洗衣粉對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞的微核誘變效應(yīng)研究

馮航

摘要 根據(jù)微核誘導(dǎo)原理，利用蠶豆根尖細(xì)胞微核檢測(cè)技術(shù)對(duì)洗衣粉的毒性狀況做出客觀(guān)評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：洗衣粉會(huì)誘導(dǎo)微核的產(chǎn)生，說(shuō)明洗衣粉在超過(guò)一定濃度時(shí)對(duì)生物細(xì)胞是有毒的。

關(guān)鍵詞 蠶豆根尖細(xì)胞；洗衣粉；微核誘變效應(yīng)

中圖分類(lèi)號(hào) R961 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2016）16-0177-01

現(xiàn)階段，全球生態(tài)破壞、資源浪費(fèi)和短缺、環(huán)境污染等問(wèn)題嚴(yán)重。為探明環(huán)境污染對(duì)生物機(jī)體是否有蓄積毒作用，必須從環(huán)境的一致性下手。環(huán)境的一致性指環(huán)境中物理或化學(xué)污染物對(duì)生物的致畸、致癌、致突變性。“三致”中的致畸、致癌常常是致突變的結(jié)果。

微核是真核生物細(xì)胞經(jīng)各種理化因子作用后引起染色體畸變，在間期細(xì)胞中的一種變現(xiàn)形式。微核是常用的遺傳毒理指標(biāo)之一，指示染色體或紡錘體的損傷。由于這種損傷會(huì)與細(xì)胞受到的外界因子的劑量呈正比，因此可用微核出現(xiàn)的頻率來(lái)評(píng)價(jià)環(huán)境誘發(fā)因子[1]。

蠶豆根尖細(xì)胞微核試驗(yàn)（MCNT）技術(shù)是以染色體斷裂及紡錘體損傷為測(cè)試終點(diǎn)的植物微核監(jiān)測(cè)方法。它靈敏度高、操作技術(shù)簡(jiǎn)單，用于監(jiān)測(cè)環(huán)境致突變的誘變活性對(duì)人體和其他生物體遺傳物質(zhì)產(chǎn)生危害的技術(shù)。本試驗(yàn)以蠶豆作試驗(yàn)材料，采用MCNT技術(shù)，來(lái)檢測(cè)洗衣粉。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

蠶豆（根尖細(xì)胞的染色體大，DNA含量高，對(duì)誘變因子反應(yīng)敏感）、奇強(qiáng)洗衣粉。95%乙醇、鹽酸、吉姆薩染液。顯微鏡、試管、蠶豆培養(yǎng)盆、紗布、燒杯、培養(yǎng)皿、載玻片、凹面載玻片、小刀、恒溫水浴鍋、鑷子、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 浸種胚芽。將試驗(yàn)用蠶豆按需要放入盛水燒杯中，在25 ℃下浸泡24 h。在此期間至少換2次水，所換水應(yīng)25 ℃預(yù)溫。種子吸脹后用毛巾松散包裹置洗臉盆中，保持溫度，催芽12～24 h，待初生根長(zhǎng)2～3 mm，再取發(fā)芽良好的種子，放入鋪滿(mǎn)濾紙的洗臉盆中，25 ℃繼續(xù)催芽，經(jīng)36～48 h，大部分初生根長(zhǎng)至1～2 cm，根發(fā)育良好，此時(shí)可用來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)[2]。

1.2.2 檢測(cè)因子處理根尖。選取初生根生長(zhǎng)良好、根長(zhǎng)一致的種子，放入盛有被測(cè)液的培養(yǎng)皿中，被測(cè)液浸沒(méi)根尖即可。

1.2.3 根尖細(xì)胞恢復(fù)培養(yǎng)。處理后的種子用自來(lái)水浸洗3次，每次2～3 min。洗凈后再置入有濕潤(rùn)濾紙的瓷盤(pán)中，25 ℃下再恢復(fù)培養(yǎng)24 h。

1.2.4 制片。從根尖頂端切下1 cm長(zhǎng)的幼根，用卡諾固定液固定24 h，用蒸餾水浸洗固定好的幼根，60 ℃水浴鹽酸酸解15 min。取適量根尖用吉姆薩染液染色15 min，壓片。

1.2.5 鏡檢。細(xì)胞核呈紫紅色，背景基本為無(wú)色，然后在視野內(nèi)統(tǒng)計(jì)微核數(shù)目。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)《全國(guó)生物技術(shù)監(jiān)測(cè)規(guī)范—蠶豆根尖微核技術(shù)》規(guī)定的污染指數(shù)劃分標(biāo)準(zhǔn)，參考陳光榮等的試驗(yàn)方法，利用污染指數(shù)（PI）值來(lái)劃分污染程度。洗衣粉對(duì)蠶豆根尖微核率百分比和污染指數(shù)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1?？梢钥闯觯?個(gè)試驗(yàn)組的微核率分別為4.62%、5.37%、5.06%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了對(duì)照組的1.94%的微核率。由此表明，各試驗(yàn)組的洗衣粉均具有一定的污染性，且污染程度隨著微核率的上升而加重。污染指數(shù)（PI）為試驗(yàn)組的微核百分率與對(duì)照組的微核百分率的比值，PI≤1.5時(shí)，洗衣粉幾乎沒(méi)有污染；1.53.5時(shí)，洗衣粉為重度污染。由表1可知，試驗(yàn)組的PI值都在2.0～3.5的范圍內(nèi)。由此表明，洗衣粉的污染指數(shù)為中度污染，表明洗衣粉具有一定的毒性[3-4]。

3 結(jié)論與討論

前人研究結(jié)果表明，不同長(zhǎng)度的蠶豆根尖對(duì)于微核率有較大的影響，雖然在選材時(shí)選用了顆粒飽滿(mǎn)、體積重量相近的蠶豆，但在同樣時(shí)間的成長(zhǎng)中卻不可避免地造成根尖生長(zhǎng)程度不可能絕對(duì)相同，因此對(duì)于微核率有相對(duì)的影響。

由不同的洗衣粉的微核率可得，不同洗衣粉的濃度對(duì)人們的傷害是不同的，因此應(yīng)該減少洗衣粉的用量。洗衣粉是人們生活中洗衣服的必需品，它的作用就是幫助人們花更少的精力洗凈衣服上的污漬。但洗衣服使用過(guò)多對(duì)人體是有損傷的，人們選擇洗衣粉的時(shí)候應(yīng)根據(jù)自身的實(shí)際情況選擇低濃度的洗衣粉。

該試驗(yàn)結(jié)果表明，日常洗漱用品可能具有一定的毒性，作用于蠶豆根尖后引起染色體畸變，由此可推斷對(duì)人體也有可能致癌、致畸、致突變，提醒人們選擇安全的洗漱用品，減少使用含有害化學(xué)物質(zhì)的日常用品。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 蠶豆根尖微核試驗(yàn)的應(yīng)用與發(fā)展[J].癌變·畸變·突變，1999，11（3）：337.

[2] 王玉鵬.微核試驗(yàn)方法及在環(huán)境監(jiān)測(cè)中應(yīng)用的發(fā)展趨勢(shì)[J].環(huán)境與健康雜志1999，16（6）：378-379.

[3] 胡振東，蠶豆微核測(cè)定技術(shù)及其應(yīng)用[J].淮北煤師院學(xué)報(bào)，2000，21（4）：65-67.

[4] 鄧冰，穆龍，周銀行.采用蠶豆根尖細(xì)胞微核技術(shù)檢測(cè)核設(shè)施周?chē)虻倪z傳毒性[J].癌變·畸變·突變，2016，28（2）：141-144.