“小三陽”患者血清HBV-LP檢測的臨床應(yīng)用價值

張斌

“小三陽”患者血清HBV-LP檢測的臨床應(yīng)用價值

張斌

目的 檢測HBV-LP在“小三陽”患者中的表達，并探討其意義。方法 利用ELISA法檢測300例乙肝“小三陽”患者血清中HBV-LP水平；實時熒光定量PCR檢測HBV-DNA，并對兩者檢測結(jié)果作相關(guān)性分析。結(jié)果 HBV-LP及HBV-DNA在300例患者中的總陽性率（36．3%、41．7%）、在172例肝功能正?；颊咧械年栃月剩?2．2%、14．5%）及在128例肝功能異?；颊咧械年栃月剩?8．8%、78．1%）間比較，P＞0．05。結(jié)論 在無條件開展PCR檢測的基層醫(yī)院，可以開展HBV-LP檢測作為判斷乙肝“小三陽”患者的病毒復(fù)制指標(biāo)。

乙肝；小三陽；HBV-LP；HBV-DNA

乙型肝炎“小三陽”見于非活動性HBsAg攜帶者和HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者，出現(xiàn)的原因比較復(fù)雜。臨床上常通過E抗原和DNA檢測結(jié)果，判斷患者體內(nèi)乙肝病毒在體內(nèi)存在和復(fù)制情況，判斷其傳染性，并作為治療的指標(biāo)，但由于技術(shù)條件和硬件要求的限制，PCR不太適合在基層醫(yī)院和社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心開展，難以及時為基層臨床醫(yī)生提供相關(guān)信息[1]。本研究利用ELISA法檢測300例乙肝“小三陽”患者血清中HBV-LP水平；實時熒光定量PCR檢測HBV-DNA，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源收集300例2015年6月—2016年12月在我院門診就診和住院的經(jīng)ELISA法檢測呈表面抗原、E抗體、核心抗體陽性，表面抗體、e抗原陰性的“小三陽”乙肝病毒攜帶者血清標(biāo)本，每例標(biāo)本分為兩份，置于-20℃冰箱保存，分批進行實驗，1份標(biāo)本送南京迪安醫(yī)學(xué)檢驗中心進行實時熒光定量PCR檢測HBV-DNA。一份血清標(biāo)本留我院作HBV-LP檢測。300例標(biāo)本中肝功能正常者172例，肝功能異常者128例；男性188例，女性112例，年齡18～75歲，平均（49.5±8.4）歲。

1.2 實驗方法

（1）HBV-LP檢測：采用ELISA法，試劑盒由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供，結(jié)果采用MODEL-680酶標(biāo)儀判讀。操作嚴格按試劑盒操作說明進行。

（2）HBV-DNA檢測：采用實時熒光定量PCR法，標(biāo)本采集后，送到南京迪安醫(yī)學(xué)檢驗中心進行檢測，結(jié)果判定：copies＞1×103為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用Stata8.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，率的比較采用χ2檢驗；HBV-LP及HBV-DNA間相關(guān)分析采用Spearman等級相關(guān)，檢驗水準α均為0.05，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 300例“小三陽”血清標(biāo)本HBV-LP和HBV-DNA檢測結(jié)果

ELISA法檢測HBV-LP總陽性率為36.3%（109/300），實時熒光定量PCR法檢測HBV-DNA總陽性率為41.7%（125/300），總陽性率間兩組對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=1.793 5，P=0.181）（表1）。

表1 300例“小三陽”血清標(biāo)本HBV-LP和HBV-DNA檢測結(jié)果

2.2 乙肝病毒攜帶者HBV-LP及HBV-DNA檢測陽性率

172 例肝功能正常的“小三陽”乙肝病毒攜帶者HBV-LP及HBV-DNA檢測陽性率分別為12.2%（21/172）及14.5%（25/172），（χ2=0.401 5，P=0.526）；128例肝功能異常的“小三陽”乙肝病毒攜帶者HBV-LP及HBV-DNA檢測陽性率分別為68.8%（88/128）及78.1%（100/128），兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.883 6，P=0.089 ）

3 討論

由于PCR檢測法的高靈敏性和特異性，HBV-DNA檢測結(jié)果是臨床上用來評估抗病毒療效的重要指標(biāo)之一，但受實驗條件及實驗人員的限制，在基層醫(yī)院開展有一定的困難[2-3]。不少研究顯示HBV-LP與血清HBV-DNA檢測結(jié)果有良好的一致性，HBVLP是從蛋白水平反映HBV感染者體內(nèi)病毒復(fù)制程度的可靠指標(biāo)，尤其是HBeAg陰性患者體內(nèi)病毒復(fù)制及預(yù)后判斷的良好血清學(xué)監(jiān)測指標(biāo)，且其檢測方法為常規(guī)的ELISA法，適合在基層醫(yī)院開展運用[4-6]。

本研究結(jié)果顯示雖然HBV-LP總陽性率（36.3%）、在172例肝功能正常患者中的陽性率（12.2%）及在128例肝功能異?；颊咧械年栃月剩?8.8%）均略低于HBV-DNA檢測結(jié)果（41.7%、14.5%、78.1%），但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，且HBV-LP及HBV-DNA檢測結(jié)果間具有高度相關(guān)性，表明HBV-LP在定性檢測方面，可在一定程度上替代HBV-DNA。但因其不能完全客觀反映病毒量的變化，臨床應(yīng)用仍然有其局限性[7]。目前有專家提倡，HBV-DNA陰轉(zhuǎn)、e抗原血清轉(zhuǎn)換已不能作為治療的終點，而是考慮HBsAg的陰轉(zhuǎn)作為治療的終點[8]。因此，探討HBV-LP作為臨床乙肝患者抗病毒治療監(jiān)測指標(biāo)之一是有一定理論依據(jù)的，不論是檢測方法還是臨床應(yīng)用上，HBV-LP都有它的優(yōu)越性，采用酶聯(lián)免疫法檢測乙型肝炎病毒外膜大蛋白，可以反映乙型肝炎病毒復(fù)制活躍程度，作為病毒感染后診斷、治療及預(yù)后判斷的重要監(jiān)測指標(biāo)，而且酶聯(lián)免疫法檢測方法成熟，操作簡單，對設(shè)備要求不高，在廣大基層醫(yī)院便于開展。尤其在基層醫(yī)院和社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，HBV-LP的檢測是判斷乙肝患者和乙肝病毒攜帶者有無傳染性最重要、最有效的指標(biāo)之一。

[1]樂愛平，鞠北華，王文，等． 乙肝病毒大蛋白檢測在乙型肝炎診治中的臨床意義[J]．世界華人消化雜志，2006，14（16）：1578-1581．

[2]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會,中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會．慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）[J]． 中華實驗和臨床感染病雜志，2011，19（1）：13-24．

[3]楊延敏，王洪笑，王桂利，等．乙肝表面抗原大蛋白與HBV DNA的比較及其與ALT的關(guān)系[J]．世界華人消化雜志，2006，14（27）：2733-2736．

[4]莫喜明，許允，董存巖，等．乙肝病毒外膜大蛋白檢測在病毒復(fù)制判定中的意義[J]．中國實驗診斷學(xué)，2009，13（11）：1591-1593．

[5]史兵偉，田曉靜，虞麗娟，等．術(shù)前篩查HBeAg陰性HBV感染者檢測乙肝大蛋白的意義[J]．海南醫(yī)學(xué)，2013，24（16）：2412-2414．

[6]周萍，郭炫，陳葳，等．乙肝患者HBV-LP與HBV-DNA表達的相關(guān)性及臨床應(yīng)用評價[J]．臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，12（19）：1524-1525，1528．

[7]蔡葉琴，孫彥，黃黎．血清HBV-DNA與HBV免疫學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性研究[J]．河北醫(yī)學(xué)，2011，17（2）：153-155．

[8]朱錦宏，吳曉蔓．乙肝患者血清HBV cccDNA的臨床意義[J]．實用醫(yī)學(xué)雜志，2013，29（3）：395-397．

Clinical Value of Serum HBV-LP Detection in Patients With “Small Three Positive”

ZHANG Bin Laboratory Department, The Eighth People's Hospital of Tongzhou District, Nantong Jiangsu 226361, China

ObjectiveTo detect the expression of HBV-LP in patients with“small three positive” and explore its significance.MethodsThe serum levels of HBV-LP in 300 patients with hepatitis B and “small three positive” wre detected by ELISA; Real time quantitative PCR was used to detect HBV-DNA, and the correlation between the two assays was analyzed.ResultsHBV-LP and HBV-DNA in 300 patients, the total positive rate (36.3%, 41.7%), the positive rate in patients with normal liver function in 172 cases (12.2%, 14.5%) and the positive rate in patients with abnormal liver function in 128 cases (68.8%, 78.1%) and the comparison between theP＞0.05.ConclusionIn the primary hospital where PCR testing is carried out without qualifcation, HBV-LP test can be used as a virus replication index for hepatitis B patients.

hepatitis B; small three positive; HBV-LP; HBV-DNA

R446

A

1674-9308（2017）16-0059-02

10．3969/j．issn．1674-9308．2017．16．029

南通市通州區(qū)第八人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 南通 226361