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    羊棘球蚴(包蟲)病實用防治技術(shù)

    2017-08-07 23:54:17馬力克·艾則孜陳千林王鳳蓮趙揚揚李健李春燕曹政
    中國動物保健 2017年7期
    關(guān)鍵詞:疫苗

    馬力克·艾則孜+陳千林+王鳳蓮+趙揚揚+李健+李春燕+曹政

    摘要:羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗可激發(fā)羊體產(chǎn)生針對細(xì)粒棘球蚴的特異性抗體,達到避免感染的目的。臨床試驗表明,新疆、內(nèi)蒙、西藏、青海等地的羊群在進行棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗免疫注射后,其免疫保護期可維持一年之久。在免疫區(qū)給犬投喂吡喹酮,經(jīng)羊棘球蚴(包蟲)病間接ELISA檢測試劑盒的監(jiān)測,當(dāng)?shù)匮蛉喊x病患病率得到顯著的降低,且膘情普遍變得良好。由此證明,給羊群免疫接種羊棘球蚴疫苗結(jié)合給犬投喂吡喹酮可有效控制包蟲病的傳播,為保障人畜健康、增加養(yǎng)殖收入奠定良好的基礎(chǔ)。

    關(guān)鍵詞:棘球蚴;包蟲??;疫苗;ELISA

    包蟲病,即細(xì)粒棘球蚴?。‥chinococcus granulosus),是世界范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅畜牧業(yè)發(fā)展和公共衛(wèi)生的人畜共患寄生蟲病[1]。我國每年新增包蟲病患者達38萬,感染家畜約5,000萬頭份,在廣大牧區(qū)素有“蟲癌”之稱。寄生于終末宿主犬科動物體內(nèi)的棘球絳蟲孕節(jié)和蟲卵隨糞便一起排出體外,人、羊、牛等中間宿主誤食入發(fā)育期的細(xì)粒棘球蚴而引發(fā)感染。目前暫無有效的治療藥物,只能通過手術(shù)方法切除寄生器官,但復(fù)發(fā)率較高[2]。

    近年來,各界學(xué)者在如何防治細(xì)粒棘球絳蟲病方面做了大量的工作,成功研制出包蟲病Eg95疫苗[3]。臨床試驗證明,已開發(fā)的羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗對綿羊包蟲病的保護率可達97%。我國新疆、內(nèi)蒙、西藏、青海等地羊群通過免疫注射該疫苗,結(jié)合給犬投服吡喹酮,包蟲病發(fā)病率有了顯著地降低[4]。本文就羊棘球蚴(包蟲)病常見檢測技術(shù)、羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗免疫效果及綜合防控技術(shù)進行綜述。

    1檢測技術(shù)

    包蟲病的診斷常在宿主動物表現(xiàn)出相應(yīng)臨床癥狀才開始的,感染初期很難被確診。目前,對患者常以影像學(xué)和免疫學(xué)相結(jié)合進行綜合診斷。對其他中間宿主進行診斷時,常用囊液、原頭節(jié)蛋白或其他重組蛋白作為包被抗原進行ELISA檢測。

    1.1人包蟲病檢測技術(shù)

    便攜快捷、費用低廉的超聲儀是檢測包蟲病的首選方法。近年來,彩色多普勒超聲造影技術(shù)成功地應(yīng)用于HAE,因包囊病灶處有“血供”等特征,病灶周邊有連續(xù)或短棒狀滋生血管環(huán)繞,這些血管在進入病灶邊緣處突然“截斷”。跟據(jù)這一影像特點,可對包蟲病進行診斷。

    近年來應(yīng)用普遍的CT技術(shù)在包蟲病診斷中發(fā)揮著獨特的優(yōu)勢,該技術(shù)可對包囊進行準(zhǔn)確、清晰的定位,并可顯示包囊的數(shù)量、大小及位置,便于指導(dǎo)選擇手術(shù)切口和手術(shù)方式。

    1.2ELISA檢測技術(shù)

    目前,檢測棘球蚴病的首選方法是ELISA檢測法,用于檢測特異性抗原或抗體。其中,抗原B蛋白(AgB)是由細(xì)粒棘球蚴幼蟲產(chǎn)生的高豐度蛋白,由原頭節(jié)和包囊合成和分泌的,AgB蛋白具有很好的免疫原性,在調(diào)節(jié)宿主免疫應(yīng)答反應(yīng)中具有很重要的作用。棘球蚴Em2抗原具有很好的敏感性和特異性,已被WHO認(rèn)證為診斷泡狀棘球蚴的參照指標(biāo),適用于臨床診斷和大規(guī)模篩查。

    ELISA檢測法快速、靈敏,但實際操作比較復(fù)雜,我公司正在積極制備更方便、更快捷的羊棘球蚴(包蟲)病免疫金試紙條,目前正在申報新藥階段,相信不久之后,養(yǎng)殖戶自己就可以在自家羊圈中對羊群進行羊棘球蚴病的診斷。

    1.3分子生物學(xué)檢測技術(shù)

    隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,PCR基因擴增及核酸分子雜交等技術(shù)越來越多應(yīng)用于寄生蟲病的診斷和研究。臨床上約有5%~10%血清無法運用ELISA方法準(zhǔn)確檢測,而運用PCR法檢測棘球蚴保守型基因序列,可提高其檢測準(zhǔn)確率。

    1.4對終末宿主犬的檢測

    檢測終末宿主犬體內(nèi)的棘球絳蟲或糞便抗原,包括氫溴酸檳榔堿下瀉法檢測犬糞成蟲、犬糞飽和蔗糖水蟲卵漂浮檢測、細(xì)粒棘球絳蟲犬糞抗原抗體夾心ELISA診斷等。其中,最簡便、可靠的是ELISA檢測法。

    2羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗免疫效果

    中國是一個養(yǎng)羊大國,在我國的21個?。ㄊ校?、自治區(qū)中均有該病的流行,發(fā)病面積占全國總面積的86.9%,其中內(nèi)蒙古、新疆、青海、西藏、甘肅、寧夏等地區(qū)流行最為嚴(yán)重,這些地區(qū)均為人感染包蟲病的高發(fā)區(qū)。據(jù)報道,上述地區(qū)犬的成蟲感染率超過15%,家畜感染率超過50%,每年由于包蟲病感染家畜造成的經(jīng)濟損失達30億元以上[5]。

    目前,用于預(yù)防家畜感染包蟲病的唯一有效途徑是免疫接種羊棘球蚴Eg95疫苗。現(xiàn)已有成熟的商品化疫苗———羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗上市。臨床實驗表明,羊群在免疫注射該疫苗后可產(chǎn)生穩(wěn)定的抗體,從而達到免疫保護的作用。用于預(yù)防牛感染包蟲病的牛包蟲病基因工程亞單位疫苗的研發(fā)正處于臨床推廣試驗中,不久便可推向市場,服務(wù)于廣大養(yǎng)殖戶。

    2.1疫苗可有效預(yù)防羊感染棘球蚴(包蟲)病

    Health D D等[6]通過運用細(xì)粒棘球蚴抗原免疫羔羊,在初次免疫第28日再次進行免疫,其免疫保護期可達1年之久。Larrieu E等[7]運用EG95重組疫苗對新生羔羊連續(xù)進行三次免疫后,其免疫保護期可持續(xù)至商品羊出售。

    趙揚揚等[8]運用羊棘球蚴(包蟲)ELISA抗體檢測試劑盒對1,637只幼年綿羊和山羊進行了為期1年半的疫苗免疫監(jiān)測。結(jié)果顯示,Eg95重組蛋白疫苗在免疫注射14日后便可誘導(dǎo)特異性抗體產(chǎn)生,在第28日抗體水平達到最高,免疫保護期超過3個月;在首次免疫后第28日再次進行免疫,抗體水平有了顯著地增加(p<0.05),免疫保護可夠持續(xù)12個月以上;當(dāng)在二次免疫后第12個月進行第三次免疫,Eg95抗體水平得到了極顯著的提高(p<0.01),抗體滴度可達到3.5以上。

    綜上所得,羊棘球蚴Eg95重組蛋白疫苗具有良好免疫效果,可有效預(yù)防綿羊和山羊感染棘球蚴(包蟲)病。

    2.2疫苗可有效降低羊、犬的棘球蚴(包蟲)病感染率endprint

    趙揚揚等[9]運用羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗對新疆某地區(qū)羊群進行了持續(xù)四年免疫監(jiān)測,同時統(tǒng)計疫苗免疫區(qū)的犬糞蟲卵的檢出情況。結(jié)果表明,自2011至2014年期間,免疫區(qū)羊棘球蚴患病率從57%逐年降低至4.63%;犬糞中的棘球蚴蟲卵的檢出率自14.1%降低至7.4%。此外,在新疆另一地區(qū)同時進行了包蟲病疫苗免疫和對犬進行藥物驅(qū)蟲試驗。結(jié)果表明,自2011年至2015年期間,犬細(xì)粒棘球絳蟲感染率自21.53%下降至0.88%;羊包蟲病感染率自55.08%降低至4.93%。

    對比上述試驗可得,運用羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗免疫羊可顯著地降低犬患棘球蚴病的概率。結(jié)合對羊進行疫苗免疫、對犬投服吡喹酮,降低犬患棘球蚴病的效果明顯優(yōu)于單獨運用疫苗免疫羊。因此,在廣大牧區(qū)建議使用疫苗免疫家畜和對犬投服驅(qū)蟲藥相結(jié)合,以遏制棘球蚴病的傳播、流行。

    3包蟲病綜合防控技術(shù)

    棘球蚴病是我國西部地區(qū)廣大農(nóng)牧民因病致貧、因病返貧的疾病之一,同時也是嚴(yán)重制約我國畜牧業(yè)健康發(fā)展的疾病之一。對于包蟲病的綜合防控,可以總結(jié)為以下幾方面:

    1)加強防治宣傳。部分農(nóng)牧民對棘球蚴病還未形成清楚的認(rèn)識,甚至還有許多畜主不知道棘球蚴病是什么。繼續(xù)加大宣傳,做到家喻戶曉,使廣大農(nóng)牧民清楚認(rèn)識棘球蚴病的病原、致病機理、臨床癥狀以及防控措施等,以提高他們防控棘球蚴病的自覺性,這是戰(zhàn)勝包蟲病的第一步,也是最關(guān)鍵的一步。

    2)多部門密切配合,落實防控責(zé)任。包蟲病防控是一項長久的攻堅戰(zhàn),人力、物力、財力的保障和嚴(yán)格的防控責(zé)任制度是十分必要的。各部門密切配合與協(xié)作,建立嚴(yán)格的防控責(zé)任制度,同時爭取加大人力、物力、財力的投入,以保障防控工作的正常運行。

    3)強化畜間防治,推進群防群控。包蟲病流行范圍廣、危害嚴(yán)重,消除包蟲病還有很大的困難。棘球蚴生活史復(fù)雜、中間宿主眾多,犬等終末宿主是包蟲病的主要傳染源,目前還未開發(fā)出可預(yù)防犬感染棘球絳蟲的疫苗,但已開發(fā)的羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗切斷了其生活史,有效地降低了羊包蟲病的患病率。此外,牛包蟲病基因工程亞單位疫苗也即將實現(xiàn)商品化。推進畜間全群強制免疫,形成群防群控的局面,為保障人畜健康、增加養(yǎng)殖收入奠定良好的基礎(chǔ)。

    4)重視隊伍建設(shè)。消滅包蟲病需要一支責(zé)任心極強的防控隊伍。我國牧區(qū)畜牧生產(chǎn)仍以自然放牧為主,產(chǎn)業(yè)管理落后,基層疾控能力薄弱,加之特殊的地理環(huán)境、宗教習(xí)俗等因素,給防治工作帶來了巨大的困難。各級疫控中心和畜牧獸醫(yī)部門應(yīng)加強對防疫工作者和檢疫工作者進行全面系統(tǒng)的培訓(xùn),以保障包蟲病防控工作的順利開展。

    參考文獻:

    [1]齊普生,范元良,張壯志.包蟲(棘球蚴)病在我國的流行情況[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué), 1989, (03): 35-38.

    [2]范才良,廖天學(xué),李慧,等.羊棘球蚴(包蟲)基因工程亞單位疫苗免疫母羊后羔羊母源抗體消長規(guī)律研究[J].中國草食動物科學(xué), 2015, 35(5): 53-55.

    [3]鐘秀琴,楊光友.細(xì)粒棘球絳蟲EG95疫苗的研究進展[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報, 2014, 45(8): 1207-1212.

    [4]孟慶賀.我國包蟲病的診斷和治療進展[J].中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生, 2014, 5: 16-18.

    [5]趙莉,張旭,張壯志,等.包蟲病診斷技術(shù)與預(yù)防疫苗的研究進展[J].疾病預(yù)防控制通報, 2013, 28(2): 84-87.

    [6]Heath D D, Holcman B. Vaccination against Echinococcus in perspective [J]. Acta Trop, 1997, 67(1-2): 37-41.

    [7]Larrieu E,HerreroE, MujicaG,etal.Pilotfield trialoftheEG95 vaccineagainstovinecysticechinococcosisin RioNegro,Argentina:early impactandpreliminarydata[J]. ActaTrop,2013,127(2):143-151.

    [8]趙揚揚,李春燕,郭建華,等.羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗的效果監(jiān)測[J].四川畜牧獸醫(yī). 2016,43(10):27-29.

    [9]趙揚揚,李春燕,郭建華,等.細(xì)粒棘球蚴Eg95重組蛋白疫苗臨床免疫效果研究[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2016,09:743-747.endprint

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