不同炮制方法對細辛中甲基丁香酚和細辛脂素含量的影響※

盧肖英

不同炮制方法對細辛中甲基丁香酚和細辛脂素含量的影響※

盧肖英

目的比較不同炮制方法對細辛中甲基丁香酚和細辛脂素含量的影響。方法采用蜜制、酒制以及醋制等方式對細辛實施炮制處理，而后應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）檢測其有效成分甲基丁香酚、細辛脂素含量。結(jié)果酒制的細辛甲基丁香酚含量顯著上升，蜜制、醋制等炮制方式下甲基丁香酚含量均降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）；堿制和炒焦炮制方式下，細辛脂素含量保持不變，蜜制、酒制等炮制方式下細辛脂素含量均顯著提升，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。結(jié)論不同炮制方式下細辛中的甲基丁香酚與細辛素含量會存在明顯差異，需要科學(xué)地選擇炮制方式，保證其藥物作用價值，切實發(fā)揮藥物治療效果。

炮制方法；細辛；甲基丁香酚；細辛脂素；含量

細辛為馬兜鈴科植物北細辛、漢城細辛或華細辛的干燥根和根莖，為臨床常用藥物，其祛風(fēng)止痛、清熱散寒等功效突出。甲基丁香酚與細辛脂素均為細辛的主要成分，具有鎮(zhèn)痛、祛痰等功效。而不同炮制方式下細辛中的甲基丁香酚以及細辛脂素含量會存在較大差異[1]。本研究就不同炮制方法對細辛中甲基丁香酚和細辛脂素含量的影響進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 材料與儀器

1.1 儀器應(yīng)用安捷倫1260高效液相色譜儀（Agilent公司，美國），粉碎機（浙江省永康市金穗機械制造廠），KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器，CP114型數(shù)控超聲波清洗器，CP114型電子分析天平，HH-600型三用恒溫水箱，SHZ（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵等儀器設(shè)備。

1.2 試劑與藥品細辛藥材，甲醇、甲基丁香酚對照品以及細辛脂素對照品等，甲醇為色譜純，水為純凈水，其余試劑為分析純[2]。

1.3 方法

1.3.1 炮制方法 對細辛應(yīng)用酒制、堿制、醋制、蜜制、鹽制、甘草制、炒焦、姜制、堿醋制及米泔水制的方式進行炮制。其中：①酒制方式為細辛25 g，加10 g黃酒拌勻，悶潤，黃酒吸取干凈后，放在25 ℃烘箱中真空干燥，備用[3]。②醋制方式為細辛25 g，加15 g米醋拌勻，悶潤，米醋被吸取干凈后，放在25 ℃真空烘箱中晾干，備用。③蜜制則應(yīng)用細辛25 g，融入12 g煉蜜拌勻，悶潤，密制吸取干凈后，烘箱中25 ℃真空干燥曬干，備用[4]。④堿制則應(yīng)用細辛25 g，融入20倍0.01 mol/L的NaHCO3溶液中浸泡3次，每次24 h，浸泡后細辛放于烘箱中25 ℃真空干燥曬干，備用。⑤鹽制則取細辛25 g，加12.5 g粗鹽，適當清水融化，和藥物攪拌均勻，悶潤5 min，炒鍋中火抄5 min，取出、冷卻、干燥、備用[5]。⑥炒焦則取細辛25 g，中火或者武火炒至表面焦黃色，存在焦香氣。⑦甘草制則取細辛25 g，加20 ml甘草汁攪拌均勻，悶潤，甘草汁吸收干凈后，烘箱中25 ℃真空干燥備用。⑧姜制：細辛25 g，加6 g姜汁攪拌，悶潤，姜汁吸取干凈后，烘箱中25 ℃真空感染待干，備用。⑨堿醋制：取細辛25 g，加入40倍0.01 mol/L的NaHCO3溶液中浸泡3次，每次24 h，浸泡后細辛置入烘箱中干燥至干；10 g米醋稀釋2倍后，用醋將堿制后的細辛拌勻，悶制，干燥，備用。⑩米泔水制：細辛25 g，加20 ml米泔水拌勻，悶潤，米泔水吸盡后，烘箱中25 ℃真空干燥待干，備用。

1.3.2 制備對照品 應(yīng)用Agilent TC-C18，以0.2%醋酸水溶液為流動相B，實施梯度洗脫，流速為1.0 ml/min。稱取甲基丁香酚對照品0.0369 g，置于10 ml棕色量瓶中，精密量取0.5 ml對照品溶液，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制作成1 ml中含甲基丁香酚 184.5 μg。選取細辛脂素對照品0.0111 g，置于10 ml棕色量瓶中，再精密量取1 ml對照品溶液，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升中含細辛脂素111 μg。

1.3.3 檢測方法 采用高效液相色譜法（HPLC）檢測不同炮制方式下細辛中甲基丁香酚、細辛脂素的含量。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析使用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細辛不同炮制方式下甲基丁香酚含量比較酒制的細辛甲基丁香酚含量顯著較高，蜜制、醋制等炮制方式下甲基丁香酚含量均降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見圖1。

圖1 細辛不同炮制方式下甲基丁香酚含量比較

2.2 細辛不同炮制方式下細辛脂素含量比較堿制和炒焦炮制方式下，細辛脂素含量保持不變，蜜制、酒制等炮制方式下細辛脂素含量均顯著較高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見圖2。

圖2 細辛不同炮制方式下細辛脂素含量比較

3 討論

細辛是臨床中應(yīng)用價值比較突出的馬兜鈴科植物，具有華細辛、北細辛之分。細辛可謂是目前我國臨床治療中應(yīng)用歷史比較悠久的中藥材，具有祛風(fēng)散寒、止痛、通竅等作用。

細辛在臨床研究治療過程中應(yīng)用時間較長，包括多種有效成分，其中甲基丁香酚具有鎮(zhèn)痛、祛痰等功效，細辛脂素具有抗病毒、抗菌的效果。細辛能夠發(fā)揮治癌的價值，臨床應(yīng)用效果較顯著。中藥傳統(tǒng)炮制技術(shù)豐富多樣，如蜜制、鹽制、酒制以及醋制等，不同炮制方式下，對患者的臨床癥狀改善也會產(chǎn)生不同影響。

細辛炮制方式對其甲基丁香酚和細辛脂素含量的影響研究，有助于全面了解藥物的應(yīng)用價值，以其主要成分甲基丁香酚與細辛脂素含量為標準，分析炮制方式的科學(xué)性與質(zhì)量的控制效果，能有效保證細辛炮制效果的提升，也能夠為患者的臨床治療活動奠定良好的基礎(chǔ)。

相關(guān)研究表明，炒制方式能夠降低細辛中黃樟醚，更好地保存甲基丁香酚和細辛脂素含量[6]。在實踐研究中采用多種炮制方法，探究細辛炮制的合理性與質(zhì)量的可控性價值，為細辛炮制效果的提升打下基礎(chǔ)，也為細辛的采收、加工、炮制與臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)。

流動相的選擇方面，選擇比較甲醇-水以及乙腈-0.2%冰醋酸的分離效果等，將細辛樣品中各類色譜峰更好的展現(xiàn)出來。建立指紋圖譜方法，能夠滿足中藥色譜指紋圖譜測定的要求，在明確峰值的基礎(chǔ)上，對甲基丁香酚與細辛脂素含量進行綜合分析，有助于更好地控制細辛炮制品的質(zhì)量。

咳嗽高敏感綜合征（CHS）是指與咳嗽反射高敏性相關(guān)、不能用其他原因解釋的慢性咳嗽，患者多具有癥狀反復(fù)發(fā)作、病情比較嚴重的特點。細辛在CHS治療中的應(yīng)用，能夠有效發(fā)揮其藥物作用價值。

細辛炮制方式會影響其中的藥物成分，對現(xiàn)代中藥材制作以及中藥材價值的彰顯等均能產(chǎn)生重要影響。炮制中，毒性成分會發(fā)生適當轉(zhuǎn)變，黃樟醚、馬兜鈴酸A會存在毒性減弱的情況。炮制減毒為中藥炮制后的重要問題。不同炮制方式下，其中甲基丁香酚與細辛脂素含量也會存在明顯差異。

細辛炮制中，甲基丁香酚的保存情況直接關(guān)系到其臨床應(yīng)用的綜合效果和應(yīng)用價值等。炮制中，基于其含量損失的實際情況，可以將其進行排序。酒制方式下含量最多，其次為醋制、甘草制以及堿醋制等。酒制炮制方式下，不但能夠保留其中的甲基丁香酚含量，且能夠增加其浸出量，醋制方式下，甲基丁香酚的保留效果也比較理想，能夠保存95%以上；甘草制和堿醋制炮制方式下，則能夠保留80%以上[7]。其他的炮制方式下，對細辛脂素浸潤率相差較小，保留率相對較穩(wěn)定。

本研究中，細辛經(jīng)過炮制，酒制的甲基丁香酚含量顯著上升，蜜制、醋制等炮制方式下甲基丁香酚含量均降低，表明不同炮制方式下對細辛中甲基丁香酚含量會產(chǎn)生一定影響。產(chǎn)生這種情況的原因可能為蜂蜜中含有果糖、葡萄糖、氨基酸、有機酸等，細辛中的化學(xué)成分會發(fā)生轉(zhuǎn)變，在細辛炒制過程中，能夠加速其中化學(xué)成分的有效轉(zhuǎn)化，藥物成分會不同程度的減少[8]。堿制和炒焦炮制方式下，細辛脂素含量保持不變，蜜制、酒制等炮制方式下細辛脂素含量會顯著提升，表明了炮制方式對細辛脂素含量也會產(chǎn)生影響效果，炮制方式與細辛中成分含量之間具有密切聯(lián)系。

甲基丁香酚與細辛脂素含量的研究，對現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)理論的發(fā)展能夠產(chǎn)生重要推動效果。基于實踐研究發(fā)現(xiàn)，酒制炮制方式下，甲基丁香酚含量不但不會減少，且會增加10%～20%，基于數(shù)據(jù)研究結(jié)果能夠看出，酒制的方式下應(yīng)用效果顯著。堿制與炒煎方式下，細辛脂素含量會顯著降低，醋制、姜制以及鹽制等方式下，細辛脂素的含量均能夠顯著增加，尤其是米泔水制、甘草制與堿醋制可使細辛脂素增加35%以上。提示不同炮制方式對保留中藥細辛有效成分甲基丁香酚與細辛脂素含量的中藥影響，也能夠為細辛炮制后毒素的減弱研究帶來一定的借鑒價值。

綜上所述，不同炮制方式下細辛中的甲基丁香酚與細辛素含量也會存在明顯差異，需要科學(xué)選擇炮制的方式，保證其藥物作用價值，切實發(fā)揮藥物治療的效果。

[1] 張小龍,孫曉,孫思,等.HPLC法同時測定辛芩顆粒中細辛脂素、升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷的含量[J].中國藥師,2014,17(12):2027-2029.

[2] 王知斌,李晶,雷印廷,等.GC-MS同時測定石菖蒲揮發(fā)油中β-細辛醚、ɑ-細辛醚和甲基丁香酚的含量[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2014,42(6):22-24.

[3] 潘磊,鄭柳,?；?等.細辛揮發(fā)油成分提取與甲基丁香酚含量測定的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥,2015,26(4):967-970.

[4] 曹晨,王靜哲,王璐,等.高效液相色譜法同時測定細辛中7種主要成分的含量[J].中國藥學(xué)(英文版),2015,24(8):530-537.

[5] 劉玉紅,易進海,黃蛟,等.RP-HPLC法同時測定細辛中甲基丁香酚、黃樟醚和細辛脂素的含量[J].藥物分析雜志,2012,32(5):822-825.

[6] 黃鮫,易進海,劉玉紅,等.炒制對細辛中黃樟醚、甲基丁香酚和細辛脂素含量的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2013,19(19):90-92.

[7] Liu Yan,Ji Lanzhu,Wang Guiqing,et al.Impact of Asarum Essential Oils on Physiological and Biochemical Indicators of Two Agricultural Pests[J].Plant Diseases and Pests,2014,3(14):1-6.

[8] 黃鮫,易進海,劉玉紅,等.細辛煎煮過程中甲基丁香酚、黃樟醚和細辛脂素的變化研究[J].中成藥,2012,34(10):1971-1974.

10.12010/j.issn.1673-5846.2017.07.007

廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣東廣州 510120

廣東省中醫(yī)藥局面上項目（編號：20171183，課題名稱：基于多靶點協(xié)同機制探討細辛治療咳嗽高敏綜合征的藥效物質(zhì)研究）

盧肖英（1968.8-），大專學(xué)歷，主管中藥師。研究方向：中藥藥劑