黃連素聯(lián)合阿托伐他汀對急性缺血性腦卒中的臨床療效分析及其對血清炎癥因子的調(diào)控作用

王 佩，李 迎，任 紅，馮 銳

(河北省保定市第一中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)三科，河北 保定 071000)

·論 著·

黃連素聯(lián)合阿托伐他汀對急性缺血性腦卒中的臨床療效分析及其對血清炎癥因子的調(diào)控作用

王 佩，李 迎，任 紅，馮 銳

(河北省保定市第一中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)三科，河北 保定 071000)

目的探討黃連素聯(lián)合阿托伐他汀對急性缺血性腦卒中(acute cerebral ischemic stroke，AIS)的臨床療效及其對血清炎癥因子巨噬細(xì)胞移動抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)、白細(xì)胞介素6(interleukin-6，IL-6)及單核細(xì)胞比率(monocyte proportion，MONO%)的調(diào)控作用。方法選擇120例AIS患者，隨機(jī)分為聯(lián)合組(n=60)和阿托伐他汀組(n=60)。2組均給予AIS常規(guī)治療。聯(lián)合組給予黃連素(300 mg，3次/d)+阿托伐他汀(40 mg，每晚1次)，阿托伐他汀組給予阿托伐他汀(40 mg，每晚1次)。對2組治療前后血清MIF、IL-6、MONO%水平和美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS)評分以及治療90 d改良Rankin量表(Modified Rankin Scale，mRS)評分進(jìn)行比較。結(jié)果 治療前2組MIF、IL-6和MONO%差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療14 d，2組MIF、IL-6和MONO%均較治療前明顯降低(P<0.05)，且聯(lián)合組MIF、IL-6和MONO%明顯低于阿托伐他汀組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療前2組 NIHSS評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 治療14 d，2組NIHSS評分均明顯降低(P<0.05)，且聯(lián)合組NIHSS評分明顯低于阿托伐他汀組(P<0.05)；治療90 d，聯(lián)合組mRS評分明顯低于阿托伐他汀組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療前2組MIF、IL-6、MONO%與NIHSS評分呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論在AIS治療中，黃連素聯(lián)合阿托伐他汀可顯著促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，改善短期預(yù)后，并顯著降低AIS急性期血清炎癥因子MIF、IL-6、MONO%水平。

卒中；黃連素；白細(xì)胞介素6；細(xì)胞遷移分析

急性缺血性腦卒中(acute cerebral ischemic stroke，AIS)是最常見的卒中類型，占我國腦卒中亞型的70%，復(fù)發(fā)率高達(dá)17.7%[1]。研究發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞移動抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)[2]、白細(xì)胞介素6(interleukin-6，IL-6)[3-4]、單核細(xì)胞比率(monocyte proportion，MONO%)水平與AIS的病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，黃連素具有抗腫瘤、降壓、調(diào)節(jié)糖脂代謝、抗動脈粥樣硬化等作用[5]。本研究觀察黃連素聯(lián)合阿托伐他汀對AIS的臨床療效及其對血清MIF、IL-6、MONO%水平的調(diào)控作用，初步評價(jià)聯(lián)合治療對AIS的抗炎作用是否更有優(yōu)勢。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年10月—2016年5月河北省保定市第一中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的AIS患者120例，均符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》。由計(jì)算機(jī)隨機(jī)編碼分為2組。聯(lián)合組60例,男性32例，女性28例，年齡51～78歲，平均(62.84±4.67)歲；吸煙者40例，飲酒者34例，高血壓42例，糖尿病51例，冠心病30例。阿托伐他汀組60例,男性34例，女性26例，年齡52～75歲，平均(61.94±3.77)歲；吸煙者38例，飲酒者37例，高血壓40例，糖尿病49例，冠心病32例。2組性別、年齡、吸煙、基礎(chǔ)疾病等一般資料差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

本研究獲醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者及家屬對本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn) 入選標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)頭顱CT和(或)頭顱磁共振成像證實(shí)為新發(fā)缺血病灶；②年齡40～80歲；③發(fā)病時(shí)間在72 h內(nèi)。排除標(biāo)準(zhǔn)： ①對研究中所使用藥物過敏或發(fā)生其他嚴(yán)重感染需抗感染治療者；②有顱內(nèi)或胃腸道等出血性疾病史；③合并嚴(yán)重的風(fēng)濕免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)及腫瘤性疾病；④任何原因?qū)е碌陌V呆、昏迷等無法合作者；⑥需靜脈溶栓或手術(shù)治療者。

1.3 治療方法 按照急性缺血性腦卒中最新指南，均給予神經(jīng)內(nèi)科AIS基礎(chǔ)治療，包括阿司匹林腸溶片抗血小板聚集、疏血通改善循環(huán)、依達(dá)拉奉清除自由基、腦苷肌肽營養(yǎng)神經(jīng)等治療。聯(lián)合組給予復(fù)方黃連素片(貴州恒霸藥業(yè)有限責(zé)任公司，300 mg，3次/d)+阿托伐他汀鈣片(輝瑞制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20051408，40 mg，每晚1次)。阿托伐他汀組給予阿托伐他汀鈣片(輝瑞制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20051408，40 mg，每晚1次)。合并高血壓、糖尿病、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病等基礎(chǔ)病的患者，給予降壓、降糖、保護(hù)心臟等對癥治療。

1.4 檢測方法

1.4.1 血清MIF、IL-6、MONO%水平的測定 抽取第1、14天空腹臥位肘靜脈血5 mL，置于含有促凝劑的真空采血管里，搖勻后離心(3 000 r/min)5 min，分離血清標(biāo)本，置于EP管內(nèi)，編號標(biāo)記，保存于-80 ℃冰箱備用。統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immuno sorbent assay, ELISA)雙抗體夾心法檢測血清MIF、IL-6水平(人MIF、IL-6 ELISA試劑盒購于上海酶聯(lián)生物科技有限公司，操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行)；應(yīng)用日本日立系列7600全自動生化分析儀及配套試劑測定MONO%水平。

1.4.2 神經(jīng)功能缺損的評定 治療前、治療14 d行美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表評分(National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS)，隨訪90 d行改良Rankin量表(Modified Rankin Scale，mRS)評分。所有評定均由同一位高年資醫(yī)師進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較分別采用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)和配對t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用直線相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組治療前后血清MIF、IL-6、MONO%水平比較 治療前，2組MIF、IL-6和MONO%差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療14 d，2組MIF、IL-6和MONO%均較治療前明顯降低(P<0.05)；治療14 d，聯(lián)合組MIF、IL-6和MONO%均明顯低于阿托伐他汀伐組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2 2組治療前后NIHSS評分和治療90 d mRS評分變化 治療前，2組NIHSS評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療 14 d，2組NIHSS評分均明顯降低，聯(lián)合組NIHSS評分明顯低于阿托伐他汀組(P<0.05)；治療90 d，聯(lián)合組mRS評分也明顯低于阿托伐他汀組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 2組治療前后血清MIF、IL-6、MONO%比較 Table 1 Comparison of serum MIF，IL-6，MONO% levels before and after treatment between two groups

*P<0.05 與治療前比較(配對t檢驗(yàn))

表2 2組治療前后NIHSS和mRS評分比較 Table 2 Comparison of NIHSS and mRS before and after treatment between two groups 分)

*P<0.05與治療前比較(配對t檢驗(yàn))

2.3 相關(guān)性分析 入院治療前，2組血清MIF、IL-6、MONO%水平與NIHSS評分呈正相關(guān)(r=0.243、0.235、0.241，P<0.05),但相關(guān)程度較低。

2.4 不良反應(yīng) 治療過程中，阿托伐他汀組出現(xiàn)轉(zhuǎn)氨酶和(或)肌酸肌酶輕度升高2例，定期復(fù)查，恢復(fù)正常水平；聯(lián)合組出現(xiàn)腹瀉不適1例，經(jīng)對癥處理后好轉(zhuǎn)。2組不良反應(yīng)發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.342，P=0.059)。2組均未出現(xiàn)肌痛、肌溶解等嚴(yán)重并發(fā)癥。

3 討 論

AIS的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，包括細(xì)胞炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、Ca2+穩(wěn)態(tài)失調(diào)等。AIS急性期一般指發(fā)病2周左右，細(xì)胞炎癥反應(yīng)可以加速AIS急性期腦組織缺血半暗帶的細(xì)胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)，缺血性腦卒中發(fā)生后，機(jī)體內(nèi)通過核轉(zhuǎn)錄因子通路、Toll樣受體4等通路，完成炎癥反應(yīng)的級聯(lián)放大過程，引發(fā)其他炎癥因子如IL-1、IL-6、腫瘤壞死因子α等的產(chǎn)生和釋放[6]。

炎癥因子MIF，是一種類似于趨化因子的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，具有促炎癥作用[7]。當(dāng)炎癥反應(yīng)發(fā)生時(shí)，MIF可以抑制巨噬細(xì)胞的遷移，增強(qiáng)其聚集、吞噬功能，誘導(dǎo)更多炎性細(xì)胞因子的分泌，擴(kuò)大炎癥反應(yīng)。IL-6作為一種具有廣泛調(diào)節(jié)作用的促炎性細(xì)胞因子，在缺血損害下能引發(fā)強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答反應(yīng)，早期被釋放到細(xì)胞外隙，參與腦損傷的病理過程。單核細(xì)胞作為巨噬細(xì)胞的前身，其比率變化反映著人體內(nèi)的免疫炎癥反應(yīng)的強(qiáng)弱。在AIS患者中，單核細(xì)胞數(shù)量增加越多，臨床預(yù)后越差。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合組與阿托伐他汀組比較，AIS患者14 d的NIHSS評分、90 d的mRS評分明顯偏低，說明聯(lián)合組更顯著發(fā)揮了促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)及改善短期預(yù)后的臨床療效；同時(shí)，聯(lián)合組較阿托伐他汀組可顯著降低AIS患者血清炎癥因子MIF、IL-6、MONO%水平，即顯著發(fā)揮了抗炎作用。與與張彥海等[8]及區(qū)顯揚(yáng)等[9]的研究結(jié)果基本一致。

AIS的發(fā)生發(fā)展是復(fù)雜的級聯(lián)反應(yīng)。聯(lián)合治療改善AIS臨床療效及發(fā)揮抗炎腦保護(hù)作用可能是多通路、多環(huán)節(jié)相互作用的結(jié)果。可能有以下幾種機(jī)制：①通過調(diào)節(jié)過氧化物酶體增殖劑激活受體(peroxisome proliferator-activated receptor，PPARs)系統(tǒng)[10]，調(diào)控PPAR-α[11]、PPAR-γ[12]的表達(dá)水平，參與炎癥免疫反應(yīng)；②抑制細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶通路，調(diào)控腫瘤壞死因子α、IL-6及環(huán)氧合酶2等的表達(dá)[13]；③阻斷核轉(zhuǎn)錄因子κB信號通路，抑制炎癥因子IL-6、單核細(xì)胞趨化因子、環(huán)氧合酶2、一氧化氮合酶等靶基因的轉(zhuǎn)錄激活[14]；④調(diào)節(jié)腺苷酸活化蛋白激酶通路，調(diào)控細(xì)胞能量代謝，抑制炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)。

本研究結(jié)果還顯示，AIS患者血清MIF、IL-6、MONO%水平與NIHSS評分呈正相關(guān)，但相關(guān)程度較低。說明MIF、IL-6、MONO%可能參與了AIS的炎癥反應(yīng)過程，并能夠在一定程度上反映出卒中病情的嚴(yán)重程度。此結(jié)果與虞莉娜等[15]的研究結(jié)果一致。因此，監(jiān)測缺血性腦卒中高危人群血清MIF、IL-6、MONO%水平可協(xié)助診斷、預(yù)防發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥。當(dāng)然，本研究仍存在一定的局限性，如沒有對研究對象進(jìn)行病因分型及病情嚴(yán)重程度分層等。另外，在臨床研究中對合并其他基礎(chǔ)疾病的患者需要進(jìn)行對癥處理，不能做到完全無影響。

隨著我國中醫(yī)藥學(xué)不斷發(fā)展，在缺血性腦血管病的防治中加用傳統(tǒng)中藥是有益的，也是可行的。而黃連素作為一種價(jià)格低廉、來源廣泛、不良反應(yīng)小的有效中藥成分，可以減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，增加患者依從性，臨床應(yīng)用前景十分廣闊。

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(本文編輯：許卓文)

The analysis of clinical effect of berberine combined with atorvastatin on patients with acute cerebral ischemic stroke and the regulating effect on serum inflammatory factors

WANG Pei, LI Ying, REN Hong, FENG Rui
(ThirdDepartmentofNeurology，theFirstCenterHospitalofBaodingCity,HebeiProvince,Baoding071000,China)

Objective To investigate the clinical effect of berberine combined with atorvastatin on patients with acute cerebral ischemic stroke(AIS) and the regulating effect on serum macrophage migration inhibitory factor(MIF), interleukin-6(IL-6) and monocyte proportion(MONO%). Methods One hundred and twenty patients with AIS were recruited and randomly divided into 2 groups: combined group(n=60) and atorvastatin group(n=60). They all

the basical treatment of AIS. Combined group received berberine(300 mg, tid) and atorvastatin(40 mg, qn). Atorvastatin group received atorvastatin(40 mg, qn). The levels of serum MIF, IL-6, MONO%(before treatment and after treatment) and the nerve function defect grades(before treatment、after treatment and day 90) were measured and compared. Results The levels of serum MIF, IL-6 and MONO% were no significant differences between the two groups before treatment(P>0.05). After 14 days treatment, the levels of serum MIF, IL-6 and MONO% of the two groups were significantly lower(P<0.05). And the levels of serum MIF, IL-6 and MONO% of combined group after treatment were significantly lower than those of atorvastatin group(P<0.05). The National Institute of Health Stroke Scale(NIHSS) scores was no significant difference between the two groups before treatment(P>0.05). After 14 days treatment, the NIHSS scores of the two groups were significantly lower(P<0.05). And the NIHSS scores of combined group after treatment were significantly lower than those of atorvastatin group(P<0.05). On day 90, the Modified Rankin Scale(mRS) scores of combined group were significantly lower than those of atorvastatin group(P<0.05). There was positive correlation of serum MIF, IL-6, MONO% and NIHSS scores before treatment(P<0.05). Conclusion Combined berberine with atorvastatin can significantly improve neurological impairment and down-regulate the levels of serum MIF, IL-6 and MONO% of patients with acute cerebral ischemic stroke.

stroke; berberine; interleukin-6; cell migration assay

2016-08-25；

2017-03-31

河北省中醫(yī)藥管理局科研計(jì)劃項(xiàng)目(2017307)

王佩(1971-)，女，河北石家莊人，河北省保定市第一中心醫(yī)院主任醫(yī)師，醫(yī)學(xué)博士，從事神經(jīng)內(nèi)科疾病診治研究。

R743

A

1007-3205(2017)06-0625-04

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.06.002