• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    復合抗菌肽對山羊瘤胃發(fā)酵和酶活性的影響

    2017-08-07 09:56:38鄧俊良楊顏銥任志華左之才崔恒敏
    動物營養(yǎng)學報 2017年7期
    關鍵詞:抗菌肽胃液丁酸

    高 爽 鄧俊良 陳 蕓 楊顏銥 劉 旗 陳 憧 任志華 左之才 王 婭 崔恒敏

    (四川農業(yè)大學動物醫(yī)學院,動物疫病與人類健康重點實驗室,環(huán)境公害與動物疾病四川省高校重點實驗室,成都611130)

    復合抗菌肽對山羊瘤胃發(fā)酵和酶活性的影響

    高 爽 鄧俊良*陳 蕓 楊顏銥 劉 旗 陳 憧 任志華 左之才 王 婭 崔恒敏

    (四川農業(yè)大學動物醫(yī)學院,動物疫病與人類健康重點實驗室,環(huán)境公害與動物疾病四川省高校重點實驗室,成都611130)

    本試驗旨在探討復合抗菌肽對飼喂不同精料飼糧山羊瘤胃發(fā)酵和酶活性的影響。選取18只4月齡雄性山羊,隨機分3組,每組6只。對照組(Ⅰ組)、高精料組(Ⅱ組)、高精料抗菌肽組(Ⅲ組)分別飼喂300、600和600 g/(只·d)精料,同時Ⅲ組在精料中添加3.0 g/(只·d)復合抗菌肽。試驗期為60 d。結果表明:1)與Ⅰ組相比,Ⅱ組瘤胃液乙酸、總揮發(fā)性脂肪酸(T-VFA)、甲烷(CH4)、氨態(tài)氮(NH3-N)、尿素氮、微生物蛋白(MCP)濃度與(乙酸+丁酸)/丙酸及木聚糖酶、脂肪酶活性極顯著或顯著增加(P<0.01或P<0.05),羧甲基纖維素酶(CMCase)、β-葡萄糖苷酶和淀粉酶活性極顯著或顯著降低(P<0.01或P<0.05),丙酸、丁酸濃度及果膠酶、中性蛋白酶活性無顯著變化(P>0.05)。2)與Ⅱ組相比,Ⅲ組瘤胃液丙酸、丁酸、NH3-N濃度及CMCase、果膠酶、中性蛋白酶及脂肪酶活性無顯著變化(P>0.05),乙酸、T-VFA、CH4、尿素氮濃度與(乙酸+丁酸)/丙酸及木聚糖酶活性極顯著或顯著降低(P<0.01或P<0.05),MCP濃度及β-葡萄糖苷酶、淀粉酶活性極顯著或顯著增加(P<0.01或P<0.05)。由此說明,復合抗菌肽可調節(jié)山羊瘤胃發(fā)酵模式,提高飼料利用率,是理想的飼料添加劑。

    復合抗菌肽;瘤胃發(fā)酵;酶活性;山羊

    抗菌肽(AMPs)是基因編碼或在外界因素誘導下用于對抗外源性病原體入侵的一類防御性活性多肽類物質,具有抗細菌、真菌、病毒、寄生蟲、腫瘤等作用[1-3]。由于抗菌肽在結構和來源上存在差異性,其作用機理有所不同,膜作用機制和胞內作用機制是人們普遍認同的2類機制[4],前者主要包括桶板模型、毯式模型、環(huán)形孔模型和凝聚模型,后者分為抑制細胞呼吸、抑制大分子(DNA、RNA和蛋白質)的合成、抑制酶活性以及抑制細胞分裂、細胞壁和隔膜的形成[5-6]。研究發(fā)現,抗菌肽可促進仔豬[7]和肉雞[8]腸道發(fā)育和腸道營養(yǎng)物質的吸收,調節(jié)腸道微生物菌群結構,改善腸道

    內環(huán)境,提高生產性能。目前已有作為飼料添加劑的抗菌肽商品應用于提高奶牛生產性能和防治奶牛乳房炎等方面[9-10],但尚未見其在瘤胃中作用的相關報道。瘤胃是反芻動物最重要的消化器官之一,瘤胃發(fā)酵調控一直是反芻動物研究的重點。已證實益生菌、植物提取物和瘤胃素等均可調控瘤胃發(fā)酵,提高營養(yǎng)物質利用率。從抗菌肽的生物學功能和機制中我們推測,抗菌肽也會影響瘤胃某些微生物的活性,進而影響瘤胃內環(huán)境,是一種潛在的新型飼料添加劑。因此,本試驗擬研究復合抗菌肽對山羊瘤胃發(fā)酵和酶活性的影響,為其在反芻動物生產中的應用提供科學依據。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    復合抗菌肽由豬防御素(37個氨基酸)和蒼蠅抗菌肽(40個氨基酸)混合而成,各占50%,由四川華德生物工程有限公司提供,規(guī)格為500 g/袋。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 試驗設計

    選取18只4月齡體重[(16.13±0.64) kg]相

    近的健康雄性川中黑山羊,預飼2周后開始正式試驗。將18只山羊隨機分為3組,每組6只。對照組(Ⅰ組)、高精料組(Ⅱ組)、高精料抗菌肽組(Ⅲ組)分別飼喂300、600和600 g/(只·d)精料,同時Ⅲ組在精料中添加3.0 g/(只·d)復合抗菌肽。試驗羊每天09:00和18:00分別等量飼喂精料1次,自由采食收割山雜草,自由飲水,單欄群養(yǎng)。試驗期為60 d。試驗用精料組成及營養(yǎng)水平見表1。

    表1 精料組成及營養(yǎng)水平(干物質基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of the concentrate (DM basis) %

    預混料為每千克精料提供Premix provides the following per kg of the concentrate:Fe (as ferrous sulfate) 30 mg,Cu (as copper sulfate) 10 mg,Zn (as zinc sulfate) 50 mg,Mn (as manganese sulfate) 60 mg,VA 2 937 IU,VD 343 IU,VE 30 IU。

    1.2.2 瘤胃液的采集與指標檢測

    分別于試驗第20天、第40天和第60天每組隨機選4只羊,晨飼前用負壓器材和胃管收集瘤胃液50 mL,4層紗布過濾后分裝于5 mL離心管中,保存在-80 ℃冰箱內待測。

    瘤胃液各揮發(fā)性脂肪酸(volatile fatty acids,VFA)濃度采用瓦里安(CP-3800)氣相色譜儀檢測,具體方法參照Luo等[11]的方法進行;瘤胃液甲烷(CH4)濃度根據Moss等[12]推導出的公式CH4=(1.8C2-1.1C3+1.6C4)/4=0.45C2-0.275C3+0.40C4計算,式中C2為乙酸濃度(mmol/L),C3為丙酸濃度(mmol/L),C4為丁酸濃度(mmol/L)。瘤胃液氨態(tài)氮(NH3-N)濃度采用苯酚-次氯酸鈉比色法[13]測定;瘤胃液微生物蛋白(MCP)濃度采用三氯乙酸(TCA)蛋白質沉淀法[AOAC(1990)]測定;瘤胃液尿素氮濃度以及木聚糖酶、果膠酶、β-葡萄糖苷酶、羧甲基纖維素酶、中性蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性均采用試劑盒檢測,其中尿素氮、淀粉酶、脂肪酶檢測試劑盒為南京建成生物工程研究所產品,羊用木聚糖酶、果膠酶、β-葡萄糖苷酶和羧甲基纖維素酶酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測試劑盒為美國RD公司產品。

    1.3 數據處理與分析

    所得試驗數據先經Excel 2010處理,用SPSS 19.0統計軟件進行統計分析,Duncan氏法進行多重比較,試驗結果用平均值±標準差(mean±SD)表示。

    2 結果與分析

    2.1 山羊瘤胃發(fā)酵參數的變化

    由表2可見,試驗期內各組山羊瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸(T-VFA)濃度均隨飼喂時間的延長而逐漸降低,且在各時間點均表現為Ⅱ組極顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P<0.01),Ⅰ和Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)。各組山羊瘤胃液乙酸濃度隨飼喂時間的變化趨勢與T-VFA濃度變化趨勢相一致,同時在各時間點也均表現為Ⅱ組極顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P<0.01),Ⅰ和Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)。各組山羊瘤胃液丙酸濃度也隨飼喂時間的延長而逐漸降低,在各時間點各組山羊瘤胃液丙酸濃度差異均不顯著(P>0.05),但在數值上Ⅲ組高于Ⅰ和Ⅱ組。在第20天時山羊瘤胃液丁酸濃度表現為Ⅱ組極顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P<0.01),在其他時間點各組間差異不顯著(P>0.05)。山羊瘤胃液(乙酸+丁酸)/丙酸和CH4濃度變化趨勢一致,在各時間點均表現為Ⅱ組極顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P<0.01),Ⅰ和Ⅲ組差異均不顯著(P>0.05),但在數值上Ⅲ組低于Ⅰ組。

    表2 山羊瘤胃發(fā)酵參數的變化Table 2 Changes of ruminal fermentation characteristics of goats

    同行數據肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫字母差異極顯著(P<0.01)。下表同。

    In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

    2.2 山羊瘤胃液氮素濃度變化

    由表3可知,各組山羊瘤胃液NH3-N濃度隨飼喂時間的延長而逐漸升高。在第20天和第60天,Ⅱ、Ⅲ組山羊瘤胃液NH3-N濃度極顯著或顯著高于Ⅰ組(P<0.01或P<0.05),Ⅲ組顯著低于Ⅱ組(P<0.05);在第40天,各組間山羊瘤胃液NH3-N濃度差異不顯著(P>0.05)。在第20天,各組山羊瘤胃液MCP濃度差異不顯著(P>0.05);在第40天和第60天,Ⅱ、Ⅲ組山羊瘤胃液MCP濃度極顯著或顯著高于Ⅰ組(P<0.01或P<0.05),Ⅲ組顯著高于Ⅱ組(P<0.05)。各組山羊瘤胃液尿素氮濃度隨飼喂時間的延長而逐漸升高,且在第20天時表現為Ⅱ組極顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P<0.01),在第40天和第60天時表現為Ⅱ組顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P<0.05),同時在各時間點Ⅲ組與Ⅰ組相比均差異不顯著(P>0.05)。

    2.3 山羊瘤胃液酶活性變化

    由表4可知,試驗期內各時間點,Ⅱ組山羊瘤胃液木聚糖酶活性極顯著或顯著高于Ⅰ組(P<0.01或P<0.05);在第40天,Ⅲ組山羊瘤胃液木聚糖酶活性極顯著高于Ⅰ組(P<0.01)而與Ⅱ組差異不顯著(P>0.05),在第20天和第60天,Ⅲ組山羊瘤胃液木聚糖酶活性與Ⅰ組差異不顯著(P>0.05),但極顯著或顯著低于Ⅱ組(P<0.01或P<0.05)。在第20天,Ⅱ組山羊瘤胃液果膠酶活性顯著高于Ⅰ組(P<0.05),在其余時間點雖也高于Ⅰ組但差異不顯著(P>0.05);在第40天,Ⅲ組山羊瘤胃液果膠酶活性顯著高于Ⅱ組(P<0.05),在其余時間點雖也高于Ⅱ組但差異不顯著(P>0.05)。在各時間點Ⅱ組山羊瘤胃液β-葡萄糖苷酶活性均極顯著或顯著低于Ⅰ組(P<0.01或P<0.05),Ⅲ組與Ⅰ組差異不顯著(P>0.05)。在第20天,各組山羊瘤胃液羧甲基纖維素活性差異不顯著(P>0.05),在其余時間點Ⅱ和Ⅲ組均極顯著低于Ⅰ組(P<0.01),且Ⅱ組極顯著低于Ⅲ組(P<

    0.01)。試驗期內各時間點,各組間山羊瘤胃液中性蛋白酶和淀粉酶活性差異均不顯著(P>0.05);Ⅱ、Ⅲ組脂肪酶活性均極顯著高于Ⅰ組(P<0.01),Ⅱ和Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)。

    表3 山羊瘤胃液氮素濃度的變化Table 3 Changes of nitrogen concentrations in rumen fluid of goats

    表4 山羊瘤胃液酶活性變化Table 4 Changes of enzyme activities in rumen fluid of goats

    3 討 論

    3.1 復合抗菌肽對山羊瘤胃發(fā)酵參數的影響

    反芻動物對粗飼料具有很強的耐受性,這與瘤胃中微生物的發(fā)酵作用密不可分,因此瘤胃內環(huán)境的穩(wěn)定對反芻動物至關重要。碳水化合物在反芻動物瘤胃內微生物的作用下降解為VFA,其中乙酸、丙酸和丁酸為最主要的VFA。VFA是反芻動物最主要的能量來源[14]。瘤胃中的丙酸是合成葡萄糖的前體物質,在肝臟中通過糖異生作用生成葡萄糖,為機體供能;乙酸和丁酸是合成乳脂肪和體脂肪的前體,前者在線粒體基質內與肉堿形成復合物供能,后者通過瘤胃壁時轉變成β-羥丁酸,參與三羧酸循環(huán)[15]。此外,丁酸可刺激瘤胃上皮發(fā)育,促進營養(yǎng)物質的消化吸收[16]。本試驗中,Ⅱ組山羊瘤胃液乙酸、T-VFA濃度和(乙酸+丁酸)/丙酸與Ⅰ組相比均極顯著增加,而這與馬惠忠[17]研究得出的飼糧中精料比例增加時乙酸濃度減少不符,可能在本試驗條件下Ⅱ組山羊采食的粗料較Ⅰ組多,導致二者精粗比變化不明顯。添加復合抗菌肽后山羊瘤胃液乙酸、T-VFA濃度和(乙酸+丁酸)/丙酸與Ⅱ組相比顯著減少,與Ⅰ組差異不顯著。這與前人在體內試驗中添加釀酒酵母(1 g/kg)[18]或體外試驗中添加釀酒酵母(20~60 mg/mL)[19]、產朊假絲酵母(2.67×106CFU/mL)[20]提高瘤胃液T-VFA濃度的結果不一致,可能是Ⅲ組山羊采食的粗料較Ⅱ組少,說明復合抗菌肽能抑制山羊采食粗料,提高精料的比例,進而促進機體能量代謝。

    CH4不僅是一種重要的溫室氣體,也是反芻動物能量損失的主要因素,因此抑制CH4產生一直是反芻動物營養(yǎng)研究的重點。在本試驗中,在第60天,Ⅲ組與Ⅱ組相比瘤胃液CH4濃度減少了17.17%,說明復合抗菌肽可抑制山羊瘤胃中CH4的產生,從而提高飼料利用率。

    3.2 復合抗菌肽對山羊瘤胃液氮素濃度的影響

    NH3-N是瘤胃氮代謝中的重要產物,它反映了能量供應和飼料中蛋白質在瘤胃中的降解和吸收的程度。在ATP充足條件下,瘤胃微生物利用飼料蛋白質以及多肽、氨基酸、氨和尿素為氮源,并以VFA為碳架合成MCP。研究發(fā)現,NH3-N濃度過低(少于0.025 mg/mL)會導致瘤胃發(fā)酵發(fā)生解偶聯作用,進而導致MCP產率減少;反之,NH3-N濃度過高,細菌不能完全利用NH3-N合成MCP,NH3-N積累過量,導致血漿中尿素氮濃度升高,一方面影響瘤胃微生物的生長,另一方面加重機體氮代謝的負擔[21]。

    對瘤胃微生物生長的最適NH3-N濃度的研究報道不盡一致,一般認為最適范圍在0.05~0.28 mg/mL[21-22]。本試驗中,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組山羊瘤胃液NH3-N濃度變動范圍分別為7.32~14.00 mg/dL、12.53~17.79 mg/dL和11.95~16.49 mg/dL,均處于NH3-N濃度最適范圍內。添加復合抗菌肽后(Ⅲ組)山羊瘤胃液中尿素氮濃度顯著低于Ⅱ組,略高于Ⅰ組,且MCP濃度顯著增加,到試驗第60天與Ⅰ組相比提高了39.15%,與Ⅱ組相比提高了15.32%,說明復合抗菌肽能增加山羊瘤胃微生物對飼料蛋白質的利用率,進而促進機體的生長發(fā)育。這與Tripathi等[23]將克魯維酵母、釀酒酵母和啤酒酵母單獨或按照1∶1∶1比例配合成復合活酵母飼喂羔羊,連續(xù)飼喂91 d后發(fā)現瘤胃液MCP濃度增加,改善了飼料轉化率的試驗結果相一致。

    3.3 復合抗菌肽對山羊瘤胃液酶活性的影響

    反芻動物在長期進化中形成了一套完整的降解纖維素體系,其復雜而龐大。羧甲基纖維素酶是一類內切纖維素酶,可從纖維聚合體的非結晶區(qū),從內部水解β-1,4-糖苷鍵,產生纖維二糖、葡萄糖和麥芽糊精。β-葡萄糖苷酶主要將纖維二糖進一步水解成葡萄糖。木聚糖是最重要的半纖維素,其結構復雜,降解需要多種酶參與,這些酶包括切割主鏈的內切β-木聚糖酶、β-1,4-木糖苷酶,切割側鏈的葡萄糖苷酶等。纖維素酶主要由瘤胃內細菌和原蟲分泌。原蟲的密毛屬、多加多泡屬和內毛屬主要通過產生β-葡萄糖苷酶、羧甲基纖維素酶和木聚糖酶來降解纖維素,但其具體作用尚不明確。瘤胃內降解纖維素的細菌種類較多,如產琥珀絲狀桿菌、黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、溶纖維丁酸弧菌等主要分泌木聚糖酶、β-葡聚糖酶等。此外,瘤胃內真菌也能分泌果膠酶、纖維素酶和半纖維素酶[24]。本試驗中,與Ⅰ組相比,Ⅱ和Ⅲ組山羊瘤胃液木聚糖酶和果膠酶活性均升高,且后者能使由于高精料降低的β-葡萄糖苷酶和羧甲基纖維素酶活性升高,但仍低于Ⅰ組。這與黃慶生等[25]得出的酵母培養(yǎng)物提高肉牛瘤胃液木聚糖酶活性的試驗結果一致,但其研究中瘤胃液羧甲基纖維素酶活性也顯著增加,造成這種差異的原因可能與添加劑的種類、生物功能以及試驗動物種類有關。本試驗中,添加復合抗菌肽后山羊瘤胃液β-葡萄糖苷酶活性無顯著變化,這與Kamra等[26]得出的飼喂犢牛酵母細胞(5×109個/mL,10 mL,連續(xù)飼喂159 d)不影響瘤胃液β-葡萄糖苷酶活性的研究結果相一致。

    瘤胃內存在較多降解蛋白質的細菌、真菌和原蟲,但真菌和原蟲降解蛋白質的能力較弱,當前研究較多的是嗜淀粉擬桿菌、棲瘤胃普雷沃氏菌和溶纖維丁酸弧菌,其數量多、降解蛋白質活性強,是蛋白質降解的主要菌群[14]。本試驗中,添加復合抗菌肽后對山羊瘤胃液中性蛋白酶活性沒有發(fā)生顯著變化。目前尚未見關于抗菌肽對瘤胃液中性蛋白酶活性影響的研究報道。以往研究發(fā)現,飼糧精粗比(3∶7、5∶5、7∶3)、蛋白質源(大豆粕、大豆粕+棉籽粕+菜籽粕、魚粉+棉籽粕+菜籽粕、膨化大豆、清蛋白)、碳水化合物結構對瘤胃液中性蛋白酶活性均無顯著影響,說明瘤胃液中中性蛋白酶的活性比較穩(wěn)定,難以變化[14,24,27]。

    瘤胃內的淀粉大部分在微生物分泌的淀粉酶作用下分解成麥芽糖,最終產生VFA為機體提供能量[14,28]。瘤胃內牛鏈球菌、丁酸梭菌和嗜淀粉瘤胃桿菌是主要的分解淀粉的細菌,其能分泌較高活性的淀粉酶,降解淀粉活性強[24]。此外,瘤胃內毛蟲和部分真菌也具有分解淀粉的能力,但其具體作用機制尚不明確,有待進一步研究。一般認為,飼料和瘤胃pH是影響瘤胃微生物酶活性的主要因素[29]。本試驗中,添加復合抗菌肽后對山羊瘤胃液淀粉酶活性無顯著影響。這與何丹林等[30]在雞飼糧中添加500 g/t蠶抗菌肽AD-酵母制劑、劉翠玲[31]在鯉魚飼料中添加3 g/kg抗菌肽對腸道淀粉酶活性無顯著影響以及Kamra等[26]飼喂犢牛添加酵母細胞的飼糧后瘤胃淀粉酶活性無顯著變化的結果一致。

    目前,尚未見抗菌肽對反芻動物瘤胃液脂肪酶活性影響的研究報道,但有在其他畜禽動物和水產動物上的研究報道。劉翠玲[31]在鯉魚基礎飼料中添加水產專用抗菌肽(3 g/kg),連續(xù)飼喂56 d,發(fā)現鯉魚后腸段脂肪酶活性顯著增加;郭威等[32]在仔雞基礎飼糧中添加0.5%或1.0%產脂肪酶芽孢桿菌菌劑,發(fā)現仔雞腸道脂肪酶活性顯著增加;范國歌[33]在仔豬基礎飼糧中添加0.05%或0.10%復合益生菌(由枯草芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌組成),連續(xù)飼喂60 d,結果糞便中脂肪酶活性顯著高于對照組。本試驗中,Ⅱ和Ⅲ組山羊瘤胃液脂肪酶活性較Ⅰ組極顯著提高,與前人研究結果[31-33]一致。

    4 結 論

    復合抗菌肽調節(jié)山羊瘤胃發(fā)酵模式,產生較多的丙酸,降低CH4產生,促進脂肪分解,提高飼料利用率,改善瘤胃發(fā)酵內環(huán)境,是理想的飼料添加劑。

    [1] DAI T H,HUANG Y Y,SHARMA S K,et al.Topical antimicrobials for burn wound infections[J].Recent Patents on Anti-Infective Drug Discovery,2010,5(2):124-151.

    [2] LEGUEN E,CHASSEPOT A,DECHER G,et al.Bioactive coatings based on polyelectrolyte multilayer architectures functionalized by embedded proteins,peptides or drugs[J].Biomolecular Engineering,2007,24(1):33-41.

    [3] MARSHALL S H,ARENAS G.Antimicrobial peptides:a natural alternative to chemical antibiotics and a potential for applied biotechnology[J].Electronic Journal of Biotechnology,2003,6(3):271-284.

    [4] LI Y M,XIANG Q,ZHANG Q H,et al.Overview on the recent study of antimicrobial peptides:origins,functions,relative mechanisms and application[J].Peptides,2012,37(2):207-215.

    [5] 李冠楠,夏雪娟,隆耀航,等.抗菌肽的研究進展及其應用[J].動物營養(yǎng)學報,2014,26(1):17-25.

    [6] OTVOS L,Jr,INSUG O,ROGERS M E,et al.Interaction between heat shock proteins and antimicrobial peptides[J].Biochemistry,2000,39(46):14150-14159.

    [7] WU S D,ZHANG F R,HUANG Z M,et al.Effects of the antimicrobial peptide cecropin AD on performance and intestinal health in weaned piglets challenged withEscherichiacoli[J].Peptides,2012,35(2):225-230.

    [8] CHOI S C,INGALE S L,KIM J S,et al.An antimicrobial peptide-A3:effects on growth performance,nutrient retention,intestinal and faecal microflora and intestinal morphology of broilers[J].British Poultry Science,2013,54(6):738-746.

    [9] 徐名能,黃木家,李永新,等.日糧添加抗菌肽制劑對荷斯坦牛乳中體細胞數的影響[J].中國奶牛,2011,16(16):41-43.

    [10] LUO C C,YIN D Y,GAO X J,et al.Goat mammary gland expression of Cecropin B to inhibit bacterial pathogens causing mastitis[J].Animal Biotechnology,2013,24(1):66-78.

    [11] LUO C,CAI S Y,JIA L Y,et al.Study on accurate determination of volatile fatty acids in rumen fluid by capillary gas chromatography[C]//Proceedings of the 5th International Conference on Information Engineering for Mechanics and Materials.Amsterdam:Atlantis Press,2015:386-391.

    [12] MOSS A R,JOUANY J P,NEWBOLD J,et al.Methane production by ruminants:its contribution to global warming[J].Annales De Zootechnie,2000,49(3):231-253.

    [13] BRODERICK G A,KANG J H.Automated simultaneous determination of ammonia and total amino acids in ruminal fluid andinvitromedia[J].Journal of Dairy Science,1980,63(1):64-75.

    [14] 馮仰廉.反芻動物營養(yǎng)學[M].北京:科學出版社,2006.

    [15] MCDONALD P,EDWARDS R A,GREENHALGH J F D,等.動物營養(yǎng)學[M].王九峰,李同洲,譯.北京:中國農業(yè)大學出版社,2007.

    [16] TAMATE H,MCGILLIARD A D,JACOBSON N L,et al.Effect of various dietaries on the anatomical development of the stomach in the calf[J].Journal of Dairy Science,1962,45(3):408-420.

    [17] 馬惠忠.不同精粗比日糧對內蒙古白絨山羊瘤胃發(fā)酵和瘤胃微生物區(qū)系的影響[D].碩士學位論文.呼和浩特:內蒙古農業(yè)大學,2008.

    [18] LASCANO G J,HEINRICHS A J.Rumen fermentation patterns of dairy heifers fed restricted amounts of high,medium,and low concentrate diets and the addition ofSaccharomycescerevisiae[J].Journal of Animal Science,2007,86(Suppl.1):109.

    [19] LILA Z A,MOHAMMED N,TAKAHASHI T,et al.Increase of ruminal fiber digestion by cellobiose and a twin strain ofSaccharomycescerevisiaelive cellsinvitro[J].Animal Science Journal,2006,77(4):407-413.

    [20] 龐德公,楊紅建,曹斌斌,等.高精料全混合日糧中產朊假絲酵母添加水平對體外瘤胃發(fā)酵特性和纖維降解的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2014,26(4):940-946.

    [21] SATTER L D,SLYTER A L L.Effect of ammonia concentration on rumen microbial protein productioninvitro[J].British Journal of Nutrition,1974,32(2):199-208.

    [22] COTTA M A,RUSSELL J B.Effect of peptides and amino acids on efficiency of rumen bacterial protein synthesis in continuous culture[J].Journal of Dairy Science,1982,65(2):226-234.

    [23] TRIPATHI M K,KARIM S A.Effect of individual and mixed live yeast culture feeding on growth performance,nutrient utilization and microbial crude protein synthesis in lambs[J].Animal Feed Science and Technology,2010,155(2/3/4):163-171.

    [24] 孫宏選.不同來源的蛋白質和非結構性碳水化合物對泌乳奶牛瘤胃微生物酶活性的影響[D].碩士學位論文.北京:中國農業(yè)科學院,2006.

    [25] 黃慶生,王加啟.添加不同酵母培養(yǎng)物對瘤胃纖維分解菌群和纖維素酶活的影響[J].畜牧獸醫(yī)學報,2005,36(2):144-148.

    [26] KAMRA D N,CHAUDHARY L C,AGARWAL N,et al.Growth performance,nutrient utilization,rumen fermentation and enzyme activities in calves fed onSaccharomycescerevisiaesupplemented diet[J].Indian Journal of Animal Sciences,2002,72(6):472-475.

    [27] 劉清清.日糧精粗比對綿羊消化和瘤胃消化代謝的影響[D].碩士學位論文.晉中:山西農業(yè)大學,2014.

    [28] 段迎凱,蔣洪文,薛白,等.瘤胃灌注不同來源淀粉對牦牛瘤胃發(fā)酵及血清生化指標的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2012,24(8):1484-1492.

    [29] 李亞學,王佳堃,孫華,等.不同精粗比下添加維生素B12對體外瘤胃發(fā)酵和微生物酶活力的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2012,24(10):1888-1896.

    [30] 何丹林,溫劉發(fā),鄧春柳,等.蠶抗菌肽AD-酵母制劑對粵黃雞腸道消化酶和飼料品質的影響[J].中國家禽,2004,26(7):9-10.

    [31] 劉翠玲.飼料中添加微生態(tài)制劑、抗菌肽及其復合制劑對鯉魚生長、消化和非特異性免疫相關酶活性的影響[D].碩士學位論文.上海:上海海洋大學,2015.

    [32] 郭威,郭曉軍,袁洪水,等.產脂肪酶芽孢桿菌對仔雞生長性能、腸道脂肪酶活力和微生物菌群的影響[J].中國飼料,2016(14):19-21,25.

    [33] 范國歌.高效復合益生菌的研制及對仔豬生產性能影響的研究[D].碩士學位論文.鄭州:河南農業(yè)大學,2011.

    *Corresponding author, professor, E-mail: dengjl213@126.com

    (責任編輯 菅景穎)

    Effects of Compound Antimicrobial Peptides on Ruminal Fermentation and Enzyme Activities of Goats

    GAO Shuang DENG Junliang*CHEN Yun YANG Yanyi LIU Qi CHEN Chong REN Zhihua ZUO Zhicai WANG Ya CUI Hengmin

    (KeyLaboratoryofEnvironmentalHazardandAnimalDiseases,KeyLaboratoryofAnimalDiseaseandHumanHealth,CollegeofVeterinary,MedicineofSichuanAgriculturalUniversity,Chengdu611130,China)

    This experiment was evaluated to study the effects of compound antimicrobial peptides (C-AMPs) on ruminal fermentation and enzyme activities of goats fed diets with different concentrates. Eighteen 4-month-old male goats were randomly divided into 3 groups and each group had 6 goats. The groups included control group (group Ⅰ), high-concentrate group (group Ⅱ), and high-concentrate antimicrobial peptide group (group Ⅲ), and fed with 300, 600 and 600 g concentrate per head per day, respectively. Moreover, the concentrate of group Ⅲ supplemented with 3.0 g C-AMPs per head per day. The experiment lasted for 60 days. The results showed as follows: relative to the group Ⅰ, the group Ⅱ showed a significant increase in the concentrations of acetate, total volatile fatty acids (T-VFA), methane (CH4), ammoniacal nitrogen (NH3-N), urea nitrogen, microprotein (MCP), the ratio of (acetate+butyrate) to propionate, the activities of xylanase and lipase in rumen fluid (P<0.01 orP<0.05), and showed a significant decrease in the activities of carboxymethyl cellulose (CMCase), β-glucosidase and amylase (P<0.01 orP<0.05), but did not show a significant change in the concentrations of propionate and butyrate, and the activities of pectinase and neutral protease (P>0.05). Relative to the group Ⅱ, the group Ⅲ had no significant change in the concentrations of propionate, butyrate, NH3-N and the activities of CMCase, pectinase, neutral protease and lipase (P>0.05), but the group Ⅲ showed a significant decrease in the concentrations of acetate, T-VFA, CH4, urea nitrogen, the ratio of (acetate+butyrate) to propionate and the activity of xylanase (P<0.01 orP<0.05), and showed a significant increase in the concentration of MCP and the activities of β-glucosidase and amylase (P<0.01 orP<0.05). The results indicate that dietary C-AMPs can modulate ruminal fermentation model and enhance feed conversion rate, and it can be applied as an ideal feed additive.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(7):2548-2555]

    compound antimicrobial peptides; ruminal fermentation; enzyme activities; goats

    10.3969/j.issn.1006-267x.2017.07.040

    2016-12-07

    “長江學者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃”創(chuàng)新團隊項目(IRT0848);四川農業(yè)大學雙支計劃(3571537)

    高 爽(1993—),女,滿族,遼寧錦州人,碩士研究生,研究方向為中西獸醫(yī)與臨床。E-mail: 18283542011@163.com

    *通信作者:鄧俊良,教授,博士生導師,E-mail: dengjl213@126.com

    S816

    A

    1006-267X(2017)07-2548-08

    猜你喜歡
    抗菌肽胃液丁酸
    丁酸梭菌的篩選、鑒定及生物學功能分析
    中國飼料(2021年17期)2021-11-02 08:15:10
    抗菌肽的生物學特性及在畜禽養(yǎng)殖中的應用
    復合丁酸梭菌制劑在水產養(yǎng)殖中的應用
    當代水產(2021年2期)2021-03-29 02:57:48
    HIV-1感染者腸道產丁酸菌F.prausnitzii和R.intestinalis變化特點
    傳染病信息(2021年6期)2021-02-12 01:52:14
    藏藥佐太在模擬胃液、腸液中的汞溶出差異
    中成藥(2018年10期)2018-10-26 03:41:28
    新型抗菌肽菌絲霉素純化工藝研究
    廣東飼料(2016年5期)2016-12-01 03:43:21
    早產兒胃液培養(yǎng)在早發(fā)性感染診斷中的價值
    抗菌肽修飾方法與抗菌機制的研究進展
    瘤胃液在牛羊疾病中的臨床應用
    丁酸乙酯對卷煙煙氣的影響
    煙草科技(2015年8期)2015-12-20 08:27:06
    亚洲国产精品一区二区三区在线| 天美传媒精品一区二区| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 全区人妻精品视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 18禁在线播放成人免费| 美女视频免费永久观看网站| 伦精品一区二区三区| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品久久久久成人av| 女的被弄到高潮叫床怎么办| www.av在线官网国产| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产精品女同一区二区软件| 啦啦啦啦在线视频资源| 91精品一卡2卡3卡4卡| 久久久久久久久久久久大奶| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 人妻人人澡人人爽人人| 精品人妻一区二区三区麻豆| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲精品色激情综合| 一区二区三区免费毛片| 国产高清三级在线| 国产成人精品久久久久久| 国产成人免费观看mmmm| 热99国产精品久久久久久7| 日日啪夜夜爽| 欧美三级亚洲精品| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 亚洲熟女精品中文字幕| 国产高清有码在线观看视频| 999精品在线视频| 久久av网站| 亚洲精品视频女| 国产精品三级大全| 99热这里只有是精品在线观看| 考比视频在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 欧美国产精品一级二级三级| 三级国产精品片| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产成人精品无人区| 国产精品人妻久久久影院| 国产在视频线精品| 男人添女人高潮全过程视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 18+在线观看网站| 国产精品 国内视频| 一级片'在线观看视频| 一级毛片我不卡| 国产乱人偷精品视频| 欧美最新免费一区二区三区| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 丰满少妇做爰视频| 日韩视频在线欧美| 伊人亚洲综合成人网| 九色成人免费人妻av| 曰老女人黄片| 尾随美女入室| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 国产精品人妻久久久久久| 亚洲精品自拍成人| 成人手机av| 精品一区在线观看国产| 一级黄片播放器| 成年女人在线观看亚洲视频| 免费高清在线观看视频在线观看| av国产精品久久久久影院| 欧美 日韩 精品 国产| 久久久久国产网址| 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 热99久久久久精品小说推荐| 国产熟女午夜一区二区三区 | 亚洲av日韩在线播放| 亚洲国产欧美在线一区| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲国产精品999| 日本与韩国留学比较| 国产综合精华液| 亚洲av综合色区一区| 人妻一区二区av| 69精品国产乱码久久久| 一级毛片我不卡| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产视频首页在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 精品酒店卫生间| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 99热国产这里只有精品6| 飞空精品影院首页| 亚洲精品456在线播放app| 国产爽快片一区二区三区| 欧美97在线视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 日韩人妻高清精品专区| 在线观看免费日韩欧美大片 | 久久午夜福利片| 一边摸一边做爽爽视频免费| 乱码一卡2卡4卡精品| 久热久热在线精品观看| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 亚洲av免费高清在线观看| av女优亚洲男人天堂| 亚洲av不卡在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 一个人免费看片子| 国产成人一区二区在线| 免费看光身美女| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 亚洲中文av在线| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品无大码| 亚洲国产精品专区欧美| 国产男女内射视频| av女优亚洲男人天堂| 久久精品夜色国产| 久久久久久久久久久丰满| 免费人成在线观看视频色| 91久久精品电影网| 91国产中文字幕| 亚洲精品色激情综合| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产精品99久久99久久久不卡 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 最黄视频免费看| 黑人高潮一二区| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲精品国产av成人精品| 99热6这里只有精品| 欧美亚洲日本最大视频资源| 赤兔流量卡办理| 看十八女毛片水多多多| 五月伊人婷婷丁香| 久久久久人妻精品一区果冻| 亚洲精品国产av成人精品| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费看不卡的av| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 免费观看在线日韩| 国产黄色免费在线视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 免费观看在线日韩| 午夜日本视频在线| 亚洲国产av影院在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| av国产精品久久久久影院| 精品一区二区三区视频在线| 另类精品久久| 国产精品国产av在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 2021少妇久久久久久久久久久| 欧美97在线视频| 国产精品成人在线| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 在线观看免费视频网站a站| 一区二区三区精品91| 丝袜美足系列| 国产又色又爽无遮挡免| 日韩伦理黄色片| 我要看黄色一级片免费的| 少妇的逼水好多| 男人操女人黄网站| 亚洲国产色片| 亚洲精品美女久久av网站| 少妇人妻久久综合中文| 国产视频内射| av有码第一页| 免费人妻精品一区二区三区视频| 色网站视频免费| 国产色婷婷99| 久久av网站| 久久人妻熟女aⅴ| 久久精品国产自在天天线| 国产精品免费大片| 欧美精品亚洲一区二区| 久久国产精品大桥未久av| 制服诱惑二区| 大片免费播放器 马上看| 内地一区二区视频在线| 国产成人一区二区在线| 婷婷色麻豆天堂久久| 午夜久久久在线观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 青春草视频在线免费观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 精品午夜福利在线看| 国产亚洲精品久久久com| 久久久久久久久久久丰满| 欧美最新免费一区二区三区| av福利片在线| 亚洲成人手机| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 久久毛片免费看一区二区三区| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产一区二区在线观看日韩| 精品久久久久久久久av| 91精品伊人久久大香线蕉| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日日啪夜夜爽| 久久久久国产网址| 欧美日韩成人在线一区二区| 欧美另类一区| 久久久久网色| 97在线人人人人妻| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 在线观看三级黄色| 嫩草影院入口| 三上悠亚av全集在线观看| 免费看不卡的av| 日韩精品有码人妻一区| 青春草国产在线视频| 久久国产精品大桥未久av| 在线观看国产h片| 精品人妻一区二区三区麻豆| 99热国产这里只有精品6| 日韩 亚洲 欧美在线| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产高清有码在线观看视频| 尾随美女入室| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲不卡免费看| freevideosex欧美| 在线 av 中文字幕| 看十八女毛片水多多多| 久久久久久久精品精品| 热99久久久久精品小说推荐| 2018国产大陆天天弄谢| 精品亚洲成a人片在线观看| 久久免费观看电影| 制服人妻中文乱码| 热99国产精品久久久久久7| 黑人高潮一二区| av卡一久久| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩人妻高清精品专区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 少妇高潮的动态图| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 欧美另类一区| 国产日韩欧美视频二区| 99国产精品免费福利视频| 一区二区av电影网| 精品少妇内射三级| tube8黄色片| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 欧美xxⅹ黑人| 午夜日本视频在线| 夫妻午夜视频| 精品一区二区三区视频在线| av视频免费观看在线观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 我的老师免费观看完整版| 亚洲精品乱久久久久久| 成人无遮挡网站| 亚洲国产成人一精品久久久| 97超碰精品成人国产| 久久99精品国语久久久| 人人澡人人妻人| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲国产精品999| 最新的欧美精品一区二区| 在线观看国产h片| 人妻系列 视频| 国产探花极品一区二区| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 高清黄色对白视频在线免费看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产不卡av网站在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 国产精品蜜桃在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片 | 色网站视频免费| av国产精品久久久久影院| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 多毛熟女@视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 日本wwww免费看| 久热久热在线精品观看| 一区在线观看完整版| 韩国av在线不卡| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲国产最新在线播放| 国产男女超爽视频在线观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 尾随美女入室| 91久久精品国产一区二区三区| 夜夜爽夜夜爽视频| 午夜激情久久久久久久| 国产高清三级在线| 久久久久视频综合| 精品亚洲成国产av| 极品人妻少妇av视频| 亚洲av不卡在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 满18在线观看网站| 国产精品嫩草影院av在线观看| .国产精品久久| 中文字幕av电影在线播放| 久久av网站| av一本久久久久| 欧美97在线视频| 日韩大片免费观看网站| 国产色爽女视频免费观看| 又大又黄又爽视频免费| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 91aial.com中文字幕在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 91久久精品电影网| 水蜜桃什么品种好| 亚洲一区二区三区欧美精品| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产精品熟女久久久久浪| 欧美精品一区二区免费开放| 日本欧美视频一区| 边亲边吃奶的免费视频| 久久久久人妻精品一区果冻| 自线自在国产av| 成人免费观看视频高清| 一边亲一边摸免费视频| 欧美丝袜亚洲另类| 秋霞在线观看毛片| 在线看a的网站| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲综合色网址| 97在线人人人人妻| 婷婷色综合大香蕉| 99热全是精品| 久久99一区二区三区| 亚洲成人手机| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 成人影院久久| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 99热这里只有精品一区| 亚洲经典国产精华液单| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲av综合色区一区| 国产熟女欧美一区二区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产视频内射| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 日本黄色日本黄色录像| 精品久久蜜臀av无| 香蕉精品网在线| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲色图综合在线观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 久久人人爽人人爽人人片va| 美女国产高潮福利片在线看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 丝袜脚勾引网站| 永久免费av网站大全| 国产精品久久久久久精品电影小说| 两个人的视频大全免费| 免费黄色在线免费观看| 黄片无遮挡物在线观看| 丝袜在线中文字幕| 搡女人真爽免费视频火全软件| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | av在线app专区| 精品一区二区免费观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久久久久久久大av| 乱码一卡2卡4卡精品| 日韩大片免费观看网站| 精品视频人人做人人爽| 搡老乐熟女国产| 国产伦理片在线播放av一区| 午夜免费鲁丝| 久久精品人人爽人人爽视色| 日韩欧美精品免费久久| 满18在线观看网站| 免费黄色在线免费观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| 搡老乐熟女国产| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 这个男人来自地球电影免费观看 | www.色视频.com| 精品亚洲成国产av| 2018国产大陆天天弄谢| 97超碰精品成人国产| 国产精品女同一区二区软件| av有码第一页| 美女cb高潮喷水在线观看| 男女免费视频国产| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美精品一区二区免费开放| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 高清毛片免费看| www.色视频.com| 国产色爽女视频免费观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久这里有精品视频免费| 成人影院久久| 免费大片黄手机在线观看| 嫩草影院入口| 久久99一区二区三区| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲综合色网址| 午夜视频国产福利| 人人澡人人妻人| 国产成人精品福利久久| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产成人精品无人区| 少妇人妻精品综合一区二区| 69精品国产乱码久久久| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 国产精品99久久99久久久不卡 | 在线观看人妻少妇| √禁漫天堂资源中文www| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国精品久久久久久国模美| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 一本久久精品| 日韩一本色道免费dvd| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产一区二区在线观看av| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产男女内射视频| 久久久久久久久久成人| 久久韩国三级中文字幕| av.在线天堂| 欧美精品亚洲一区二区| 一区在线观看完整版| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成人影院久久| 久久久国产精品麻豆| 久久国内精品自在自线图片| 男的添女的下面高潮视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日韩中字成人| 老女人水多毛片| 多毛熟女@视频| 亚洲久久久国产精品| 美女内射精品一级片tv| 亚洲av欧美aⅴ国产| 在线观看www视频免费| 亚洲av成人精品一二三区| 国产日韩欧美在线精品| 搡老乐熟女国产| 大香蕉久久网| 国内精品宾馆在线| a级毛片在线看网站| 999精品在线视频| 美女国产视频在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 视频中文字幕在线观看| 99国产综合亚洲精品| 曰老女人黄片| av免费观看日本| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲国产色片| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久久久久久国产电影| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 日韩成人伦理影院| 一区二区三区免费毛片| 男女啪啪激烈高潮av片| 中文字幕亚洲精品专区| 久久人人爽人人爽人人片va| 在线精品无人区一区二区三| 成人无遮挡网站| 久久热精品热| 纯流量卡能插随身wifi吗| 黑人高潮一二区| 久久亚洲国产成人精品v| av卡一久久| 交换朋友夫妻互换小说| 婷婷色av中文字幕| 99热网站在线观看| 久久久精品免费免费高清| 国产av国产精品国产| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲精品中文字幕在线视频| 日韩三级伦理在线观看| 欧美人与善性xxx| 2022亚洲国产成人精品| √禁漫天堂资源中文www| 一级毛片aaaaaa免费看小| 一级a做视频免费观看| 在线观看免费视频网站a站| 色哟哟·www| 国产av一区二区精品久久| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | av免费在线看不卡| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚州av有码| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲三级黄色毛片| 久久97久久精品| 国产免费一级a男人的天堂| 性色av一级| 色吧在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲精品,欧美精品| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 超碰97精品在线观看| 亚洲av男天堂| 熟女av电影| 国模一区二区三区四区视频| 视频在线观看一区二区三区| 丝瓜视频免费看黄片| 男女高潮啪啪啪动态图| 久久国产精品大桥未久av| 秋霞在线观看毛片| 桃花免费在线播放| 熟女av电影| 日韩免费高清中文字幕av| 2022亚洲国产成人精品| 乱码一卡2卡4卡精品| 18禁在线播放成人免费| 免费观看在线日韩| 国产一级毛片在线| 一边亲一边摸免费视频| 成人免费观看视频高清| 亚洲精品第二区| 草草在线视频免费看| 午夜免费观看性视频| 国产成人免费无遮挡视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久精品国产亚洲av天美| 国产视频首页在线观看| 九九在线视频观看精品| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲精品色激情综合| 国产在线视频一区二区| 丝袜脚勾引网站| 亚洲av成人精品一二三区| 久久久欧美国产精品| 人妻人人澡人人爽人人| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 久久人妻熟女aⅴ| 丝袜在线中文字幕| 亚洲内射少妇av| 亚洲中文av在线| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 成人午夜精彩视频在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 免费人妻精品一区二区三区视频| 在线观看一区二区三区激情| 久久99热这里只频精品6学生| 天天操日日干夜夜撸| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 亚洲av综合色区一区| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲经典国产精华液单| 国产视频内射| 亚洲综合色网址| 久久精品人人爽人人爽视色| a级毛色黄片| 在线观看三级黄色| 九草在线视频观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 色吧在线观看| 欧美日本中文国产一区发布| 国产精品久久久久久精品电影小说| 一区二区av电影网| 国产伦理片在线播放av一区| 久久久久网色| 国产一区二区在线观看av| 麻豆成人av视频| av女优亚洲男人天堂| 亚洲伊人久久精品综合| 在线精品无人区一区二区三| 国产 精品1| 国产成人免费观看mmmm| 日本黄色日本黄色录像| 少妇 在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 成人免费观看视频高清| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产亚洲欧美精品永久| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久99热6这里只有精品| 亚洲国产欧美在线一区| 国产成人精品在线电影| 国产亚洲一区二区精品| 九色成人免费人妻av| 人体艺术视频欧美日本| 欧美成人精品欧美一级黄| 精品一区在线观看国产| 欧美xxⅹ黑人| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 中文字幕亚洲精品专区| 国产高清国产精品国产三级| 我的老师免费观看完整版| 97在线人人人人妻| 免费观看性生交大片5|