血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及中藥保護(hù)作用

位 庚 李紅蓉 常麗萍 李 創(chuàng)

(石家莊市第二醫(yī)院，河北 石家莊 050051)

血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及中藥保護(hù)作用

位 庚 李紅蓉 常麗萍1李 創(chuàng)

(石家莊市第二醫(yī)院，河北 石家莊 050051)

血管內(nèi)皮細(xì)胞；血管緊張素Ⅱ；分泌功能；細(xì)胞凋亡

血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)又稱為內(nèi)皮細(xì)胞，是介于血流和血管壁之間的一層扁平單核細(xì)胞。VEC受損在動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、急性心肌梗死、急性心梗無再流、各種腦血管疾病、腎血管疾病等發(fā)病和病理過程中都起著非常重要的作用。血管緊張素(Ang)Ⅱ是腎素-Ang-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)中尤為重要的血管活性物質(zhì)，是多種心血管疾病的重要促進(jìn)因素。它具有收縮血管的功能，主要由VEC及血管平滑肌細(xì)胞分泌，通過多種機(jī)制導(dǎo)致VEC的結(jié)構(gòu)和功能損傷，對(duì)VEC的超微結(jié)構(gòu)、屏障功能及分泌功能產(chǎn)生重大不良影響，還可以引起細(xì)胞衰老和誘導(dǎo)其凋亡。本文綜述AngⅡ?qū)EC損傷及中藥的保護(hù)作用。

1 AngⅡ?qū)EC超微結(jié)構(gòu)的影響

線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)中研究較多的兩大細(xì)胞器，它們存在于大多數(shù)細(xì)胞內(nèi)。研究表明〔1〕，用AngⅡ干預(yù)人臍靜脈VEC(HUVECs)24 h后，透射電鏡觀察線粒體出現(xiàn)腫脹，形態(tài)由正常的棒狀變?yōu)閳A形或橢圓形，線粒體的嵴被破壞，變得模糊甚至消失，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的池出現(xiàn)了擴(kuò)張；杞菊地黃丸含藥血清干預(yù)組，線粒體的腫脹和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池?cái)U(kuò)張明顯減輕，說明中成藥杞菊地黃丸對(duì)VEC的超微結(jié)構(gòu)有保護(hù)作用。

2 AngⅡ?qū)EC緊密連接蛋白表達(dá)的影響

緊密連接存在于VEC及各類上皮細(xì)胞之間，常圍繞上皮細(xì)胞或VEC的頂端呈連續(xù)帶狀分布，封閉了相鄰細(xì)胞間的空隙，形成天然屏障。起著維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、選擇性通透和維持細(xì)胞極性及參與細(xì)胞增殖的作用。AngⅡ可抑制VEC鈣黏蛋白(VE)、咬合蛋白、閉合蛋白及β-連環(huán)蛋白的表達(dá)，這些緊密連接蛋白表達(dá)下調(diào)可以使VEC之間緊密連接減少，通透性增加，使VEC功能受損，進(jìn)而可能導(dǎo)致一些疾病的發(fā)生，而中藥通心絡(luò)能夠逆轉(zhuǎn)這些緊密連接蛋白的表達(dá)下調(diào)，減輕AngⅡ?qū)EC屏障功能的影響〔2〕。

3 AngⅡ?qū)EC生成血管活性物質(zhì)的影響

VEC襯于血管的內(nèi)表面，能合成和釋放多種血管活性物質(zhì)，來調(diào)節(jié)局部血管的舒縮。舒血管物質(zhì)主要包括一氧化氮(NO)和前列環(huán)素(PGI2)，縮血管物質(zhì)目前研究最多的是內(nèi)皮素(ET)。生理狀態(tài)下，VEC分泌的舒血管物質(zhì)和縮血管物質(zhì)在局部維持一定的濃度比，互相制約，保持動(dòng)態(tài)平衡。當(dāng)VEC受到損傷時(shí)，其分泌的舒血管因子就會(huì)減少，可誘發(fā)高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病。

3.2 AngⅡ?qū)EC產(chǎn)生ET-1的影響 ET-1是由21個(gè)氨基酸殘基組成的多肽，主要由VEC合成和釋放，具有強(qiáng)烈的收縮血管作用〔6〕。AngⅡ可誘導(dǎo)HUVECs生成ET-1明顯增加〔7〕，ET-1參與了血管損傷的發(fā)病機(jī)制，ET-1可促進(jìn)細(xì)胞增殖和肥大，參與心血管細(xì)胞損傷的多種病理過程，還可以刺激炎癥因子白細(xì)胞介素(IL)-6的釋放和核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB表達(dá)的上調(diào)〔8，9〕。茶多酚〔10，11〕對(duì)AngⅡ所致VEC分泌ET-1具有抑制作用，中藥復(fù)方活心湯〔12〕含藥兔血清也可抑制AngⅡ?qū)е碌腣EC損傷，減少ET-1 mRNA的表達(dá)。

4 AngⅡ?qū)EC釋放炎性因子的影響

一些中藥復(fù)方對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)損傷的VEC有明顯的保護(hù)作用，如血脂康可以降低VEC E-選擇素的表達(dá)，減少單核細(xì)胞與VEC的黏附率〔19〕；天麻鉤藤飲含藥血清、潛陽育陰顆?？梢种艫ngⅡ誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子(TNF)-α、IL-6的釋放〔20，21〕。

5 AngⅡ可引起VEC的衰老

衰老是生物隨著時(shí)間的推移自發(fā)的必然過程，表現(xiàn)為結(jié)構(gòu)和功能衰退，適應(yīng)性和抵抗力減退。研究證實(shí)，與年齡相關(guān)的許多心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展都與VEC的衰老有關(guān)系，VEC的衰老是人類衰老和多種疾病發(fā)生的基礎(chǔ)。AngⅡ可以致體外培養(yǎng)的HUVECs衰老、發(fā)生凋亡，其衰老的發(fā)生機(jī)制可能與蛋白激酶B(Akt)/NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表達(dá)的失衡有關(guān)〔22，23〕。靈芝多糖是靈芝中一類主要活性成分，它可以通過糾正由AngⅡ致VEC衰老的eNOS/NO體系失衡，維持VEC功能正常而抑制衰老〔24〕。

6 AngⅡ?qū)EC凋亡的影響

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞為了維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，由多種基因控制的自主有序的死亡，也就是程序性死亡。在VEC，AngⅡ可通過與其受體AT1和AT2結(jié)合而誘導(dǎo)VEC凋亡〔25〕。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的過程中，可涉及多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，其中主要有自殺相關(guān)因子及其配體(Fas/Fasl)死亡受體轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑〔26〕、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑〔27〕；酪氨酸蛋白激酶(PTK)/絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶(MKP)-1信號(hào)系統(tǒng)、神經(jīng)酞胺信號(hào)系統(tǒng)〔28〕和蛋白激酶C信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)〔29〕等。

在AngⅡ誘導(dǎo)VEC凋亡中，氧化和線粒體損傷也發(fā)揮著重要作用。AngⅡ可以激活細(xì)胞膜表面的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)/煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶及還原型輔酶Ⅱ(NADPH)氧化酶，促進(jìn)活性氧簇(ROS)生成，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，引起細(xì)胞凋亡〔30〕。線粒體是對(duì)細(xì)胞內(nèi)外損傷最為敏感的細(xì)胞器之一，當(dāng)損傷發(fā)生時(shí)，線粒體膜通透性增加，并由此引起線粒體膜電位(MMP)的下降、細(xì)胞色素(Cyt)-C釋放增多、線粒體腫大和調(diào)節(jié)胞內(nèi)Ca2+濃度進(jìn)而啟動(dòng)Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)等變化，最終導(dǎo)致凋亡的發(fā)生。

中藥可通過不同途徑抑制AngⅡ誘導(dǎo)的VEC凋亡，如潛陽育陰顆?！?1〕、黃芪與當(dāng)歸不同配比水提液〔32〕和甘肅黃芪黃酮化合物〔33〕等可通過下調(diào)促凋亡因子抑制VEC的凋亡；綠茶多酚(GTP)和黑茶多酚(BTP)可以通過下調(diào)NADPH氧化酶亞基p22phox和p67phox的表達(dá)，來降低細(xì)胞內(nèi)的ROS生成，降低了AngⅡ誘導(dǎo)的VEC通透性〔34〕。前荷葉堿〔35〕通過增加NO生成而抑制AngⅡ誘導(dǎo)的HUVECs凋亡；羥基紅花黃色素A可以抑制ROS生成保護(hù)細(xì)胞線粒體從而抑制VEC凋亡〔36〕。

1 多芳芳，鄒志東，王文娟，等.杞菊地黃丸對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響〔J〕.中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2010;12(10)：1750-2.

2 李利敏.血管緊張素Ⅱ?qū)ρ軆?nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白表達(dá)的影響及通心絡(luò)的干預(yù)作用〔D〕.石家莊：河北醫(yī)科大學(xué)，2014.

3 Steffen Y，Schewe T，Sies H.Epicatechin elevates nitric oxide inendothelial cells via inhibition of NADPH oxidase〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2007；359(3)：828-33.

4 李永勝，梁黔生，王 進(jìn)，等.丹參酮ⅡA對(duì)豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞受血管緊張素Ⅱ作用時(shí)產(chǎn)生NO及eNOS基因表達(dá)的影響〔J〕.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2007;27(7)：637-9.

5 李永勝，王照華，梁黔生，等.丹參酮ⅡA對(duì)血管緊張素Ⅱ所致主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞游離鈣離子及產(chǎn)生一氧化氮的影響〔J〕.中華高血壓雜志，2006;14(11)：882-6.

6 Levin ER.Endothelins as cardiovascular peptides〔J〕.Am J Nephrol，1996；16(3)：246-51.

7 黎蘭芳，王云開.Ghrelin對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷保護(hù)作用的研究〔J〕.中國微循環(huán)，2008;12(5)：293-5，298.

8 Browatzki M，Schmidt J，Kubler W，etal.Endothelin-1 induces interleukin-6 release via activation of the transcription factor NF-kappaB in human vascular smooth muscle cells〔J〕.Basic Res Cardiol,2000；95(2)：98-105.

9 Presta I，Tassone EJ，Andreozzi F，etal.AngiotensinⅡtype 1 receptor，but no type 2 receptor，interferes with the insulin-induced nitric oxide production in HUVECs〔J〕.Atherosclerosis,2011；219(2)：463-7.

10 劉 玉，孫運(yùn)峰，馬貴喜，等.茶多酚對(duì)血管緊張素Ⅱ所致血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌內(nèi)皮素功能的影響〔J〕.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005;26(12)：1408-10.

11 李 靖，李嗚皋，馬貴喜，等.茶多酚和艾司洛爾對(duì)高AngⅡ狀態(tài)下血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮素分泌的影響〔J〕.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2010；26(3)：383-4.

12 丁亞芳，宮麗鴻，高 峰，等.搜風(fēng)祛痰法中藥對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB mRNA及ET-1 mRNA表達(dá)的影響〔J〕.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2010；8(12)：1479-81.

13 Salgado DR，Rocco JR，Silva E，etal.Modulation of the renin-angiotensin-aldosterone system in sepsis：a new therapeutic approach〔J〕.Expert Opin Ther Tar，2010；14(1)：11-20.

14 Carl-McGrath S，Grantzdorffer I，Lendeckel U，etal.AngiotensinⅡ-generating enzymes，angiotensin-converting enzyme (ACE) and mast cell chymase (CMA1)，in gastric inflammation may be regulated by H.pylori and associated cytokines〔J〕.Pathology,2009；41(5)：419-27.

15 Marino F，Guasti L，Tozzi M，etal.Angiotensin type 1 receptor expression and interleukin-8 production in polymorphonuclear leukocytes of patients with peripheral arterial disease〔J〕.J Cardiovasc Pharm，2009；54(6)：520-5.

16 Cho BS，Kim SD，Park JK，etal.Effects of Bupleurumfalcatum and its combination with an angiotensinⅡ receptor blocker on cytokine and chemokine expression in human mesangialcells〔J〕.Phytother Res，2010；24(3)：339-43.

17 Yang LX，Guo RW，Liu B，etal.Role of TRPC1 and NF-kappaB in mediating angiotensinⅡ-induced Ca2+entry and endothelial hyperpermeability〔J〕.Peptides，2009；30(7)：1368-73.

18 Cheng ZJ，Vapaatalo H，Mervaala E.AngiotensinⅡand vascular inflammation〔J〕.Med Sci Monk，2005；11(6)：194.

19 胡永輝.中藥血脂康對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞E-選擇素表達(dá)的影響〔D〕.南昌：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院，2006.

20 孟云輝，涂 欣，涂晉文，等.天麻鉤藤飲含藥血清對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用的研究〔J〕.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2007；13(1)：26-8，43.

21 嚴(yán) 冬，方祝元，嚴(yán)士海，等.潛陽育陰顆粒含藥血清對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷NADPH氧化酶、AKT、TNF-α、IL-6的影響〔J〕.中成藥，2014；36(9)：1809-13.

22 單海燕，白小涓，張四揚(yáng)，等.AngⅡ誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老及凋亡相關(guān)基因的表達(dá)〔J〕.中國病理生理雜志，2008；24(6)：1041-6.

23 吳曉東，王 微，周 賀，等.Akt/NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在AngⅡ誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老中的表達(dá)及意義〔J〕.中國藥理學(xué)通報(bào)，2010；26(7)：922-5.

24 鄒美圣.靈芝多糖對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老的影響及機(jī)制研究〔D〕.廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

25 Dimmeler S，Rippmann V，Weiland U，etal.AngiotensinⅡinduces apoptosis of human endothelial cells protective effect of nitric oxide〔J〕.Circ Res,1997；81(6)：970-6.

26 Li P，Allen H，Banerjee S，etal.Mice deficient in IL-1 beta-converting enzyme are defective in production of mature IL-1 beta and resistant to endotoxicshock〔J〕.Cell，1995；80(3)：401-11.

27 單海燕，白小涓，李效麗.ERK1/2在AngⅡ誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的表達(dá)及意義〔J〕.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011；40(7)：605-7，615.

28 He M，He X，Xie Q，etal.AngiotensinⅡinduces the expression of tissue factor and its mechanism in human monocytes〔J〕.Thromb Res，2006；117(5)：579-90.

29 Mahrouf M，Ouslimani N，Peynet J，etal.Metformin reduces angiotensin-mediated intracellular production of reactive oxygen species in endothelial cells through the inhibition of protein kinase C〔J〕.Biochem Pharmacol，2006；72(2)：176-83.

30 Lee DY，Wauquier F，Eid AA，etal.Nox4 NADPH oxidase mediates peroxynitrite-dependent uncoupling of endothelial nitric-oxide synthase and fibronectin expression in response to angiotensinⅡ：role of mitochondrial reactive oxygen species〔J〕.J Biol Chem，2013；288(40)：28668-86.

31 陳 藝，方祝元，嚴(yán)士海，等.潛陽育陰顆粒含藥血清對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及fas/fasL蛋白表達(dá)的影響〔J〕.中成藥，2013；35(7)：1381-5.

32 周春剛，陸 曙，王書樂，等.黃茂與當(dāng)歸不同配比水提液對(duì)ANGⅡ誘導(dǎo)大鼠動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)觀察〔J〕.中成藥，2013；35(10)：2253-6.

33 梁連生，余 靜，宋瑞霞，等.甘肅黃芪黃酮對(duì)AngⅡ致內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用〔J〕.中國藥理學(xué)通報(bào)，2006；22(12)：1505-9.

34 Ying CJ，Xu JW，Ikeda K，etal.Tea polyphenols regulate nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase subunit expression and ameliorate angiotensinⅡ-induced hyperpermeability in endothelial cells〔J〕.Hypertens Res,2003；26(10)：823-8.

35 陳愛華，肖 華，李志梁，等.前荷葉堿對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響〔J〕.中草藥，2006；37(7)：1045-8.

36 劉永剛，李芳君.羥基紅花黃色素A對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的抑制作用〔J〕.中藥材，2013；36(7)：1128-31.

〔2016-01-15修回〕

(編輯 苑云杰/王一涵)

國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(No.2012CB518606)；石家莊市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.161462343)

位 庚(1980-)，女，博士，主治醫(yī)師，主要從事糖尿病及心血管疾病研究。

R285

A

1005-9202(2017)13-3353-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.13.107

1 河北以嶺醫(yī)藥研究院 國家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)研究室