基于結(jié)構(gòu)糖組學(xué)的食源性糖蛋白研究進(jìn)展

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(1.渤海大學(xué)化學(xué)化工與食品安全學(xué)院,遼寧錦州 121013;2.吉林大學(xué)營養(yǎng)與功能食品研究室,吉林長春 130062;3.西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院功能糖組學(xué)實(shí)驗(yàn)室,陜西西安710069)

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基于結(jié)構(gòu)糖組學(xué)的食源性糖蛋白研究進(jìn)展

趙文竹1,陳月皎1,張宏玲1,于志鵬1,*,劉靜波2,于漢杰3,勵建榮1,*

(1.渤海大學(xué)化學(xué)化工與食品安全學(xué)院,遼寧錦州 121013;2.吉林大學(xué)營養(yǎng)與功能食品研究室,吉林長春 130062;3.西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院功能糖組學(xué)實(shí)驗(yàn)室,陜西西安710069)

糖蛋白是一類具有多種功能的重要化合物,其糖鏈結(jié)構(gòu)復(fù)雜,功能多樣,在生物體內(nèi)參與多種細(xì)胞活動。糖組學(xué)是繼基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)后又一新興領(lǐng)域,而結(jié)構(gòu)糖組學(xué)作為糖組學(xué)的重要組成部分,主要用于分析糖蛋白的結(jié)構(gòu)。本文介紹利用結(jié)構(gòu)糖組學(xué)相關(guān)技術(shù)在食源性糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)以及糖基化位點(diǎn)研究中的應(yīng)用,旨在為結(jié)構(gòu)糖組學(xué)在糖蛋白結(jié)構(gòu)解析中的廣泛應(yīng)用提供依據(jù)。

糖蛋白,糖鏈,糖組學(xué),結(jié)構(gòu)糖組學(xué)

聚糖是第三類生物信息大分子,其較高的復(fù)雜性取決于組成聚糖的單糖種類繁多并且每種單糖都有各種形式的異構(gòu)體以及不同的糖苷鍵連接方式。結(jié)構(gòu)的多樣性使聚糖在生物信息方面比蛋白質(zhì)和核酸更具影響力,在生物體中發(fā)揮著其他生物分子不可替代的作用,而且因其不是基因的直接產(chǎn)物,關(guān)于糖生物功能和蛋白質(zhì)糖基化功能在蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)領(lǐng)域下無法闡述清楚。21世紀(jì)初期,“糖組”和“糖組學(xué)”的概念被提出[1]。糖組被定義為單一生物體內(nèi)全部聚糖的總稱[2],類似于基因組和蛋白質(zhì)組。糖組學(xué)是研究糖復(fù)合物和糖鏈結(jié)構(gòu)功能的科學(xué),其綜合系統(tǒng)地研究糖鏈結(jié)構(gòu)、糖鏈形成的分子機(jī)制以及糖鏈功能。

蛋白質(zhì)的糖基化即糖鏈修飾是蛋白質(zhì)翻譯后的重要修飾之一,細(xì)胞中50%以上的蛋白質(zhì)具有糖鏈,糖鏈在生命活動中發(fā)揮著生物信息分子的重要作用。目前,食源性糖蛋白的研究日益增多,主要集中在糖蛋白的提取和分離純化方面,但對糖鏈結(jié)構(gòu)方面的研究較少,阻礙對糖蛋白功能活性的深入研究。本文主要介紹糖組學(xué)以及應(yīng)用結(jié)構(gòu)糖組學(xué)研究方法解析食源性糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)信息,旨在為食源性糖蛋白活性及構(gòu)效關(guān)系的研究提供理論依據(jù)。

1 糖組學(xué)的研究進(jìn)展

1958年,Crick提出生物中心法則,生物信息從DNA→RNA→蛋白質(zhì),其中核酸主要存在于細(xì)胞核內(nèi),這主要就是細(xì)胞核內(nèi)的信息交流。細(xì)胞和細(xì)胞之間的交流主要是依靠細(xì)胞表面或細(xì)胞分泌的物質(zhì)因子,糖鏈就存在于細(xì)胞表面的膜蛋白、糖脂或分泌蛋白上。研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞發(fā)育、分化、細(xì)胞免疫、微生物感染、腫瘤轉(zhuǎn)移等細(xì)胞之間的生物現(xiàn)象都與細(xì)胞表面的糖鏈相關(guān)[3-7]。糖組學(xué)是對全部聚糖的全面分析且主要針對糖蛋白,側(cè)重研究糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)和功能。糖組學(xué)主要解決基因信息、糖基化位點(diǎn)信息、聚糖結(jié)構(gòu)以及糖基化功能四個方面的問題[8]。糖組學(xué)根據(jù)側(cè)重點(diǎn)不同分為結(jié)構(gòu)糖組學(xué)和功能糖組學(xué),其中結(jié)構(gòu)糖組學(xué)主要側(cè)重于結(jié)構(gòu)分析,功能糖組學(xué)偏重于功能研究[9]。

1.1結(jié)構(gòu)糖組學(xué)

結(jié)構(gòu)糖組學(xué)主要研究內(nèi)容是蛋白質(zhì)的糖基化位點(diǎn)和糖鏈結(jié)構(gòu)分析。蛋白質(zhì)糖鏈結(jié)構(gòu)分析涉及到糖蛋白的提取分離和糖鏈結(jié)構(gòu)的鑒定等。糖鏈結(jié)構(gòu)測定遠(yuǎn)比核酸和蛋白質(zhì)要困難,因糖鏈不均一性和含量甚微而備受挑戰(zhàn)[10-12]。糖鏈的完整序列難以通過一種方法來完成,需要多種手段組合以確定糖鏈的結(jié)構(gòu)信息。糖鏈結(jié)構(gòu)分析上的突破將為糖蛋白的功能分析提供技術(shù)支持,利用結(jié)構(gòu)糖組學(xué)的多元化策略和技術(shù)表征糖蛋白糖鏈空間構(gòu)象,將為糖蛋白糖鏈空間構(gòu)象解析提供一個新的思路。

1.2功能糖組學(xué)

功能糖組學(xué)為功能糖蛋白質(zhì)組學(xué)研究提供理論基礎(chǔ)[13-15]。目前,在糖蛋白質(zhì)組學(xué)、糖組學(xué)下可以鑒定糖鏈并得出部分結(jié)構(gòu)信息,但不能提供關(guān)于糖鏈功能的信息。因此,為了全面闡明糖組的功能將功能糖組學(xué)的研究方法引入進(jìn)來[16]。微陣列技術(shù)是目前研究功能糖組學(xué)的重要手段[9],2002年首次被用于研究糖生物學(xué)[17]。微陣列技術(shù)主要將聚糖以共價連接的方式固定在具有化學(xué)反應(yīng)活性表面的玻璃芯片上,通過高通量掃描技術(shù)分析糖分子與其它生物分子之間的相互作用,研究聚糖在生物體內(nèi)的功能與作用機(jī)制。微陣列技術(shù)主要包括糖庫的建立,樣品的固定以及標(biāo)記的檢測和數(shù)據(jù)處理四個步驟。其中糖庫的建立方法同基因庫和蛋白質(zhì)庫的建立方法相似,糖分子的固定主要包括共價連接和非共價吸附兩種類型。微陣列技術(shù)檢測需求樣品量小,可同時對成百個樣品進(jìn)行檢測分析。

但目前微陣列技術(shù)仍處于發(fā)展的初級階段,在固定糖分子的玻璃芯片的選擇上和檢測技術(shù)的敏感性等方面還需進(jìn)一步發(fā)展。

2 結(jié)構(gòu)糖組學(xué)的研究方法

結(jié)構(gòu)糖組學(xué)應(yīng)用于糖蛋白等高度異構(gòu)體且具有多個分支的化合物的結(jié)構(gòu)分析,其在分析糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)方面主要有四種關(guān)鍵技術(shù)。

2.1多維液相色譜法

多維液相色譜法(multi-dimensional liquid chromatography,MDLC)采用2-氨基吡啶熒光標(biāo)定[18]。該方法不僅用于中性N-聚糖的二維映射[19],現(xiàn)也已被應(yīng)用到聚糖(包括酸性聚糖)的三維映射[20]中。MDLC分離原則主要依據(jù)聚糖化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同,聚糖的正相色譜分離基本取決于其分子量大小,反相色譜分離則基于其疏水性。陰離子交換色譜法是分離酸性聚糖的方法。MDLC因峰重疊少,峰容量大,分辯率高,選擇性好等優(yōu)勢成為分離純化糖鏈的重要手段,也是當(dāng)前糖鏈結(jié)構(gòu)分析的主流技術(shù)[21]。MDLC與常規(guī)糖苷酶協(xié)同處理相比其單獨(dú)作用更有效且適用于各種吡啶基胺聚糖[20]。

2.2質(zhì)譜技術(shù)

質(zhì)譜技術(shù)(mass spectrometry,MS)可以精確測量生物大分子的分子量并提供其分子結(jié)構(gòu)信息。基于MS結(jié)合其它技術(shù)在糖蛋白、糖肽、糖鏈分析中扮演越來越重要的作用,其可以測定糖基化位點(diǎn),單糖組成,糖鏈序列(圖1)等[22]。電噴霧電離(electrospray ionization,ESI)和基質(zhì)輔助激光解吸電離(matrix-assisted laser desorptionionization,MALDI)的“軟電離”特性適合于高極性、難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定的物質(zhì)分析[23]。它們各有特色但也存在局限性。ESI-MS具有很高的靈敏性,可以分析高達(dá)20000 Da大分子，也可以分析小于1000 Da小分子[24]。但ESI-MS易受樣品和溶劑中干擾物的影響。MALDI-MS也可用于分析大分子物質(zhì),對干擾物的忍受力強(qiáng),并且在譜圖上碎片峰少,易于解析結(jié)構(gòu),但在解吸過程中易造成較弱的鍵斷裂,從而部分糖鏈結(jié)構(gòu)丟失,丟失的糖鏈可能會有重要的生物活性,因此,ESI-MS和MALDI-MS不能完全解析糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)。近年來,對于復(fù)雜聚糖結(jié)構(gòu)分析首先通過串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)實(shí)現(xiàn),即為MSn[25-26]。MSn技術(shù)就是進(jìn)行多次質(zhì)譜聯(lián)用,從樣品中選擇母離子進(jìn)行逐級轟擊分析,不受其他物質(zhì)干擾,所獲得的糖鏈結(jié)構(gòu)信息更加詳盡。因?yàn)閭€別聚糖傾向于顯示一個特性的模式,通常在高達(dá)到MS3或者M(jìn)S4的過程下被有效地分化,每級MS只提供了一組質(zhì)核比(m/z)值,用于解釋理論上可能的組合物[27]。目前,通過建立標(biāo)準(zhǔn)糖串聯(lián)質(zhì)譜庫進(jìn)行比較相關(guān)糖鏈,從而達(dá)到確定糖鏈結(jié)構(gòu)的目的。

圖1 質(zhì)譜技術(shù)在分析糖蛋白應(yīng)用總結(jié)Fig.1 An overview of glycoprotein characterization techniques by MS

2.3毛細(xì)管電泳

毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)與傳統(tǒng)的電泳技術(shù)相比主要特點(diǎn)在于其需要在散熱效率極高的毛細(xì)管內(nèi)進(jìn)行。它在分析糖蛋白方面是非常有效的工具。相對于傳統(tǒng)的糖基化研究需要高純度糖蛋白樣品而言,毛細(xì)管電泳具備最明顯的優(yōu)勢就是能分離混合物[28]。它要求較高的理論塔板數(shù)(>100000),在測定的速度和靈敏度上都有巨大的優(yōu)勢,同時毛細(xì)管技術(shù)要求樣品的用量很少,一般只需要納升級的進(jìn)樣量。但是毛細(xì)管電泳技術(shù)也有一些缺陷,一個是它需要在毛細(xì)管壁上吸取待處理樣液,因而,需要開發(fā)和應(yīng)用有效的毛細(xì)管壁的材料。另外對分析生物樣品中低濃度的蛋白質(zhì)的靈敏度不高,需要結(jié)合MS一起使用[29]。應(yīng)用MS高敏感性的特點(diǎn)作為CE的檢測器,CE-MS具有高敏感性,高分辨率的特點(diǎn),在測定多糖分子量,組成分析以及純度鑒定方面應(yīng)用廣泛。另外CE也可與激光誘導(dǎo)熒光系統(tǒng)(LIF)聯(lián)合使用,盡管CE-LIF不能直接用于檢測聚糖結(jié)構(gòu),但CE-LIF主要用于分離聚糖的同分異構(gòu)。

2.4凝集素

凝集素(agglutinin)主要是從植物、動物、微生物中分離具有特異性糖結(jié)合活性的蛋白。凝集素最大的特點(diǎn)就是可以識別糖蛋白、糖脂以及細(xì)胞膜上復(fù)雜結(jié)構(gòu)的糖鏈,并且一種凝集素只能與一種糖鏈特異性結(jié)合[30]。不同的糖肽需要找不同的凝集素結(jié)合,如,刀豆凝集素(convalina agglutinin,Con A)富集高甘露糖型的糖肽、麥胚凝集素(wheat germ agglutinin,WGA)富集末端含有N-乙酰氨基葡萄糖和唾液酸的糖肽、橙黃網(wǎng)胞盤菌凝集素(aleuria aurantia lectin,AAL)能富集巖藻糖的糖肽等[31]。凝集素已廣泛用于聚糖的富集和鑒定,并在不同組分不同類型的聚糖研究中得到了應(yīng)用[32]。Kasai將外源凝集素與前沿親和色譜(frontal affinity chromatography,FAC)結(jié)合[33],FAC提供聚糖和凝集素連接強(qiáng)度的數(shù)值,隨著自動化FAC系統(tǒng)的出現(xiàn),處理樣品能力大大提高,凝集素特異性結(jié)合糖系統(tǒng)的數(shù)據(jù)可以被迅速積累,并且凝集素的特異性以Kd值的方式體現(xiàn)也比以往的方式更系統(tǒng)[34-35]。

凝集素芯片技術(shù)的出現(xiàn)對應(yīng)用糖組學(xué)研究復(fù)雜的聚糖結(jié)構(gòu)的高通量、高靈敏性的鑒定提供了方便[36],其原理就是將凝集素固定在經(jīng)醛基化、環(huán)氧化或其他方式修飾過的玻璃芯片上,再用熒光標(biāo)記的凝集素與樣品雜交,檢測陽性信號,分析對應(yīng)的寡糖結(jié)構(gòu),從而達(dá)到鑒定糖鏈結(jié)構(gòu)的目的[37]。凝集素芯片技術(shù)在鑒定某一特定類型的糖鏈結(jié)構(gòu)或者糖鏈連接鍵等方面有優(yōu)勢,但其只能檢測部分結(jié)構(gòu)信息,這并不能判斷出該糖鏈結(jié)構(gòu)存在于哪種聚糖中。

糖組學(xué)研究的相關(guān)技術(shù)在分析糖鏈結(jié)構(gòu)方面都有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),但也都存在弊端。MDLC、MS、CE、FAC在分析糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)時,都需要對樣品進(jìn)行處理,除去對待測糖鏈有影響的糖鏈,這樣會消耗大量的時間和人力。凝集素芯片技術(shù)在操作前不需處理樣品,并同時分析多組樣品,操作時間短,準(zhǔn)確性高,分析后的樣品還可用于后續(xù)分析,但此技術(shù)芯片上的凝集素種類還不夠完善,不能分析復(fù)雜的糖鏈結(jié)構(gòu),在鑒定方面沒有達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化,并且凝集素獲得的信息不夠完善。使用糖組學(xué)的單一技術(shù)研究可能會遇到很多困難,因此采用糖組學(xué)多元化策略鑒定糖鏈結(jié)構(gòu)。多維液相色譜法可以進(jìn)行多維分離,分離的更徹底,與質(zhì)譜法聯(lián)用自動化程度高,重復(fù)性好;外源凝集素技術(shù)在測定糖鏈結(jié)構(gòu)方面也一直受到青睞。凝集素鑒定糖鏈結(jié)構(gòu)具有特異、敏感、快速的特點(diǎn),將凝集素與FAC結(jié)合使用,可以提高糖鏈回收率,在解析混合糖鏈也有較好的效果。

3 結(jié)構(gòu)糖組學(xué)的應(yīng)用

食源性糖蛋白具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎、防衰老等功效[38],目前提取食源性糖蛋白方法主要有水浸提法、有機(jī)溶劑提取法和酸堿溶液提取法等[39-41],糖蛋白的分離純化大多采用DEAE離子交換和Sephadex凝膠層析法,并通過紫外分光光度計和紅外光譜等技術(shù)鑒定單糖組成的一級結(jié)構(gòu)[42-43]。目前結(jié)構(gòu)糖組學(xué)在食源性糖蛋白及其他領(lǐng)域的成功運(yùn)用為糖蛋白的純化及結(jié)構(gòu)解析提供了新的解決策略。

3.1結(jié)構(gòu)糖組學(xué)相關(guān)技術(shù)在食源性糖蛋白中應(yīng)用

質(zhì)譜技術(shù)早已在醫(yī)藥、臨床、化學(xué)和化工領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,現(xiàn)將質(zhì)譜技術(shù)和毛細(xì)管技術(shù)結(jié)合應(yīng)用在糖鏈結(jié)構(gòu)方面的研究。Hilz等從黑色板栗中提取木糖葡聚糖,經(jīng)內(nèi)切葡聚糖酶降解后應(yīng)用CE-ESI-MSn分析鑒定葡聚糖的結(jié)構(gòu)[44];Zamfir等采用CE-ESI對含有硫酸皮膚素/軟骨素的寡聚糖進(jìn)行分析,鑒定了所含二糖的種類和結(jié)構(gòu)[45]。孫偉等從生藥枸杞中提取枸杞多糖,利用電噴霧電離二級質(zhì)譜以及串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),分析出其包含19條N-糖鏈且都是中性糖[46]。最近有研究者利用CE-LIF技術(shù)將NBD-F作為熒光標(biāo)記物分析人類轉(zhuǎn)鐵蛋白,牛胎球蛋白以及人類α-1酸性糖蛋白中N-糖鏈(圖2)[47]。李玲梅等人用聚丙烯凝膠電泳法分離大豆糖蛋白,回收出現(xiàn)的蛋白質(zhì)條帶并釋放凝膠中的N-糖鏈,標(biāo)記糖鏈,應(yīng)用ESI-MS、MSn、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用分析糖蛋白,確定15條蛋白質(zhì)條帶,其中7條是低聚甘露型聚糖,2條是α-1,3核心巖藻聚糖,6條是沒有聚糖修飾的蛋白質(zhì),并對后續(xù)研究糖蛋白糖基化位點(diǎn)和大豆糖蛋白生物活性提供基礎(chǔ)[48]。質(zhì)譜技術(shù)對待測樣品要求不高,可以是氣體、液體,也可以是固體,每次測定樣品用量少,靈敏度高,尤其是MSn可以對樣品多級測定,準(zhǔn)確性高,能分析相對分子量較大的物質(zhì),相信MS在未來糖鏈結(jié)構(gòu)的鑒定會有更好的應(yīng)用。

圖2 CE-LIF分析寡糖結(jié)構(gòu)Fig.2 Capollary electrophoresis with laser-induced fluorometric detection of NBD-F-labeled oligosaccharides注:(a)人體血清轉(zhuǎn)鐵蛋白、(b)牛胎球蛋白、(c)人類α-1酸性糖蛋白中提取的寡糖。

3.2結(jié)構(gòu)糖組學(xué)相關(guān)技術(shù)在其他方面的應(yīng)用

結(jié)構(gòu)糖組學(xué)技術(shù)在其他領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用,其中凝集素技術(shù)在生物學(xué)方面一直是熱點(diǎn)技術(shù),有研究利用ConA、晶狀體凝集素(lentil lectin,LCH)、雪花凝集素(sonwdrop lectin,GNA)3種植物凝集素組成親和層析柱分離純化N-連接糖蛋白,進(jìn)行二維電泳、圖像分析、質(zhì)譜分析確定肝癌細(xì)胞表達(dá)規(guī)律[49]。齊義軍等應(yīng)用植物凝集素親和層析法從血清中富集寡甘露糖型、唾液酸型的N-連接糖蛋白及O-連接的糖蛋白,通過加入ConA、LCH、GNA于Poly-Prep層析柱內(nèi)制備寡甘露糖型糖蛋白;利用瓊脂糖偶聯(lián)的麥胚凝集素WGA、接骨木凝集素(elderberry lectin,SNA)、馬鞍樹凝集素(maackia amurensis lectin,MAL)于Poly-Prep層析柱內(nèi)富集唾液酸型N-連接糖蛋白;通過花生凝集素(peanut agglutinin,PNA)和木菠蘿凝集素(Jacalin)于Poly-Prep層析柱內(nèi)富集唾液酸型O-連接糖蛋白,最后應(yīng)用MS檢測,確定所獲得的14個糖蛋白均為N-連接糖蛋白[50]。鄒寧等利用凝集素分析患者血清中高甘露糖表達(dá)量,研究高甘露糖型糖蛋白在不同疾病中的表達(dá)規(guī)律[51]。在生物體系中糖蛋白絕對豐度低,富集糖蛋白是研究糖組學(xué)的基礎(chǔ),也是目前研究的瓶頸,使用凝集素親合層析法富集糖蛋白是目前研究者首選的技術(shù),但目前已知的凝集素種類并不全面,并不能結(jié)合所有糖蛋白,所以凝集素的開發(fā)也是未來的焦點(diǎn)。凝集素芯片技術(shù)主要應(yīng)用在糖蛋白的檢測和細(xì)胞表面糖結(jié)構(gòu)的檢測。Pilobello等用凝集素芯片技術(shù)鑒定卵清蛋白結(jié)構(gòu),證明凝集素芯片能夠區(qū)分糖鏈的不同連接方式并檢測出不同樣品的糖結(jié)構(gòu),之后陸續(xù)開發(fā)出檢測細(xì)胞表面糖結(jié)構(gòu)的芯片以及檢測糖蛋白結(jié)構(gòu)的產(chǎn)品QproteomeTMGlycoArray kits,并且應(yīng)用在快速檢測糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)上[52]。

4 結(jié)論與展望

解析糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)、闡明糖鏈功能以及獲得更多的生物學(xué)信息,對日后開發(fā)抗腫瘤、抗病毒、抗感染等功能性食物、藥物方面起到重要的促進(jìn)作用。糖鏈不同于有模板可循的核酸和蛋白質(zhì),因此,鑒定糖鏈結(jié)構(gòu)和糖基化位點(diǎn)是食源性糖蛋白研究的難點(diǎn)。糖基化鑒定的難點(diǎn)在于糖鏈?zhǔn)谴蠓肿佣掖嬖谖⒂^不均一性,同時糖鏈在串聯(lián)質(zhì)譜中碎裂且與肽段的碎裂規(guī)律不同,導(dǎo)致蛋白質(zhì)組學(xué)的質(zhì)譜解析方法和軟件難以完整地鑒定肽段序列和糖鏈結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)糖組學(xué)是研究糖基化位點(diǎn)的有效手段:利用N-糖酰胺酶切除糖鏈后鑒定N-糖基化位點(diǎn);通過電子轉(zhuǎn)運(yùn)裂解鑒定糖肽肽段;將高能碰撞裂解與電子轉(zhuǎn)運(yùn)裂解聯(lián)用或碰撞誘導(dǎo)裂解與三級質(zhì)譜聯(lián)用鑒定完整N-糖肽。

多維液相色譜法,軟電離質(zhì)譜技術(shù),凝集素芯片等結(jié)構(gòu)糖組學(xué)研究方法的出現(xiàn)為鑒定糖鏈結(jié)構(gòu)和糖基化位點(diǎn)提供了新途徑。但質(zhì)譜技術(shù)、色譜技術(shù)等樣品消耗量大,時間長,而凝集素法由于其特異性識別糖蛋白,可以減少預(yù)先對糖鏈分離步驟,從而縮短時間,但凝集素技術(shù)并不適用于所有糖蛋白糖鏈的解析,不具備普遍性。因此,將結(jié)構(gòu)糖組學(xué)研究技術(shù)協(xié)同運(yùn)用進(jìn)而準(zhǔn)確解析食源性糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)以及糖基化位點(diǎn)是未來研究的焦點(diǎn)。

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Progressoffood-derivedglycoproteinsbasedonthestructuralglycomics

ZHAOWen-zhu1,CHENYue-jiao1,ZHANGHong-ling1,YUZhi-peng1,*,LIUJing-bo2,YUHan-jie3,LIJian-rong1,*

(1.College of Food Science and Engineering,Bohai University,Jinzhou 121013,China; 2.Laboratory of Nutrition and Functional Food,Jilin University,Changchun 130062,China; 3.Laboratory for Functional Glycomics,College of Life Sciences,Northwest University,Xi’an 710069,China)

Glycoprotein is an important compound,and glycan possess more diverse structure and more functions which makes glycan to take part in various activities. Glycomics especially structural glycomics as an emerging field that follows the genomics and proteomics,focusing on analyzing glycoprotein structure. The passage mainly introduced the application of structural glycomics on the aspect of glycan structure and glycosylation sites in foodborne glycoprotein,which hoped provide the reference for subsequent research.

glycoproteins;glycan;glycomics;structural glycomics

2017-01-10

趙文竹(1986-)，女，博士，講師，研究方向：果蔬生物活性成分的結(jié)構(gòu)與功能研究，E-mail：zhaowenzhu777@163.com。

*通訊作者:于志鵬(1984-)，男，博士，講師，研究方向：功能蛋白與活性肽的結(jié)構(gòu)及功能研究，E-mail：yuzhipeng20086@sina.com。 勵建榮(1964-)，男，博士，教授，研究方向:水產(chǎn)與果蔬加工，E-mail：ljr64@163.com。

國家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(31601479)。

TS201

:A

:1002-0306(2017)12-0333-06

10.13386/j.issn1002-0306.2017.12.062