潰瘍性結(jié)腸炎患者炎癥黏膜中PCT、IL-6、IL-23水平的表達(dá)及臨床意義

張宇翔 張凱亞

(河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院肛腸科，河南 鄭州 450000)

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潰瘍性結(jié)腸炎患者炎癥黏膜中PCT、IL-6、IL-23水平的表達(dá)及臨床意義

張宇翔 張凱亞1

(河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院肛腸科，河南 鄭州 450000)

目的 探討潰瘍性結(jié)腸炎(UC)患者炎癥黏膜中降鈣素原(PCT)、白細(xì)胞介素(IL)-6及IL-23水平的表達(dá)及臨床意義。方法 選擇UC患者52例(研究組)及同期50例健康者(對(duì)照組)，采用免疫組化實(shí)驗(yàn)方法測定黏膜炎癥因子水平，并比較不同分組炎癥黏膜中PCT、IL-6及IL-23水平，并采用ROC曲線探究3種炎性因子在UC疾病診斷過程中的作用。結(jié)果 研究組PCT、IL-6及IL-23水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；UC重度組PCT、IL-6及IL-23水平均顯著高于UC中度、輕度組，UC中度組高于UC輕度組；UC患者中PCT水平與IL-6和IL-23水平、IL-6與IL-23水平間均存在正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)；ROC曲線顯示，PCT、IL-6及IL-23水平在診斷UC發(fā)生的可信度均較高。結(jié)論 UC患者機(jī)體炎癥黏膜中PCT、IL-6、IL-23水平均顯著高于健康人群，且病情越重其水平越高，其在診斷UC疾病進(jìn)展上具有重要的臨床診斷意義。

潰瘍性結(jié)腸炎；炎性因子

目前，關(guān)于潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，有研究表明〔1〕，機(jī)體免疫應(yīng)答及免疫調(diào)節(jié)失衡患者常易發(fā)生UC，說明機(jī)體免疫系統(tǒng)功能失調(diào)可能與UC的發(fā)病存在關(guān)系。UC作為一種慢性炎癥性疾病，促炎因子如降鈣素原(PCT)、白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-23等，在促進(jìn)UC的發(fā)病過程中均扮演重要角色〔2〕，但關(guān)于炎癥因子表達(dá)在UC患者的診斷價(jià)值的研究較少。PCT是一種炎癥性糖蛋白，在正常情況下不均有活性，在預(yù)測感染、敗血病等過程中廣泛應(yīng)用；此外，細(xì)胞因子IL-23能夠活化T細(xì)胞促進(jìn)IL-6表達(dá)，導(dǎo)致UC的發(fā)生。本研究探討PCT、IL-6、IL-23在UC患者炎癥黏膜中的表達(dá)情況及臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 隨機(jī)選取2015年3月至2016年6月河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的UC患者52例為研究組，其中男29例，女23例；年齡25～71〔平均(55.12±7.13)〕歲，病程1個(gè)月～3年，平均(11.22±4.73)個(gè)月；根據(jù)Truelove-Witts標(biāo)準(zhǔn)對(duì)UC病情進(jìn)行分級(jí)〔3〕，其中輕度5例、中度23例、重度24例。另選擇本院同期健康體檢者50例為對(duì)照組，其中，男27例，女23例；年齡50～75〔平均(55.43±7.04)〕歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均確診為UC，診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)2012年頒布《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見》〔4〕，并經(jīng)結(jié)腸鏡病理組織檢查確診為UC；②臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他感染者；②合并其他腸道疾病者；③合并免疫系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤，本研究患者及家屬均知情同意，兩組性別、年齡均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 在電子結(jié)腸鏡下取患者直腸或結(jié)腸病變黏膜3～5塊，健康體檢者均取正常直腸或結(jié)腸黏膜3～5塊，采用4%甲醛固定，石蠟包埋，并制成3 μm厚度切片，進(jìn)一步進(jìn)行免疫組化染色。采用Eli VisionTMplus即用型免疫組化試劑盒及二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑進(jìn)行免疫組化染色，兔抗人PCT單克隆抗體、兔抗人IL-6單克隆抗體、兔抗人IL-23單克隆抗體及免疫組化EliVisionTMsuper試劑盒(兔)均購于福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司；本研究實(shí)驗(yàn)操作均由檢驗(yàn)科專業(yè)技術(shù)人員嚴(yán)格按照試劑盒說明操作規(guī)范進(jìn)行。結(jié)果判定：先在低倍鏡下定性觀察，再于高倍鏡下(×400)選擇5個(gè)視野，采用Image-ProPlus6.0軟件測定炎性因子在每一視野中的累積光密度值，取其平均值作為該黏膜組織中炎性因子的相對(duì)表水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS9.4軟件進(jìn)行F檢驗(yàn)、SNK法、χ2檢驗(yàn)和Pearson相關(guān)分析，采用受試者工作特征曲線(ROC)評(píng)價(jià)PCT、CRP、IL-6確定UC預(yù)測的截?cái)嘀怠?/p>

2 結(jié) 果

2.1 兩組黏膜炎癥因子水平比較 研究組PCT、IL-6及IL-23水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組炎癥因子水平比較

2.2 不同嚴(yán)重程度UC患者黏膜中炎癥因子水平比較 UC患者黏膜炎癥因子隨著病情的增加，PCT、IL-6及IL-23水平均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同嚴(yán)重程度UC患者黏膜炎癥因子水平比較

與對(duì)照組比較:1)P<0.05；與輕度組比較:2)P<0.05；與中度組比較:3)P<0.05

2.3 UC患者炎癥因子指標(biāo)間的相關(guān)性分析 UC患者黏膜PCT與IL-6和IL-23呈正相關(guān)(r=0.435，0.522；P=0.000，0.021)，黏膜IL-6與IL-23呈正相關(guān)(r=0.621，P=0.004)。

2.4 黏膜PCT、IL-6和IL-23水平對(duì)診斷UC的效果評(píng)價(jià) 將所有研究對(duì)象黏膜PCT、IL-6及IL-23水平擬合ROC曲線顯示，PCT、IL-6及IL-23水平在預(yù)測UC發(fā)生的ROC曲線對(duì)應(yīng)的陰影下面積均較大，分別為0.849(0.733，0.941)、0.822(0.710，0.894)、0.913(0.92，1.000)，說明3項(xiàng)指標(biāo)在預(yù)測UC發(fā)生的可信度均較高，預(yù)測UC的截?cái)嘀捣謩e為0.14 μg/ml、773.25 mg/ml與530.71 ng/ml。見表3，圖1。

表3 黏膜炎癥因子對(duì)UC患病的診斷效果評(píng)價(jià)

圖1 黏膜中PCT、CRP和IL-6水平預(yù)測UC的ROC曲線

3 討 論

細(xì)胞因子是一類由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的具有信息傳遞功能的小分子蛋白，在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能具有重要的作用。既往研究證實(shí)〔5〕，PCT能促進(jìn)腸內(nèi)細(xì)菌引起UC的病情進(jìn)展，推測PCT水平對(duì)UC病情診斷存在一定的意義，而IL-6、IL-23均是機(jī)體免疫細(xì)胞分泌的重要炎性指標(biāo)，且有研究報(bào)道其與UC的病程進(jìn)展有關(guān)〔6〕。

PCT由甲狀腺C細(xì)胞分泌，在健康者體內(nèi)表達(dá)較低，當(dāng)發(fā)生感染后會(huì)迅速升高，且升高水平與患者的疾病程度存在一定相關(guān)關(guān)系，被認(rèn)為是臨床感染性疾病診斷的指標(biāo)〔7〕。本研究結(jié)果說明機(jī)體PCT水平與UC的發(fā)生存在一定的關(guān)系，與袁柏思等〔8〕研究結(jié)果基本一致。研究報(bào)道〔9〕，IL-6是由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及T細(xì)胞分泌的一種輔助型T淋巴細(xì)胞(Th)1型細(xì)胞因子，其能夠作用于多種不同的效應(yīng)細(xì)胞，參與機(jī)體急性炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)等多種病理過程，在UC的發(fā)病過程中扮演重要角色。隨著患者UC病情的加重患者IL-6的水平逐漸升高。其原因可能與IL-6抗凋亡信號(hào)在UC的發(fā)病過程中能夠活化轉(zhuǎn)錄因子STAT3誘導(dǎo)抗凋亡因子bcl-xL和bcl-2，使T細(xì)胞對(duì)凋亡出現(xiàn)障礙，導(dǎo)致炎癥部位出現(xiàn)T細(xì)胞聚集，最終引起UC的發(fā)生相關(guān)〔10〕。

本研究同樣驗(yàn)證隨著患者UC病情的加重機(jī)體IL-23水平逐漸升高，其原因與IL-23能夠誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞分化為Th17細(xì)胞，其能夠分泌多種細(xì)胞因子發(fā)揮促炎作用。動(dòng)物模型研究顯示〔11〕，阻斷小鼠IL-23或下游IL-6等細(xì)胞因子的表達(dá)能夠抑制炎癥性疾病的進(jìn)展。因此，PCT、IL-6及IL-23水平等細(xì)胞因子的表達(dá)，在UC疾病的進(jìn)展過程中扮演重要角色。進(jìn)一步對(duì)3種因子進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果與既往研究結(jié)果一致〔12〕。

本研究結(jié)果提示，3種因子在診斷UC上均具有較高的可信度。PCT水平在診斷UC上具有一定的臨床價(jià)值，與既往研究基本一致〔13〕。

1 Uemura R，F(xiàn)ujiwara Y，Iwakura N，etal.Sleep disturbances in Japanese patients with inflammatory bowel disease and their impact on disease flare〔J〕.Springerplus，2016；5(1)：1792.

2 Panés J，Su C，Bushmakin AG，etal.Direct and indirect effects of tofacitinib on treatment satisfaction in patients with ulcerative colitis〔J〕.J Crohns Colitis，2016；10(11)：1310-5.

3 熊 真.不同嚴(yán)重程度潰瘍性結(jié)腸炎炎癥因子表達(dá)水平的臨床研究〔J〕.現(xiàn)代消化及介入診療，2016；21(3)：423-5.

4 朱 娟，劉志峰.潰瘍性結(jié)腸炎患兒血清炎癥因子及氧化應(yīng)激水平變化及意義〔J〕.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016；25(14)：1492-4，1498.

5 施曼莉，王晨宇.12 w有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)緩解期潰瘍性結(jié)腸炎患者氧化應(yīng)激、炎癥因子和運(yùn)動(dòng)能力的影響〔J〕.中國體育科技，2014；50(2)：92-7.

6 Bosca-Watts MM，Cortes X，Iborra M，etal.Short-term effectiveness of golimumab for ulcerative colitis：observational multicenter study〔J〕.World J Gastroenterol，2016；22(47)：10432-9.

7 Karagoz E，Tanoglu A.Clinical importance of serum procalcitonin in ulcerative colitis patients〔J〕.World J Gastroenterol，2014；20(42)：15941-2.

8 袁柏思，金鑫鑫，路又可，等.潰瘍性結(jié)腸炎患者血清降鈣素原檢測的臨床價(jià)值〔J〕.世界華人消化雜志，2015；23(1)：37-43.

9 Koido S，Ohkusa T，Takakura K，etal.Clinical significance of serum procalcitonin in patients with ulcerative colitis〔J〕.World J Gastroenterol，2013；19(45)：8335-41.

10 王少鑫，浦 江，劉超群，等.炎癥因子TNF-α、IL-6和IL-4在潰瘍性結(jié)腸炎中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2015；24(1)：104-6.

11 Padua D，Mahurkar-Joshi S，Law IK，etal.A long noncoding RNA signature for ulcerative colitis identifies IFNG-AS1 as an enhancer of inflammation〔J〕.Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2016；311(3)：446-57.

12 王福亭.致康膠囊對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者血清TNF-α、IL-6及CRP的影響〔J〕.西部中醫(yī)藥，2016；29(2)：100-2.

13 聶 軍，袁曉梅，吳偉民，等.老年潰瘍性結(jié)腸炎患者外周血血清降鈣素原、C反應(yīng)蛋白及白細(xì)胞介素-6水平的變化及臨床意義〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2016；36(13)：3232-3.

〔2017-04-17修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

張宇翔(1963-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事中醫(yī)肛腸疾病方面的研究。

R57

A

1005-9202(2017)14-3537-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.14.070

1 長春中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院