頭痛寧膠囊治療頭痛的實(shí)驗(yàn)研究*

何 娟，陳衍斌，許 剛，張曉紅，劉 峰△，聶西周

1.陜西國際商貿(mào)學(xué)院中藥研究院(咸陽712046 )，2.陜西步長(zhǎng)制藥有限公司(咸陽712000 )，3.陜西中醫(yī)藥大學(xué)(咸陽712046)

頭痛寧膠囊治療頭痛的實(shí)驗(yàn)研究*

何 娟1，2，陳衍斌2，許 剛2，張曉紅2，劉 峰1，2△，聶西周3

1.陜西國際商貿(mào)學(xué)院中藥研究院(咸陽712046 )，2.陜西步長(zhǎng)制藥有限公司(咸陽712000 )，3.陜西中醫(yī)藥大學(xué)(咸陽712046)

目的：進(jìn)行頭痛寧膠囊治療頭痛的實(shí)驗(yàn)研究。方法：通過熱板實(shí)驗(yàn)、扭體反應(yīng)等方法考察頭痛寧膠囊對(duì)小鼠疼痛的影響；建立急性不完全性腦缺血模型，考察頭痛寧膠囊對(duì)大鼠腦組織含水量的影響；考察頭痛寧膠囊對(duì)去甲腎上腺素和5-HT引起大鼠離體腦基底動(dòng)脈收縮的影響。結(jié)果：頭痛寧膠囊高、中劑量組能夠顯著降低熱板所致小鼠疼痛反應(yīng)；頭痛寧膠囊各劑量組均顯著降低醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，具有明顯鎮(zhèn)痛作用；頭痛寧膠囊顯著降低腦缺血模型大鼠腦組織含水量；對(duì)去甲腎上腺素、5-羥色胺引起的大鼠腦基底動(dòng)脈收縮有明顯的抑制作用。結(jié)論：頭痛寧膠囊具有明顯鎮(zhèn)痛作用，可用于各類頭痛的治療。

偏頭痛、緊張性頭痛以頭痛暴作、疼痛劇烈、或左或右、反復(fù)發(fā)作為特征的一種臨床常見病、多發(fā)病，屬于中醫(yī)學(xué)“頭風(fēng)”、“偏頭痛”范疇。疾病可發(fā)生在任何年齡，發(fā)病率約37%～78%，女性發(fā)病率較高。本病發(fā)作劇烈，遷延難愈，因而被歷代醫(yī)家視為疑難病癥。目前，偏頭痛、緊張性頭痛的發(fā)病機(jī)制和病因尚不明確，與神經(jīng)遞質(zhì)代謝紊亂、顱周肌肉、心理因素、缺血、炎性介質(zhì)釋放增多等均有一定關(guān)系[1-2]。頭痛寧膠囊由土茯苓、天麻、制首烏等六味藥材組成，具有熄風(fēng)滌痰，逐瘀止痛的功效，用于偏頭痛、緊張性頭痛屬痰瘀阻絡(luò)證，證見：痛勢(shì)甚劇，或攻沖作痛，或痛如錐刺，或連及目齒，伴目眩畏光，胸悶脘脹，惡心嘔吐，急躁易怒，反復(fù)發(fā)作。多年臨床實(shí)踐證明頭痛寧膠囊在治療各類頭痛均療效確切，安全性高，為進(jìn)一步明確頭痛寧膠囊治療頭痛的藥理作用及其機(jī)制，本研究對(duì)其進(jìn)行了藥效學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)研究，為臨床合理應(yīng)用提供依據(jù)。

材料與方法

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠，雌雄兼用，體重18～22 g；SD大鼠，雌雄兼用，體重180～220 g。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(軍)2012-0007。

2 試藥與儀器 頭痛寧膠囊(國藥準(zhǔn)字：20150914)、對(duì)乙酰氨基酚片(批號(hào)為141003)、鹽酸氟桂利嗪膠囊(西比靈，批號(hào)為130613770)、去甲腎上腺素(NE，分析純，美國Sigma 公司)、5-羥色胺(5-HT，分析純，美國Sigma 公司)、0.9%氯化鈉注射液(生理鹽水)，乙酸(分析純，99.5%)。熱板儀(RB-200，成都泰盟軟件有限公司)、電熱恒溫干燥箱(WHL-25AB，天津市泰斯特儀器有限公司)、電子天平(DV215CD，德國梅特勒公司)、八道生理記錄儀及其附件(RM-6000，日本NIHON KOHDEN公司)、等長(zhǎng)張力換能器(TB-612T，日本NIHON KOHDEN公司)。

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)

3.1.1 對(duì)熱板所致小鼠疼痛的影響:選取實(shí)驗(yàn)用小鼠，體重18～22 g，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)前1 d，將小鼠放在熱板儀上(溫度55 ℃)，挑選舔后足時(shí)間合格的小鼠(痛閾值處于5～30 s)，篩選供實(shí)驗(yàn)用小鼠80只。將小鼠隨機(jī)分成5組，每組16只，即頭痛寧膠囊低、中、高劑量組、空白對(duì)照組(生理鹽水)、陽性對(duì)照組(對(duì)乙酰氨基酚)。頭痛寧膠囊低、中、高三個(gè)劑量組分別灌胃給藥0.105 g/kg、0.21 g/kg、0.42 g/kg，空白對(duì)照組給予等體積的生理鹽水，陽性對(duì)照組選用對(duì)乙酰氨基酚為對(duì)照藥，劑量為0.2 mg /10 g。于給藥后30 min、60 min分別測(cè)定小鼠舔后足的時(shí)間。

3.1.2 對(duì)醋酸所致小鼠扭體的影響:取小鼠50只，體重18～22 g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只，頭痛寧膠囊低、中、高三個(gè)劑量組分別灌胃給藥0.105 g/kg、0.21 g/kg、0.42 g/kg，陽性對(duì)照組給予0.2 mg/10g對(duì)乙酰氨基酚，空白對(duì)照組給予等體積的生理鹽水。每日灌胃給藥1次，連續(xù)給藥7 d，末次給藥后30 min，給小鼠腹腔注射0.6 %冰醋酸溶液(臨用前配置)0.1 ml/10g，觀察并記錄注射醋酸溶液后20 min內(nèi)小鼠首次出現(xiàn)扭體反應(yīng)的時(shí)間和小鼠的扭體次數(shù)。

3.2 頭痛寧膠囊對(duì)大鼠腦組織含水量的影響:取健康SD大鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分成6組，每組10只。頭痛寧膠囊低、中、高三個(gè)劑量組分別灌胃給藥0.21 g/kg、0.42 g/kg、0.84 g/kg；陽性對(duì)照組選用西比靈為對(duì)照藥，劑量為0.332 mg/kg；假手術(shù)組和模型組分別給予等體積的生理鹽水，給藥體積皆為1 ml/100 g，連續(xù)給藥10 d，于第11天給藥后1 h，乙醚麻醉，打開大鼠頸部，結(jié)扎大鼠兩側(cè)頸總動(dòng)脈，形成急性不完全性腦缺血模型，假手術(shù)組不結(jié)扎大鼠兩側(cè)頸總動(dòng)脈。結(jié)扎手術(shù)3 h后，斷頭處死大鼠，開顱，取全腦，用電子天平秤定腦濕重，然后將腦放入干燥箱中，110 ℃烘72 h后，再次稱定腦干重，然后計(jì)算腦含水量，腦含水量=(腦濕重-腦干重)÷腦濕重×100 %。

3.3 對(duì)大鼠離體腦基底動(dòng)脈收縮的影響：取2.2項(xiàng)下低、中、高3個(gè)劑量組、模型組(空白)及陽性對(duì)照組(西比靈)的大鼠斷頭后，迅速取出大鼠腦基底動(dòng)脈，分離血管周圍組織，去除血管內(nèi)血液，并制成動(dòng)脈環(huán)，將動(dòng)脈環(huán)掛在充滿克氏液的浴槽中，溫度37 ℃，通入95% O2和5% CO2混合氣體，先分別加入去甲腎上腺素和5-羥色胺引起腦基底動(dòng)脈收縮，10 min后分別向浴槽中加入不同濃度的藥物，記錄給藥前激動(dòng)劑所誘導(dǎo)的血管收縮和給藥后的血管收縮變化情況，計(jì)算給藥后血管收縮抑制百分率[3]。抑制百分率(%)=(給藥前血管收縮-給藥后血管收縮)/給藥前血管收縮×100 %。

結(jié) 果

1 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)

1.1 對(duì)熱板所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響:給藥后，頭痛寧膠囊各劑量組與空白對(duì)照組比較，均能提高小鼠熱刺激所致疼痛的痛閾值，延長(zhǎng)效果與給藥劑量有一定的量效關(guān)系，且高劑量組效果與陽性對(duì)照組相當(dāng)，結(jié)果見表1。

表1 對(duì)熱板所致小鼠疼痛的影響

注：與空白對(duì)照組比較△P<0.05，▲P<0.01

1.2 對(duì)醋酸所致小鼠扭體的影響:各劑量組與空白對(duì)照組比較均具有顯著鎮(zhèn)痛作用，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，各劑量組與空白對(duì)照組比較20min內(nèi)扭體次數(shù)均顯著下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，結(jié)果見表2。

2 頭痛寧膠囊對(duì)大鼠腦組織含水量的影響 頭痛寧膠囊各劑量組和陽性對(duì)照組與空白對(duì)照組比較，大鼠腦濕重與腦干重?zé)o明顯差異，大鼠腦含水量均能顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，表明頭痛寧膠囊能顯著降低大鼠腦含水量，結(jié)果見表3。

3 對(duì)大鼠離體腦基底動(dòng)脈收縮的影響 頭痛寧膠囊對(duì)腦基底動(dòng)脈收縮抑制作用隨劑量增加呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系，頭痛寧膠囊對(duì)去甲腎上腺素和5-HT引起腦基底動(dòng)脈收縮有抑制作用，均較空白對(duì)照組顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，結(jié)果見表4。

表2 對(duì)醋酸所致小鼠扭體的影響

注：與空白對(duì)照組比較，▲P<0.01

表3 對(duì)大鼠腦組織含水量的影響

注：與模型組比較▲P<0.01

表4 對(duì)大鼠離體腦基底動(dòng)脈收縮的影響

注：與空白對(duì)照組比較，▲P<0.01

討 論

頭痛，是一種常見病和多發(fā)病，物理、生化、精神和機(jī)械性質(zhì)等多種因素均可能誘發(fā)頭痛。頭痛發(fā)作機(jī)理極其復(fù)雜，是反復(fù)發(fā)作性頭部血管舒縮功能紊亂引起的[4]。頭痛的發(fā)病人群廣，患病率高，嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量。按照頭痛疾患的國際分類，將頭痛疾患分為：原發(fā)性頭痛，繼發(fā)性頭痛，腦神經(jīng)痛、中樞和原發(fā)性顏面痛及其他頭痛[5]， 其中又以原發(fā)性頭痛的人數(shù)最多，包括偏頭痛、緊張型頭痛、叢集性頭痛和其它類型原發(fā)性頭痛4類[6]。從中醫(yī)角度來看，頭部是人體的諸陽之會(huì)，頭痛病因可分為外感和內(nèi)傷兩大類，外部因素的侵襲和內(nèi)部五臟六腑的病化，都會(huì)產(chǎn)生頭痛。外感頭痛分為風(fēng)寒、風(fēng)熱、風(fēng)濕；內(nèi)傷頭痛分為肝陽上亢、痰濁內(nèi)擾、氣血虧虛、腎精虧虛、瘀血內(nèi)阻，原發(fā)性頭痛常歸為內(nèi)傷頭痛范疇。中醫(yī)中藥治療頭痛的歷史較為悠久，國內(nèi)患者長(zhǎng)期以來對(duì)中藥信任度較高，使得中成藥在頭痛治療中的地位日趨重要。

頭痛寧膠囊處方是在前清孟文瑞《春腳集》中“立愈湯”的基礎(chǔ)上加減化裁而成，方中天麻甘平入肝，平肝潛陽，熄風(fēng)止痙，為平肝熄風(fēng)之要藥、“治風(fēng)之神藥”，土茯苓甘淡性平，入肝胃經(jīng)，除濕健脾、清熱解毒，兩藥共用為主。何首烏與天麻共用，兩藥直入肝膽經(jīng)，陰平陽秘，頭痛自除。當(dāng)歸補(bǔ)血活血，補(bǔ)肝血養(yǎng)肝陰，與首烏共為臣藥。防風(fēng)以舉為用，味輕而升，引諸藥直達(dá)頭面受病之所，用為佐藥；全蝎平肝熄風(fēng)，用為使藥。全方集升降攻補(bǔ)于一方，兼顧風(fēng)痰瘀虛，為治療偏頭痛證屬風(fēng)痰阻絡(luò)標(biāo)本同治之良方，可以用于治療風(fēng)火痰瘀引起的各種頭痛?，F(xiàn)代臨床應(yīng)用表明，頭痛寧膠囊治療偏頭痛、緊張性頭痛、叢集性頭痛、原發(fā)性血管性頭痛等各類頭痛均有良好的療效[7]；在治療偏頭痛方面更加顯著，有效率高于西比靈[8]；頭痛寧膠囊可通過調(diào)節(jié)體內(nèi)血漿NOS、5-羥色胺和谷氨酸的含量對(duì)緊張性頭痛發(fā)揮作用[9]。

本研究對(duì)頭痛寧膠囊的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了研究，結(jié)果表明頭痛寧膠囊高劑量組和陽性對(duì)照組能顯著提高小鼠熱刺激所致疼痛的痛閾值，各劑量組均能顯著降低小鼠因醋酸刺激所致的扭體次數(shù)，證明頭痛寧膠囊具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用。

腦缺血、炎癥介質(zhì)釋放增多等均可導(dǎo)致緊張性頭痛發(fā)病[2]，非特異性炎癥是腦缺血的病理生理反應(yīng)之一，在急性期可以加重缺血性腦損傷。本研究利用大鼠急性不完全性腦缺血模型，測(cè)定頭痛寧膠囊對(duì)大鼠腦組織含水量的影響，進(jìn)而反應(yīng)腦組織的水腫和炎癥介質(zhì)釋放程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，頭痛寧膠囊各劑量組與模型組的腦含水量百分率相比有顯著性差異，說明頭痛寧膠囊具有降低腦組織含水量的作用，可能具有降低炎癥介質(zhì)釋放，調(diào)節(jié)血管通透性的作用。

椎-基底動(dòng)脈發(fā)生病變時(shí)，腦部血流不暢，供血不足，常出現(xiàn)眩暈、頭痛等癥狀，頭痛多為跳痛，有時(shí)呈炸裂痛，多位于枕部，彎腰或憋氣時(shí)加重[3]。本實(shí)驗(yàn)考察了頭痛寧膠囊對(duì)大鼠離體腦基底動(dòng)脈收縮的影響，發(fā)現(xiàn)其對(duì)去甲腎上腺素和5-羥色胺引起的腦基底動(dòng)脈收縮具有明顯的抑制作用，有助于降低眩暈、頭痛的發(fā)生率，緩解頭痛癥狀。

本研究結(jié)果表明，頭痛寧膠囊具有良好的鎮(zhèn)痛作用，能夠降低腦缺血模型大鼠腦組織含水量，抑制去甲腎上腺素和5-羥色胺引起的腦基底動(dòng)脈收縮。研究為頭痛寧膠囊在臨床上治療各種類型頭痛提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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[2] 楊 月，李春紅．緊張型頭痛病因病機(jī)初探[J]．國醫(yī)論壇，2016，31(1):13-14．

[3] 趙林鋼，龍 軍，袁冬平．眩痛停方對(duì)離體犬基底動(dòng)脈收縮反應(yīng)的影響[J]．安徽醫(yī)藥，2013，17(11) :1845-1847．

[4] 李炳祺．對(duì)602例頭痛患者流行病學(xué)問卷調(diào)查[J]．現(xiàn)代醫(yī)院，2011，11(7):72-73.

[5] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)疼痛學(xué)分會(huì)頭面痛學(xué)組．中國偏頭痛診斷治療指南[J]．中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2011，17(2) :65-86．

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(收稿：2017-01-23)

*陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2016SF-368)

陜西省創(chuàng)新藥物研究中心資助項(xiàng)目(2015SF2-09)

陜西省咸陽市中青年科技領(lǐng)軍人才資助項(xiàng)目(2015k04-30-9)

頭痛/中醫(yī)藥療法 動(dòng)物，實(shí)驗(yàn) 大鼠 @頭痛寧膠囊

R747.2

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.07.082

陜西省創(chuàng)新人才推進(jìn)計(jì)劃-重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)計(jì)劃(2015KCT-19)

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