感。外觀組織形態(tài)：均勻的渾濁液，久置后允許有少量沉淀，無肉眼可見外來雜質(zhì)。

表8 β-CD對(duì)靈芝口服液的影響

3.2 理化指標(biāo)

通過1.6方法的理化指標(biāo)測定結(jié)果表明：口服液中靈芝多糖≥90 mg/100 mL，總類黃酮≥100 mg/100 mL,可溶性固形物≥5.0%。

3.3 微生物指標(biāo)

菌落總數(shù)≤100 cfu/mL，大腸桿菌數(shù)≤3 MPN/100 mL，致病菌未檢出。

4 結(jié)論

(1)以紫芝為栽培菌種，栽培的枇杷靈芝多糖含量高，提取物苦味稍低，適合研制口服液。

(2)枇杷靈芝與枇杷花，紅棗，枸杞通過感觀評(píng)定和正交試驗(yàn)法，調(diào)配研制出具有保健效果的枇杷靈芝口服液。該產(chǎn)品在保持枇杷靈芝獨(dú)特的風(fēng)味基礎(chǔ)上，通過枇杷花加強(qiáng)了類黃酮的含量，此外紅棗與枸杞的甜味改善了靈芝的苦澀味，枇杷靈芝口服液產(chǎn)品為褐色，澄清，有靈芝及枇杷花特有香味，適口性較好。單因素和正交試驗(yàn)表明，枇杷靈芝口服液配方最優(yōu)組合為靈芝用量2.5%、輔料用量2%、冰糖用量1.5%。通過產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)結(jié)果表明：口服液中每100 mL含靈芝多糖90 mg，總類黃酮100 mg、可溶性固形物含量≥5.0%。

(3)利用β-CD消除靈芝的苦味，添加量為0.01%時(shí)，可掩蓋靈芝部分苦味，同時(shí)又保留靈芝風(fēng)味，改善口服液的風(fēng)味。

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(責(zé)任編輯：曾小軍)

Preparation of Oral Liquid fromGanodermalucidumand Loquat Flower

CHEN Chan, ZHANG Ping, LAI Teng-qiang, HUANG Xiao-mei, XIONG Shi-ying

(Fujian Vocational College of Agriculture, Fuzhou 350119, China)

Ganodermalucidum, which was cultivated in Fujian Vocational College of Agriculture, was used as principal raw material; loquat flower, jujube and medlar were used as ingredients; a kind of complex oral liquid was developed by adding moderate stabilizer. The results showed thatFomesjaponicawas the suitable variety for the preparation of oral liquid. The optimum prescription for the preparation of oral liquid was found as follows: 2.5%G.lucidum, 2% ingredients, 1% rock candy, and 0.01% β-CD. 0.01% β-CD could remove the bitterness ofG.lucidum, improve the flavor of the prepared oral liquid, and enhance the stability of this product.

Ganodermalucidum; Loquat flower; Oral liquid

2017-04-24

福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院院級(jí)課題(2015JS003)。

陳嬋(1980─)，女，講師，碩士研究生，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏。

S567.3+1；TS201.1

A

1001-8581(2017)09-0094-05