PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果比較

劉清源

(廣東省惠州市惠城區(qū)馬安畜牧獸醫(yī)與漁業(yè)站，廣東 惠州 516001）

PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果比較

劉清源

(廣東省惠州市惠城區(qū)馬安畜牧獸醫(yī)與漁業(yè)站，廣東 惠州 516001）

為比較豬藍耳病滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果，本試驗在惠城區(qū)某豬場隨機選取100頭仔豬，分成兩組，分別免疫豬藍耳病滅活疫苗與弱毒疫苗，采用ELISA方法檢測血清中的抗體水平，并對兩組抗體的S/P值進行比較。結(jié)果表明，豬藍耳病弱毒疫苗產(chǎn)生的抗體水平比滅活疫苗高，滅活疫苗免疫效果較差，且抗體持續(xù)時間短。本研究為豬場藍耳病的防控及免疫程序的制定提供理論依據(jù)。

PRRSV；滅活疫苗：弱毒疫苗；比較

豬藍耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的一種高致病性傳染病[1]。由于PRRSV具有免疫抑制的特點，病豬對其他疾病的抵抗能力也會降低，增加混合感染的風(fēng)險，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。該病無特效治療藥物，對豬群進行疫苗免疫和抗體水平監(jiān)測是防止PRRSV感染的重要手段[2]。我國的PRRSV商品化疫苗以滅活疫苗和弱毒疫苗為主[3]。為比較兩種疫苗免疫效果，探討2種疫苗的選用及免疫程序的制定，本試驗分別使用上述兩種疫苗對惠城區(qū)某豬場的100頭豬進行分組免疫，于免疫14 d、28 d、42 d、56 d、70 d后采集血清樣品，采用ELISA試劑盒進行抗體檢測，并對兩種疫苗的免疫效果進行比較和分析，為豬場疫苗的選擇及免疫時間的確定提供參考。

1 材料和方法

1.1 儀器及試劑

酶標(biāo)儀ELX800，購自BIOTEK公司；PRRSV抗體試劑盒，購自武漢科前生物公司。

1.2 疫苗

PRRSV滅活疫苗（NVDC-JAXI株）和弱毒疫苗（JAXI-R株）均為國家招標(biāo)疫苗。

1.3 動物分組及免疫情況

將某豬場100頭豬豬分為A、B兩組，每組50頭，A組接種滅活疫苗，2 mL/頭；B組接種弱毒疫苗，1頭份/頭，均在頸部肌肉注射，首免后48 d進行二免。

1.4 血清的制備

分別于免疫前、免疫后1 4d 、28 d、42 d、56 d、70 d后從豬前腔靜脈采血，6 000 r/min離心15 min，取上清于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 抗體檢測方法

待檢血清采用E L ISA方法檢測PRRSV抗體，具體操作步驟參照試劑盒說明書進行。

1.6 結(jié)果判定

通過計算樣品孔與陽性孔 OD630nm比值 S/P 值來判定被檢血清PRRSV抗體的結(jié)果。判定標(biāo)準(zhǔn)：S/P 值＞0．42，判定被檢血清藍耳病病毒抗體陽性；S/ P值＜0．42，則判定被檢血清藍耳病抗體陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 PRRSV抗體檢測陽性率比較

免疫后，A、B兩組抗體陽性率有所升高，A組抗體陽性數(shù)隨時間延長不斷增加，二免28 d后，陽性率達到94%；B組在免疫后42 d，抗體陽性率達到100%，二免后抗體水平趨于穩(wěn)定。B組陽性率在首免后不同時間段內(nèi)抗體陽性率均高于A組，對豬群的保護作用較A組理想（見表1）。

2.2 PRRSV疫苗誘導(dǎo)抗體的檢測結(jié)果

從兩種疫苗接種后PRRS V抗體S/P值來看（見圖1），弱毒疫苗激發(fā)機體產(chǎn)生的抗體滴度要明顯高于滅活疫苗，B組在首免后抗體水平不斷升高，二免后抗體增幅較大，二免28 d后抗體水平達到最高值；A組在免疫后抗體滴度開始升高，首免后28～42 d抗體S/P值出現(xiàn)下降的現(xiàn)象，加強免疫后，PRRSV抗體滴度繼續(xù)升高，B組接種疫苗28 d內(nèi)，二免抗體水平高于首免。

3 討論

本研究表明，PRRSV弱毒疫苗接種后能快速激發(fā)機體產(chǎn)生抗體，從表1中可以看出，接種弱毒疫苗28 d后，B組試驗豬群的平均抗體滴度超過國家規(guī)定的“抗體合格率超過70%”的標(biāo)準(zhǔn)。而A組結(jié)果顯示，PRRSV滅活疫苗在二免前豬群抗體合格率僅為64%，需要進行補免才能使抗體合格率達到國家的基本要求。圖1結(jié)果顯示，B組在接種弱毒疫苗28 d后，PRRSV抗體檢測結(jié)果呈陽性。隨后，S/P值繼續(xù)升高，表明體內(nèi)的抗體滴度在免疫后不斷增強，抗體水平穩(wěn)定，能夠有效保護豬群不受該病的感染。而A組在接種滅活疫苗后28 d，仍有部分豬的抗體S/P值低于0．42，表1 中A組在免疫后42 d相比2周前抗體陽性率較高，但是在28～42 d內(nèi)，S/P值還出現(xiàn)下降的趨勢，說明首免28 d后抗原蛋白在機體內(nèi)激發(fā)抗體產(chǎn)生的能力已開始減弱，因此，即使抗體陽性率符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，仍需對抗體S/P值進行定期監(jiān)測，不能忽視因為體內(nèi)抗原降解而導(dǎo)致的豬群在出欄前抗體水平下降。二免后抗體水平雖然有所上升，首免70 d后，還存在個別豬出現(xiàn)抗體陰性的現(xiàn)象。在整個免疫過程中，滅活疫苗誘導(dǎo)的抗體始終低于弱毒疫苗，弱毒疫苗在接種1頭份/頭即可產(chǎn)生良好的效果，無需進行二次免疫。而滅活疫苗要達到國家規(guī)定的抗體合格率，則需進行加強免疫，時間設(shè)置在首免30日左右最為適宜。

表1 PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗免疫組的抗體陽性率 %

圖1 接種疫苗后PRRSV抗體S/P值變化情況

PRRSV滅活疫苗安全性較高，易于運輸和保存，使用方便，因此為眾多養(yǎng)殖戶所青睞[4]。滅活疫苗可能在加工過程中造成一些重要的抗原表位喪失[5]，僅能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生體液免疫，導(dǎo)致首免效果不理想，需要二次免疫才能產(chǎn)生對豬群的有效保護。而弱毒疫苗具有快速誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生，抗體有效時間長等優(yōu)點，近年來也備受用戶關(guān)注，這可能是因為弱毒疫苗接種后，機體內(nèi)部免疫與自然感染病毒類似，能同時誘導(dǎo)體液反應(yīng)和細胞免疫反應(yīng)[6]，使得抗體的產(chǎn)生速度更快，持續(xù)時間更長。但是PRRSV弱毒疫苗使用過程中存在安全性方面的問題，活的毒株可能在豬體內(nèi)發(fā)生弱毒返強的現(xiàn)象。豬場在疫苗選擇的問題上，應(yīng)該根據(jù)具體實際情況而定，在周邊PRRSV感染威脅較小的情況下，應(yīng)盡可能選用滅活疫苗，增加免疫次數(shù)，進行定期抗體水平監(jiān)測，以期達到凈化PRRSV的目的[7]。而在PRRSV流行地區(qū)，或豬場已經(jīng)暴發(fā)該病，則應(yīng)選用弱毒疫苗，但需注意的是，斷奶仔豬不宜接種弱毒疫苗，因為部分弱毒疫苗可能由于減毒效果不理想，使抵抗力較低的仔豬出現(xiàn)“疫苗毒”感染[8]。另外，PRRSV弱毒疫苗的毒株在機體內(nèi)容易與其他毒株發(fā)生重組，產(chǎn)生病毒變異株，因而豬場在選用弱毒疫苗時，應(yīng)盡量避免不同毒株的疫苗混用。

[1] 李祥健， 劉有昌， 趙東升． 豬藍耳病[J]． 畜禽業(yè)， 2009 (3)： 64-66．

[2] 劉生杰， 劉成文． 豬藍耳病及繼發(fā)感染試驗診斷與綜合防治研究[J]． 中國農(nóng)學(xué)通報， 2007， 23(9)： 40-43．

[3] 邱立新， 鄭杰． 高致病性豬藍耳病的臨床診斷與防治[J]． 中國畜牧獸醫(yī)，2008， 35(1)： 114-115．

[4] 曹斌， 王海燕， 周廣生， 等． 不同類型豬藍耳病疫苗的體液免疫效果比較[J]． 中國動物檢疫， 2010， 27(8)： 51-52．

[5] VANHEE M， DELPUTTE P L，DELRUE I， et al． Development of an experimental inactivated PRRSV vaccine that induces virusneutralizing antibodies[J]． Veterinary research， 2009， 40(6)： 1-15．

[6] 王小三， 張春杰， 趙星燦． 豬繁殖與呼吸障礙綜合征疫苗的應(yīng)用現(xiàn)狀及研究進展[J]． 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2012， 41(3)：12-15， 25．

[7] 戴火林， 華威， 畢淑珍． 豬藍耳病滅活苗與弱毒苗免疫效價試驗[J]． 中國畜禽種業(yè)， 2014 (11)： 87-88．

[8] 吳錦艷， 田宏， 尚佑軍， 等． 高致病性豬藍耳病病毒 GS/LZh/07 株的分離， 鑒定及其非結(jié)構(gòu)蛋白 Nsp2 基因特性分析[J]． 畜牧獸醫(yī)學(xué)報， 2009，40(3)： 438-443．

2017-02-16）

劉清源（1990-），男，廣東惠州人，碩士研究生，從事臨床獸醫(yī)方面研究