分析5%葡萄糖注射液中外源性抗氧劑的測(cè)定

＊陳敏 雷翔霄 王洋 張賈亮

（常州方圓制藥有限公司工程中心 江蘇 213125）

分析5%葡萄糖注射液中外源性抗氧劑的測(cè)定

＊陳敏 雷翔霄 王洋 張賈亮

（常州方圓制藥有限公司工程中心 江蘇 213125）

利用HPLC方法對(duì)5%葡萄糖注射液內(nèi)抗氧劑1010與168的含量進(jìn)行檢測(cè)，側(cè)重點(diǎn)在于專研抗氧劑在注射液內(nèi)的遷移情況。結(jié)果顯示抗氧劑1010在0.61～363.66mg·L-1范疇內(nèi)線性關(guān)系優(yōu)良，抗氧劑168在1.21～362.66mg·L-1區(qū)間內(nèi)線性關(guān)系優(yōu)良?？梢娡庠葱钥寡鮿┰?%葡萄糖注射液中發(fā)生了遷移。

5%葡萄糖注射液；外源性抗氧劑；測(cè)定形式；線性關(guān)系

在實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)程中，應(yīng)用的色譜柱為伊利特C18柱，流動(dòng)相為乙睛一四氫呋喃一水，其流動(dòng)速率1．5mL·min-1，檢測(cè)波長度為276nm。具體是以三種不同的聚丙烯輸液瓶為研究對(duì)象，研究結(jié)構(gòu)復(fù)雜以及性質(zhì)不穩(wěn)定的強(qiáng)氧化劑是否能夠與藥物之間產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，以及工業(yè)抗氧化劑是否能夠從外包裝滲入進(jìn)藥液內(nèi)，對(duì)抗氧化劑的滲出狀況進(jìn)行思考研究。

1.實(shí)驗(yàn)器具、試劑及樣品

(1)實(shí)驗(yàn)器具

液相色譜儀為島津LC 20AD型（由日本島津生產(chǎn)）；電子分析天平，梅特勒XS 105型（由梅特勒一托利多儀器有限公司生產(chǎn)）；固相苯取柱為PEP SPE 60mg/3mL Agela Cleanert型（由安吉爾提供）。

(2)試劑與藥品

抗氧劑1010，抗氧劑168（均由西格瑪奧德里齊公司提供）；三批次聚丙烯輸液瓶（由六安鵬誠醫(yī)藥包裝有限公司提供），批號(hào)如下：081202、081203、081204。河南和江蘇生產(chǎn)并提供聚丙烯輸液瓶均為1批，批號(hào)如下：090301、090113；其它試劑均或分析純或色譜純。

2.方法

(1)對(duì)波長的檢查與測(cè)量

分別量取抗氧劑1010、168適量，融入流動(dòng)相配制對(duì)照品溶液，將其擱置于紫外分光光度計(jì)內(nèi)對(duì)其波長進(jìn)行整體化掃描，掃描結(jié)果表明上述兩類抗氧劑在270-280nm區(qū)間內(nèi)吸收量最大，在上述區(qū)段內(nèi)吸收峰波動(dòng)幅度不大，鑒于溶劑對(duì)其影響程度微小的緣故，所以將檢測(cè)波長設(shè)定為276nm。

(2)系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

量取適量抗氧劑，與流動(dòng)相配置混合對(duì)照液，參照色譜條件對(duì)樣，錄入色譜圖。繼而采用單一化的對(duì)照措施，對(duì)溶液1010、168-1、168-2性質(zhì)進(jìn)行定位務(wù)必參照一定的規(guī)律，結(jié)果顯示抗氧劑168更容易被氧化，有磷酸鹽與亞磷酸鹽物質(zhì)出現(xiàn)。通過檢測(cè)上述兩種物質(zhì)峰面積總和具有統(tǒng)計(jì)意義，所以本實(shí)驗(yàn)借助兩者峰總面積進(jìn)行計(jì)算。已知抗氧劑色譜峰和相鄰峰之間的分離度R高于1．5，理論板數(shù)N也不小于3000。研究結(jié)果證明，依照上述因素，1010與168抗氧劑和其余成分之間能出現(xiàn)基線分離現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)過程中始終要確保供試品中抗氧劑存留時(shí)間和對(duì)照品之間的一致性，空白樣品對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無任何影響（見圖1～3）。

圖2 樣品液色譜圖

圖3 空白色譜圖

(3)供試液制備方式

葡萄糖注射液中抗氧劑的遷移量與粒料數(shù)目、瓶內(nèi)抗氧劑量等因素相關(guān)聯(lián)，為了對(duì)氧化劑遷移模式有一個(gè)全面的認(rèn)知，對(duì)粒料與瓶內(nèi)抗氧劑開展了溶液配置工作，為檢測(cè)環(huán)節(jié)提供便捷性。將苯與甲醇按照2：3的比例混合洗滌燒瓶與漏斗，把洗滌液注入進(jìn)濾液內(nèi)至0．25L，量取0．05L對(duì)其采取烘干策略，量取等體積的四氫呋喃和乙睛混合液，將剩余物投入其中，定容到5．0 mL，應(yīng)用0． 45um濾膜對(duì)其進(jìn)行過濾，以備用。

對(duì)抗氧劑遷移量檢測(cè)用于供試液配置環(huán)節(jié)：首先對(duì)樣品事先做好處理，即用天平稱取樣品30．0g，對(duì)其施以搗碎舉措，繼而將其置于燒杯內(nèi)，用400mL蒸餾水對(duì)其清洗，在25℃室溫環(huán)境下待樣品干燥以后，將其導(dǎo)入錐形瓶內(nèi)，兌入200mL的5%葡萄糖溶液，將其置于高壓蒸汽火菌器內(nèi)，加熱到125℃，維持0．5h，冷卻到25℃，取出即獲得樣品液，對(duì)其采用均等分配，一份備用。

固相萃取處理環(huán)節(jié)中的操作要點(diǎn)：首先應(yīng)用等量的甲醇與蒸餾水（5mL）對(duì)固相萃取柱施以活化措施，稱取150mL參照上述程序配制樣品液，對(duì)其在固相萃取柱流動(dòng)的速度進(jìn)行管控，最佳區(qū)間為2～3mL·min-1，借用5ml甲醇、4Ml四氫呋喃對(duì)其分別進(jìn)行洗滌脫水處理，將最后溶液整合在一起，使等體積四氫呋喃與乙睛混合，對(duì)其進(jìn)行稀釋到10 ml，以備用。

(4)穩(wěn)定性

抗氧劑1010峰面積（D1～D4）分別為99751、94623、95613、95798，上述數(shù)據(jù)證明抗氧劑1010在24h內(nèi)穩(wěn)定性優(yōu)良；抗氧劑168峰面積（D1～D3）分別為66812、68977、68725，上述數(shù)據(jù)證明抗氧劑168的磷酸鹽和亞磷酸鹽濃度之和在24h內(nèi)穩(wěn)定性優(yōu)良。

3.結(jié)果

(1)抗氧劑1010的線性研究

取上述對(duì)照品溶液D1～D4，按上述色譜條件注入色譜儀，記錄峰面積，峰面積(X)與濃度(Y)之間存在線性回歸關(guān)系，回歸方程為：Y=0．000SX+2．0142(r=0．9997)。結(jié)果證明抗氧劑1010在0．61-363． 66mg區(qū)間中線性關(guān)系優(yōu)良。

(2)抗氧劑168的線性研究

取上述對(duì)照品溶液D1～D3，依照以上色譜條件導(dǎo)入進(jìn)色譜儀，記錄峰面積，峰面積(X)與濃度(Y)之間存在線性回歸關(guān)系，回歸方程為：Y=0．0007X+1．2845(r=0．9998)。結(jié)果證明抗氧劑168在1．21～362．66mg區(qū)間內(nèi)線性關(guān)系優(yōu)良。

4.實(shí)驗(yàn)討論

將葡萄糖注射液作為提取媒介，抗氧劑的測(cè)量結(jié)果顯示，3批次粒料、5批次瓶體中測(cè)量到的抗氧劑單一含量均小于0．02%，總量數(shù)值也沒有超過0．3%。其都和歐洲藥典第5版（非腸道制劑及眼科制劑用容器用聚丙烯）內(nèi)做出的相關(guān)規(guī)范相匹配，總量滿足了小于0．3%的限度標(biāo)準(zhǔn)。

結(jié)束語

文中三個(gè)不同廠家制造的聚丙烯輸液瓶內(nèi)的抗氧劑比例存在差異性，總量分別為0．1%、0．2%、0．4%，盡管抗氧化劑遷移總量都不高于最低檢出量，但是090301中抗氧劑1010含量顯著高于儀器檢測(cè)極限值。通過該設(shè)計(jì)與開展該實(shí)驗(yàn)，可以得出如下的結(jié)論，即在5%葡萄糖注射液中外源性抗氧劑的遷移量與粒料數(shù)目、瓶體中抗氧劑的量相關(guān)聯(lián)，則遷移量與上述物質(zhì)投入量之間呈正相關(guān)關(guān)系，所以管控好藥用輸液包裝制作進(jìn)程中抗氧劑添加比例是極為必要的。

[1]周嬋嬋,朱泓霞,周雪琴．參芎葡萄糖注射液致藥物不良反應(yīng)回顧性分析[J]．實(shí)用藥物與臨床,2015,04:454-456．

[2]郭歡迎,耿慶光,王嫦鶴．右旋糖酐40葡萄糖注射液pH值與5-羥甲基糠醛、糠醛含量的相關(guān)性分析[J]．中國藥物警戒,2015,10:611-613．

[3]李治軍．幾種常用中藥注射劑與5%葡萄糖注射液的配伍分析[J]．內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2014,21:47．

(責(zé)任編輯：王恒)

Analysis of the Measurement of Exogenous Antioxidants in 5% Glucose Injection

Chen Min, Lei Xiangxiao, Wang Yang, Zhang Jialiang

（Engineering Center, Changzhou Fangyuan pharmacy Co., ltd, Jiangsu, 213125）

Make use of the HPLC method to measure the content of antioxidants 1010 and 168 in 5% glucose injection and the key point is the study of the movement situation of antioxidants in injection. The result has shown that the antioxidant 1010 has a good linear relation in the range of 0.61～363.66mg·L-1and antioxidant 168 has a good linear relation in the range of 1.21～362.66mg·L-1. We can know that the exogenous antioxidants has movement in 5% glucose injection.

5% glucose injection；exogenous antioxidants；measurement form；linear relation

R < class="emphasis_bold"> 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

A

陳敏（1990～)，女，常州方圓制藥有限公司工程中心；研究方向：藥物分析。