臭參正丁醇萃取部位化學(xué)成分研究△

莊小翠，晏永明，張慶芝，程永現(xiàn)*

(1.中國科學(xué)院 昆明植物研究所 植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，云南 昆明 650201；2.云南中醫(yī)學(xué)院 中藥學(xué)院，云南 昆明 650500)

·基礎(chǔ)研究·

臭參正丁醇萃取部位化學(xué)成分研究△

莊小翠1，2，晏永明1，張慶芝2，程永現(xiàn)1，2*

(1.中國科學(xué)院 昆明植物研究所 植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，云南 昆明 650201；2.云南中醫(yī)學(xué)院 中藥學(xué)院，云南 昆明 650500)

目的對臭參正丁醇萃取部位的化學(xué)成分進(jìn)行研究。方法采用反相、凝膠和高效液相等色譜法結(jié)合核磁共振波譜、質(zhì)譜等分離和鑒定臭參正丁醇萃取部位化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果從中分離得到21個化合物，分別為7R，8R-蘇式-4，7，9，9-四羥基-3-甲氧基-8-O-4′-新木脂素-3′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)，兒茶素-7-O-β-D-葡萄糖苷(2)，紫丁香酚苷(3)，松柏苷(4)，黨參苷II(5)，(Z)-4-羥基肉桂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)，2-羥甲基苯基-1-O-β-D-葡萄糖苷(7)，芐基-6-O-β-D-吡喃木糖基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)，(2E)-2-(β-D-吡喃葡萄糖氧基)-3-苯基-2-丙烯酸(9)，(2Z)-2-(β-D-吡喃葡萄糖氧基)-3-苯基-2-丙烯酸(10)，2-苯乙基-6-O-β-D-吡喃木糖基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)，黨參苷I(12)，3-羥基-2-{4-[(1E)-3-羥基丙-1-烯-1-基]-2-甲氧基苯氧基}丙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)，(2E)-4-羥基-2-己烯酸(14)，(2E)-3-甲基-2-戊二酸(15)，5-乙酰莽草酸(16)，色氨酸(17)，腺苷(18)，煙酸(19)，咖啡因(20)，5-(甲氧羰基)-2-吡咯烷酮(21)。結(jié)論21個化合物均為已知化合物，其中化合物8、9、11、13和21為首次從臭參中分離得到。

臭參；苯丙素苷；生物堿

臭參，也稱云南參、云南臭參、臭藥、臭黨參和土黨參等[1-3]，是桔梗科(Campanulaceae)黨參屬(Codonopsis)植物的根，具特殊臭味[4]。據(jù)文獻(xiàn)資料統(tǒng)計，云南地區(qū)稱為臭參的植物主要包括管鐘黨參[5-10]C.bulleyanaForrest ex Diels(別名蘭花臭參、胡毛洋參)、小花黨參[11]C.micranthachipp、球花黨參C.subglobosaW.W.Sm(別名天寧黨參、巫山黨參、單枝黨參)、心葉黨參[12-15]C.cordifolioideaP.C.Tsoong(別名擬心葉黨參、棱子黨參、古燈茶根、古東根)和纏繞黨參[16]C.pilosula(Franch.)Nannf.var.volubilis(Nannf.)L.T.Shen等。臭參作為特色的食材在云南多個地方如尋甸、中甸、宜良、麗江等地[17]均有栽培，尤其是以昆明周邊地區(qū)如尋甸和宜良為甚，其常見的食用方法是老百姓從菜市場或農(nóng)貿(mào)市場購回鮮品并將其用于燉雞、燉排骨等，服用后可矢氣頻頻[18-19]。臭參的這一功能引起了筆者的注意，經(jīng)過實地調(diào)研并經(jīng)權(quán)威鑒定，發(fā)現(xiàn)尋甸和宜良地區(qū)多年來廣為栽培的臭參均為黨參C.pilosula。

黨參是傳統(tǒng)中藥，《中華人民共和國藥典》2010年版[20]及2015年版[21]記載的黨參藥材為桔?？浦参稂h參Codonopsispilosula(Franch.)Nannf.、素花黨參C.pilosulaNannf.var.modesta(Nannf.)L.T.Shen 或川黨參C.tangshenOliv.的干燥根。黨參味甘，性平，具有健脾益肺、養(yǎng)血生津的功能，用于脾肺氣虛，食少倦怠，咳嗽虛喘，氣血不足，面色萎黃，心悸氣短，津傷口渴，內(nèi)熱消渴[21]，但還未見服用黨參后出現(xiàn)矢氣頻頻的報道[22]。古有“橘生淮南則為橘，生于淮北則為枳”的說法，也有形同而味異的實際，產(chǎn)于北方和云南的黨參是否因為地理環(huán)境等因素發(fā)生了品質(zhì)變化，從而形成了不同的道地性卻值得探究。為此，筆者對產(chǎn)于云南尋甸的黨參正丁醇部位的化學(xué)成分進(jìn)行了初步研究，此文主要報道從中鑒定的21個已知化合物，其中化合物8、9、11、13和21為首次從臭參中分離得到。

1 儀器與材料

Xevo TQ-S超高壓液相色譜三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀；UPLC-IT-TOF液相-離子阱飛行時間色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀；Bruker Avance Ⅲ 400 MHz、Bruker Avance 600 MHz和Bruker Avance 800 MHz核磁共振儀(TMS為內(nèi)標(biāo))；硅膠GF254(青島海洋化工廠)；RP-18(40～63 μm，日本Daiso)；MCI gel CHP 20P(75～150 μm，日本三菱公司產(chǎn)品)；Sephadex LH-20(25～100 μm，Pharmacia公司)。Agilent 1200型HPLC和北京創(chuàng)新通恒LC3000型HPLC，半制備色譜柱為Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×9.4 mm，5 μm)和YMC-Pack-ODS-A(250 mm×10 mm，5 μm)；制備柱為Thermo Hypersil GOLD(250 mm× 21.2 mm，5 μm)，分析型色譜柱為Thermo Hypersil GOLD(250 mm × 4.6 mm，5 μm)。

臭參樣品食用部位為根，為2015年11月采集于云南省昆明市尋甸縣金源鄉(xiāng)妥托村委會老黑山村，系栽培品，此地經(jīng)年栽培的臭參此前曾經(jīng)由中國科學(xué)院植物研究所洪德元研究員鑒定為黨參C.pilosula，其標(biāo)本(1016268)保存于中國科學(xué)院昆明植物研究所標(biāo)本館。

2 提取與分離

取干燥臭參13 kg，粉碎后用80%的乙醇水回流提取3次，提取液減壓濃縮得總提物。總提物水混懸后用乙酸乙酯等體積萃取3次，水層用正丁醇等體積萃取3次，得正丁醇部分(190 g)。該部分行MCI gel CHP 20P柱，以甲醇-水(20%～100%)梯度洗脫得到5個組分(Fr.A～Fr.E)。

Fr.B(3.2 g)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到3個組分(Fr.B1～Fr.B3)。Fr.B1(1.7 g)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到4個組分(Fr.B1.1～Fr.B1.4)。其中Fr.B1.3(788 mg)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到6個組分(Fr.B1.3.1～Fr.B1.3.6)。Fr.B1.3.2(200 mg)經(jīng)半制備HPLC(乙腈-水，9%)純化得化合物3(8.9 mg；Rt=25 min)、4(4.0 mg；Rt=19 min)、5(2.8 mg；Rt=26 min)、14(1 mg；Rt=18 min)、15(0.8 mg；Rt=19 min)、17(0.7 mg；Rt=12 min)。Fr.B1.3.3(440 mg)經(jīng)制備HPLC(甲醇-水，12%)得9個組分(Fr.B1.3.3.1～Fr.B1.3.3.9)。Fr.B1.3.3.6(10 mg)經(jīng)半制備HPLC(甲醇-水，18%)純化得化合物6(1.3 mg；Rt=30 min)。Fr.B2(659 mg)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到4個組分(Fr.B2.1～Fr.B2.4)。其中Fr.B2.2(200 mg)經(jīng)半制備HPLC(甲醇-水，12%)純化得化合物7(1.7 mg；Rt=44 min)。Fr.B2.3(398 mg)經(jīng)半制備HPLC[甲醇-水，5%(含5‰的甲酸)]純化得化合物16(5.2 mg；Rt=39 min)和(1.0 mg；Rt=11 min)。Fr.B3(283 mg)經(jīng)半制備HPLC(甲醇-水，10%(含5‰的甲酸))純化得化合物2(73.2 mg；Rt=36 min)、18(9.6 mg；Rt=12 min)。

Fr.C(7.0 g)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到3個組分(Fr.C1～Fr.C3)。Fr.C1(3.1 g)行RP-18柱，以甲醇-水(25%～100%)梯度洗脫得到4個組分(Fr.C1.1～Fr.C1.4)。Fr.C1.2(1.6 g)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)柱色譜分離得到3個組分(Fr.C1.2.1～Fr.C1.2.3)。Fr.C1.2.2(500 mg)經(jīng)制備HPLC(甲醇-水，24%)得到7個組分(Fr.C1.2.2.1～Fr.C1.2.2.7)。Fr.C1.2.2.3(90 mg)經(jīng)半制備HPLC[甲醇-水，25%(含5‰的甲酸)]純化得化合物8(2.4 mg；Rt=22 min)和21(4.2 mg；Rt=35 min)。Fr.C1.2.3(500 mg)經(jīng)制備HPLC(甲醇-水，24%)得到7個組分(Fr.C1.2.3.1～Fr.C1.2.3.7)。Fr.C1.2.3.4(100 mg)經(jīng)半制備HPLC(甲醇-水，18%)分離得到化合物1(2.7 mg；Rt=44 min)和13(1.2 mg；Rt=33 min)。Fr.C2(1.9 g)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到3個組分(Fr.C2.1～Fr.C2.3)。Fr.C2.2(1.2 g)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到3個組分(Fr.C2.2.1～Fr.C2.2.3)。Fr.C2.2.2(800 mg)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)凝膠柱色譜得到3個組分(Fr.C2.2.2.1～Fr.C2.2.2.3)。Fr.C2.2.2.1(300 mg)經(jīng)半制備HPLC[乙腈-水，13%(含5‰的甲酸)]得到化合物11(2.5 mg；Rt=45 min)和12(8.5 mg；Rt=35 min)。Fr.C2.3(100 mg)經(jīng)半制備HPLC[乙腈-水，13%(含5‰的甲酸)]得到化合物9(1.1 mg；Rt=20 min)、10(0.9 mg；Rt=25 min)和20(1.2 mg；Rt=14 min)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色固體，ESI-MSm/z：549[M+Na]+，1H-NMR(800 MHz，CD3OD)δH：7.03(1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6′)，6.98(1H，d，J=1.8 Hz，H-2)，6.82(1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6)，6.77(1H，d，J=1.8 Hz，H-5′)，6.75(1H，d，J=8.0，1.8 Hz，H-2′)，6.74(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，4.78(1H，d，J=6.0 Hz，H-7)，4.77(1H，d，J=8.0 Hz，H-1″)，4.30(1H，m，H-8)，3.85(2H，m，H-6″)，3.77(3H，s，H-10)，3.72(2H，m，H-9)，3.67(1H，m，H-9′a)，3.51(1H，m，H-9′b)，3.47(1H，m，H-2″)，3.42(1H，m，H-5″)，3.35(1H，m，H-4″)，3.32(1H，m，H-3″)，1.76(2H，m，H-8′)，2.56(2H，m，H-7′)；13C-NMR(200 MHz，CD3OD)δC：149.7(C-3′)，148.9(C-3)，147.9(C-4′)，147.1(C-4)，138.3(C-1′)，134.1(C-1)，124.4(C-6′)，120.9(C-6)，120.3(C-2′)，120.1(C-5′)，115.9(C-5)，111.7(C-2)，103.6(C-1″)，87.1(C-8)，78.2(C-3″)，77.8(C-5″)，75.1(C-2″)，73.4(C-7)，71.4(C-4″)，62.5(C-6″)，62.1(C-9′)，61.6(C-9)，56.5(C-10)，35.3(C-8′)，32.4(C-7′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[23]，因此鑒定化合物1為(7R，8R)-蘇式-4，7，9，9′-四羥基-3-甲氧基-8-O-4′-新木脂素-3′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物2：ESI-MSm/z：451[M-H]-，無色膠狀物，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δH：9.43(1H，br s，5-OH)，8.87(2H，br s，3′-OH，4′-OH)，6.72(1H，d，J=1.5 Hz，H-2′)，6.69(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.59(1H，d，J=8.0 Hz，H-6′)，6.09(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，5.98(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，5.25(1H，br s，3-OH)，4.70(1H，d，J=7.6 Hz，H-1″)，4.55(1H，d，J=7.1 Hz，H-2)，3.87(1H，m，H-3)，3.66(1H，dd，J=11.6，7.4，Ha-6″)，3.45(1H，dd，J=11.6，4.3 Hz，Hb-6″)，3.16～3.36(4H，m，H-2″，H-3″，H-4″，H-5″)，2.67(1H，dd，J=16.0，5.0 Hz，Ha-4)，2.41(1H，dd，J=16.0，8.0 Hz，Hb-4)；13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δC：156.8(C-7)，156.1(C-5)，155.2(C-8a)，144.9(C-3′)，144.8(C-4′)，130.4(C-1′)，118.3(C-6′)，115.1(C-5′)，114.4(C-2′)，101.9(C-4a)，100.5(C-1″)，96.2(C-6)，94.6(C-8)，81.2(C-2)，76.9(C-5″)，76.6(C-3″)，73.2(C-2″)，69.5(C-4″)，66.0(C-3)，60.6(C-6″)，27.6(C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[24]，因此鑒定化合物2為兒茶素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物3：ESI-MSm/z：395[M+Na]+，淡黃色固體，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：6.75(2H，s，H-2，H-6)，6.55(1H，d，J=15.8 Hz，H-7)，6.33(1H，dt，J=15.8，5.6 Hz，H-8)，4.59(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，4.22(2H，dd，J=5.6，1.2 Hz，H-9)，3.86(6H，s，H-10，H-11)，3.78(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6′)，3.66(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6′)，3.38～3.49(3H，overlap，H-2′，H-3′，H-4′)，3.21(1H，m，H-5′)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：154.3(C-3，C-5)，136.5(C-1)，135.6(C-4)，131.8(C-7)，130.5(C-8)，105.1(C-2，C-6)，105.9(C-1′)，78.3(C-3′)，77.9(C-5′)，75.6(C-2′)，71.1(C-4′)，63.9(C-9)，62.4(C-6′)，57.0(C-10，C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[25]，因此鑒定化合物3為紫丁香酚苷。

化合物4：ESI-MSm/z：365[M+Na]+，淡黃色固體，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.11(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，7.07(1H，s，H-2)，6.95(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.55(1H，d，J=15.8 Hz，H-7)，6.28(1H，dt，J=15.8，5.6 Hz，H-8)，4.86(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，4.21(2H，dd，J=5.6，1.2 Hz，H-9)，3.87(3H，s，H-10)，3.86(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6′)，3.68(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6′)，3.45～3.50(2H，overlap，H-2′，H-3′)，3.39(1H，overlap，H-4′)，3.31(1H，m，H-5′)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：151.3(C-3)，148.1(C-4)，134.2(C-1)，131.8(C-7)，129.4(C-8)，121.2(C-6)，118.4(C-5)，111.8(C-2)，103.2(C-1′)，78.7(C-3′)，78.4(d，C-5′)，75.4(C-2′)，71.8(C-4′)，64.2(C-9)，62.9(C-6′)，57.2(C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[26]，因此鑒定化合物4為松柏苷。

化合物5：ESI-MSm/z：395[M+Na]+，淡黃色固體，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：6.70(2H，s，H-2，H-6)，5.99(1H，ddd，J=15.8，10.3，6.1 Hz，H-8)，5.30(1H，dd，J=15.8，1.5 Hz，Ha-9)，5.13(1H，dd，J=10.3，1.5 Hz，Hb-9)，5.07(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，4.86(1H，overlap，H-7)，3.84(6H，s，H-10，H-11)，3.78(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6′)，3.68(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6′)，3.34～3.50(3H，overlap，H-3′～H-5′)，3.30(1H，m，H-2′)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：154.1(C-3，C-5)，141.6(C-8)，141.4(C-4)，136.5(C-1)，114.8(C-9)，105.3(C-2，C-6)，105.2(C-1′)，78.3(C-3′)，77.8(C-5′)，75.7(C-2′)，75.6(C-7)，71.3(C-4′)，62.7(C-6′)，56.8(C-10，C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[27]，因此鑒定化合物5為黨參苷II。

化合物6：ESI-MSm/z：335[M+Na]+，淡黃色固體，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.33(2H，d，J=8.0 Hz，H-2，H-6)，7.04(2H，d，J=8.0 Hz，H-3，H-5)，6.54(1H，d，J=15.8 Hz，H-7)，6.25(1H，dt，J=15.8，5.6 Hz，H-8)，4.86(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，4.19(2H，dd，J=5.6，1.2 Hz，H-9)，3.87(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6′)，3.68(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6′)，3.34～3.46(4H，overlap，H-2′～H-5′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料中的數(shù)據(jù)對比基本一致[28]，因此鑒定化合物6為(Z)-4-羥基肉桂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物7：白色固體，ESI-MSm/z：309[M+Na]+，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.33(2H，d，J=7.2 Hz，H-6)，7.12(2H，t，J=7.2 Hz，H-3)，6.80(2H，m，H-4，H-5)，4.84(1H，overlap，Ha-7)，4.73(1H，d，J=11.9 Hz，Hb-7)，4.39(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.91(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6′)，3.68(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6′)，3.24～3.50(4H，m，H-2′～H-5′)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：157.1(C-2)，131.5(C-6)，130.6(C-4)，125.7(C-1)，121.0(C-5)，116.8(C-3)，103.9(C-1′)，78.6(C-3′，C-5′)，75.6(C-2′)，72.1(C-4′)，68.2(C-7)，63.3(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[29]，因此鑒定化合物7為2-羥甲基苯基-1-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物8：白色固體，ESI-MSm/z：425[M+Na]+，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.42(2H，d，J=7.2 Hz，H-2，H-6)，7.32(2H，t-like，J=7.2 Hz，H-3，H-5)，7.26(1H，t-like，J=7.2 Hz，H-4)，4.66(1H，d，J=11.9 Hz，Ha-7)，4.35(1H，t-like，J=7.8 Hz，H-1′)，4.12(1H，d，J=11.9 Hz，Hb-7)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：139.1(C-1)，129.2(C-3，C-5)，129.1(C-2，C-6)，128.7(C-4)，105.2(C-1″)，103.4(C-1′)，77.9(C-3″)，77.0(C-2″)，75.1(C-3′)，74.2(C-5′)，72.4(C-4″)，71.9(C-2′)，71.7(C-4′)，69.5(C-7，C-5″)，66.7(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[30]，因此鑒定化合物8為芐基-6-O-β-D-吡喃木糖基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，為首次從臭參中分離得到。

化合物9：淡黃色固體，ESI-MSm/z：325[M-H]-，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.36(2H，d，J=7.3 Hz，H-2，H-6)，7.21(2H，t-like，J=7.3 Hz，H-3，H-5)，7.11(1H，t-like，J=7.3 Hz，H-4)，6.17(1H，s，H-7)，4.82(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.86(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6′)，3.67(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6′)，3.34～3.43(4H，overlap，H-2′～H-5′)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：163.9(C-9)，149.3(C-8)，136.8(C-1)，129.5(C-2，C-6)，128.9(C-3，C-5，C-7)，127.2(C-4)，102.2(C-1′)，78.4(C-3′)，77.8(C-5′)，74.9(C-2′)，71.5(C-4′)，62.8(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[31]，因此鑒定化合物9為(2E)-2-(β-D-吡喃葡萄糖氧基)-3-苯基-2-丙烯酸，為首次從臭參中分離得到。

化合物10：ESI-MSm/z：325[M-H]-，淡黃色固體，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.84(2H，d，J=7.3 Hz，H-2，H-6)，7.33(2H，t-like，J=7.3 Hz，H-3，H-5)，7.27(1H，t-like，J=7.3 Hz，H-4)，6.95(1H，s，H-7)，5.15(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.75(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6′)，3.61(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6′)，3.23～3.49(4H，overlap，H-2′～H-5′)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：169.1(C-9)，145.4(C-8)，135.2(C-1)，131.5(C-2，C-6)，129.5(C-3，C-5，C-7)，129.2(C-4)，103.1(C-1′)，78.5(C-3′)，78.3(C-5′)，75.7(C-2′)，71.4(C-4′)，62.6(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[32]，因此鑒定化合物10為(2Z)-2-(β-D-吡喃葡萄糖氧基)-3-苯基-2-丙烯酸。

化合物11：白色固體，ESI-MSm/z：439[M+Na]+，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.17～7.28(5H，m，H-1-H-5)，4.32(2H，overlap，H-1′，H-1″)，4.09(2H，m，H-8)，3.75～3.88(4H，m，H-6′，H-6″)，3.18～3.53(7H，m，H-2′～H-5′，H-2″～H-4″)，2.95(2H，t，J=7.2 Hz，H-7)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：140.1(C-1)，130.0(C-2，C-6)，129.4(C-3，C-5)，127.2(C-4)，105.1(C-1′)，104.4(C-1″)，77.9(C-3′)，76.9(C-4′)，75.0(C-2′)，74.2(C-4″)，72.4(C-2″)，71.8(C-5′)，71.6(C-3″)，69.5(C-8)，69.4(C-5″)，62.6(C-6′)，37.2(C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[33]，因此鑒定化合物11為2-苯乙基-6-O-β-D-吡喃木糖基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，為首次從臭參中分離得到。

化合物12：淡黃色固體，ESI-MSm/z：677[M-H]-，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：6.78(2H，s，H-2，H-6)，6.64(1H，d，J=15.8 Hz，H-7)，6.32(1H，dt，J=15.8，6.3 Hz，H-8)，4.74(2H，d，J=6.3 Hz，H-9)，4.62(2H，d，J=7.6 Hz，H-1″，H-1?)，3.86(6H，s，H-10，H-11)，3.79(2H，t，J=10.9 Hz，H-6″)，3.66(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6?)，3.61(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6?)，3.19～3.49(8H，overlap，H-2″～H-5″，H-2?～H-5?)，2.94(2H，overlap，H-2′)，2.73(2H，overlap，H-4′)，1.51(3H，s，H-6′)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：172.7(C-5′)，172.6(C-1′)，154.4(C-3，C-5)，136.2(C-1)，134.9(C-7)，134.2(C-4)，124.4(C-8)，105.7(C-2，C-6)，105.3(C-1″)，98.3(C-1?)，78.4(C-3″)，78.1(C-3?)，77.9(C-3′)，77.8(C-5″)，77.7(C-5?)，75.7(C-2″)，75.2(C-2?)，71.5(C-4″)，71.3(C-4?)，66.1(C-9)，63.5(C-3′)，62.8(C-6″)，62.5(C-6?)，57.0(C-10，C-11)，44.8(C-2′，C-4′)，23.0(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[34]，因此鑒定化合物12為黨參苷I。

化合物13：黃色固體，ESI-MSm/z：439[M+Na]+，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.07(1H，d，J=8.0 Hz，H-6′)，7.06(1H，d，J=1.8 Hz，H-3′)，6.94(1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-5′)，6.54(1H，d，J=15.8 Hz，H-7′)，6.27(1H，dt，J=15.8，5.6 Hz，H-8′)，4.41(1H，t，J=5.0 Hz，H-2)，4.33(1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)，4.21(2H，dd，J=5.6，1.4 Hz，H-9′)，4.11(1H，dd，J=10.8，5.0 Hz，Ha-3)，3.86(3H，s，H-10′)，3.80～3.85(3H，overlap，H-1，Hb-3)，3.78(1H，dd，J=11.8，2.3 Hz，Ha-6″)，3.66(1H，dd，J=11.8，5.2 Hz，Hb-6″)，3.18～3.35(4H，overlap，H-2″～H-5″)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：152.0(C-2′)，148.2(C-1′)，133.4(C-4′)，131.4(C-7′)，128.7(C-8′)，120.7(C-5′)，118.9(C-6′)，111.4(C-3′)，104.7(C-1″)，81.0(C-2)，78.0(C-3″)，77.9(C-5″)，75.1(C-2″)，71.6(C-4″)，69.1(C-3)，63.7(C-1)，62.8(C-9′)，61.9(C-6″)，56.5(C-10′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[35]，因此鑒定化合物13為3-羥基-2-{4-[(1E)-3-羥基丙-1-烯-1-基]-2-甲氧基苯氧基}丙基-β-D-吡喃葡萄糖苷，為首次從臭參中分離得到。

化合物14：白色固體，ESI-MSm/z：129[M-H]-，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：6.82(1H，dd，J=15.6，5.1 Hz，H-3)，5.97(1H，d，J=15.6，H-2)，4.14(1H，m，H-4)，1.55(2H，m，H-5)，0.94(3H，t，J=7.4 Hz，H-6)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：171.8(C-1)；150.4(C-3)，122.9(C-2)，73.1(C-4)，30.5(C-5)，10.0(C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[36]，因此鑒定化合物14為(2E)-4-羥基-2-己烯酸。

化合物15：白色固體，ESI-MSm/z：143[M-H]-，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：5.83(1H，s，H-2)，3.57(2H，s，H-4)，1.94(3H，s，H-6)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：174.6(C-5)，170.2(C-1)，152.2(C-3)，120.8(C-2)，39.8(C-4)，25.8(C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[37]，因此鑒定化合物15為(2E)-3-甲基-2-戊二酸。

化合物16：白色固體，ESI-MSm/z：215[M-H]-，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：6.76(1H，s，H-2)，5.12(1H，dd，J=12.9，5.7 Hz，H-3)，4.32(1H，m，H-5)，3.79(1H，dd，J=7.8，5.7 Hz，H-4)，2.80(1H，dd，J=18.1，4.1 Hz，Ha-6)，2.23(1H，dd，J=18.1，5.7 Hz，Hb-6)，2.06(3H，s，H-9)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：172.4(C-7)，170.7(C-8)，137.5(C-2)，131.6(C-1)，71.5(C-3)，70.3(C-4)，67.3(C-5)，29.6(C-6)，21.0(C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[38]，因此鑒定化合物16為5-乙酰莽草酸。

化合物17：白色固體，ESI-MSm/z：205[M+H]+，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.06(1H，d，J=8.0 Hz，H-4)，7.35(1H，d，J=8.0 Hz，H-7)，7.18(1H，s，H-2)，7.13(1H，t，J=7.4 Hz，H-6)，7.03(1H，t，J=7.4 Hz，H-5)，3.85(1H，dd，J=9.4，3.8 Hz，H-9)，3.54(1H，dd，J=15.2，3.8 Hz，Ha-8)，3.14(1H，dd，J=15.2，9.4 Hz，Hb-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[39]，因此鑒定化合物17為色氨酸。

化合物18：白色粉末狀固體，ESI-MSm/z：290[M+Na]+，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δH：8.35(1H，s，H-2)，8.14(1H，s，H-8)，7.36(2H，br s，6-NH2)，5.88(1H，d，J=4.6 Hz，H-1′)，5.45(1H，br s，H-2′-OH)，5.38(1H，br s，H-3′-OH)，5.26(1H，s-like，H-4′-OH)，4.62(1H，s-like，H-2′)，4.15(1H，s-like，H-3′)，3.97(1H，s-like，H-4′)，3.67(2H，dd，J=10.6，5.4 Hz，H-5′)；13C-NMR(200 MHz，DMSO-d6)δC：156.2(C-6)，152.4(C-2)，149.1(C-4)，139.9(C-8)，119.4(C-5)，87.9(C-1′)，85.9(C-4′)，73.5(C-2′)，70.7(C-3′)，61.7(C-5′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[40]，因此鑒定化合物18為腺苷。

化合物19：白色固體，ESI-MSm/z：122[M-H]-，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δH：9.10(1H，br s，H-2)，8.67(1H，d，J=5.0 Hz，H-6)，8.38(1H，d，J=8.0 Hz，H-4)，7.12(1H，dd，J=8.0，5.0 Hz，H-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[41]，因此鑒定化合物19為煙酸。

化合物20：白色固體，ESI-MSm/z：217[M+Na]+，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：7.86(1H，s，H-8)，3.99(3H，s，H-9)，3.53(3H，s，H-3)，3.35(3H，s，H-1)；13C-NMR(150 MHz，CD3OD)δC：155.3(C-6)，151.8(C-2)，148.4(C-4)，142.6(C-8)，106.7(C-5)，32.5(N-9-CH3)，28.7(N-3-CH3)，26.8(N-1-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[42]，因此鑒定化合物20為咖啡因。

化合物21：白色固體，ESI-MSm/z：166[M+Na]+，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δH：4.30(1H，dd，J=9.0，4.4 Hz，H-5)，3.76(3H，s，H-7)，2.47(1H，m，Ha-3)，2.33(2H，m，H-4)，2.15(1H，m，Hb-3)；13C-NMR(200 MHz，CD3OD)δC：181.1(C-2)，174.5(C-6)，57.0(C-5)，52.9(C-7)，30.3(C-3)，25.8(C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)資料對比基本一致[43]，因此鑒定化合物21為5-(甲氧基羰基)-2-吡咯烷酮，為首次從臭參中分離得到。

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ChemicalConstituentsfromn-BuOHExtractofCodonopsispilosula

ZHUANG Xiaocui1，2，YAN Yongming1，ZHANG Qingzhi2，CHENG Yongxian1，2*

(1.StateKeyLaboratoryofPhytochemistryandPlantResourcesinWestChina，KunmingInstituteofBotany，ChineseAcademyofSciences，Kunming650201，China； 2.CollegeofTraditionalChineseMedicine，YunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine，Kunming650500，China)

Objective:To study the chemical constituents from then-butanol extract ofCodonopsispilosulaproduced in Yunnan province.MethodsThe chemical constituents were isolated by various column chromatography.Their structures were identified by NMR and MS.ResultsTwenty-one known compounds were isolated fromn-butanol extract ofC.pilosulafrom in Yunnan province.Their structures were identified as 7R，8R-threo-4，7，9，9′-tetrahydroxy-3-methoxy-8-O-4′-neolignan-3′-O-β-D-glucopyranoside (1)，catechin-7-O-β-D-glucopyranside (2)，syringin (3)，coniferin (4)，tangshenoside II (5)，(Z)-4-hydroxycinnamyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside (6)，2-hydroxymethylphenyl-1-O-β-D-glucopyranoside (7)，benzyl-6-O-β-D-xylopyranosyl-O-β-D-glucopyranoside (8)，(2E)-2-(β-D-glucopyranosyloxy)-3-phenyl-2-propenoic acid (9)，(2Z)-2-(β-D-glucopyranosyloxy)-3-phenyl-2-propenoic acid (10)，2-phenylethyl 6-O-β-D-xylopyranosyl-O-β-D-glucopyranoside (11)，tangsheno side I (12)，3-hydroxy-2-{4-[(1E)-3-hydroxyprop-1-en-1-yl]-2-methoxyphenoxy}propyl-β-D-glucopyranoside (13)，(2E)-4-hydroxy-2-hexenoic acid (14)，(2E)-3-methyl-2-pentenedioic acid (15)，5-acetyl-shikimic acid (16)，tryptophan (17)，adenosine (18)，niacin (19)，caffeine (20)，and 5-(methoxycarbonyl)-2-pyrrolidone (21)，respectively，by spectroscopic methods.ConclusionAmong these substances，compounds8，9，11，13and21were isolated fromC.pilosulafor the first time.

Codonopsispilosula；phenylpropanoids；alkaloids

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.9.005

云南省生物科技重大項目(2014FC002)

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程永現(xiàn)，研究員，研究方向：中藥藥效物質(zhì)；E-mail：yxcheng@mail.kib.ac.cn

2017-05-17)