基于鐵死亡機(jī)制的淋巴瘤中醫(yī)藥干預(yù)基礎(chǔ)研究進(jìn)展

李 希，陸嘉惠，徐 旻，沈 偉，傅 華，周雯怡，袁欣蓓

1.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院（上海 200032）；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬市中醫(yī)醫(yī)院（上海 200071）

淋巴瘤是常見(jiàn)的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，分類亞型有170 多種，具有很強(qiáng)的個(gè)體異質(zhì)性，因此治療療效差異大。淋巴瘤現(xiàn)有臨床指南中的治療方案平均緩解率不足70%，大量臨床試驗(yàn)研究尚在推行過(guò)程中，仍需探究可使患者進(jìn)一步受益的治療方法及藥物［1-2］。2012 年Dixon 等［3］發(fā)現(xiàn)，小分子藥物中的鐵死亡誘導(dǎo)劑Erastin可觸發(fā)一種鐵依賴性、調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡形式——鐵死亡。與凋亡、壞死、自噬等細(xì)胞死亡方式不同，鐵死亡的主要特征是由于細(xì)胞內(nèi)鐵依賴的脂質(zhì)活性氧（ROS）堆積，細(xì)胞發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化，從而誘發(fā)細(xì)胞死亡。近年來(lái)研究［4-6］發(fā)現(xiàn)多種淋巴瘤細(xì)胞系對(duì)鐵死亡敏感，因此鐵死亡機(jī)制在治療及控制淋巴瘤的發(fā)展過(guò)程中存在應(yīng)用潛力。

中醫(yī)藥對(duì)于惡性淋巴瘤具有一定的防治效果，實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)中藥有效成分以及部分復(fù)方制劑已經(jīng)展現(xiàn)出鐵死亡誘導(dǎo)作用，具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，且毒副作用小，但具體的作用機(jī)制有待深入研究。本文通過(guò)綜述近年來(lái)鐵死亡機(jī)制在淋巴瘤中的應(yīng)用以及中醫(yī)藥干預(yù)作用的研究進(jìn)展，旨在為中醫(yī)藥防治惡性淋巴瘤提供理論依據(jù)。

1 鐵死亡的機(jī)制研究

鐵死亡是由細(xì)胞鐵負(fù)荷增加驅(qū)動(dòng)，并通過(guò)鐵調(diào)節(jié)、脂質(zhì)代謝和ROS堆積過(guò)載等一系列生物學(xué)作用所誘發(fā)的一種特殊細(xì)胞死亡形式，其復(fù)雜過(guò)程中還會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞膜完整性的喪失和各個(gè)細(xì)胞器的異常變化等［7-8］。鐵死亡與淋巴瘤發(fā)生的關(guān)鍵機(jī)制途徑多集中于鐵代謝、脂質(zhì)代謝、胱氨酸-谷氨酸反向轉(zhuǎn)運(yùn)體/谷胱甘肽/谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4（System Xc-/GSH/GPX4）通路以及p53基因調(diào)控途徑，核心關(guān)聯(lián)細(xì)胞器主要包括線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體等。

1.1 鐵死亡的分子機(jī)制

1.1.1 鐵代謝途徑 鐵是維持人體生命的重要微量元素，也是ROS 累積和鐵死亡發(fā)生的必需元素。鐵一般情況下以二價(jià)鐵離子（Fe2+）或三價(jià)鐵離子（Fe3+）形式存在于機(jī)體內(nèi)［9］，過(guò)量的Fe2+能夠通過(guò)芬頓反應(yīng)誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生大量的ROS，進(jìn)一步與多不飽和脂肪酸（PUFAs）反應(yīng)，促進(jìn)脂質(zhì)過(guò)氧化引發(fā)鐵死亡［10］。部分為芬頓反應(yīng)介導(dǎo)脂質(zhì)氫過(guò)氧化物形成的酶，需要Fe2+作為輔助因子來(lái)控制鐵池的大小，從而促進(jìn)不穩(wěn)定鐵積累并調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)鐵死亡的敏感性［11］。來(lái)自鐵池中的Fe2+可與GSH結(jié)合，GSH 的消耗會(huì)促進(jìn)不穩(wěn)定鐵的可用性，動(dòng)員芬頓反應(yīng)以介導(dǎo)鐵死亡［12］。血紅素加氧酶-1（HO-1）也可以通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)Fe2+的積累來(lái)誘導(dǎo)鐵死亡［13］。另外，膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ferroportin）和prominin-2 蛋白（prominin-2）介導(dǎo)的含鐵蛋白多泡體可耗盡鐵池中的鐵，進(jìn)而誘導(dǎo)對(duì)鐵死亡的抗性［14］。熱休克蛋白β1（HSPβ1）過(guò)表達(dá)通過(guò)穩(wěn)定F-肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架來(lái)下調(diào)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1（TfR1）介導(dǎo)的鐵攝取，從而抑制鐵死亡［15］。

1.1.2 脂質(zhì)代謝途徑 鐵死亡主要是由特定膜脂的過(guò)氧化作用驅(qū)動(dòng)。游離PUFAs 是合成脂質(zhì)信號(hào)傳遞介質(zhì)的底物，對(duì)ROS 誘導(dǎo)的過(guò)氧化反應(yīng)高度敏感［16］。PUFAs 比飽和脂肪酸（SFAs）和單不飽和脂肪酸（MUFAs）更容易被細(xì)胞內(nèi)的ROS 氧化，進(jìn)而產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化物。PUFAs 在摻入包括磷脂（PL）在內(nèi)的膜脂后被氧化，其過(guò)度積累會(huì)導(dǎo)致鐵死亡［17］。溶血磷脂酰膽堿?；D(zhuǎn)移酶3（LPCAT3）和?；o酶A 合成酶長(zhǎng)鏈家族成員4（ACSL4）可參與激活PUFAs 的跨膜特性，并將其整合到PL 中，是誘導(dǎo)鐵死亡的敏感因子［18］。PUFAs還可以被脂肪氧化酶（LOXs）催化的位點(diǎn)特異性氧化，導(dǎo)致鐵死亡的發(fā)生［19］。相反，MUFAs 可通過(guò)酰基輔酶A 合成酶長(zhǎng)鏈家族成員3（ACSL3）將PUFAs 成分從PUFA-PL 中置換出來(lái)，或通過(guò)抑制乙酰輔酶A 羧化酶（ACC）的磷酸化來(lái)限制PUFAs 的生物合成，可起到抗鐵死亡/保護(hù)細(xì)胞免受鐵死亡的作用［20］。

1.1.3 System Xc-/GSH/GPX4 通路途徑 System Xc-/GSH/GPX4 通路是鐵死亡與淋巴瘤相關(guān)領(lǐng)域的熱點(diǎn)研究通路，是保護(hù)細(xì)胞免受鐵死亡的中央調(diào)節(jié)器［21］。System Xc-主要由輕鏈亞基溶質(zhì)載體家族7 成員11（SLC7A11）與重鏈亞基溶質(zhì)載體家族3 成員2（SLC3A2）組成，其作用是通過(guò)細(xì)胞膜介導(dǎo)細(xì)胞外半胱氨酸和細(xì)胞內(nèi)谷氨酸的交換；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPX）是具有過(guò)氧化物酶活性的酶家族，其表達(dá)異常與癌變有關(guān)，其中 GPX4 是鐵死亡的關(guān)鍵抑制因子；半胱氨酸和谷氨酸是GSH 生物合成的底物，GPX4 作為GSH 依賴性過(guò)氧化物酶，通過(guò)將有毒性的脂質(zhì)過(guò)氧化物（PL-PUFA-OOH）還原為無(wú)毒的非活性和非致死性的PUFA磷脂醇（PUFA-PL-OH）來(lái)對(duì)抗脂質(zhì)過(guò)氧化［22］。鐵死亡誘導(dǎo)劑Erastin 以及RSL3、RIN56 等的作用靶點(diǎn)即是通過(guò)直接抑制System Xc-介導(dǎo)的半胱氨酸輸入導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)GSH的消耗，或間接促進(jìn)GPX4的降解來(lái)誘導(dǎo)鐵死亡效應(yīng)的發(fā)生［23］。GSH 作為細(xì)胞抗氧化的重要物質(zhì)，對(duì)細(xì)胞鐵死亡的抑制發(fā)揮關(guān)鍵作用，多藥耐藥基因MDR1可通過(guò)將GSH 外排，增加細(xì)胞對(duì)鐵死亡的敏感性［24］。

1.1.4p53基因調(diào)控途徑p53基因是人體重要的抑癌基因，其失活對(duì)腫瘤的形成極為關(guān)鍵。研究提示，p53基因?qū)﹁F死亡存在雙向調(diào)節(jié)作用。p53基因可在轉(zhuǎn)錄水平抑制蛋白SLC7A11 的表達(dá)，進(jìn)而減少GSH 的生物合成，從而誘導(dǎo)鐵死亡并抑制腫瘤生長(zhǎng)［25］；花生四烯酸12-脂肪氧化酶（ALOX12）可氧化PUFAs 并誘導(dǎo)細(xì)胞鐵死亡，p53基因可通過(guò)抑制蛋白SLC7A11 表達(dá)誘導(dǎo)ALOX12 活性，從而限制其功能［26］。p53基因座下游的一個(gè)新靶基因——獨(dú)立磷脂酶基因A2beta，被發(fā)現(xiàn)可通過(guò)切割過(guò)氧化脂質(zhì)和從膜PLs 釋放PUFA 來(lái)抑制鐵死亡［27］。p21基因是一種可以抑制細(xì)胞周期進(jìn)程的p53基因轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)，其可將合成核酸所需的部分原料轉(zhuǎn)化為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶和GSH的底物并抑制鐵死亡［28］。

1.2 鐵死亡中細(xì)胞器的作用 細(xì)胞器是細(xì)胞的重要組成部分，包括線粒體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等，具有維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的重要功能。在應(yīng)激條件下，細(xì)胞器的功能障礙會(huì)促進(jìn)細(xì)胞死亡過(guò)程，其中就包括了細(xì)胞的鐵死亡。

1.2.1 線粒體 鐵死亡細(xì)胞通常表現(xiàn)為線粒體腫脹，伴隨線粒體嵴減少、線粒體膜電位耗散以及線粒體膜通透性增加，進(jìn)而影響鐵死亡誘導(dǎo)物的活性。

（1）線粒體與ROS：GPX4、重組人超氧化物歧化酶2（SOD2）和微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1（MGST1）是線粒體相關(guān)的抗氧化蛋白，在鐵死亡過(guò)程中保護(hù)線粒體免受氧化損傷；干擾素基因刺激蛋白1-線粒體融合蛋白Mitofusin 1/Mitofusin 2（STING1-Mfn1/Mfn2）通路通過(guò)誘導(dǎo)線粒體融合和隨后的ROS產(chǎn)生來(lái)觸發(fā)鐵死亡。［29-30］

（2）線粒體與鐵代謝：鐵可以通過(guò)蛋白溶質(zhì)載體家族25 成員37（SLC25A37）和溶質(zhì)載體家族25 成員28（SLC25A28）轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體并用于合成血紅素或鐵硫蛋白質(zhì)（Fe-S），而血紅素促進(jìn)鐵死亡［31］；線粒體DNA（mtDNA）復(fù)制需要DNA 聚合酶（POLG）和脫氧鳥(niǎo)苷激酶（DGUOK），扎西他濱和線粒體轉(zhuǎn)錄因子A（TFAM）降解對(duì)POLG 的抑制誘導(dǎo)mtDNA 的應(yīng)激，從而激活GASSTING1通路依賴性自噬以介導(dǎo)鐵死亡［32］。

（3）線粒體與三羧酸（TCA）循環(huán)：TCA 循環(huán)通過(guò)促進(jìn)乙酰乙酸（ACAC）介導(dǎo)的脂肪酸合成來(lái)增強(qiáng)鐵死亡，這種作用被丙酮酸脫氫酶激酶4（PDK4）介導(dǎo)的葡萄糖代謝抑制或被谷氨酰胺酶2（GLS2）介導(dǎo)的谷氨酰胺分解增強(qiáng)。［33］

1.2.2 溶酶體 溶酶體是酸性膜結(jié)合細(xì)胞器，通過(guò)自噬的激活、溶酶體組織蛋白酶的釋放、溶酶體鐵或一氧化氮（NO）的積累3種機(jī)制促進(jìn)鐵死亡。

（1）自噬的激活：自噬的特征是形成雙膜結(jié)合囊泡，由自噬相關(guān)抗胸腺細(xì)胞球蛋白（ATG）的連續(xù)貢獻(xiàn)分級(jí)執(zhí)行，敲低ATG基因可抑制癌細(xì)胞中的鐵死亡；幾種選擇性自噬途徑可通過(guò)去除不同的貨物來(lái)促進(jìn)鐵死亡，包括鐵蛋白、溶質(zhì)載體家族40 成員1（SLC40A1）、GPX4、芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白（ARNTL）和脂滴。［34］

（2）溶酶體組織蛋白酶釋放：溶酶體組織蛋白酶B（CTSB）的釋放可導(dǎo)致細(xì)胞鐵死亡，溶酶體CTSB 因信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3（STAT3）的激活而上調(diào)，進(jìn)而從溶酶體轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核，切割DNA 或組蛋白H3，而H3裂解會(huì)改變鐵死亡相關(guān)基因的表達(dá)。［35］

（3）溶酶體鐵/NO 積累：溶酶體鐵/NO 的積累可以通過(guò)誘導(dǎo)脂質(zhì)過(guò)氧化促進(jìn)溶酶體依賴性鐵死亡。［36］

1.2.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是蛋白質(zhì)合成和加工以及脂質(zhì)分泌的中心細(xì)胞器。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激會(huì)觸發(fā)未折疊蛋白質(zhì)反應(yīng)，從而恢復(fù)蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)，但當(dāng)細(xì)胞無(wú)法恢復(fù)穩(wěn)態(tài)時(shí)也可引發(fā)細(xì)胞死亡。

（1）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激：來(lái)自真核翻譯起始因子2α激酶3/真核翻譯起始因子2A/轉(zhuǎn)錄激活因子4（EIF2aK3/EIF2A/ATF4）通路的應(yīng)激，在鐵死亡中起雙重作用；ATF4通過(guò)促進(jìn)熱休克蛋白A5（HSPA5）介導(dǎo)的GPX4蛋白穩(wěn)定或SLC7A11 表達(dá)來(lái)抑制鐵死亡，而其通過(guò)上調(diào)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白1（CHAC1）以降解GSH 來(lái)誘導(dǎo)鐵死亡。［37］

（2）STING1：STING1 是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的一種跨膜蛋白，通過(guò)自噬或Mfn1/Mfn2 介導(dǎo)的線粒體融合途徑促進(jìn)鐵死亡。［38-39］

（3）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)酶：硬脂酰輔酶A 去飽和酶（SCD）是膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1（SREBP1）的靶基因，長(zhǎng)鏈酰基輔酶A 合成酶3（ACSL3）激活MUFAs后，可競(jìng)爭(zhēng)性地抑制PUFAs誘導(dǎo)的鐵死亡。［40］

（4）鋅離子（Zn2+）：Zn2+可誘導(dǎo)鐵死亡，鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白溶質(zhì)載體家族39 成員7（SLC39A7）對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的抑制可以觸發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因HERPUD1的表達(dá)，以驅(qū)動(dòng)鐵死亡抗性。［41］

2 鐵死亡與淋巴瘤

多種淋巴瘤細(xì)胞系呈現(xiàn)對(duì)上述鐵死亡途徑的敏感性，在應(yīng)用不同類型、不同劑量的鐵死亡誘導(dǎo)劑干預(yù)后，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均呈現(xiàn)出高強(qiáng)度腫瘤抑制效果。部分臨床研究發(fā)現(xiàn)了鐵死亡對(duì)淋巴瘤診治方面的貢獻(xiàn)：彌漫大B 細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）細(xì)胞系在鐵死亡淋巴瘤相關(guān)性研究中居首，二者之間存在高度關(guān)聯(lián)。DLBCL是非霍奇金淋巴瘤病理分型中最常見(jiàn)的亞型，其發(fā)生及預(yù)后與GPX4 的過(guò)度表達(dá)或缺失密切相關(guān)，并對(duì)System Xc-的抑制敏感，故DLBCL 是對(duì)鐵死亡高度敏感的一類淋巴瘤［42］。臨床研究［43］提示，通過(guò)免疫組織化學(xué)法評(píng)估DLBCL 患者的GPX4 表達(dá)，發(fā)現(xiàn)GPX4 陽(yáng)性組相對(duì)于陰性組的總生存期較短，GPX4 的過(guò)表達(dá)是DLBCL 的獨(dú)立不良預(yù)后指標(biāo)；另外，通過(guò)評(píng)估鐵死亡相關(guān)基因ZEB1、PSAT1、NGB、Nrf2、LAMP2、HIF1A、FH和CXCL2的表達(dá)量，也可有效地對(duì)DLBCL 患者的預(yù)后生存進(jìn)行分層［44］。DLBCL 對(duì)GPX4 調(diào)節(jié)的鐵死亡敏感［45］；鐵死亡誘導(dǎo)劑咪唑酮莫斯?。↖KE）作用于DLBCL異種移植模型后，System Xc-受到抑制而誘發(fā)鐵死亡，從而起到抗腫瘤作用［46］；富馬酸二甲酯（DMF）對(duì)兩種DLBCL 亞型均有廣泛的抗腫瘤作用，DMF 對(duì)DLBCL 的抑制作用是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化并導(dǎo)致其發(fā)生鐵死亡介導(dǎo)的［47］。

EB 病毒（EBV）被認(rèn)為是伯基特淋巴瘤以及EBV相關(guān)DLBCL的重要發(fā)病因素。EBV轉(zhuǎn)化程序激活脂質(zhì)代謝，在轉(zhuǎn)化階段會(huì)不同程度地產(chǎn)生ROS副產(chǎn)物，并且B 細(xì)胞生長(zhǎng)的伯基特淋巴瘤樣階段需要通過(guò)GPX4 及GSH 對(duì)脂質(zhì)ROS 進(jìn)行解毒，在轉(zhuǎn)化的早期階段或在伯基特淋巴瘤細(xì)胞中，這種氧化還原防御的擾動(dòng)引發(fā)了鐵死亡［48］。此外，在惰性淋巴瘤的臨床預(yù)后模型研究中也發(fā)現(xiàn)其與鐵死亡的相關(guān)性。如慢性淋巴細(xì)胞白血病（CLL）是一種克隆的B 淋巴細(xì)胞淋巴瘤，盡管發(fā)展進(jìn)程較緩慢，但難以根治，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量；鐵死亡相關(guān)基因在CLL 患者中具有分層和預(yù)后作用，通過(guò)篩選110 個(gè)與缺鐵相關(guān)的基因（FRGs），獲得了14 個(gè)具有預(yù)后價(jià)值的基因，并進(jìn)一步通過(guò)LASSO 分析開(kāi)發(fā)了8 個(gè)可能與鐵死亡相關(guān)的基因（TP63、STEAP3、NQO1、ELAVL1、PRKAA1、HELLS、FANCD2、CDKN2A），該發(fā)現(xiàn)有助于為CLL 提供更加個(gè)性化和精準(zhǔn)的治療方案。［49］

3 中醫(yī)藥通過(guò)干預(yù)鐵死亡途徑治療淋巴瘤

古代中醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)雖無(wú)“淋巴瘤”病名的明確記載，但根據(jù)癥狀體征，可以將其歸屬于中醫(yī)學(xué)“惡核”“痰毒”“石疽”“失榮”“虛勞”“積聚”等范疇。本病病因?yàn)楹?、郁火、邪毒等，病機(jī)為素體稟賦不足，或外感乖戾之氣，以致痰毒結(jié)聚不散，化為惡核，久而正氣耗傷，臟腑衰敗，漸成重癥。部分難治性淋巴瘤如T 細(xì)胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤，尤其是在中老年患者中，治療耐受度不佳，而且疾病本身亦缺乏有效的治療方案［50］。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著悠久的歷史，部分單味中藥（如青蒿、黃芩、蓽茇等）的有效成分在淋巴瘤相關(guān)研究中顯示出鐵死亡誘導(dǎo)劑的類似作用，可通過(guò)不同的機(jī)制或通路對(duì)延緩淋巴瘤/腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)與臨床進(jìn)程起到積極作用。

3.1 中藥有效成分與鐵死亡的基礎(chǔ)研究

3.1.1 靶向GSH/GPX4 途徑 GSH/GPX4 途徑是鐵死亡的重要靶點(diǎn)，抑制、減少或阻斷GSH、GPX4 可直接誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生鐵死亡。以青蒿素、雙氫青蒿素、青蒿琥酯、藤黃酸復(fù)合物等干預(yù)淋巴瘤或部分腫瘤細(xì)胞，可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)GSH的直接消耗，增加其ROS水平，并進(jìn)一步致GPX4 失活，促使細(xì)胞發(fā)生鐵死亡［51-54］。葫蘆素B 可通過(guò)促進(jìn)GPX4的泛素化和降解，使細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化水平升高，細(xì)胞內(nèi)ROS增多，同時(shí)破壞核轉(zhuǎn)錄因子紅系2相關(guān)因子2（Nrf2）/HO-1 抗氧化通路，誘導(dǎo)細(xì)胞鐵死亡［55］。小白菊內(nèi)酯衍生物DMOCPTL 在體內(nèi)可有效抑制腫瘤的生長(zhǎng)，其機(jī)制是通過(guò)GPX4泛素化誘導(dǎo)細(xì)胞鐵死亡來(lái)實(shí)現(xiàn)的［56］。喜樹(shù)堿類似物SN38 是一種GSH 的敏感前藥，其活化特性和腫瘤細(xì)胞系的細(xì)胞毒效力令其可作為有用的化學(xué)治療劑［57］。銀杏素可通過(guò)抑制Nrf2/SLC7A11/GPX4 信號(hào)通路誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及鐵死亡［58］。二氫異丹參酮Ⅰ可通過(guò)阻斷GPX4 的蛋白表達(dá)，抑制模型裸鼠腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移［59］。

3.1.2 靶向鐵代謝途徑 青蒿素（ARS）與鐵離子抑制劑甲磺酸去鐵胺（DFO）聯(lián)合應(yīng)用，可通過(guò)下調(diào)蛋白激酶B（Akt）抑制劑/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/p70 信號(hào)通路表達(dá)，上調(diào)促分裂原活化的絲裂原活化蛋白激酶/c-Jun 氨基端蛋白激酶（MAPK/JNK）信號(hào)通路表達(dá)，進(jìn)而誘發(fā)細(xì)胞鐵死亡來(lái)抑制小鼠T 淋巴瘤細(xì)胞系（EL4 細(xì)胞）以及人源急性T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系（Jurkat 細(xì)胞）的生長(zhǎng)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)［60］同樣證實(shí)了ARS 對(duì)EL4 細(xì)胞的鐵死亡誘導(dǎo)作用。6-姜辣素可降低泛素特異性蛋白酶14（USP14）的表達(dá)，增加鐵濃度、自噬體和ROS 數(shù)量，抑制腫瘤細(xì)胞的存活和增殖率，并顯著降低腫瘤體積和質(zhì)量［61］。此外，部分中藥成分還可起到抗鐵死亡作用。黃芩素可保護(hù)鐵死亡誘導(dǎo)劑RSL3 誘導(dǎo)的急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）的鐵死亡，降低脂質(zhì)過(guò)氧化和ROS 的產(chǎn)生，因此調(diào)節(jié)鐵穩(wěn)態(tài)和抑制芬頓反應(yīng)可能是黃芩素發(fā)揮治療作用的機(jī)制之一［62］。

3.1.3 靶向脂質(zhì)代謝 齊墩果酸可有效抑制荷淋巴瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)改善小鼠的免疫功能［63］，其機(jī)制包括通過(guò)增加細(xì)胞ROS 水平和線粒體膜電位分解誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和鐵死亡，并在一定程度上促進(jìn)半胱天冬酶激活［64］。另外，相關(guān)實(shí)驗(yàn)［65］中發(fā)現(xiàn)，齊墩果酸可增加氧化應(yīng)激水平和Fe2+含量，并增加腫瘤細(xì)胞鐵死亡相關(guān)脂質(zhì)代謝蛋白ACSL4 的表達(dá)。相反，部分中藥還可通過(guò)抗氧化來(lái)抑制鐵死亡的發(fā)生。經(jīng)典方劑天麻鉤藤飲可通過(guò)調(diào)控ACSL4 介導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化抑制鐵死亡，進(jìn)而發(fā)揮對(duì)模型動(dòng)物的神經(jīng)保護(hù)作用［66］。丹參酮ⅡA 能夠降低ApoE-/-小鼠肝臟脂質(zhì)沉積和脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，這可能與干預(yù)肝細(xì)胞鐵死亡相關(guān)蛋白作用有關(guān)［67］。

3.1.4 靶向細(xì)胞器 青蒿琥酯（ART）可激活人轉(zhuǎn)錄激活因子4（ATF4）/ CEBP 同源蛋白（CHOP）/CHAC1 通路，誘導(dǎo)伯基特淋巴瘤細(xì)胞DAUDI 和CA-46 細(xì)胞的肥大細(xì)胞增生，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而發(fā)生鐵死亡［68］。人源ABC 型DLBCL 細(xì)胞株OCI-LY3 加入不同濃度ART 處理，發(fā)現(xiàn)ART 可能通過(guò)促進(jìn)ROS 產(chǎn)生，上調(diào)半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和下調(diào)B 淋巴細(xì)胞瘤-2蛋白（Bcl-2）表達(dá)，從而誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡［69］。藤黃酸可抑制DLBCL 細(xì)胞的增殖活性、促進(jìn)細(xì)胞凋亡并抑制小鼠DLBCL 的生長(zhǎng)，其機(jī)制可能與調(diào)控過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）表達(dá)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)［70］。姜黃類似物（EF24）可誘導(dǎo)促進(jìn)HO-1 過(guò)表達(dá)動(dòng)物模型的腫瘤細(xì)胞鐵死亡［71］；此外，EF24 還可增強(qiáng)射線誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路的活化，進(jìn)而調(diào)控腫瘤細(xì)胞對(duì)放射治療的敏感性［72］。

3.1.5 靶向其他途徑 茄堿可通過(guò)調(diào)節(jié)ROS 和Bcl-2關(guān)聯(lián)X 蛋白（Bax）/Bcl-2 通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，也可通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)氧自由基水平，調(diào)控蛋白激酶誘導(dǎo)自噬［73］。百里香和牛蒡提取物被認(rèn)為是潛在的血液腫瘤治療草藥候選物，可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、自噬和鐵死亡阻止白血病和多發(fā)性骨髓瘤癌細(xì)胞的增殖［74］。黃芩苷可通過(guò)下調(diào)鐵蛋白重鏈1（FTH1）增加ROS 水平，使細(xì)胞發(fā)生鐵死亡，進(jìn)而發(fā)揮其抗癌活性［75］，還可通過(guò)調(diào)控p53/SLC7A11 介導(dǎo)細(xì)胞的鐵死亡［76］。蓽茇酰胺可間接增強(qiáng)Erastin 誘導(dǎo)的細(xì)胞鐵死亡，抑制SLC7A11 和重組人硫氧還蛋白還原酶1（TXNRD1），可使淋巴瘤細(xì)胞遭受“二硫化物脅迫”，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［77］。楊樹(shù)蜂膠對(duì)DLBCL 細(xì)胞系（SU-DHL-2）具有抑制作用，在被楊樹(shù)蜂膠干預(yù)后，DHL 細(xì)胞中的鐵死亡相關(guān)蛋白區(qū)域可見(jiàn)顯著富集（包括谷氨酸/半胱氨酸連接酶調(diào)節(jié)亞基、鐵蛋白和血紅素加氧酶），還可通過(guò)下調(diào)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（PLK1），影響細(xì)胞凋亡和鐵死亡［78-79］。

3.2 中藥有效成分靶向鐵死亡的生物信息學(xué)分析研究 通過(guò)生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)仍有相當(dāng)一部分中藥有效成分存在靶向鐵死亡通路的應(yīng)用潛力，有待進(jìn)一步研究其與淋巴瘤及相關(guān)各類腫瘤、炎癥反應(yīng)的關(guān)聯(lián)性。大豆苷元（源于牛膝、女貞子、雞血藤、葛根、黃芪等）被發(fā)現(xiàn)可能通過(guò)鐵死亡通路治療腸道炎癥性反應(yīng)，對(duì)于淋巴瘤放射治療和化學(xué)療法（簡(jiǎn)稱“化療”）所致消化道癥狀或相關(guān)藥物所致的免疫性腸病具有應(yīng)用意義［80］。含有蘆丁、槲皮素（源于艾葉、白果、白花蛇舌草、敗醬草、北沙參等）成分的中藥聯(lián)合小分子藥物可抑制雷公藤誘導(dǎo)的體內(nèi)多器官損傷，其機(jī)制可能是因?yàn)橐种屏嗣庖哒{(diào)節(jié)和Akt/mTOR 通路介導(dǎo)的細(xì)胞鐵死亡和凋亡［81］。部分淋巴瘤患者合并存在結(jié)締組織疾病，需要服用免疫抑制劑來(lái)進(jìn)行協(xié)同治療，因此深入研究中藥成分保護(hù)正常細(xì)胞免受鐵死亡的機(jī)制，將更有助于淋巴瘤治療的可持續(xù)性，提高患者對(duì)治療的耐受度；白藜蘆醇（源于虎杖、桑白皮、土茯苓等）可通過(guò)調(diào)控Nrf2-抗氧化反應(yīng)元件（ARE）、蛋白激酶R 樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶（PERK）、GPX4 等關(guān)鍵靶點(diǎn)，保護(hù)神經(jīng)元、心肌細(xì)胞等免受鐵死亡［82-84］。

淋巴瘤的常用化療方案中存在如蒽環(huán)類、蛋白酶體抑制劑等對(duì)心臟、周圍神經(jīng)產(chǎn)生損傷的藥物，深入研究中藥相關(guān)成分的作用通路，對(duì)改善淋巴瘤患者的化療耐受度與依從性、協(xié)同提高治療效果將大有裨益；與鐵死亡相關(guān)的非編碼RNA特征是部分腫瘤潛在的致癌性預(yù)后生物標(biāo)志物，如含有染料木素成分（源于射干、杜仲、肉蓯蓉、山豆根、葛根等）的抗腫瘤藥物可提高患者的生存率。［85］淋巴瘤病理的生物基因?qū)W標(biāo)志譜較廣，交叉篩選鐵死亡與淋巴瘤基因PANEL 譜有助于精確發(fā)現(xiàn)相關(guān)淋巴瘤分型的預(yù)后基因，提高早期患者診斷的預(yù)后識(shí)別水平；大黃素（源于大黃、板藍(lán)根、薄荷、蒼耳子、石菖蒲、澤瀉等）可通過(guò)對(duì)鐵死亡關(guān)鍵蛋白谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶P1（GSTP1）的特異性活性抑制來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞鐵死亡，不僅為氧依賴性光動(dòng)力療法（PDT）提供了充足的氧氣，而且還為腫瘤細(xì)胞中鐵依賴性鐵死亡提供了Fe3+，為實(shí)現(xiàn)PDT/鐵死亡協(xié)同治療提供了可能。［86］

4 小結(jié)與展望

中藥復(fù)方已被臨床證實(shí)對(duì)淋巴瘤各階段的中西醫(yī)結(jié)合治療具有良好的療效［87］；中藥單體有效成分亦在近年淋巴瘤相關(guān)研究中被發(fā)現(xiàn)具有鐵死亡誘導(dǎo)劑的類似作用，可通過(guò)不同的機(jī)制或通路對(duì)延緩淋巴瘤/腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)與臨床進(jìn)程起到積極作用。通過(guò)鐵死亡相關(guān)機(jī)制誘導(dǎo)淋巴瘤細(xì)胞鐵死亡，或抑制正常細(xì)胞免受鐵死亡，進(jìn)而提高西藥對(duì)于淋巴瘤誘導(dǎo)/維持治療的療效、延緩疾病進(jìn)程、改善患者體質(zhì)狀態(tài)和生活質(zhì)量，將會(huì)是中醫(yī)藥治療淋巴瘤的重要切入點(diǎn)，值得深入探索與挖掘。因此，進(jìn)一步挖掘“中醫(yī)藥-淋巴瘤-鐵死亡”的內(nèi)在關(guān)聯(lián)，將有助于為淋巴瘤患者提供更多有效的治療方案。