抗菌肽RISE-AP12聯(lián)合中藥湯劑對(duì)種植體周圍炎齦溝液炎癥因子的影響

董穎韜，賈斌

（北京市崇文口腔醫(yī)院，北京100062）

抗菌肽RISE-AP12聯(lián)合中藥湯劑對(duì)種植體周圍炎齦溝液炎癥因子的影響

董穎韜，賈斌

（北京市崇文口腔醫(yī)院，北京100062）

目的探討抗菌肽RISE－AP12聯(lián)合中藥湯劑治療對(duì)種植體周圍炎齦溝液炎癥因子的影響。方法選擇2010年3月至2015年10月醫(yī)院收治的種植體周圍炎患者80例（種植體146枚），按隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，各40例（種植體各73枚）。兩組患者均行牙周基礎(chǔ)治療，雙氧水漱口，鹽酸米諾環(huán)素軟膏留置，每周1次治療，4周為1療程，連續(xù)治療2個(gè)療程；口服中藥湯劑，每日2次，4周為1個(gè)療程，連續(xù)治療2個(gè)療程。觀察組患者在此基礎(chǔ)上加用抗菌肽RISE－AP12含漱，每日3次。結(jié)果治療后，兩組患者菌斑指數(shù)（PLI）、探診深度（PD）和齦溝出血指數(shù)（SBI）水平均降低，且觀察組降低更明顯（P＜0.05）。兩組患者齦溝液中白細(xì)胞介素6（IL－6）、一氧化氮合酶（NO）、基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP－2）表達(dá)均降低，且觀察組降低更明顯（P＜0.05）。兩組患者可溶性血管黏附分子1（sVCAM－1）、E型鈣黏附分子（E－cadherin）均降低，骨保護(hù)因子（OPG）均升高，且觀察組變化更優(yōu)（P＜0.05）。雖觀察組總不良反應(yīng)發(fā)生率高于對(duì)照組（P＜0.05），但癥狀均較輕微，不影響治療。結(jié)論抗菌肽RISE－AP12聯(lián)合中藥牙周基礎(chǔ)治療可顯著改善種植體周圍炎患者的臨床體征，并顯著降低患者齦溝液中炎癥因子、黏附因子表達(dá)，促進(jìn)OPG表達(dá)，不良反應(yīng)均輕微，經(jīng)對(duì)癥處理后不影響治療，值得臨床推廣。

抗菌肽RISE－AP12；中藥；種植體周圍炎；牙周基礎(chǔ)治療；齦溝液；炎癥因子

口腔種植技術(shù)是目前治療牙缺失或受損的主要技術(shù)[1]，而種植體在口腔內(nèi)存留時(shí)間是評(píng)價(jià)種植技術(shù)成功與否的重要指標(biāo)。種植體周圍炎是發(fā)生在已形成骨結(jié)合的種植體，在行使正常功能后出現(xiàn)的可逆性牙周黏膜炎癥，如不及時(shí)治療可導(dǎo)致骨功能喪失而使種植體松動(dòng)[2－3]。研究顯示[4]，在種植體植入的5～10年中約有將近1／10的患者出現(xiàn)種植體周圍炎，表現(xiàn)為口腔疼痛、牙周腫脹、嚴(yán)重影響生活質(zhì)量，目前針對(duì)此類疾病主要采用牙周基礎(chǔ)治療，嚴(yán)重者可配合口服抗生素，但抗生素因存在過敏及不良反應(yīng)的問題，使其應(yīng)用具有一定限制性。中醫(yī)認(rèn)為，種植體周圍炎是外感毒邪上犯于上焦所引起的氣血失和，治療以瀉熱止痛、清火解毒為法[5]?？诜兴帨珓┮渣S連上清散加減，具有清熱瀉火止痛的功效，可用于口腔牙齦紅腫熱痛等諸癥?？咕腞ISE－AP12為人工合成的新制劑，抗菌譜更廣，抗耐藥性更強(qiáng)，高效低毒，在口腔疾病的治療中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)[6]。本研究中擬對(duì)我院種植體周圍炎患者采用牙周基礎(chǔ)治療配合口服中藥湯劑，觀察其臨床療效及對(duì)齦溝液中炎癥因子表達(dá)水平的影響，為臨床治療提供參考。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

納入標(biāo)準(zhǔn)[7]：均行種植修復(fù)術(shù)超過1年；表現(xiàn)為種植體牙周組織充血水腫、質(zhì)軟，種植體無松動(dòng)，周圍有種植體周圍袋；近中或遠(yuǎn)中的齦溝出血指數(shù)≥1；牙周探診深度≥3 mm；種植體牙周組織可有膿液溢出或出現(xiàn)竇道，X線攝片顯示出現(xiàn)骨吸收透影區(qū)。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：治療前1個(gè)月大劑量應(yīng)用抗生素、非甾體類藥物或采用其他方式治療種植體周圍炎；合并其他牙周疾??；糖尿病且血糖控制不佳；白塞氏病、血管炎、結(jié)締組織病等相關(guān)免疫疾病；合并嚴(yán)重臟器的器質(zhì)性病變；妊娠或哺乳期；精神類疾病依從性不佳；對(duì)本研究所用藥物過敏。

病例選擇與分組：選擇2010年3月至2015年10月在我院治療的種植體周圍炎患者80例（種植體146枚，每例患者≥1枚），按隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，各40例（種植體各73枚）。兩組患者年齡、性別、病程、種植體植入時(shí)間等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。詳見表1。

表1 兩組患者一般資料比較（n＝40）

1.2 方法

所有患者均囑咐采用漱口水清潔口腔，采用牙線等工具清潔，在此基礎(chǔ)上給予牙周基礎(chǔ)治療，采用超聲潔牙機(jī)行潔治術(shù)，同時(shí)采用齦上、下潔治，平整根面，調(diào)整咬合，術(shù)后采用雙氧水及生理鹽水反復(fù)沖洗牙周袋；采用鹽酸米諾環(huán)素軟膏（日本SUN－STARINC株式會(huì)社藥廠，國藥準(zhǔn)字H20100244，規(guī)格為0.5 g）留置于牙周0.5 h，每周1次治療，4周為1個(gè)療程，連續(xù)治療2個(gè)療程；口服中藥湯劑，組方黃連10 g，大黃10 g，連翹10 g，薄荷6 g，旋覆花6 g，黃芩10 g，荊芥6 g，梔子10 g，防風(fēng)10 g，石膏15 g，桔梗6 g，黃柏10 g，蔓荊子（炒）10 g，白芷10 g，甘草6 g，加水煮至200m L，每日2次，4周為1個(gè)療程，連續(xù)治療2個(gè)療程。觀察組患者在此基礎(chǔ)上給予抗菌肽RISE－AP12（美國銳瑟公司）含漱，每日3次。

1.3 觀察指標(biāo)與臨床療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[8]

觀察患者菌斑指數(shù)（PLI）、探診深度（PD）、齦溝出血指數(shù)（SBI）。PLI評(píng)分：無菌斑為0分，探針輕劃種植體表面即可看到菌斑為1分，肉眼可見菌斑為2分，大量菌斑為3分。PD評(píng)分：保證同一醫(yī)師采用均一力度使用探針探測(cè)齦緣到牙周袋底的間距，記錄6個(gè)部位，分別為頰側(cè)及舌側(cè)的近中、中央、遠(yuǎn)中部位，取平均深度。SBI評(píng)分：保證同一醫(yī)師采用均一力度使用探針沿種植體齦緣探診，無出血為0分，點(diǎn)狀出血為1分，線狀出血為2分，重度出血為3分，自發(fā)出血為4分。

齦溝液中炎癥因子：治療前后對(duì)兩組患者的牙種植體周圍齦溝液采用濾紙進(jìn)行提取，將齦溝液提取存放于－80℃行下一步測(cè)定。采用夾心法ELISA檢測(cè)齦溝液中炎癥因子，包括白細(xì)胞介素6（IL－6）、一氧化氮合酶（NO）、基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP－2）的表達(dá)。

齦溝液中黏附分子及骨保護(hù)因子（OPG）：采用同一批齦溝液標(biāo)本，采用夾心法ELISA檢測(cè)，包括可溶性血管黏附分子1（sVCAM－1）、E型鈣黏附分子（E－cadherin），采用real－time PCR檢測(cè)OPG表達(dá)。

在治療期間密切觀察兩組患者的臨床表現(xiàn)，記錄不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0版軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分比表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果見表2至表5。

3 討論

目前，口腔種植技術(shù)在全球范圍內(nèi)廣泛應(yīng)用[9]，但存在一定的遠(yuǎn)期失敗率，由于清潔不當(dāng)，口腔內(nèi)大量細(xì)菌滋生牙菌斑，而種植體與骨組織之間缺乏天然牙齒周圍的牙周膜，導(dǎo)致種植體缺乏一層天然的保護(hù)屏障，抵抗力差，易受細(xì)菌影響發(fā)生炎癥[10]。種植體周圍炎初期表現(xiàn)為牙周黏膜出現(xiàn)的炎癥反應(yīng)，多表現(xiàn)為軟組織紅腫，探診可伴有出血；隨著病程發(fā)展可見牙周袋形成，種植體附著水平降低出現(xiàn)松動(dòng)，X線攝片顯示種植體骨密度下降，存在骨質(zhì)吸收等[11]。牙齦溝內(nèi)的齦溝液具有天然的殺菌成分，當(dāng)種植體周圍炎發(fā)生時(shí)，齦溝液中會(huì)產(chǎn)生各類炎癥因子，其中IL－6作為由中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等合成分泌的一種重要趨化因子[12]，可直接參與炎癥反應(yīng)，并對(duì)損傷組織的細(xì)胞因子進(jìn)行放大作用，對(duì)牙周組織進(jìn)行損害；NO具有細(xì)胞毒作用，在炎癥發(fā)生時(shí)，可被過度釋放，打破局部促炎及抗炎因子的循環(huán)，加劇炎癥過程；MMP－2是對(duì)牙周組織進(jìn)行破壞的炎癥因子，能降解膠原纖維及蛋白，破壞細(xì)胞外基質(zhì)[13]。sVCAM－1及E－cadherin為具有黏附作用的免疫球蛋白，可募集更多的炎癥因子向局部黏附，加重炎癥反應(yīng)。OPG是反應(yīng)骨質(zhì)破壞的一類配體，當(dāng)骨質(zhì)遭到炎癥的破壞，破骨細(xì)胞活躍時(shí)，OPG的表達(dá)開始降低，因此可反映牙槽骨被破壞程度[14]。

表2 兩組患者PLI，PD，SBI比較（s，n＝40）

表2 兩組患者PLI，PD，SBI比較（s，n＝40）

注：與治療前相比，＃P＜0.05；與對(duì)照組治療后比較， P＜0.05。表3和表4均同。

組別PLI（分）PD（mm）SBI（分）對(duì)照組觀察組治療前2.46±0.42 2.50±0.50治療后2.09±0.34＃1.87±0.33＃治療前4.30±0.52 4.23±0.55治療后3.19±0.45＃2.98±0.36＃治療前3.62±1.02 3.65±1.04治療后2.06±0.25＃1.81±0.23＃

表3 兩組患者齦溝液中炎癥因子表達(dá)水平比較（s，n＝40）

表3 兩組患者齦溝液中炎癥因子表達(dá)水平比較（s，n＝40）

IL－6（ng／mL）NO（ mol／L）MMP－2( g／L)組別對(duì)照組觀察組治療前39.50±2.52 39.69±2.08治療后25.72±1.99＃22.69±1.57＃治療前3.82±0.64 3.92±0.56治療后1.38±0.34＃1.10±0.32＃治療前223.10±23.01 230.45±24.97治療后130.12±19.24＃110.01±17.00＃

表4 兩組患者sVCAM－1，E－cadherin，OPG表達(dá)水平比較（s，n＝40）

表4 兩組患者sVCAM－1，E－cadherin，OPG表達(dá)水平比較（s，n＝40）

組別sVCAM－1（ng／L）E－cadherin（ng／L）OPG對(duì)照組觀察組治療前104.50±17.52 105.69±18.08治療后78.72±8.99＃63.69±7.57＃治療前70.82±10.64 71.92±0.56治療后39.38±7.34＃35.10±6.32＃治療前45.10±7.01 46.45±6.97治療后86.12±9.24＃91.01±9.00＃

表5 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較[例（%），n＝40]

中醫(yī)認(rèn)為[15]，口腔內(nèi)產(chǎn)生的炎癥屬于外感風(fēng)火邪毒侵犯上焦，導(dǎo)致局部氣血失和，發(fā)為紅腫熱痛、種植體周圍炎被認(rèn)為上焦火熱邪犯的一種，治療當(dāng)以清熱瀉火、疏風(fēng)止痛為法。本研究中使用的中藥均具有疏風(fēng)解毒、清熱去火功效，其中黃連、黃芩、黃柏、大黃均是清熱瀉火要藥，配伍可清三焦火邪。大黃泄腑通便并給邪以通路，梔子清心導(dǎo)赤，連翹解上焦火熱之毒，蔓荊子疏風(fēng)散邪，各藥配伍重在瀉火解毒，同時(shí)疏風(fēng)止痛。

抗菌肽是一種廣泛存在于真核細(xì)胞生物體內(nèi)的小分子多肽，具有廣譜抗細(xì)菌作用?？咕暮臀⑸镏g通過電荷相互作用或由受體介導(dǎo)發(fā)生接觸后，在細(xì)胞膜積累進(jìn)而破壞膜結(jié)構(gòu)完整性，導(dǎo)致細(xì)胞死亡[16]?？咕腞ISE－AP12為人工合成新型抗菌肽，比天然抗菌肽具有更高的抗菌能力和極高的抗耐藥性，對(duì)人體自身細(xì)胞影響小。此外，在口腔感染中，內(nèi)毒素可攻擊根尖周的成纖維細(xì)胞，促使其壞死而破壞根尖周的屏障作用，抗菌肽則RISE－AP12可中和內(nèi)毒素，具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)[17]。

本研究結(jié)果顯示，采用口服中藥湯劑結(jié)合抗菌肽、牙周基礎(chǔ)治療種植體周圍炎患者，治療后PLI，SBI，PD較對(duì)照組顯著改善，且治療組治療后齦溝液中的炎癥因子、黏附因子的表達(dá)也較對(duì)照組治療后顯著下降，OPG較對(duì)照組治療后顯著升高。

綜上所述，口服中藥湯劑聯(lián)合抗菌肽RISE－AP12治療種植體周圍炎可顯著改善種患者臨床體征，并顯著降低齦溝液中炎癥因子、黏附因子的表達(dá)，促進(jìn)OPG的表達(dá)，不良反應(yīng)較輕微，經(jīng)對(duì)癥處理后不影響治療，值得臨床推廣。

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Effect of Antibacterial Pep tide RISE－AP12 Com bined w ith Traditional Chinese M edicine Decoction on Inflamm atory Factors in Peri－Im p lant Crevicu lar Fluid

Dong Yingtao,Jia Bin

(Chongwen Stomatological Hospital,Beijing,China 100062)

Ob jective To investigate the effect of Antibacterial Peptide RISE－AP12 combined with traditional Chinese medicine(TCM) decoction on inflammatory factors in peri－implant crevicular fluid.M ethods 80 patients(146 implants)with periimplantitis admitted to our hospital from March 2010 to October 2015 were random ly divided into the observation group and the control group,40 cases(73 imp lants)in each group.The patients in the two groups were given periodontal treatment,hydrogen peroxide mouthwash,minocycline hydrochloride ointment lien,once weekly treatment for 4 weeks as a course of treatment,continuous treatment for 2 courses,at the same time,the patients were given TCM decoction,4 weeks as a course of treatment,continuous treatment for 2 courses,on this basis,the observation group was treated with Antimicrobial Peptide RISE－AP12 gargle,3 times／d.Results After treatment,The PLI,PD,SBI levels in the two groups were significantly decreased,and the observation group decreased more significantly(P＜0.05).After treatment, the expression of IL－6,NO,MMP－2 in the two groups were significantly decreased,and the observation group decreased more significantly(P＜0.05).After treatment,the sVCAM－1,E－cadherin in the two groups were significantly decreased,but OPG were significantly increased,and the observation group improved more significantly(P＜0.05).The incidence of adverse reactions in the observation group was higher than that in the control group(P＜0.05),but the symptoms were mild and did not affect the treatment.Conclusion Antibacterial Peptide RISE－AP12 combined with TCM decoction can significantly improved clinical signs of patients with periimplantitis,significantly decreased the expression of inflammatory factors and adhesion factors in peri－implant crevicular fluid and promote the expression of osteoprotegerin,the adverse reactions are mild and it does not affect the treatment after symptomatic treatment,it is worthy of clinical promotion.

Antibacterial Peptide RISE－AP12;traditional Chinese medicine;periimplantitis;initial periodontal therapy;grevicular fluid;inflammatory factors

R969.4；R988.2

A

1006－4931(2017)11－0060－04

2017－03－09)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.11.020