利用微衛(wèi)星標(biāo)記分析雁蕩土雞及其他3個(gè)雞群體遺傳多樣性

曾 濤，孫思維，田 勇，陳 黎，盧立志，干賢通，干方本，吳春琴，*

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 畜牧獸醫(yī)研究所，浙江 杭州 310021; 2.溫州科技職業(yè)學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)系，浙江 溫州 325006; 3.浙江綠雁農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司，浙江 樂清325615)

利用微衛(wèi)星標(biāo)記分析雁蕩土雞及其他3個(gè)雞群體遺傳多樣性

曾 濤1，孫思維2，田 勇1，陳 黎1，盧立志1，干賢通3，干方本3，吳春琴2，*

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 畜牧獸醫(yī)研究所，浙江 杭州 310021; 2.溫州科技職業(yè)學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)系，浙江 溫州 325006; 3.浙江綠雁農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司，浙江 樂清325615)

為探討浙江省不同地方雞群體的遺傳多樣性及遺傳距離，促進(jìn)浙江境內(nèi)雞群體遺傳資源的合理利用和保護(hù)，本試驗(yàn)利用STR分型技術(shù)對(duì)雁蕩麻雞Ⅰ系、Ⅱ系、蕭山雞、龍游麻雞和仙居雞5個(gè)群體(440只個(gè)體)在28個(gè)位點(diǎn)上的遺傳多樣性進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明，所有位點(diǎn)在5個(gè)群體中的平均有效等位基因(Ne)、期望雜合度(He)和多態(tài)信息含量(PIC)分別為3.709 0、0.664 1和0.621 5，其中龍游麻雞的平均Ne、He和PIC最高(3.941 9、0.702 2和0.661 3)；仙居雞最低(3.505 1、0.653 9和0.609 3)；雁蕩麻雞2個(gè)品系平均值處于龍游麻雞和仙居雞之間(Ⅰ系分別為3.785 5、0.670 6和0.628 8，Ⅱ系分別為3.695 7、0.654 6和0.611 4)。遺傳距離和系統(tǒng)聚類結(jié)果顯示，5個(gè)雞群體聚為3類，雁蕩麻雞2個(gè)群體為一類，仙居雞為一類，蕭山雞與龍游麻雞為一類。雁蕩麻雞Ⅰ系和Ⅱ系是浙江境內(nèi)不同于仙居雞、蕭山雞和龍游麻雞而單獨(dú)存在的一個(gè)品種。

雞；微衛(wèi)星；遺傳多樣性；遺傳距離

微衛(wèi)星DNA 核心序列重復(fù)次數(shù)的不同和重復(fù)程度的不同導(dǎo)致了每個(gè)基因座的多態(tài)性[1]，微衛(wèi)星DNA 或標(biāo)記因其有數(shù)量多、分布廣、多態(tài)性豐富、呈共顯性遺傳方式等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)在動(dòng)物遺傳育種中得到廣泛應(yīng)用。目前，全球生物多樣性正在下降，研究和保護(hù)動(dòng)物的遺傳多樣性已成為保護(hù)生物學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn)。微衛(wèi)星作為理想的遺傳標(biāo)記，已應(yīng)用于動(dòng)物遺傳多樣性和建立遺傳譜系的研究中，推動(dòng)了保護(hù)遺傳學(xué)的發(fā)展。國(guó)內(nèi)外已有多位學(xué)者用微衛(wèi)星標(biāo)記研究了不同家禽品種的遺傳結(jié)構(gòu)、親緣關(guān)系和遺傳多樣性[2-7]。

雁蕩土雞原產(chǎn)于樂清市雁蕩山區(qū)一帶，是在特定的地理、氣候等環(huán)境和傳統(tǒng)飼養(yǎng)管理方式下，經(jīng)過長(zhǎng)期擇優(yōu)繁育而形成的蛋肉兼用品種。2004年以來，課題組對(duì)散養(yǎng)在雁蕩山區(qū)一帶的土雞進(jìn)行收集和閉鎖繼代選育，根據(jù)土雞的羽色和生產(chǎn)性能重點(diǎn)培育了兩個(gè)品系，分別是Ⅰ系快長(zhǎng)型，羽色為黑羽黑腳，生長(zhǎng)速度較快；Ⅱ系優(yōu)質(zhì)型，羽色為黃麻羽黃腳，生長(zhǎng)速度較慢。雁蕩土雞雞肉品質(zhì)細(xì)嫩，雞蛋營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，深受當(dāng)?shù)厝藗儦g迎。本研究選取與雁蕩土雞相近的浙江省本地蛋肉兼用型雞品種蕭山雞、龍游麻雞和仙居雞，進(jìn)行遺傳多樣性比較及遺傳距離的分析，以揭示雁蕩土雞的遺傳特征，為地方雞品種資源開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

本試驗(yàn)采集浙江省主要的5個(gè)雞(Gallusgallus)群體的血樣。5個(gè)群體樣本信息詳見表1。所有群體公母比例為1∶1。

1.2 血液采集及DNA提取

采取翅靜脈采血，收集于醫(yī)用2 mL一次性真空采血管(含抗凝劑)帶回實(shí)驗(yàn)室，-20 ℃保存?zhèn)溆?。使用TaKaRa Blood Genome DNA Extraction Kit提取總DNA。0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其純度，用紫外分光光度計(jì)法估計(jì)含量，稀釋DNA樣品至 50 ng·μL-1，用于后續(xù)微衛(wèi)星分型分析。

1.3 引物設(shè)計(jì)及PCR擴(kuò)增

根據(jù)GenBank和相關(guān)文獻(xiàn)所提供的雞的SSR序列及引物進(jìn)行篩選。選擇核心重復(fù)序列較多，且在多個(gè)品種中多態(tài)性豐富的位點(diǎn)。最終選取30對(duì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，其中28對(duì)引物擴(kuò)增成功，引物由上海英捷生物有限公司合成，詳見表2。

PCR反應(yīng)體系為15 μL，具體為：10×Buffer 1.5 μL，DNA 1.0 μL，25 mmol·L-1Mg2+1.5 μL，酶0.3 μL，10 pmol·μL-1上下游引物各0.15 μL，ddH2O補(bǔ)至15 μL。擴(kuò)增反應(yīng)程序如下：94 ℃ 預(yù)變性3 min；94 ℃變性15 s，52～65 ℃退火15 s，72 ℃延伸 30 s，共35個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸3 min，4 ℃保存。

表1 各群體樣本信息

Table 1 Information of the population sample

品種Breeds樣本量Samplesize來源Source雁蕩麻雞Ⅰ系YandangchickenⅠ(YDⅠ)100浙江綠雁農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司ZhejiangLvyanAgriculturalDevelopmentCo．，Ltd．雁蕩麻雞Ⅱ系YandangchickenⅡ(YDⅡ)100浙江綠雁農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司ZhejiangLvyanAgriculturalDevelopmentCo．，Ltd．蕭山雞Xiaoshanchicken(XS)60杭州蕭山東海養(yǎng)殖有限責(zé)任公司HangzhouXiaoshanEastSeaAquacultureCo．，Ltd．龍游麻雞Longyouchicken(LY)60衢州某雞場(chǎng)AchickenfarminQuzhou仙居雞Xianjuchicken(XJ)120浙江禮仕得仙居雞開發(fā)有限公司ZhejiangLishideXianjuChickenDevelopmentCo．，Ltd．

表2 雞微衛(wèi)星引物信息

Table 2 Microsatellite primers sequences of chicken

座位名稱(Loci)染色體Chromosome引物序列Primerssequences退火溫度Annealingtemperature/℃ADL1369TGTCAAGCCCATCGTATCACCACCTCCTTCTCCTGTTCA53ADL1665TGCCAGCCCGTAATCATAAAGCACCACGACCCAATCTA55ADL1852CATGGCAGCTGACTCCAGATAGCGTTACCTGTTCGTTTGC60ADL1951AGATGGAAGACAGGACAAATAGCACAGACAATGTTATGC52ADL21011ACAGGGAGGATAGTCACACATGCCAAAAAGATGAATGAGTA55ADL2122TTTCAAAAGTGCCCTCACACTTCCTCCCTAAACTATGCTG52ADL22513CCAAAAAGCTGTATCACCTTGCCTGTTGTAAACCACCTGA59ADL12311GCTGTGTCAAGATTAGAATCACAACAATGAAAAACACTACCTGA53ADL201ZGCTGAGGATTCAGATAAGACAATGGCTGACGTTTCACAGC52ADL1762TTGTGGATTCTGGTGGTAGCTTCTCCCGTAACACTCGTCA52LEI01663AAGCAAGTGCTGGCTGTGCTCTCCTGCCCTTAGCTACGCAC58LEI006614GATCAGATGCATCCAAAGTTCGAAGCAGGAAAATAGAAAAGGC56LEI00944CAGGATGGCTGTTATGCTTCCAGGCCAACCCATACAAGAAAC63MCW02954ATCACTACAGAACACCCTCTCTATGTATGCACGCAGATATCC62MCW00146AAAATATTGGCTCTAGGAAACCGGAAATGAAGGTAAGACTAGC63MCW6710GCACTACTGTGTGCTGCAGTTTGAGATGTAGTTGCCATTCCGAC65MCW00815GTTGCTGAGAGCCTGGTGCAGCCTGTATGTGGAATTACTTCTC63MCW1837ATCCCAGTGTCGAGTATCCGATGAGATTTACTGGAGCCTGCC64MCW294ZACTGAACAGAAACAGTCTTCCCTTCTCTAGATGTCCACTACC63MCW33017TGGACCTCATCAGTCTGACAGAATGTTCTCATAGAGTTCCTGC63MCW00854GTGCAGTTATATGAAGTCTCTCGGTATACAGGGCTTCTGAAACA57MCW2642AGACTGAGTCACACTCGTAAGCTTACTTTTCACGACAGAAGC56MCW1349GGAGACTTCATTGTGTAGCACACCAAAAGACTGGAGGTCAAC58MCW10413TAGCACAACTCAAGCTGTGAGAGACTTGCACAGCTGTGACC64MCW1451ACTTTATTCTCCAAATTTGGCTAAACACAATGGCAACGGAAAC61MCW1503TCCTGACTGAAATGGTACAGCCATGAAAACCTTTGCCCTCAG61MCW325AAGTTCCTTGTACAATTGTTATCATTACTAGTACAATCAAGATGG56MCW43GGATTACAGCACCTGAAGCCAAACCAGCCATGGGTGCAGATTGG64MCW1207CTATGTAAAGCTTGAATCTTCAATTCCTGGGTGCTAATTTACC57MCW1744TGGACTTAACACTGCTATTGCCTCTCTACCTTGGAGGGCTGA54

含熒光標(biāo)記的PCR產(chǎn)物用ABI-3730XL DNA Analyzer全自動(dòng)測(cè)序儀檢測(cè)。上樣總體積為10 μL，其中包括已經(jīng)混有ROX500標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)參的上樣液Hi-Di Formamide 9 μL，PCR產(chǎn)物1 μL。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用GeneMapper 4.0導(dǎo)出圖譜文件，根據(jù)圖譜中最大波峰位置判斷目標(biāo)條帶的大小，單波峰為純合子，雙峰為雜合子，并生成Excel數(shù)據(jù)表格。利用microsatellite-toolkit軟件計(jì)算有效等位基因數(shù)目(Ne)、期望雜合度(He)、多態(tài)信息含量(PIC))。用Popgene32軟件進(jìn)行F-統(tǒng)計(jì)量分析，群體Nei氏遺傳距離及相似性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 微衛(wèi)星位點(diǎn)檢測(cè)分型

利用 28對(duì)引物分別對(duì)440個(gè)樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增，利用ABI-3730XLDNA Analyzer全自動(dòng)測(cè)序儀對(duì)所檢位點(diǎn)進(jìn)行毛細(xì)管電泳掃描、判讀基因型(圖1)。

2.2 群體的遺傳多樣性比較

所有位點(diǎn)在5個(gè)群體中的平均He、PIC和Ne分別為0.664 1、0.621 5和3.709 0，其中龍游麻雞的平均He、PIC和Ne最高(0.702 2、0.661 3和3.941 9)，仙居雞最低(0.653 9、0.609 3和3.505 1)，雁蕩麻雞2個(gè)品系處于龍游麻雞和仙居雞之間， 但與兩者又具有顯著差異(Ⅰ系分別為0.670 6、0.628 8和3.785 5；Ⅱ系分別為0.654 6、0.611 4和3.695 7)(表3)。

2.3 群體間的遺傳距離和系統(tǒng)聚類

利用Popgene32軟件對(duì)5個(gè)雞群體間的Nei氏相似性和遺傳距離進(jìn)行了分析，同時(shí)根據(jù)遺傳距離，采用UPGMA法進(jìn)行聚類，詳見表4和圖2。雁蕩麻雞Ⅰ系和Ⅱ系的相似性最高為0.904 9，其次是蕭山雞與龍游麻雞(0.820 6)；雁蕩麻雞與其他3個(gè)品種的相似性高低依次為仙居雞>龍游麻雞>蕭山雞；雁蕩麻雞與其他3個(gè)品種間的遺傳距離大于3個(gè)品種內(nèi)部的遺傳距離，說明雁蕩麻雞是屬于單獨(dú)的一個(gè)品種；聚類分析顯示，雁蕩麻雞2個(gè)品系單獨(dú)聚成一類，與仙居雞遺傳距離小于與蕭山雞和龍游麻雞的遺傳距離，而蕭山雞和龍游麻雞聚成一類。遺傳距離和系統(tǒng)聚類結(jié)果均表明，雁蕩麻雞Ⅰ系和Ⅱ系是不同于仙居雞、蕭山雞和龍游麻雞而單獨(dú)存在的一個(gè)品種。

圖1 位點(diǎn)ADL225的某基因型Fig.1 One of genotyping of ADL225

表3 二十八個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)在各個(gè)群體中的期望雜合度(He)、多態(tài)信息含量(PIC)、有效等位基因數(shù)(Ne)

Table 3 Expected heterozygosities， polymorphism information content and the number of effective alleles of 28 microsatellite loci in each population

位點(diǎn)Loci群體Population雁蕩麻雞Ⅰ系(YDⅠ)雁蕩麻雞Ⅱ系(YDⅡ)蕭山雞(XS)龍游麻雞(LY)仙居雞(XJ)平均值MeanADL136He085040836307904089070850708437PIC083220811207568087310830408207Ne753015719346228768546208963533ADL166He079410811308493082490808608176PIC076920781608243079370780707899Ne538655887563293548785133656449ADL185He083980841808153058740381106931PIC081770821207823056040367506698Ne645196756852189239301611644864ADL195He077390721407561082080669407483PIC073620664507056078830606907003Ne387574371539898536072995341186ADL210He062700534907574079640799407030PIC054110490907073076380763906534Ne262471833739950471504840036016ADL212He063420601305595070660686806376PIC060830556005121067810628305966Ne243692828522441333623159728010ADL225He085610802006161087690859008020PIC083440770005658085520839107729Ne619005878925705765426912958413ADL123He052550472702467044700480804345PIC050310444202323041440441304070Ne217461838613238179551918418101ADL201He001990000861000212PIC001960000817000203Ne100001020210000109331000010227ADL176He070330768105549080630729507124PIC064690728704945077390686306661Ne441353757622223498373655938066LEI0166He058400596606453060210463105782PIC050400507205744053000382604996Ne249202442927756248081855824094LEI0066He088300955008990094100945009190PIC071760705407998081830767607617Ne396564505556023619114880650290MCW0295He067880543807556066700668906628PIC061690476007145061040612406060Ne294682367739874295222994830497

續(xù)表1

表4 五個(gè)雞群體間的Nei氏遺傳相似性系數(shù)和遺傳距離

Table 4 Nei’s unbiased measures of genetic identity and genetic distance

品種Breeds雁蕩麻雞Ⅰ系(YDⅠ)雁蕩麻雞Ⅱ系(YDⅡ)蕭山雞(XS)龍游麻雞(LY)仙居雞(XJ)雁蕩麻雞Ⅰ系(YDⅠ)????09049063230716007556雁蕩麻雞Ⅱ系(YDⅡ)01000????063190689207171蕭山雞(XS)0458404590????0820606506龍游麻雞(LY)033400372301977???? 08082仙居雞(XJ)02802033250429802130????

*Nei氏遺傳相似性系數(shù)(對(duì)角線以上)和遺傳距離(對(duì)角線以下)

Nei’s genetic identity (above diagonal) and genetic distance (below diagonal).

圖2 五個(gè)雞群體基于Nei氏遺傳距離的UPGMA系統(tǒng)發(fā)育聚類圖Fig.2 UPGMA dendrogram of 5 breeds based on Nei’s genetic distance

3 討論

了解雁蕩麻雞的遺傳多樣性，有助于中國(guó)地方雞種的選育及開發(fā)利用。雁蕩麻雞體軀長(zhǎng)方形，體型中等。羽色具有麻雞的特點(diǎn)，尾羽上翹。按照羽色和脛部皮膚顏色的不同，分Ⅰ系(黑麻羽青腳)、Ⅱ系(黃麻羽黃腳)兩個(gè)品系，具有豐富的多樣性。雁蕩麻雞是雁蕩山區(qū)獨(dú)特的家禽資源，體型偏小，抗病力強(qiáng)，肉蛋營(yíng)養(yǎng)豐富，但目前，該品種尚未經(jīng)過省遺傳資源鑒定，因此有必要了解該品種的遺傳特性及其與周邊地方雞種的遺傳距離，為今后雁蕩土雞更好地開發(fā)提供參考。

由于微衛(wèi)星標(biāo)記具有多態(tài)豐富、共顯性、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，被用于雞種多樣性，以及群體內(nèi)及群體間的遺傳結(jié)構(gòu)和差異研究[8-11]。通過分析遺傳雜合度(He)和多態(tài)信息含量(PIC)，可以看到不同座位在不同群體中的遺傳變異程度不同。從本研究的結(jié)果可以看出，28個(gè)微衛(wèi)星座位在5個(gè)不同雞群體，呈現(xiàn)出不同的多態(tài)現(xiàn)象。其中，S9的Ne、He和PIC較其他位點(diǎn)稍低，為低度多態(tài)位點(diǎn)，其他位點(diǎn)均處于中高度多態(tài)位點(diǎn)。5個(gè)群體中的平均He、PIC和Ne分別為0.664 1、0.621 5和3.709 0，其中龍游麻雞的平均He、PIC和Ne最高(0.702 2、0.661 3和3.941 9)，仙居雞的平均He、PIC和Ne最低(0.653 9、0.609 3和3.505 1)，雁蕩麻雞2個(gè)品系的平均He、PIC和Ne處于龍游麻雞和仙居雞之間，但與兩者又具有顯著差異(Ⅰ系He、PIC和Ne分別為0.670 6、0.628 8和3.785 5；Ⅱ系He、PIC和Ne分別為0.654 6、0.611 4和3.695 7)，結(jié)果表明,雁蕩麻雞是處于龍游麻雞和仙居雞之間的品種。

遺傳距離是指不同的種群或種間的基因差異的程度，并且以某種數(shù)值進(jìn)行度量，通常由基因頻率的某個(gè)函數(shù)所確定。遺傳距離的信息已作為在決策保種計(jì)劃時(shí)群體結(jié)構(gòu)和品種分化最基本的指標(biāo)，準(zhǔn)確理解遺傳距離的概念和在不同的情況下選擇合適的度量方式是很重要的。遺傳距離是研究物種遺傳多樣性的基礎(chǔ)，它反映了所研究群體的系統(tǒng)分化，一般認(rèn)為，群體分化時(shí)間越短，遺傳距離越小。哪種遺傳距離測(cè)定方法對(duì)分析品種遺傳變異最好并無定論，不同的遺傳距離得出的系統(tǒng)發(fā)生樹不同[12-13]。本試驗(yàn)得到的聚類圖中，5個(gè)雞群體聚為3類，雁蕩麻雞2個(gè)群體單獨(dú)為一類，仙居雞為一類，蕭山雞與龍游麻雞為一類。結(jié)果表明，雁蕩麻雞Ⅰ系和Ⅱ系是不同于仙居雞、蕭山雞和龍游麻雞而單獨(dú)存在的一個(gè)品種。

本研究通過應(yīng)用28個(gè)多態(tài)性較好的微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)浙江省5個(gè)雞群體進(jìn)行了遺傳多樣性分析，所得的聚類圖能夠準(zhǔn)確地反映5個(gè)群體間的分化關(guān)系，各品種的遺傳多樣性非常豐富，都具有各自的特性，在合理開發(fā)利用的同時(shí)，要保存其各自優(yōu)良的品種資源。同時(shí)，本研究也發(fā)現(xiàn)雁蕩麻雞是不同于仙居雞、蕭山雞和龍游麻雞而單獨(dú)存在的一個(gè)品種，應(yīng)申請(qǐng)省遺傳資源鑒定為新的保護(hù)品種。

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(責(zé)任編輯 張 韻)

Genetic diversity of Yandang chicken and other three chicken populations using microsatellite markers

ZENG Tao1， SUN Siwei2， TIAN Yong1， CHEN Li1， LU Lizhi1， GAN Xiantong3， GAN Fangben3， WU Chunqin2，*

(1.InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryScience，ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences，Hangzhou310021，China; 2.DepartmentofAnimalScience，WenzhouVocationalCollegeofScienceandTechnology，Wenzhou325006，China; 3.ZhejiangLvyanAgriculturalDepartmentCo.，Ltd.，Yueqing325615，China)

In order to study the chicken populations’ genetic diversity and relationship and promote the rational use and protection of the chicken populations genetic resources in Zhejiang Province， 28 microsatellite loci were tested in the 5 chicken populations， which were Yandang chicken I， Yandang chicken II， Xiaoshan chicken， Longyou chicken and Xianju chicken， totally 440 samples. The results showed that the average effective number of alleles (Ne) was 3.709 0， the average expected heterozygosity (He) was 0.664 1， and the mean polymorphic information content (PIC) was 0.621 5. In addition， the Ne， He and PIC of Longyou chicken were the highest (3.941 9， 0.702 2 and 0.661 3). The Ne， He and PIC of Xianju chicken were the lowest (3.505 1， 0.653 9 and 0.609 3). The Ne， He and PIC of Yandang chicken were between the two populations (Ⅰ: 3.785 5， 0.670 6 and 0.628 8; Ⅱ: 3.695 7， 0.654 6 and 0.611 4). Phylogenetic tree analysis based on Nei’s genetic distance revealed that Yandang chicken (Ⅰ and Ⅱ)， Xianju chicken， Xiaoshan chicken and Longyou chicken was clustered into threes group separately. It indicated that Yandang chicken was a separate breed which is different from Xiaoshan chicken， Longyou chicken and Xianju chicken.

chicken; microsatellite; genetic diversity; genetic distance

http://www.zjnyxb.cn

10.3969/j.issn.1004-1524.2017.07.03

2017-01-12

浙江省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金資助項(xiàng)目(2013-101)；溫州市種子種苗科技創(chuàng)新專項(xiàng)項(xiàng)目(N20120031)；浙江省科學(xué)技術(shù)廳重大科技專項(xiàng)重大農(nóng)業(yè)項(xiàng)目(2014C02001)

曾濤(1987—)，男，安徽安慶人，博士，助理研究員，主要從事家禽遺傳育種研究。E-mail: zengtao4009@126.com

*通信作者，吳春琴，E-mail: nkywcq@163.com

S831.2

A

1004-1524(2017)07-1070-07

浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)ActaAgriculturaeZhejiangensis， 2017，29(7): 1070-1076

曾濤，孫思維，田勇，等. 利用微衛(wèi)星標(biāo)記分析雁蕩土雞及其他3個(gè)雞群體遺傳多樣性[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017，29(7)： 1070-1076.