干熱處理甜瓜、籽瓜細(xì)菌性果斑病種子對幼苗發(fā)病的影響

萬秀琴，王惠林,2*

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與園藝學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052；2.國家瓜類工程研究技術(shù)中心，新疆 昌吉 831100)）

新疆是我國甜瓜、籽用西瓜生產(chǎn)制種最主要的區(qū)域之一，然而新疆出現(xiàn)的檢疫性病害細(xì)菌性果斑病對瓜類產(chǎn)品能引起危害且其危害日益加重[1]。在北疆和哈密產(chǎn)區(qū)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，哈密瓜輕病田葉片發(fā)病率8%～15%，重病田葉片發(fā)病率80%以上，哈密瓜生長中后期果實感病后引起潰爛，失去商品價值，受損率5%～15%，對哈密瓜的品質(zhì)和產(chǎn)量影響較大[2]。經(jīng)國內(nèi)外研究表明，細(xì)菌性果斑病病菌可在種子或隨病殘體在土壤中越冬，種子帶菌是該病傳播的重要方式之一[3]。目前種子健康處理的方法和技術(shù)很多，藥劑處理仍然是防止種子帶菌的主要措施之一[4]，但大部分藥劑處理會影響種子的發(fā)芽率和田間成苗率，長期利用化學(xué)防治的方法的確有效地控制了病害，但高殘留、抗藥性等缺點對環(huán)境和人畜健康造成嚴(yán)重威脅，生態(tài)平衡遭到破壞[5]。宋順華等[6]研究表明，種子干熱處理可以阻止病原菌在種子表面的進(jìn)一步繁殖，降低種子的帶菌率。干熱處理作為一種綠色、有效的處理方式，為西瓜、甜瓜的種子安全性及有效控制瓜類細(xì)菌性果斑病提供了新的途徑[7]。唐炎英等[8]對西瓜種子干熱處理有報道，但對甜瓜、籽用西瓜帶菌種子干熱處理的報道少見，由于不同種子對溫度的敏感性不同，每種類型種子都有其適宜的干熱處理程序，因此本研究對甜瓜、籽用西瓜帶菌種子進(jìn)行有針對性地摸索干熱處理的條件，以便有效地殺滅病原菌，且不影響種子的質(zhì)量，篩選出適宜甜瓜、籽瓜的干熱處理方法，為生產(chǎn)提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

試驗于2016年6-8月在國家瓜類工程技術(shù)研究中心試驗基地進(jìn)行。試驗選用的種子材料為Vm 9-109甜瓜新品系及民籽1號籽瓜自交系，均由新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與園藝學(xué)院提供；供試細(xì)菌性果斑病菌的菌株由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物檢疫研究室提供，菌株代號為xjl12。

1.2 試驗方法

1.2.1 病原菌的培養(yǎng)

細(xì)菌性果斑病菌在KMB（20g胰蛋白胨，1.5 g K2HPO4，1.5 g MgSO4·7H2O，10 g甘油，10 g瓊脂粉，定容到1 L）固體平板上進(jìn)行活化，28 ℃培養(yǎng)24 h，挑取單菌落接種于NB液體培養(yǎng)液中，220 r/min、28 ℃培養(yǎng)16～18 h。用分光光度計測定菌懸液的OD值，并用滅菌水將菌懸液濃度調(diào)到OD600為0.2～0.5備用[9]。1.2.2 試驗設(shè)計

試驗所用的甜瓜、籽用西瓜種子經(jīng)過人工接菌2 h后陰干。甜瓜種子在恒溫干燥箱中分別進(jìn)行50、55、60、65、70 ℃干燥滅菌，時間分別為2、4、6、8 d。籽用西瓜種子的干燥溫度同甜瓜種子處理溫度，處理時間分別為3、6、9、12 d，對照設(shè)置為帶菌種子不進(jìn)行高溫處理。

育苗基質(zhì)用以鋸末和蛭石4∶1的體積比混合配制，并高溫（100 ℃）滅菌，裝于經(jīng)84消毒液浸泡15 min后清洗干凈的穴盤中。甜瓜和籽用西瓜種子每穴播2粒，甜瓜每個處理設(shè)置3個重復(fù)，共計120粒；籽用西瓜每個處理設(shè)置3個重復(fù)，共計120粒。出苗后統(tǒng)計種子出苗率，并在出苗后每天傍晚澆水，在真葉展開后噴施營養(yǎng)液以供幼苗生長。1.2.3 試驗指標(biāo)的統(tǒng)計

病情調(diào)查統(tǒng)計，病情分級參考Hopkins等[10］的分級標(biāo)準(zhǔn)，且略有改動，分級標(biāo)準(zhǔn)如下。

0級：植株無病斑；

1級：葉片病斑較少，病斑面積占整棵植株面積的20%以下；

3級：病斑較多，病斑面積占總面積的21%～40%；

5級：病斑較多，病斑面積占總面積的41%～60%；

7級：病斑很多或融合成大斑，病斑面積占總面積的61%～80%；

9級：病斑很多或融合成大斑，胚軸或莖部有病斑，病斑面積占總面積的81%以上，植株死亡。

病情指數(shù)的計算方法如下：DI=（∑發(fā)病級數(shù)×發(fā)病株數(shù)）÷（最高病級×總株數(shù)）×100。防治效果=（對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)）÷對照病情指數(shù)×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 干熱處理對甜瓜帶菌種子防治效果的影響

干熱處理甜瓜帶菌種子后，對其幼苗發(fā)病情況的影響結(jié)果見表1。在50 ℃條件處理下，隨著處理時間的增加，幼苗的出苗率≥90%，且大于對照的出苗率。甜瓜種子50 ℃處理2 d與50 ℃處理6 d后種子的活力無明顯差異，與對照相比種子活力極顯著提高；隨著溫度的增加，55、60、65 ℃處理（2、4 d），幼苗的出苗率與對照相比有顯著差異；70 ℃處理時間較長（4～8 d）會影響種子出苗率，顯著低于對照的出苗率。70 ℃處理條件下幼苗的發(fā)病率、病情指數(shù)隨著處理時間的增加而降低，防治效果隨著處理溫度和時間的增加而增強(qiáng)。將防治效果大于80%作為篩選依據(jù)，綜合防治效果及種子活力，防治效果較好的處理是：60 ℃處理6、8 d，防治效果均為85.6%；65 ℃處理6 d，防治效果為85.0%。

2.2 干熱處理對籽用西瓜帶菌種子防治效果的影響

干熱處理籽用西瓜帶菌種子后，對其幼苗發(fā)病情況的影響結(jié)果見表2。在50、55 ℃下，隨著處理時間的增加種子的出苗率整體呈增加趨勢，50 ℃處理9、12 d，55 ℃處理12 d與對照相比，增加了種子的出苗率，且差異顯著，說明適宜的溫度可促進(jìn)種子的活力。60 ℃和70 ℃處理9、12 d后種子出苗率較對照極顯著降低，說明種子活力受到影響。幼苗的病情指數(shù)在同溫度下隨著時間的增加而降低。將防效大于75%作為篩選依據(jù)，綜合考慮出苗率及防治效果，防治效果較好的處理是：60 ℃處理12 d，防治效果為86.5%；65 ℃處理12 d，防治效果為83.0%。

表1 甜瓜帶菌種子干熱處理后幼苗的發(fā)病情況

表2 籽用西瓜帶菌種子干熱處理后幼苗的發(fā)病情況

3 結(jié)論與討論

試驗結(jié)果表明：對甜瓜帶菌種子有較好的防治效果的處理是：60 ℃處理6、8 d和65 ℃處理6 d，防治效果分別為85.6%和85.0%；對籽用西瓜帶菌種子防治效果較好的處理是：60 ℃處理12 d，防治效果為86.5%；65 ℃處理12 d，防治效果為83.0%。

干熱滅菌是目前農(nóng)業(yè)上應(yīng)用于種子生產(chǎn)加工的一種經(jīng)濟(jì)有效的方法，對殺死各種病原菌都有效[11]。特別是對于侵入種子內(nèi)部的病原菌起到浸種拌種所達(dá)不到的效果[12]，又能避免出現(xiàn)水浸種子及毒性殘留問題，對種子加工來說既節(jié)省了工

序又節(jié)約了成本。適當(dāng)?shù)母蔁崽幚聿粌H可以起到殺菌效果，還能促進(jìn)種子萌發(fā)[13]，與試驗中籽用西瓜種子在高溫處理下種子的活力有提高的結(jié)果一致。黃俊霞[14]研究表明種子帶菌率與幼苗的發(fā)病率具有明顯的線性關(guān)系，因此幼苗的發(fā)病情況是反映高溫處理后防治效果的重要依據(jù)。試驗結(jié)果顯示，高溫處理對甜瓜與籽用西瓜種子的防治效果不同，對甜瓜種子的處理效果優(yōu)于籽用西瓜種子，可能與籽用西瓜種子較大且其種皮較厚有關(guān)，因此增加高溫處理的溫度及時間，才能有效地殺死種子內(nèi)部的病原菌。但處理溫度及時間不當(dāng)會嚴(yán)重影響種子的活力，并且會加速種子老化及種子的耐貯藏性[15]，所以不同種子需根據(jù)其對溫度的敏感性，選擇適宜的干熱處理方法。

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