包被肉桂油對肉雞生長性能、血漿生化指標(biāo)、免疫器官指數(shù)和腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

段 瑞，郭雙雙，丁斌鷹，李葉涵，程 強，畢云天

(武漢輕工大學(xué)動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)湖北省重點實驗室，湖北 武漢 430023)

包被肉桂油對肉雞生長性能、血漿生化指標(biāo)、免疫器官指數(shù)和腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

段 瑞，郭雙雙，丁斌鷹，李葉涵，程 強，畢云天

(武漢輕工大學(xué)動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)湖北省重點實驗室，湖北 武漢 430023)

研究旨在探討日糧中添加不同水平的包被肉桂油對肉雞生長性能、血漿生化指標(biāo)、免疫器官指數(shù)和腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響，試驗選取1日齡(45.23±0.50) g的科寶(cobb)肉雞540只，隨機分為6個處理組:對照組、正對照組、50 mg/kg肉桂油組、100 mg/kg肉桂油組、200 mg/kg肉桂油組、300 mg/kg肉桂油組；每組6個重復(fù)，每個重復(fù)15只雞。試驗期為42 d。結(jié)果表明：1)與對照組相比，日糧中添加300 mg/kg肉桂油提高了42日齡肉雞的平均日增重、平均日采食量(P<0.05)。2)日糧中添加不同濃度的肉桂油均降低了肉雞前期血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活力、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力(P<0.05)。3)日糧中添加50、100 mg/kg的包被肉桂油分別提高了21、42日齡脾臟指數(shù)(P<0.05)。4) 日糧中添加300 mg/kg肉桂油提高了肉雞前期十二指腸的絨毛高度、空腸絨毛高度/隱窩深度(P<0.05)。綜合來看，日糧中添加肉桂油能夠提高肉雞的生長性能，促進(jìn)脾臟發(fā)育, 改善血液狀況、保持腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性。包被肉桂油可以替代黃霉素在肉雞飼料中的應(yīng)用，適宜添加劑量為300 mg/kg。

肉桂油；肉雞；血漿生化指標(biāo)；免疫器官；腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)

近年來，食品安全問題受到社會的普遍關(guān)注，畜禽養(yǎng)殖中抗生素的濫用問題非常突出。隨著國內(nèi)外對抗生素的禁用或限用，抗生素替代品的開發(fā)和研究一直是畜禽業(yè)廣泛關(guān)注的熱點。植物提取物具有廣泛的生理功能，如殺菌、抗病毒、抗氧化和抗炎等，它被應(yīng)用于家禽飼料中[1]，是一種潛在的抗生素替代品。肉桂油是肉桂的提取物，其主要成分為肉桂醛。在肉雞的日糧中添加肉桂醛能夠提高生長性能和養(yǎng)分的消化率，增加盲腸雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量，降低大腸桿菌的數(shù)量，改善腸道絨毛的形態(tài)結(jié)構(gòu)和肉雞的免疫機能[2]。包被是一種能保護飼料添加劑有效組分活性和保證產(chǎn)品品質(zhì)一致高效的技術(shù)，在提高產(chǎn)品穩(wěn)定性、掩蓋不良?xì)馕?、控制產(chǎn)品在消化道中的釋放和提高生物利用度等方面發(fā)揮著重要作用[3]。為保證肉桂油在小腸內(nèi)有效定點釋放，本次試驗選用了包被肉桂油，探討肉雞日糧添加包被肉桂油對生長性能、血漿生化指標(biāo)、免疫器官指數(shù)及腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響，為肉桂油在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與基礎(chǔ)日糧

包被肉桂油由湖北省某生物技術(shù)有限公司提供，產(chǎn)品外觀為淺黃色粉末狀，肉桂醛質(zhì)量分?jǐn)?shù)為35.7%，添加劑的劑量選擇依據(jù)本實驗室前期肉桂油在仔豬日糧中的應(yīng)用而定[4]；抗生素用黃霉素，抗生素的劑量依照本試驗肉桂醛最小添加劑量而定?；A(chǔ)日糧采用玉米-豆粕型日糧，基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

注：礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克全價料提供：銅 8 mg；鋅75 mg；鐵80 mg；錳100 mg；硒0.15 mg；碘0.35 mg。維生素預(yù)混料為每千克全價料提供：維生素A 12 500 IU；維生素D32 500 IU；維生素K32.65 mg；維生素B12 mg；維生素B26 mg；維生素B120.025 mg；維生素E 30 IU；生物素 0.032 5 mg；葉酸 1.25 mg；泛酸 12 mg；尼克酸50 mg。

1.2 試驗動物及設(shè)計

試驗選取1日齡科寶肉雞540只，按照體重相近的原則隨機分為6個處理組(對照組、正對照組、50 mg/kg肉桂油組、100 mg/kg肉桂油組、200 mg/kg肉桂油組、300 mg/kg肉桂油組)，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)15只雞。對照組肉雞飼喂基礎(chǔ)日糧，正對照組飼喂添加50 mg/kg黃霉素的基礎(chǔ)日糧，其它處理組分別飼喂添加50、100、200和300 mg/kg肉桂油的基礎(chǔ)日糧。試驗周期42 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

肉雞采用網(wǎng)欄平養(yǎng)的方式，每籠15只雞。試驗前將雞舍、雞欄、料槽、飲水器等徹底打掃干凈消毒，并對雞舍整體采用高錳酸鉀-甲醛方法進(jìn)行消毒熏蒸。于7、21日齡接種新城疫疫苗，14、28日齡接種法氏囊疫苗。肉雞自由采食和飲水，24 h光照，每周進(jìn)行打掃并消毒。試驗0～7日齡各組溫度控制在32～34℃，7～14日齡控制在30～32℃，試驗15～42日齡溫度控制在(26±2)℃，濕度50%～60%。

1.4 樣品采集與處理

在試驗21 d和42 d，從每個重復(fù)隨機抽取1只體重相近肉雞，空腹進(jìn)行翅下靜脈采血，用EDTA作為抗凝劑，3 000 r/min離心10 min獲得血漿，迅速分裝后并轉(zhuǎn)移至-20℃保存待測。然后用頸部脫臼法致死進(jìn)行屠宰，迅速取出胸腺、脾臟、法氏囊稱重并記錄。迅速取出并分離十二指腸、空腸、回腸，分別取每個腸段中間部分約3 cm長樣品，用預(yù)冷的生理鹽水沖去腸道內(nèi)容物并置于已預(yù)冷的4%多聚甲醛固定液中固定，用于制作切片觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)。

1.5 測定指標(biāo)與方法

1.5.1 生長性能

試驗開始后，每周對試驗肉雞稱重，同時記錄每天的采食量和死亡率，并統(tǒng)計肉雞的平均日采食量、平均日增重、料重比。

1.5.2 血漿生化指標(biāo)測定

用自動生化分析儀(日立HITEC7100)測定血漿中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、堿性磷酸酶(ALP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、膽固醇(CHOL)和甘油三酯(TG)的水平。

1.5.3 免疫器官指數(shù)的測定

解剖后迅速分離并稱取胸腺、脾臟、法氏囊的質(zhì)量，分別計算其與質(zhì)量的相對比值。

1.5.4 腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的測定

將腸段分別從4%的多聚甲醛溶液中取出，用清水輕輕泡洗后修整好腸段，再用不同濃度的酒精進(jìn)行梯度脫水后，再用二甲苯將樣本透明處理，處理完成后用石蠟將樣品進(jìn)行包埋。包埋后將組織蠟塊用薄片切片機切割成厚度5 μm的切片，經(jīng)烤片、烘片處理后，采用HE染色法，用蘇木精-伊紅染液進(jìn)行染色，然后用中性樹脂封片，做成永久切片。制成的切片用光學(xué)顯微鏡(裝有計算機輔助形態(tài)測定系統(tǒng))觀察切片，從每個小腸組織的不同部位分別選取10根完好的腸道絨毛，測量每根絨毛的絨毛高度和隱窩深度。絨毛高度：絨毛頂端到腸腺開口處垂直距離。隱窩深度：隱窩開口處到隱窩基底部的垂直距離。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)，當(dāng)組間差異顯著時用Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗，以“P<0.05”為差異顯著，“P<0.01”為差異極顯著水平，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 包被肉桂油對肉雞生長性能的影響

由表2可知，與對照組相比，黃霉素處理對1～42日齡肉雞平均日增重、平均日采食量、料重比均無影響(P>0.05)。與對照組、正對照組相比，日糧中添加50、100 、200 mg/kg肉桂油對肉雞平均日增重、平均日采食量、料重比也均無影響(P>0.05)，但日糧中添加300 mg/kg肉桂油提高了平均日增重8.3% (P<0.05)、平均日采食量9.0% (P<0.05)。各處理組間的料重比均沒有表現(xiàn)出顯著差異(P>0.05)。

表2 包被肉桂油對肉雞生長性能的影響(1～42日齡)

注：同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)小寫字母相同表示差異不顯著(P> 0.05)，小寫字母不同者表示差異顯著(P< 0.05)。下表同。

2.2 包被肉桂油對肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

由表3可知，在21日齡 ，與對照組相比，黃霉素處理降低了血漿中TBIL含量37.9%(P<0.05)、ALT活力58.6%(P<0.05)、AST活力18.0%(P<0.05)和TG含量21.5%(P<0.05)，提高了血漿中TP水平11.5%(P<0.05)和ALB水平21.5%(P<0.05)。肉桂油處理降低了血漿中TBIL含量(56.0%、23.1%、29.7%、30.2%)(P<0.05)，日糧中添加50、200和300 mg/kg肉桂油降低了ALT活力(29.0%、60.7%、38.8%)和AST活力(20.4%、19.0%、20.5%)(P<0.05)。與對照組相比，添加200 mg/kg肉桂油提高了血漿中TP水平10.7%(P<0.05)，100、200 mg/kg肉桂油均提高了血漿中ALB水平(16.8%、19.6%)(P<0.05)，添加50 mg/kg肉桂油降低了CHOL含量20.2%(P<0.05)，添加200 mg/kg肉桂油降低了TG含量20.3%(P<0.05)，日糧中添加100、200 mg/kg肉桂油降低了ALP活力(42.5%、30.6%)(P<0.05)。

在42日齡，與對照組相比，黃霉素處理降低了血漿中TBIL含量88.4% (P<0.05)、ALP活力32.8%(P<0.05)。與對照組相比，日糧中添加50 mg/kg肉桂油降低了血漿中TBIL含量38.3% (P<0.05)、提高了ALB水平17.9%(P<0.05)、降低了ALP活力47.8%(P<0.05)。與正對照組相比，肉桂油處理均降低了血漿中ALT活力(27.9%、21.8%、31.7%、33.0%)(P<0.05)，日糧中添加50 mg/kg肉桂油降低了血漿中AST活力28.8%(P<0.05)、提升了ALB水平20.4%(P<0.05)。

2.3 包被肉桂油對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表4可見，在整個試驗階段，與對照組相比，黃霉素處理對胸腺、脾臟、法氏囊指數(shù)均無影響(P>0.05)。在21日齡 ，與對照組和正對照組相比，日糧中添加50 mg/kg肉桂油分別提高了肉雞脾臟指數(shù)23.7%、17.7%(P<0.05)。

在42日齡，與50 mg/kg肉桂油組相比，日糧中添加100 、200mg/kg肉桂油分別提高了肉雞胸腺指數(shù)17.8%、19.8%(P<0.05)，日糧中添加100 mg/kg肉桂油提高了肉雞脾臟指數(shù)47.6%(P<0.05)，黃霉素處理及肉桂油處理對法氏囊指數(shù)均無影響(P>0.05)。

2.4 包被肉桂油對肉雞腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由表5可知，在21日齡，與對照組相比，日糧中添加300 mg/kg肉桂油增加了十二指腸的絨毛高度37.5%(P<0.05)、隱窩深度37.9%(P<0.05)，提高了空腸絨毛高度/隱窩深度6.2%(P<0.05)。

在42日齡，與50 mg/kg肉桂油處理組相比，日糧中添加100 、200、300mg/kg肉桂油分別提高了空腸的絨毛高度14.5%、13.1%、27.9%(P<0.05)。與對照組相比，日糧中添加100 、200、300 mg/kg肉桂油分別提高了空腸絨毛高度/隱窩深度37.0%、31.2%、30.4%(P<0.05)。

表3 包被肉桂油對肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

表4 包被肉桂油對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

表5 包被肉桂油對肉雞腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

注：V為絨毛高度，C為隱窩深度

3 討論

3.1 包被肉桂油對肉雞生長性能的影響

肉桂油是一種從肉桂和桂皮中提取的植物精油，肉桂醛作為香料，其本身特有的香味能提高動物的采食欲望，添加了肉桂油的飼料不用再添加其他香料和引誘劑[5]。目前，大部分的研究是在肉雞日糧中添加復(fù)合植物精油。Osman[6]添加200 mg/kg混合植物精油使肉雞日增重和耗料增重比較對照組提高約16%和12%，比抗生素組高8%和6%。Alcicek[7]添加48 mg/kg植物精油顯著改善肉雞的增重，添加48或72 mg/kg精油顯著改善飼料轉(zhuǎn)化效率，提高0～21日齡采食量。張志杰[8]添加100 g/t植物精油復(fù)合酶能提高肉雞21日齡平均日增重，對22～42日齡階段平均日增重有增加的趨勢。毛紅霞[9]等報道，隨著日糧中復(fù)合植物精油添加量增加，肉仔雞平均日增重、平均日采食量呈增加趨勢，料重比呈降低趨勢。以上研究表明混合精油可以作為潛在的肉雞生長促進(jìn)劑。本試驗在日糧中單獨添加不同濃度的肉桂油替代日糧中的黃霉素，日糧中添加300 mg/kg肉桂油可顯著提高肉雞全期平均日增重和平均日采食量?？赡芤驗槿夤鹩拖捣枷阈越∥蛤?qū)風(fēng)劑，對腸道有緩和的刺激作用，促進(jìn)腸液的分泌，刺激動物食欲，增強消化功能。這表明，肉桂油不僅能替代肉仔雞日糧中的黃霉素的應(yīng)用，而且肉桂油促生長效果要優(yōu)于黃霉素。

3.2 包被肉桂油對肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

總膽紅素主要用來診斷肝臟或腸道是否發(fā)生異常，當(dāng)肝臟受損時，總膽紅素會升高，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是反應(yīng)心臟功能和肝臟功能的重要指標(biāo)[10]。正常情況下，血清中兩種酶的活性值很小，當(dāng)機體病變時，該酶會從細(xì)胞釋放到血清中，從而使血清中酶活力增加[11]。甘油三酯作為血液中的一種脂類物質(zhì)，過高時易引起動脈粥樣硬化，誘發(fā)心血管疾病。本試驗中，相比正對照組，肉桂油處理降低了總膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶，表明在肉雞日糧中添加肉桂油不會損害肝臟和心臟，對動物機體無不良影響。血清總蛋白主要分為白蛋白和球蛋白，其含量在一定程度上可以反應(yīng)機體發(fā)育的營養(yǎng)狀況以及蛋白質(zhì)的代謝水平[12]。血清白蛋白由肝臟合成，是機體蛋白質(zhì)營養(yǎng)需求的主要來源，用于修補組織器官、提供能量、維持血漿滲透壓和作為其他營養(yǎng)物質(zhì)載體等多種功能[13]。本研究表明，日糧中添加50、100 、200 mg/kg肉桂油均提高了肉仔雞前期血液中總蛋白和白蛋白水平，說明動物體內(nèi)氨基酸代謝旺盛，蛋白質(zhì)分解下降，合成代謝增強，有利于蛋白質(zhì)在體內(nèi)的蓄積。

3.3 包被肉桂油對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

胸腺、脾臟和法氏囊是肉雞重要免疫器官，參與機體的細(xì)胞和體液免疫，一般認(rèn)為其質(zhì)量的增加是由于自身細(xì)胞分裂和生長發(fā)育所致，可表明機體免疫機能和免疫水平提高。Rivas[14]研究表明，胸腺、脾臟、法氏囊可用來評價其免疫狀況，其絕對重量和相對重量越大，說明機體的細(xì)胞免疫和體液免疫機能越強。王秋梅[15]報道，飼糧中添加100 、125、150 mg/kg復(fù)合精油可以顯著提高21日齡肉雞法氏囊指數(shù)，添加100 mg/kg復(fù)合精油可顯著提高42日齡肉雞脾臟指數(shù)。Sung[16]等通過體外實驗表明，添加了肉桂醛的實驗組(25～400 ng/ml)脾淋巴細(xì)胞的增殖能力顯著提高。 在本試驗21日齡結(jié)果中，添加50 mg/kg肉桂醛油的脾臟指數(shù)相較黃霉素處理組顯著提高了，42日齡時，100 mg/kg肉桂油組的脾臟指數(shù)相較黃霉素處理組顯著提高了。說明肉桂油對肉仔雞脾臟的發(fā)育具有促進(jìn)作用，從而增強機體的免疫功能。其原因可能是肉桂油進(jìn)入機體后在腸道內(nèi)降解為機體所需的營養(yǎng)成分，營養(yǎng)成分隨血液循環(huán)進(jìn)入脾臟淋巴細(xì)胞，從而促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖并促進(jìn)脾臟發(fā)育[5]。

3.4 包被肉桂油對肉雞腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

小腸絨毛是營養(yǎng)物質(zhì)吸收的主要場所，絨毛高度與腸道上皮細(xì)胞數(shù)量具有顯著的相關(guān)性，只有成熟的細(xì)胞才具有吸收養(yǎng)分的功能。絨毛短時，成熟細(xì)胞少，養(yǎng)分吸收能力差；隱窩深度反映了細(xì)胞的生成率，隱窩變淺，表明細(xì)胞成熟率提高，分泌功能增強[17]。絨毛高度與隱窩深度的比值綜合地反映了小腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)，比值下降，表明黏膜受損；比值上升，則黏膜結(jié)構(gòu)得到改善。Tiihonen等[18]研究認(rèn)為，在肉雞日糧中添加百里酚和肉桂醛能增加了腸道丁酸的含量，而丁酸能加速小腸上皮細(xì)胞的增殖和分化，修復(fù)腸黏膜。劉洋等[2]的研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加肉桂醛能顯著地提高21日齡肉雞十二指腸、空腸的絨毛高度以及絨毛高度與隱窩深度的比值。本試驗表明，飼料中添加300 mg/kg肉桂醛可以使42日齡肉雞十二指腸絨毛高度、空腸絨毛高度/隱窩深度比值較正對照組均有所提高；飼料中添加300 mg/kg肉桂醛可以使42日齡肉雞空腸絨毛高度、空腸絨毛高度/隱窩深度比值較正對照組也提高了。在本試驗中，日糧中添加肉桂油顯著增加了21日齡肉雞十二指腸絨毛高度以及 21日齡和42日齡空腸絨毛高度與隱窩深度比值，這與前人研究結(jié)果一致，且添加300 mg/kg肉桂油的效果要優(yōu)于其他濃度肉桂油處理組。這可能與腸道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境有關(guān)，據(jù)報道肉桂油對大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌都具有抑制活性作用[19]。蔣桂韜[20]認(rèn)為有害菌生長繁殖受抑制可以保護小腸黏膜不受損害，進(jìn)而影響小腸黏膜形態(tài)發(fā)生變化，有害菌與有益菌的優(yōu)勢地位將直接影響腸絨毛形態(tài)。

4 結(jié)論

在日糧中添加肉桂油能夠提高肉雞的生長性能，促進(jìn)脾臟發(fā)育、改善血液狀況、保持腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性。包被肉桂油可以替代黃霉素在肉雞飼料中的應(yīng)用，在本試驗條件下，肉桂油的添加劑量以300 mg/kg為宜。

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(責(zé)任編輯：舒蓮梅)

Effects of dietary coated cinnamomion on growth performance, blood biochemical index, immune organ and intestinal morphology in broilers

DUAN Rui,GUO Shuang-shuang,DING Bin-ying,Li Ye-han,CHENG Qiang,BI Yun-tian

(Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science, Wuhan Polytechnic University, Wuhan 430023，China)

It was conducted to investigate the effects of dietary supplementation with different levels of coated cinnamomion on the growth performance, serum biochemical parameters, relative weight of immune organs and intestinal morphology of broiler chickens. A total of 540 cobb broiler chickens (average initial weight at 45.23±0.50 g) were randomly assigned into six groups. The control group was fed the basal diet, while the positive control group was fed the basal diet supplemented with 50 mg/kg of flavomycin. The other four groups were fed basal diets supplemented with 50, 100, 200 and 300 mg/kg of coated cinnamomion,respectively. Each group had 6 replicates and each replicate had 15 chicks. The trail lasted for 42 d. Compared with the control group, the 300 mg/kg group significantly increased ADG and ADFI (P<0.05). All the treatment groups significantly decreasd ALT and AST activity(P<0.05) in the early age. The 50 and 100 mg/kg increased spleen index at d 21 and d 42, respectively.The 300 mg/kg group significantly increased the villus height in duodenum and the ratio of villus height to crypt deep in jejunum(P<0.05). In conclusion,the diet supplemented with coated cinnamomion could enhance the growth performance,promote the development of spleen,improve blood status, maintain the structure of intestinal morphology. The coated cinnamomion could replace flavomycin in broiler diet, and the optimal dose was 300 mg/kg.

cinnamomion ; broiler; plasma biochemical index; immune organ; intestinal morphology

2017-03-07；

2017-03-15

國家星火計劃(2013GA760002)。

段 瑞(1991-)，男，碩士，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。

丁斌鷹(1970-)，男，教授，研究生導(dǎo)師，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。

10.7633/j.issn.1003-6202.2017.05.013

S816.7；S816.32

A

1003-6202(2017)05-0049-06