急性髓系白血病患者血清腺苷脫氨酶測定的意義

韓靜穎，張之芬，鞠瑛，劉天璞，李禎，李元堂，張炳昌

(山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部，山東濟(jì)南250021)

急性髓系白血病患者血清腺苷脫氨酶測定的意義

韓靜穎，張之芬，鞠瑛，劉天璞，李禎，李元堂，張炳昌

(山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部，山東濟(jì)南250021)

目的探討血清腺苷脫氨酶(ADA)在急性髓系白血病(AML)的變化規(guī)律及其意義。方法收集山東省立醫(yī)院2012年1月至2013年12月75例治療前急性髓系白血病患者(其中63例AML患者進(jìn)行自身治療前后比較)和86例健康對(duì)照者外周血血清。采用PNP-XTO-POD偶聯(lián)連續(xù)監(jiān)測法測定血清腺苷脫氨酶(ADA)水平，采用速率法測定谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)水平。檢測健康對(duì)照組與AML組血清ADA水平，比較AML治療前后ADA水平變化，采用受試者工作特征曲線(ROC曲線)確定ADA最佳截點(diǎn)，并將AML治療前患者分為低ADA組(ADA＜13.50 U/L)和高ADA組(ADA≥13.50 U/L)，分析兩組間年齡、性別、AST、ALT和GGT差異。結(jié)果AML組患者ADA水平[15.30(9.50，31.30)U/L]顯著高于健康對(duì)照組[8.45(7.05，11.35)U/L]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)；AML組治療后ADA水平[10.70(8.10，14.90)U/L]顯著低于AML治療前[14.70(9.60，26.70)U/L]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)；采用ROC曲線，將AML治療前患者分為高ADA組(ADA≥13.50 U/L)和低ADA組(ADA＜13.50 U/L)，其中高ADA組中AST、ALT及GGT水平顯著高于低ADA組(AST Z=-3.102，P= 0.002；ALT Z=-2.046，P=0.041；GGT Z=-2.794，P=0.005)。結(jié)論ADA檢測可以作為AML患者的一項(xiàng)常規(guī)輔助檢查，對(duì)AML的疾病診斷及評(píng)估病情的發(fā)展具有一定的價(jià)值。

急性髓系白血病；腺苷脫氨酶；谷草轉(zhuǎn)氨酶；谷丙轉(zhuǎn)氨酶；谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶

腺苷脫氨酶(adenosine deaminase，ADA)是參與嘌呤核苷酸代謝的重要酶，參與核酸分解代謝、催化腺苷和脫氧腺苷脫氨轉(zhuǎn)變成次黃嘌呤核苷過程中的酶，是與機(jī)體細(xì)胞免疫活性有重要關(guān)系的核酸代謝酶類[1]，血液中ADA主要存在于血細(xì)胞中，如紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞，其中T淋巴細(xì)胞比B細(xì)胞活性更高[2]。文獻(xiàn)有關(guān)ADA報(bào)道多見于與肝病及結(jié)核病的研究[3-5]，但關(guān)于ADA在AML方面研究比較少見。

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)是常見的一種造血系統(tǒng)克隆性惡性疾病，是髓系祖細(xì)胞在發(fā)育過程中受阻于分化成熟的某一定階段，因白血病細(xì)胞的自我更新增殖、增殖失控、分化障礙、凋亡受阻等，在骨髓和其他造血組織中大量增殖累積而停滯在細(xì)胞發(fā)育的早期階段[6]。近年來，AML的高發(fā)病率越來越引起人們的重視，研究發(fā)現(xiàn)ADA水平與急性白血病存在密切相關(guān)性，已有文獻(xiàn)報(bào)道動(dòng)態(tài)監(jiān)測ADA水平有助于對(duì)急性白血病患者的療效和預(yù)后[7]。本文測定AML患者血清ADA水平及與其他指標(biāo)的相關(guān)性，進(jìn)而探討ADA水平在AML疾病中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2012年1月至2013年12月在山東省立醫(yī)院治療的AML患者共75例為AML組，男性41例，女性34例，年齡3～83[36.00(21.50,57.50)]歲。所有病例均經(jīng)血液、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查及急性白血病形態(tài)免疫細(xì)胞遺傳學(xué)分型確診為AML，均已排除心、肝、腎、重癥聯(lián)合免疫缺陷(SCID)、獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)、腫瘤、腦膜炎、其他腫瘤者。選擇同期在山東省立醫(yī)院體檢中心的健康體檢者86例，男性38例，女性48例，年齡6～72[38.50(28.00，52.25)]歲，為健康對(duì)照組。AML組和健康對(duì)照組年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(年齡Z=-0.264，P=0.791；性別χ2=1.761，P=0.185)。在75例AML患者中，有63例患者經(jīng)相同方案治療，男性37例，女性26例，年齡3～77歲[10 (10.00,50.00)]，設(shè)為AML治療前組和AML治療后組，進(jìn)行自身治療前后比較。

1.2 方法

1.2.1 樣本清晨空腹抽血，分離血清4 h內(nèi)檢測血清腺苷脫氨酶(ADA)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷氨酸轉(zhuǎn)肽酶(GGT)，標(biāo)本應(yīng)避免溶血。

1.2.2 試劑貝克曼庫爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(蘇州)有限公司AST、ALT、GGT試劑盒，按試劑盒說明書操作；浙江東甌診斷產(chǎn)品有限公司ADA試劑盒，按試劑盒說明書操作。

1.2.3 儀器OLYMPUS-AU5400全自動(dòng)生化分析儀。

1.2.4 方法在奧林巴斯AU5400全自動(dòng)生化分析儀上采用酶法測定ADA，蘋果酸脫氫酶(MDH)法測定AST，乳酸脫氫酶(LDH)法測定ALT，速率法測定GGT。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，比較采用t檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)P50(P25，P75)表示，組間比較采用秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。采用受試者工作特征(receiver operating characteristic curve，ROC曲線)評(píng)價(jià)ADA對(duì)ALL患者的診斷價(jià)值，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)意義。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)本實(shí)驗(yàn)室正常參考范圍見表1。

表1 正常參考范圍(U/L)

2 結(jié)果

2.1 AML患者的ADA水平與健康對(duì)照組比較AML組[15.30(9.50，31.30)U/L]與健康對(duì)照組[8.45(7.05，11.35)U/L]比較，ADA水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=5.922，P＜0.001)。

2.2 AML患者治療前、后ADA水平比較AML組治療后ADA水平[10.70(8.10，14.90)U/L]顯著低于治療前[14.70(9.60，26.70)U/L]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.590，P＜0.001)。

2.3 繪制ROC曲線根據(jù)健康對(duì)照組及AML組ADA水平繪制ROC曲線，ROC曲線下面積為0.771，95%可信區(qū)間為0.696～0.846，靈敏度為58.70%，特異性為87.20%，見圖1。根據(jù)約登指數(shù)的最大值確定最佳截點(diǎn)為13.50 U/L，以此截點(diǎn)為界分為高ADA組(ADA≥13.50 U/L)和低ADA組(ADA＜13.50 U/L)。高ADA組患者44例，男性22例，女性22例，年齡6～77[36.00(19.00，51.00)]歲；低ADA組患者31例，男性19例，女性12例，年齡3～83[35.00 (25.85，61.25)]歲。高ADA組和低ADA組數(shù)據(jù)年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(年齡Z=-0.903，P=0.367；性別χ2=0.935，P=0.333)。

圖1 AML患者ADA分布的ROC曲線

2.4 高ADA組與低ADA組AML患者的AST、ALT及GGT水平比較AML患者高ADA組中AST、ALT及GGT水平與低AML組比較顯著升高(AST Z=-3.102，P=0.002；ALT Z=-2.046，P=0.041；GGT Z=-2.794，P=0.005)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表2 高ADA組與低ADA組AML患者肝功指標(biāo)比較[P50(P25，P75)]

3 討論

ADA是一種核酸分解代謝酶類，廣泛分布于人體各組織中[8]，而血液中紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞ADA含量是血清的40～70倍[9]。近年來血清及體液中ADA活性的測定已在多種疾病[3-6]的診斷、鑒別診斷等研究中越來越受到重視。本研究檢測了AML患者ADA水平，發(fā)現(xiàn)AML組患者外周血ADA水平顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[10]。因此，該結(jié)論提示ADA水平的檢測可為臨床鑒別AML提供有效的參考。我們還分析AML治療前組與AML治療后組ADA水平，結(jié)果顯示兩組ADA水平有顯著性差異，且治療后ADA水平顯著低于治療前，表明ADA活性與治療有關(guān)。

筆者根據(jù)AML患者和健康對(duì)照者ADA水平繪制ADA的ROC曲線。結(jié)果顯示ADA的曲線下面積為0.771，95%可信區(qū)間為0.696～0.846。一般認(rèn)為，AUC＞0.9表明篩檢價(jià)值很高，＞0.7表明篩檢價(jià)值中等[11]。我們的結(jié)果提示血清ADA對(duì)AML患者在臨床診斷上有一定的價(jià)值。我們進(jìn)一步根據(jù)ROC曲線分析確定篩檢試驗(yàn)陽性結(jié)果的臨界值，通過高于或低于某界值判斷患者的患病概率。實(shí)驗(yàn)表明血清ADA水平輔助診斷AML價(jià)值根據(jù)Youden指數(shù)為最大值時(shí)，ADA的診斷界值為13.50 U/L，靈敏度為58.70%，特異性87.20%，該結(jié)果說明診斷準(zhǔn)確性較高，具有較高的診斷價(jià)值。

ADA廣泛存在于肝、腎、肌肉等組織中，正常情況下血清中ADA主要來源于肝臟[12]，報(bào)道顯示無論何種原因造成肝細(xì)胞受損、壞死或膜通透性增加時(shí)，均能導(dǎo)致血清ADA水平增高[13-14]。AML是成人最常見的一類急性白血病，約占成人白血病發(fā)病率的70%[15]。因此研究AML患者ADA與AST、ALT、GGT的關(guān)系是具有臨床價(jià)值的。根據(jù)ROC曲線所得出的ADA臨界值為13.50，我們將AML患者ADA分為低高兩組，并對(duì)其所對(duì)應(yīng)的AST、ALT、GGT指標(biāo)進(jìn)行比較，結(jié)果顯示AML患者低ADA組與高ADA組中AST、ALT及GGT比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且高ADA組肝功能指標(biāo)大于低ADA組，因此筆者可根據(jù)ADA臨界值對(duì)AML患者進(jìn)行初步診斷及評(píng)估病情。

綜上所述，AML患者的ADA活性增高，ADA的分泌不僅來源于肝損傷，而且也來源于AML細(xì)胞。因此，ADA對(duì)AML患者具有輔助診斷價(jià)值，且本研究表明ADA水平在經(jīng)過治療后可明顯降低。ADA檢測可以作為AML患者的一項(xiàng)常規(guī)輔助檢查，對(duì)AML的疾病診斷及評(píng)估病情的發(fā)展具有一定的價(jià)值。

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Determination of serum adenosine deaminase in patients with acute myeloid leukemia significance.

HAN Jing-ying,ZHANG Zhi-fen,JU Ying,LIU Tian-pu,LI Zhen,LI Yuan-tang,ZHANG Bin-chang.Department of Laboratory Medicine,Shandong Provincial Hospital Affiliated to Shandong University,Jinan 250021,Shandong,CHINA

ObjectiveTo explore the changes and its significance of serum adenosine deaminase(ADA)in patients with acute myeloid leukemia(AML).MethodsThe peripheral blood sera of 75 patients with AML(of which 62 had comparison before and after the treatment)and 86 healthy controls(control group)were collected in the Shandong Provincial Hospital from January 2012 to December 2013.Serum adenosine deaminase(ADA)was detected by using the PNP-XTO-POD coupling continuous monitoring method,and the alanine transaminase(ALT),glutamic oxaloacetic transaminase(AST)and gamma glutamyl transpeptidase(GGT)were detected using performance rate method.The serum ADA levels were detected between the control group and AML group.The change of ADA levels were compared in AML group before and after treatment.The receiver-operating characteristic curve(ROC curve)was used to determine the best cutoff point of ADA.Then AML patients before treatment were divided into low ADA group(ADA＜13.50 U/L) and high ADA group(ADA＞13.50 U/L)according to the cutoff point.The differences in age,sex,AST,ALT and GGT were analyzed between the two groups.ResultsThe ADA levels in the AML group[15.30(9.50,31.30)(U/L)]were significantly higher than[8.45(7.05,11.35)U/L]in the normal control group(Z=5.922,P＜0.001).Furthermore,the ADAlevels in the before treatment group[10.70(8.10,14.90)U/L]were significantly lower than[14.70(9.60,26.70)U/L] those after treatment group(Z=-3.590,P＜0.001).Using ROC curve,the before treatment group patients were divided into high ADA group(ADA≥13.50 U/L)and low ADA group(ADA＜13.50 U/L).The levels of AST,ALT and GGT in high ADA group were significantly higher than those in low ADA group(AST Z=-3.102,P=0.002;ALT Z=-2.046,P= 0.041;GGT Z=-2.794,P=0.005).ConclusionADA detection can be used as a routine examination in patients with AML,which has a certain value to the development of disease diagnosis and severity evaluation ofAML.

Acute myeloid leukemia(AML);Adenosine deaminase(ADA);Glutamic oxaloacetic transaminase (AST);Alanine transaminase(ALT);Gamma glutamyl transpeptidase(GGT)

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.15.021

R733.71

A

1003—6350（2017）15—2481—03

2016-12-22)

山東省自然科學(xué)基金(編號(hào)：ZR2011HM019)；山東省優(yōu)秀中青年科學(xué)家獎(jiǎng)勵(lì)基金(編號(hào)：B2010YY045)

張炳昌。E-mail：zhangbingchangb@163.com