青蟹壽組織培養(yǎng)基篩選試驗

宋金萍

摘要：以青蟹壽母株花劍上的花蕊作為組培材料，以MS培養(yǎng)基為基礎，確定最佳增殖和生根培養(yǎng)基成分。試驗結(jié)果表明：繼代培養(yǎng)基配方為1/2MS+6-BA0.6+IBA0.1；生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.05+NAA0.1，添加瓊脂粉6.0 g、蔗糖30.0 g、活性炭粉0.3 g；最佳栽培基質(zhì)為草炭1份、珍珠巖1/2份、蛭石1/2份、粗砂1/4份。

關(guān)鍵詞：青蟹壽；繼代培養(yǎng)；試驗；生根培養(yǎng)；栽培基質(zhì)

中圖分類號：S68 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2017）05-0003-02

壽為百合科十二眷屬多年生肉質(zhì)草本植物，小巧玲瓏，外型精巧美麗，葉片奇特，是深受大眾歡迎的多肉植物之一。青蟹壽是壽的品種之一，市場價格較高，經(jīng)濟效益顯著，但生長比較緩慢。為加快青蟹壽生長繁殖速度，常采用扦插和植物組織培養(yǎng)方式進行批量繁殖。扦插方法技術(shù)難度大，且夏季易腐爛。植物組織培養(yǎng)方式技術(shù)難度小，且適于批量繁殖。為此，采用對比試驗的方法，選取青蟹壽母株花劍上的花蕊作為組培材料，以MS培養(yǎng)基為基礎，確定最佳增殖和生根培養(yǎng)基成分，為加快青蟹壽繁殖提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料處理

以青蟹壽花劍為試驗材料，切取青蟹壽花苞里的花蕊進行培養(yǎng)試驗。用洗衣粉水洗凈芽上的殘留物，再用自來水沖洗40 min，最后用濾紙吸干水分。用0.1%氯化汞浸泡30 s，用無菌水沖洗4次，使外植體變成無菌植株，接入滅菌培養(yǎng)基，于恒溫25 ℃、光照強度2 300 lx下培養(yǎng)。

1.2 初代培養(yǎng)基選配

選擇1/3MS培養(yǎng)基，用細胞分裂素6-BA及生長素NAA，IBA進行不同濃度的對比試驗。青蟹壽花蕊外植接到誘導培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)室培養(yǎng)20 d后長出愈傷塊。選擇較硬的愈傷組織塊（非松散、玻璃化的愈傷組織）轉(zhuǎn)接到繼代培養(yǎng)基中初代培養(yǎng)25～30 d（誘導出芽點），再轉(zhuǎn)接到繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)30 d，長出新芽后進行轉(zhuǎn)接。

試驗結(jié)果顯示：1/3MS+6-BA0.06 mg/L+IBA0.02 mg/L為最佳誘導培養(yǎng)基。

1.3 繼代培養(yǎng)基篩選

在1/2MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的細胞分裂素與生長素，篩選適宜的增殖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基成分配比見表1。

將誘導出的青蟹壽小芽接種到繼代培養(yǎng)基中，置于培養(yǎng)室恒溫培養(yǎng)。繼代周期為25～30 d，多肉芽的光照強度為2 300 lx。

1.4 生根培養(yǎng)基篩選

在1/2培養(yǎng)基中添加不同濃度的生長素，1種或2種生長素互相配合，篩選出適宜的生根培養(yǎng)基。生根培養(yǎng)基中的激素添加量見表2。

將青蟹壽培養(yǎng)出的新生芽接種到生根培養(yǎng)基中，于培養(yǎng)室中培養(yǎng)35 d后長出新生根。用篩選出的最適生根培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng)，并將生根苗移入日光溫室馴化3～4 d，打開瓶蓋，用清水洗凈小苗并晾曬3～4 h，觀察根部水分情況。水分散失2/3時將小苗移栽到配比好的基質(zhì)中。

1.5 栽培基質(zhì)篩選

將生根苗移栽到不同的栽培基質(zhì)中，判斷其在各基質(zhì)上的生長情況，篩選出最適宜的組培生根苗栽培基質(zhì)并進行批量栽培。栽培基質(zhì)配比設計見表3。

2 結(jié)果與分析

2.1 最適繼代培養(yǎng)基

繼代培養(yǎng)基試驗結(jié)果表明：在培養(yǎng)基2和3中，青蟹壽小苗長勢比較好，生長勢旺盛，且培養(yǎng)基2比培養(yǎng)基3效果好；青蟹壽小苗在培養(yǎng)基1中表現(xiàn)一般，愈傷塊會增大，但只長愈傷不長苗；青蟹壽小苗在4號培養(yǎng)基中表現(xiàn)不明顯，生長勢基本沒有變化。

根據(jù)試驗結(jié)果可知，最適繼代培養(yǎng)基配方為

1/2MS+6-BA0.6+IBA0.1。

2.2 最適生根培養(yǎng)基

生根培養(yǎng)基試驗結(jié)果表明：2號培養(yǎng)基生根率≥75%，4號培養(yǎng)基生根率<75%，且4號培養(yǎng)基的生根數(shù)量比2號少；1號和4號培養(yǎng)基的生根率<50%。

最適生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.05+NAA0.1，添加瓊脂粉6.0 g、蔗糖30 g、活性炭粉0.3 g。

2.3 最適栽培基質(zhì)

青蟹壽組培生根苗生長情況表明，基質(zhì)1的栽植成活率最高，達90%以上，即最佳栽培基質(zhì)為草炭1份、珍珠巖1/2份、蛭石1/2份、粗砂1/4份。

3 結(jié)論

青蟹壽組織培養(yǎng)試驗結(jié)果表明：最適繼代培養(yǎng)基配方為1/2MS+6-BA0.6+IBA0.1；最適生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.05+NAA0.1，添加瓊脂粉6.0 g、蔗糖30.0 g、活性炭粉0.3 g；最適栽培基質(zhì)為草炭1份、珍珠巖1/2份、蛭石1/2份、粗砂1/4份。

參考文獻

[1] 王紫珊，王廣東，王雁.多肉植物白銀壽‘奇跡的離體培養(yǎng)與快速繁殖[J].基因組學與應用生物學，2014（6）：1 329-1 335.

[2] 劉芳，唐映紅，袁有美，等.多肉植物勞爾的組織培養(yǎng)[J].植物學報，2016（2）：251-256.

[3] 楊娟，俞愛軍，周燕，等.多肉植物十二卷花影壽離體快繁技術(shù)研究[J].上海農(nóng)業(yè)科技，2017（2）：83-84.