HPLC法測(cè)定30種市售果味飲料中苯甲酸、山梨酸的含量

陳懸懸+李琴+劉雪梅+吳芝園

摘 要：本研究采用高效液相色譜法檢測(cè)了30種常見果味飲料中苯甲酸、山梨酸的含量。結(jié)果表明：果汁飲料中苯甲酸、山梨酸含量分別在0～100μg/mL 范圍內(nèi)呈線性關(guān)系（r>0.9998），RSD 為 0.38%和0.26%。用該方法測(cè)定的30種市售飲料中均未檢出苯甲酸，7種飲料被檢出山梨酸，均未超過最大添加量。該方法精密度、重復(fù)性和準(zhǔn)確度均良好，可用于果汁飲料中苯甲酸和山梨酸含量的測(cè)定。

關(guān)鍵詞：HPLC；果汁飲料；苯甲酸；山梨酸

食品中該兩項(xiàng)防腐劑的檢測(cè)方法主要有氣相色譜法[2]、高效液相色譜法[3-5]和紫外分光光度法[6]等。本研究利用高效液相色譜法對(duì)30種常見果味飲料中苯甲酸和山梨酸的含量進(jìn)行了測(cè)定。該方法成本低、步驟簡(jiǎn)單，適合所有果味飲料的測(cè)定。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

普源3000 高效液相色譜儀（配有UV檢測(cè)器）：北京普源；AP-01P真空泵：塞恩斯公司；As120型超聲波清洗器：塞恩斯公司；砂芯過濾裝置：塞恩斯公司；0.45μm 微孔濾膜（水系和有機(jī)系）和 0.45μm針頭式過濾器（水系和有機(jī)系）：上海亞新；CP2250電子天平：塞特利斯公司。

1.2 試劑

甲醇（色譜純）：天津大茂公司；氨水（分析純）：天津大茂公司；乙酸銨（分析純）：天津大茂公司；苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品：南京春秋生物技術(shù)有限公司（CAS No.65-85-0）；山梨酸標(biāo)準(zhǔn)品：南京春秋生物技術(shù)有限公司（CAS No.110-44-1）；果汁飲料樣品：匯源等品牌果汁，均來源于當(dāng)?shù)卮笮统小?/p>

2 方法

2.1 流動(dòng)相與標(biāo)準(zhǔn)液的配制

2.1.1 乙酸銨溶液配制

精密稱取乙酸銨1.54g，加水溶解后定容至1000ml，并用0.45μm微孔濾膜抽濾，超聲脫氣。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制

精密稱取0.1001g苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品和0.1055g山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品，分別用蒸餾水溶解并定容至100ml，其含量均為1.00mg/ml。

2.2樣品前處理

精密量取市售的果汁飲料少量于燒杯中，用氨水（1+1）調(diào)節(jié)pH值至中性，精密量取2ml，至10ml量瓶，用超純水定容至刻度，經(jīng)水系針頭式過濾器（0.45μm）過濾，備用。

2.3 色譜條件

色譜柱：C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-乙酸銨（5：95）；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)230nm；進(jìn)樣體積10μl；實(shí)驗(yàn)用保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

3 結(jié)果與分析

3.1 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

在2.3的色譜條件下，用60μg/ml苯甲酸和山梨酸標(biāo)準(zhǔn)混合溶液進(jìn)樣，記錄色譜圖，如圖1所示。

3.2 精密度實(shí)驗(yàn)

取60μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)混合液，由2.3的方法，取 10μl注入液相色譜儀，進(jìn)行精密度試驗(yàn)，進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算RSD。見表2

3.3線性范圍實(shí)驗(yàn)

將濃度為0、20、40、60、80、100μg/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，各取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積。并以各標(biāo)準(zhǔn)品濃度（xμg/ml）為橫坐標(biāo)，峰面積y為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得苯甲酸和山梨酸的回歸方程及相關(guān)系數(shù)，見表2。

3.4樣品測(cè)定

取市售30種果汁飲料樣品按照2.2的樣品處理方法和2.3的色譜條件進(jìn)行分析，得到30種樣品的色譜譜圖，記錄峰面積，計(jì)算樣品中苯甲酸和山梨酸含量。

4 結(jié)果與結(jié)論

通過實(shí)驗(yàn)研究和計(jì)算發(fā)現(xiàn)，被檢的30種市售果汁飲料均未檢出苯甲酸，有7個(gè)樣品檢出山梨酸，但其含量均未超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

實(shí)驗(yàn)中利用的HPLC法操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、成本低廉，具有較好的穩(wěn)定性和線性范圍，可滿足常規(guī)對(duì)這2種添加劑的檢測(cè)需要。

基金項(xiàng)目 江蘇省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃（201612688009Y）

參考文獻(xiàn)

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2016，21-28.endprint