玄參中化學(xué)成分的分離鑒定及其降糖活性研究

田金鳳,尚遠宏,李學(xué)剛

(1.攀枝花學(xué)院干熱河谷特色生物資源研發(fā)四川省高校重點實驗室,四川攀枝花 617000;2.西南大學(xué) 藥學(xué)院 重慶市藥效評價工程技術(shù)研究中心,重慶 400716)

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玄參中化學(xué)成分的分離鑒定及其降糖活性研究

田金鳳1,2,尚遠宏1,李學(xué)剛2,*

(1.攀枝花學(xué)院干熱河谷特色生物資源研發(fā)四川省高校重點實驗室,四川攀枝花 617000;2.西南大學(xué) 藥學(xué)院 重慶市藥效評價工程技術(shù)研究中心,重慶 400716)

本文探討分離玄參的化學(xué)成分,并研究玄參中分離出的化合物在 HepG2 細胞中降糖作用的影響。采用滲濾提取,結(jié)合大孔樹脂、硅膠柱層析、HSCCC色譜等分離方法,NMR波譜數(shù)據(jù)鑒定結(jié)構(gòu),MTT法檢測HepG2細胞活力,試劑盒檢測細胞消耗的葡萄糖。結(jié)果表明,分離出玄參中9個化合物:類葉升麻苷(1)、升麻素苷(2)、桃葉珊瑚苷(3)、哈巴苷(4)、蔗糖(5)、肉桂酸(6)、哈巴俄苷(7)、安格洛苷C(8)、二十七烷(9)。在0.1～2.5 μg/mL濃度范圍內(nèi),哈巴俄苷在HepG2細胞中降糖活性最好。其中,二十七烷為首次從該屬植物中分離得到,化合物7是一個潛在的降糖化合物,值得進一步研究和開發(fā)。

玄參,分離鑒定,降糖活性,哈巴俄苷

玄參為玄參科植物玄參(ScrophularianingpoensisHemsl.)的干燥根,且為藥食兩用的藥材,其中環(huán)烯醚萜類和苯丙素苷類是玄參屬植物的主要化學(xué)成分[1],藥理研究表明其具降壓、抗血小板聚集、增強免疫功能、降血糖、抗氧化和抗腫瘤等作用[2]。

糖尿病屬于代謝疾病,其主要表現(xiàn)為肝臟及其肌肉、脂肪組織等對葡萄糖的攝取存在障礙,以及肝臟葡萄糖輸出增多,使血液中的葡萄糖無法正常進入細胞,導(dǎo)致人體血糖升高的一種疾病[3]。傳統(tǒng)中醫(yī)對糖尿病的記載和治療有著悠久的歷史,各種中藥被廣泛用于糖尿病的治療?，F(xiàn)在,從傳統(tǒng)中藥方劑中篩選單味藥,再從中分離降糖活性成分已成為糖尿病治療藥物的研究熱點[4-5]。Kim等[6]發(fā)現(xiàn)丹東玄參和S.borealikoreanaNakai.對晶狀體醛糖還原酶的抑制作用要明顯強于S.takesimensisNakai.和北玄參。張寧等[7]探討了玄參及其各組分(粗分的提取物)對糖尿病大鼠的降血糖作用,發(fā)現(xiàn)玄參水煎液組和大/小環(huán)烯醚萜苷組對高脂飼料喂養(yǎng)并結(jié)合小劑量STZ注射所導(dǎo)致的2型糖尿病大鼠具有降血糖作用。但關(guān)于玄參及其分離的單體的降血糖藥理作用及其機制研究的文獻尚未見相關(guān)報道,因此本部分實驗為了能更好的開發(fā)利用玄參藥食兩用的價值,以南川區(qū)為來源地的玄參為研究對象,采用大孔樹脂、硅膠、Sephadex LH-20等[8]色譜技術(shù)進行提取分離純化,通過波譜數(shù)據(jù)進行分析和結(jié)構(gòu)鑒定其化學(xué)成分,并以HepG2細胞高糖模型來研究其降糖活性,為進一步研究玄參降糖藥效和開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

玄參來源于重慶南川區(qū)。玄參根經(jīng)西南民族大學(xué)化學(xué)與環(huán)境保護工程學(xué)院劉圓教授鑒定為ScrophularianingpoensisHemsl.的根。Sephadex LH-20 上海浩然生物技術(shù)有限公司;D101大孔樹脂、柱層析用硅膠(100～200目)和薄層層析硅膠板GF254 青島海洋化工廠;HepG2細胞株 第三軍醫(yī)大學(xué)現(xiàn)代高血壓研究所;胰蛋白酶、MTT Sigma公司;EDTA 鼎國生化試劑公司;葡萄糖酶法測定試劑盒、RPMI-1640細胞培養(yǎng)基 南京建成生物工程研究所;青、鏈霉素 Hyclone公司;特級胎牛血清 Gibco公司;48孔板、96孔板 Corning公司;其它試劑均為分析純。

YP6000N電子天平 上海精密儀器科技有限公司;玻璃層析柱 上海亞榮生化儀器廠;AM-500M核磁共振儀 瑞士Bruker公司;TOMY SS-325滅菌鍋 TOMY KOGYO有限公司;EOS BRAVO全自動生化分析儀 上海安泰分析儀器有限公司;BioTek ELx808全自動酶標讀數(shù)儀 美國伯樂公司;超凈工作臺 蘇州金燕凈化設(shè)備有限公司;二氧化碳培養(yǎng)箱 上海躍進醫(yī)療儀器廠;HHW-21CU-600B恒溫水浴鍋 上海?，攲嶒炘O(shè)備有限公司;AVANTI J-30I高速冷凍離心機 BECKMAN公司。

1.2 提取與分離

1.2.1 玄參的大孔樹脂提取 取6 kg干燥的玄參根,切片粉碎,在滲漉桶中加70%的乙醇提取48 h,三次,滲漉液合并,減壓濃縮成浸膏,玄參的浸膏得率約為28.4%。再取玄參的浸膏1420 g,溶于自來水中(上樣藥液比<5%),經(jīng)D101大孔樹脂柱色譜,依次用30%、60%、90%乙醇洗脫,減壓濃縮,回收乙醇,得30%乙醇浸膏為224 g、60%乙醇浸膏為105 g、90%乙醇浸膏為8 g。

1.2.2 柱層析分離 取30%乙醇浸膏100 g,經(jīng)硅膠(100～200目)柱色譜,以乙酸乙酯-甲醇(50∶1→1∶10)梯度洗脫,經(jīng)TLC檢識合并得到6個部位Fr. 1～6。Fr. 2經(jīng)硅膠、Sephadex LH-20分離得到化合物1(375 mg)、化合物2(350 mg)、化合物3(1.02 g);Fr. 4經(jīng)Sephadex LH-20、重結(jié)晶分離得到化合物4(2.45 g)、化合物5(68 mg)。

取60%乙醇浸膏20 g,硅膠柱色譜(100～200目),以氯仿-甲醇(25∶1→10∶1)梯度洗脫,經(jīng)TLC檢識合并得到4個部位Fr. 1～4。Fr.1經(jīng)氯仿-甲醇25∶1洗脫,重結(jié)晶分離得到化合物6(45 mg);Fr. 2經(jīng)高速逆流色譜(HSCCC)分離得到化合物7(0.44 g)和化合物8(0.62 g)。

取90%乙醇浸膏5 g,以石油醚-乙酸乙酯(25∶1→1∶1)梯度洗脫,經(jīng) TLC檢識合并得到4個部位 Fr. 1～4。Fr.2經(jīng)硅膠柱,用石油醚-乙酸乙酯(10∶1)洗脫,回收溶劑至干,適量乙酸乙酯溶解,再加適量甲醇而沉淀,過濾,沉淀放置后得白色粉末,為化合物9(22 mg)。

1.2.3 降糖活性

1.2.3.1 HepG2葡萄糖消耗實驗 參照相關(guān)文獻的方法[9-10],將胰酶消化好的HepG2細胞均勻地點在96孔板中(2×105個/mL),24 h后分別放入含有不同濃度的浸膏組分、化合物1～4,6～8的無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)。每種濃度設(shè)置3復(fù)孔,以200 μL PBS液為空白對照組。孵育24 h后,取115 μL培養(yǎng)基,用葡萄糖試劑盒在全自動生化分析儀上檢測培養(yǎng)基中葡萄糖殘存量。通過下式可以計算出細胞促進葡萄糖消耗量。為了考慮細胞增殖的影響,葡萄糖消耗最終結(jié)果用GC/MTT表示[10-11](其中,促進葡萄糖消耗量(GC)=空白培養(yǎng)基中葡萄糖殘存量-藥物組培養(yǎng)基中葡萄糖殘存量,MTT為“1.2.3.2 MTT實驗”中用酶標儀于490 nm波長下檢測各孔的吸光度值)。

1.2.3.2 MTT實驗 參照相關(guān)文獻[9],在剩下的培養(yǎng)基中加入15 μL MTT,37 ℃孵育4 h,加200 μL DMSO,振蕩10 min,用酶標儀在490 nm波長下檢測吸光度。

1.3 統(tǒng)計分析

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1(C29H36O15,acteoside),淡黃色無定形粉末,mp 135～136 ℃,UV365下顯藍色熒光。1H-NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:7.06(1H,d,J=2.0 Hz,H-2?),6.78(1H,d,J=8.0 Hz,H-5?),6.96(1H,dd,J=8.0,2.0 Hz,H-6?),7.58(1H,d,J=16.0 Hz,H-7?),6.25(1H,d,J=16.0 Hz,H-8?),6.70(1H,d,J=2.0 Hz,H-2),6.67(1H,d,J=8.0 Hz,H-5),6.56(1H,dd,J=8.0,2.0 Hz,H-6),2.79(2H,m,H-7),3.72(1H,dd,J=16.0,8.0 Hz,H-8),4.02(1H,dd,J=16.0,8.0 Hz,H-8),4.38(1H,d,J=8.0 Hz,H-1′),3.39(1H,dd,J=9.3,8.0 Hz,H-2′),3.81(1H,t,J=9.3 Hz,H-3′),3.52(1H,t,J=9.3 Hz,H-5′),3.52(1H,m,H-6′),3.60(1H,m,H-6′),5.20(1H,d,J=1.5 Hz,H-1″),3.93(1H,d,J=1.5 Hz,H-2″),3.58(2H,m,H-3″,5″),3.30(1H,m,H-4″),1.09(3H,d,J=6.0 Hz,H-6″);13C-NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:δ 168.35(C=O),131.46(C-1),117.17(C-2),146.14(C-3),144.09(C-4),116.62(C-5),121.26(C-6),36.56(C-7),72.26(C-8),104.18(C-1′),76.20(C-2′),81.65(C-3′),70.57(C-4′),76.02(C-5′),62.36(C-6′),103.02(C-1″),72.33(C-2″),72.04(C-3″),73.78(C-4″),70.41(C-5″),18.45(C-6″),127.63(C-1?),115.21(C-2?),144.61(C-3?),148.02(C-4?),116.30(C-5?),123.22(C-6?),146.83(C-7?),114.66(C-8?)。根據(jù)以上核磁的波譜資料與相關(guān)參考文獻的波譜資料基本一致,確定為類葉升麻苷[12]。

化合物2(C22H28O11,Prim-O-glucosylcimifugin),白色粉末,mp 126～128 ℃。1H NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:6.60(1H,s,8-H),6.37(1H,s,3-H),4.77(1H,m,2′-H),4.76(1H,d,J=13.8 Hz,-O-CH2a),4.58(1H,d,J=13.8 Hz,-O-CH2b),4.60(1H,d,J=7.8 Hz,1″-H),4.43(1H,m,6″a-H),3.93(3H,s,-OCH3),3.87(1H,m,6″b-H),3.68(1H,m,3′a-H),3.26-3.38(5H,in,3,b′-H及glc上2″,3″,4″,5″-H),1.29(3H,s,4′-CH3),1.24(3H,s,4′-CH3)。13C-NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:179.55(C-4),167.10(C-5),165.04(C-2),161.39(C-7),157.01(C-10),118.45(C-6),112.42(C-9),111.06(C-3),103.77(C-1″),94.15(-C8),92.07(C-2′),78.16,77.95(C-3″或C-5″),74.96(C-2″),72.21(C-4′),71.53(C-4″),67.14(2-O-CH2),61.82(C-6″),60.48(5-O-CH3),28.18(C-3′),25.40(CH3-4′),25.31(CH3-4′)。根據(jù)以上核磁的波譜資料與相關(guān)參考文獻的波譜資料基本一致,確定為升麻素苷[13]。

化合物3(C15H22O9，Aucubin),白色針狀結(jié)晶。1H-NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:6.32(1H,dd,J=6.1,1.8 Hz),5.76(1H,s),5.09(1H,dd,J=6.1,3.9 Hz),4.96(1H,d,J=7.2 Hz),4.68(1H,dd,J=8.0 Hz),4.44(1H,dd,J=3.3,1.7Hz),4.34,4.18(各1H,AB,J=15.4 Hz),3.87(1H,dd,J=12.8,1.5Hz),3.68(1H,dd,J=12.8,5.3 Hz),3.37(1H,t,J=8.5 Hz),3.32(1H,m),3.23(1H,dd,J=8.5,8.0 Hz),2.89(1H,t,J=7.2 Hz),2.66(1H,m)。13C-NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:148.02(C-8),141.98(C-3),130.24(C-7),105.71(C-4),99.92(C-1′),97.72(C-1),82.84(C-6),78.26(C-3′),77.89(C-5′),74.91(C-2′),71.56(C-4′),62.66(C-6′),61.41(C-10),47.93(C-9),46.27(C-5)。根據(jù)以上核磁的波譜資料與相關(guān)參考文獻的波譜資料基本一致,確定為桃葉珊瑚苷(mp 180～182 ℃)[14]。

化合物4(C15H24O10，Harpagide),mp 130～132 ℃,Amorphous powder.1H-NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:d 1.24(3H,s,H-10),1.78(1H,dd,J=13.7/5.1 Hz,H-7a),1.89(1H,dd,J=14.5 Hz,H-7b),2.54(1H,s,H-9),3.89(1H,d,J=4.0 Hz,H-6),4.94(1H,dd,J=6.4/1.4 Hz,H-4),5.74(1H,s,H-1),6.32(1H,d,J=6.4 Hz,H-3),4.57(1H,d,J=8.0 Hz,H-1″),3.21(1H,t,J=8.4 Hz,H-2″),3.37(1H,t,J=8.6 Hz,H-3″),3.30(1H,dd,J=8.1 Hz,H-4″),3.31(1H,dd,J=5.8/2.1 Hz,H-5″),3.66(1H,dd,J=12.5/5.8 Hz,H-6a″),3.70(1H,dd,J=12.5/2.1 Hz,H-6b″);13C-NMR(CD3OD,500 MHz)δ ppm:93.65(C-1),142.84(C-3),108.51(C-4),72.21(C-5),77.63(C-6),47.44(C-7),78.65(C-8),59.77(C-9),24.99(C-10);99.24(glcC-1′),74.73(glcC-2′),78.26(glcC-3′),71.66(glcC-4′),78.04(glcC-5′),63.03(glcC-6′)。根據(jù)以上核磁的波譜資料與相關(guān)參考文獻的波譜資料基本一致,確定為哈巴苷[15]。

化合物5(C12H22O11,D-(+)-sucrose),無色結(jié)晶,mp 169～172 ℃,1H-NMR(D2O,500 MHz)δ ppm:5.41(1H,d,J=3.9 Hz,H-1),4.22(1H,dd,J=3.5,9.8 Hz,H-3′),4.06(1H,m,H-4′),3.90(1H,H-5′),3.49(1H,m,J=5 Hz,H-4),3.58(1H,dd,J=l.5 Hz,H-2),3.68(2H,s,H-l′),3.83(2H,H-6′),3.82(2H,H-6),3.86(1H,H-5),3.76(1H,H-3),13C-NMR(D2O,500 MHz)δ ppm:103.64(C-2′),92.13(C-1),81.33(C-5′),76.36(C-3′),73.95(C-4′),72.52(C-3),72.36(C-5),71.03(C-2),69.18(C-4),62.32(C-6′),61.30(C-1′),60.07(C-6),以上資料與文獻報導(dǎo)的蔗糖資料一致[16]。

化合物6(C9H8O2，Cinnamic acid),白色粉末,mp 133～135 ℃。1H-NMR(CDCl3,500 MHz)δ ppm:7.82(1H,dd,H-2),7.57(2H,m,H-6),7.41(1H,m,H-4),7.40(2H,m,H-5),6.48(1H,dd,H-1);13C-NMR(CDCl3,500 MHz)δ ppm:172.74(C-1),147.30(C-2),134.22(C-3),130.94(C-4),129.15(C-5),128.57(C-6),117.51(C-7)。根據(jù)以上核磁的波譜資料與相關(guān)參考文獻的波譜資料基本一致,確定為肉桂酸[17]。

化合物7(Harpagoside,哈巴俄苷)和化合物8(Angroside C,安格洛苷C),已另文發(fā)表[18]。

化合物9(C27H56,Twenty-Seven alkane),白色蠟狀固體,mp 68.2 ℃,不溶于水、乙醇,易溶于石油醚、氯仿,可溶于苯、乙醚等有機溶劑中。無旋光性,無紫外吸收。1H-NMR(CD3OD,500 MHz):δ0.89(3H,t,J=7.0 Hz,Me),1.33-1.20(2H,α,β-CH2);13C-NMR(CD3OD,500 MHz):δ 14.31(C-1),22.89(C-2),32.13(C-3),29.57(C-4),29.90(C-5),29.90(C-6),29.90(C-7),29.90(C-8),29.90(C-9),29.90(C-10),29.90(C-11),29.90(C-12),29.90(C-13),29.90(C-14),29.90(C-15),29.90(C-16),29.90(C-17),29.90(C-18),29.90(C-19),29.90(C-20),29.90(C-21),29.90(C-22),29.90(C-23),29.57(C-24),32.13(C-25),22.89(C-26),14.31(C-27)。根據(jù)以上核磁的波譜資料與相關(guān)參考文獻的波譜資料基本一致,確定為二十七烷[19]。

2.2 玄參提取物及單體對HepG2細胞降糖活性的影響

實驗中用HepG2細胞進行細胞降糖活性部位篩選,結(jié)果見圖1。各分離組分的GC/MTT均有劑量依賴關(guān)系,且在同一劑量下,各分離組分的葡萄糖消耗能力為:二甲雙胍>過大孔樹脂分離后的60%乙醇組分>玄參的滲濾浸膏>過大孔樹脂分離后的30%乙醇組分>過大孔樹脂分離后的90%乙醇組分。其中以過大孔樹脂分離的60%乙醇組分為玄參降糖活性的主要活性部位,而過大孔樹脂分離的30%乙醇組分和過大孔樹脂分離的90%乙醇組分的降糖活性較差。

圖1 玄參中粗提物對HepG2 細胞降糖活性的影響±s,n=3)Fig.1 Effect of different parts from Scrophularia ningpoensis Hemsley extracts on glucose consumption).注:30%、60%、90%乙醇部分是過大孔樹脂分離中 各洗脫的組分,與二甲雙胍相比,*p<0.05,**p<0.01。

在對各組分進行了系統(tǒng)分離,而得到的9個化合物,其中蔗糖和二十七烷未用于細胞實驗的比較。從圖2可知,在0.1～2.5 μg/mL濃度下,各化合物對促進HepG2細胞降糖的活性具有一定的劑量依賴關(guān)系,且在同一濃度時,各化合物的葡萄糖消耗能力為:化合物7(哈巴俄苷)的活性最強,其次為化合物4、1、8,而3、2和6的活性較弱。

圖2 玄參中不同化合物對HepG2細胞 促進葡萄糖消耗的影響±s,n=3)Fig.2 Effect of compounds from Scrophularia ningpoensis Hemsley ethanol extracts on glucose consumption注:與二甲雙胍組相比,*p<0.05,**p<0.01。

2.3 玄參提取物及單體對HepG2細胞增殖的影響

MTT法測定玄參中各組分和化合物對HepG2細胞增殖的影響,結(jié)果見圖3和圖4。圖3結(jié)果表明,當(dāng)濃度大于0.1 mg/mL時,除過大孔樹脂分離的90%乙醇組分外,其余各藥物組均對細胞增殖有一定抑制作用,且作用顯著(p<0.05),這說明當(dāng)濃度超出一定范圍時,玄參中各組分對HepG2細胞消耗葡萄糖的促進作用均受到抑制,其細胞毒性較大,會抑制細胞的增殖。而結(jié)合圖1可知,對于90%乙醇組分,雖細胞毒性較小,但葡萄糖消耗能力較差,其組分的降糖效果最不明顯。當(dāng)濃度小于0.1 mg/mL時,60%乙醇組分的細胞存活率較好,而圖1中其葡萄糖消耗能力較高,再次說明了該組分為玄參降糖活性的主要活性部位。

圖3 玄參的浸膏中不同部分 對HepG2細胞增殖的影響Fig.3 Dose dependent cytotoxicity of different fractions of Scrophularia ningpoensis Hemsley extracts注:與空白對照組相比,*p<0.05,**p<0.01。

圖4結(jié)果表明,在0.1～2.5 μg/mL濃度下,化合物1～4,6～8的細胞存活率均較高。而從圖2和圖4可知,哈巴俄苷的葡萄糖消耗能力最高,對促進HepG2細胞降糖的活性具有一定的劑量依賴關(guān)系。

圖4 玄參中不同化合物對HepG2 細胞增殖的影響Fig.4 Dose dependent cytotoxicity of different compound

哈巴俄苷在HepG2細胞中降糖活性為玄參中首次發(fā)現(xiàn),為進一步研究玄參的物質(zhì)基礎(chǔ)奠定了基礎(chǔ),但是單一某種細胞模型實驗并不能完全確定玄參中化學(xué)成分的降糖作用的影響,還需要結(jié)合體外的多種細胞實驗和體內(nèi)高糖動物實驗等來進一步研究分子機制,同時,玄參中其它未分離的成分是否有較好的降糖作用也需進一步的探討。

3 結(jié)論

本實驗對玄參70%乙醇提取物的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究,從中分離得到9個化合物,分別鑒定為類葉升麻苷、升麻素苷、桃葉珊瑚苷、哈巴苷、蔗糖、肉桂酸、哈巴俄苷、安格洛苷C、二十七烷。同時,采用人肝癌細胞HepG2建立了高糖細胞模型,分離的化合物對降糖的活性均具有不同程度的促進作用,且在0.1～2.5 μg/mL濃度范圍內(nèi),哈巴俄苷在HepG2細胞中降糖活性最好。其中,二十七烷為首次從該屬植物中分離得到,哈巴俄苷是一個潛在的降糖化合物,值得進一步研究和開發(fā)。

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Study on the separation of chemical componentsand hypoglycemic activity ofScrophularianingpoensisHemsl.

TIAN Jin-feng1,2,SHANG Yuan-hong1,LI Xue-gang2,*

(1. Key Laboratory of Dry-hot Valley Characteristic Bio-Resources Development at university ofSichuan Province,Panzhihua University,Panzhihua 617000,China;2.College of Pharmacetical Sciences,Southwest University,Chongqing EngineeringResearch Center for Pharmacodynamics Evaluation,Chongqing 400716,China)

This paper investigated the action of hydrophilic constituents fromScrophularianingpoensisHemsl. on glucose-lowering effect metabolism in HepG2 cells. The crude extract by diacolating with 70% ethanol was redissolved in water and was loaded on a glass column containing D101 macroporous resin,and was separated by silica gel column and HSCCC to obtain compounds. The structures of compounds were identified by1H and13C-NMR spectroscopic data,and cell assay was performed by MTT and Kit methods in high glucose model. Compounds were identified as acteoside(1),prim-O-glucosylcimifugin(2),aucubin(3),harpagide(4),D-(+)-sucrose(5),cinnamic acid(6),harpagoside(7),angroside C(8)and twenty-seven alkane(9). Antihyperglycemic activity of each compounds in 0.1～2.5 μg/mL concentration range was selected,and glucose consumption ability of harpagoside was the highest. Twenty-seven alkane was isolated from the genus ofScrophularianingpoensisHemsl. for the first time. Antihyperglycemic activity of compound 7 ofScrophularianingpoensiswould be potentialand rich resources for drug development.

ScrophularianingpoensisHemsl.;separation and identification;antihyperglycemic activity;harpagoside

2016-12-08

田金鳳(1981-)，女，博士，研究方向：天然產(chǎn)物化學(xué)，E-mail：tjfasyh@163.com。

*通訊作者:李學(xué)剛(1964-)，男，博士，教授，研究方向：中藥，E-mail：shyh611@126.com。

四川省教育廳重點基金項目(14ZA0345,15ZA0370)；四川省高校重點實驗室開放基金項目(GR-2015-E-01,szjj2017-110)；攀枝花市社會發(fā)展科技計劃項目(2014TX-10-3,2016CY-S-10)；攀枝花學(xué)院博士科研啟動經(jīng)費項目(bkqj2015026,bkqj2015023)。

TS201.1

A

1002-0306(2017)13-0025-05

10.13386/j.issn1002-0306.2017.13.005