奶粉中菌落總數(shù)的不確定度評(píng)價(jià)

汪楊++沈佳特++何開(kāi)勇++王嫣

摘要：依據(jù)GB 4789.2-2010《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》以及相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，評(píng)價(jià)了10份不同奶粉樣品中菌落總數(shù)不確定度。結(jié)果表明，可用指數(shù)法對(duì)樣品的菌落總數(shù)檢測(cè)結(jié)果的不確定度做出較好的評(píng)估。

關(guān)鍵詞：奶粉；菌落總數(shù)；不確定度

中圖分類號(hào)：TS252.51；TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）13-2521-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.13.031

Uncertainty Evaluation of Aerobic Plate Count in Milk Powder

WANG Yang， SHEN Jia-te， HE Kai-yong， WANG Yan

（Testing Centre for Biosafety， Hubei Institute for Food and Drug Control， Wuhan 430064， China）

Abstract： According to JJF 1059.1-2012 Evaluation and Expression of Uncertainty in Measurement and GB 4789.2-2010 Food Microbiological Examination：Aerobic Plate Count and related statistical methods， uncertainty of aerobic plate count in 10 different milk powder samples were evaluated. The results showed that， the index method could well evaluated uncertainty of aerobic plate count in samples， which was suitable for the uncertainty evaluation of aerobic plate count in the daily work.

Key words： milk powder； aerobic plate count； uncertainty

菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)[1]。菌落總數(shù)的檢測(cè)結(jié)果用數(shù)值表示，一定程度反映了食品被細(xì)菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量，是評(píng)價(jià)食品微生物質(zhì)量的重要指標(biāo)。在CNAS-CL07：2011《測(cè)量不確定度的要求》[2]中指出，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有能力對(duì)每一項(xiàng)有數(shù)值要求的測(cè)量結(jié)果進(jìn)行不確定度評(píng)估，對(duì)于不同的檢測(cè)項(xiàng)目和檢測(cè)對(duì)象，可以采用不同的評(píng)估方法。由于微生物在樣品中分布不均勻，菌落總數(shù)檢測(cè)誤差的問(wèn)題更為突出，因此對(duì)食品中菌落總數(shù)進(jìn)行測(cè)量不確定度評(píng)價(jià)，是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制的一部分，對(duì)提供準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

奶粉10份；平板計(jì)數(shù)瓊脂為北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.2 檢驗(yàn)方法

按《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》（GB 4789.2-2010）規(guī)定，無(wú)菌取樣25 g，加入225 mL滅菌生理鹽水中制成1∶10的樣品稀釋液，再用1 mL滅菌吸管吸取1∶10的樣品稀釋液1 mL，沿管壁緩慢注于盛有9 mL滅菌生理鹽水的無(wú)菌試管中，振搖試管使其混合均勻，制成 1∶100的樣品勻液，以此類推，制備10倍系列稀釋樣品勻液。選取2～3個(gè)適宜的稀釋級(jí)，吸取各稀釋度的稀釋樣品勻液1 mL于無(wú)菌培養(yǎng)皿中，每個(gè)稀釋度接種2個(gè)平皿，同時(shí)分別取1 mL滅菌生理鹽水做空白對(duì)照。將約15 mL冷卻至46 ℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36 ℃培養(yǎng)48 h。培養(yǎng)結(jié)束后，計(jì)算并報(bào)告菌落總數(shù)。

3 討論

不確定度的評(píng)定有測(cè)量不確定度的A類評(píng)定和測(cè)量不確定度的B類評(píng)定。測(cè)量不確定度的A類評(píng)定，指對(duì)在規(guī)定測(cè)量條件下測(cè)得的量值，用統(tǒng)計(jì)分析的方法進(jìn)行的測(cè)量不確定度分量的評(píng)定。測(cè)量不確定度的B類評(píng)定，指用不同于測(cè)量不確定度A類評(píng)定的方法進(jìn)行的測(cè)量不確定度分量的評(píng)定[4]。測(cè)量不確定度評(píng)定要全面考慮不確定度的來(lái)源，力求合理評(píng)定各個(gè)分量的數(shù)值，避免不適當(dāng)?shù)母吖阑虻凸?，保持測(cè)量體系的穩(wěn)定。

建立正確的數(shù)學(xué)模型是開(kāi)展測(cè)量不確定度評(píng)定的基礎(chǔ)。由于菌落總數(shù)檢測(cè)結(jié)果發(fā)散性大、非正態(tài)分布，不適用于直接計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)差，因而采用指數(shù)法來(lái)統(tǒng)計(jì)分析這類分散性大的菌落總數(shù)數(shù)據(jù)。本次評(píng)定充分考慮人員操作變動(dòng)性、菌落不均勻分布的影響，對(duì)樣品進(jìn)行重復(fù)測(cè)定，引入重復(fù)性影響因子；同時(shí)考慮加樣稀釋和取樣引入的不確定度。

菌落總數(shù)是食品微生物檢驗(yàn)的常規(guī)項(xiàng)目之一，其限量標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)產(chǎn)品類型的不同，可能低至10 CFU/g，也可高達(dá)數(shù)萬(wàn)CFU/g。當(dāng)結(jié)果處于臨界值時(shí)，其取值區(qū)間就尤為重要[5]。本次評(píng)定可適用于本實(shí)驗(yàn)室的任何一次試驗(yàn)，為奶粉中菌落總數(shù)檢驗(yàn)結(jié)果判定奠定了基礎(chǔ)。通過(guò)本次評(píng)定可看出，菌落總數(shù)不確定度以由重復(fù)測(cè)定引入的A類不確定度為主要來(lái)源。由此可見(jiàn)，提高操作人員的技能，制定嚴(yán)格的操作規(guī)程，對(duì)降低菌落總數(shù)測(cè)定中的不確定度有著重要的作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] GB 4789.2-2010，食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定[S].

[2] CNAS-CL07：2011，測(cè)量不確定度的要求[S].

[3] 袁 平，吳春敏，林 仲，等.食品中菌落總數(shù)測(cè)定不確定度評(píng)定數(shù)學(xué)模型的建立[J].預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇，2016，22（7）：540-545.

[4] 鄭 萍，丁 珵，武利平，等.化妝品菌落總數(shù)指標(biāo)測(cè)量不確定度的評(píng)定[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015，25（22）：3866-3874.

[5] 陳彩彥，陳丹萍，鄧建娣.食品中菌落總數(shù)測(cè)定的不確定度分析[J].食品安全導(dǎo)刊，2016（21）：54.