過敏性紫癜患兒血清白介素18、基質(zhì)金屬蛋白酶-2組織抑制劑的含量檢測與腎臟損害關(guān)系

胡學(xué)文，張國華，吳艷紅

廣東藥科大學(xué)附屬第一醫(yī)院兒科，廣東 廣州 510080

過敏性紫癜患兒血清白介素18、基質(zhì)金屬蛋白酶-2組織抑制劑的含量檢測與腎臟損害關(guān)系

胡學(xué)文，張國華，吳艷紅

廣東藥科大學(xué)附屬第一醫(yī)院兒科，廣東 廣州 510080

目的檢測過敏性紫癜患兒白介素18（IL-18）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）及其組織抑制劑（TIMP-2）的血清水平，并探討其與腎臟損害的關(guān)系。方法過敏性紫癜患兒58例，根據(jù)臨床尿檢結(jié)果分為單純性紫癜組30例和紫癜性腎炎組28例，另設(shè)健康對照組20例；采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法，分別檢測受研對象IL-18，MMP-2以及TIMP-2的血清水平，并統(tǒng)計分析。 結(jié)果 與對照組相比，單純性紫癜組IL-18（t=32.23，P＜0.01）、MMP-2（t=21.29，P＜0.05） 及TIMP-2（t=16.82，P＜0.05）均明顯增高，紫癜性腎炎組IL-18（t=91.07，P＜0.01）、MMP-2（t=46.04，P＜0.01） 及TIMP-2（t=9.27，P＜0.05）3項指標檢出值增高更加明顯；紫癜性腎炎組的IL-18（t=8.55，P＜0.05）、MMP-2（t=10.36，P＜0.05）水平均高于單純性紫癜組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；紫癜性腎炎組與單純性紫癜組的MMP-2的血清水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.69，P＞0.05）。結(jié)論過敏性紫癜患兒血中有較高的IL-18、MMP-2及MMP-2表達；IL-18、MMP-2的表達與患兒的腎臟損害相關(guān)。

過敏性紫癜；白介素18；基質(zhì)金屬蛋白酶-2；基質(zhì)金屬蛋白酶-2組織抑制劑；腎臟損害

過敏性紫癜（HSP）好發(fā)于3～10歲兒童，常累及腎臟組織，紫癜腎的發(fā)病機制仍未完全闡明。近年來的基礎(chǔ)及臨床研究顯示此類腎臟損害伴有明顯的免疫功能紊亂，主要為體液免疫異常，其中白細胞介素18（IL-18）在免疫性腎臟損害中起重要作用[1-4]。細胞外基質(zhì)的合成和或降解異?？赡苁荋SP發(fā)生發(fā)展過程中出現(xiàn)特征性病理改變的原因之一[5]。既往研究多側(cè)重單因素在免疫性腎臟損害過程中的作用，本文檢測HSP患兒血清中IL-18、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）及其組織抑制劑（TIMP-2）的表達水平。旨在綜合分析IL-18、MMP-2及TIMP-2在小兒HSP病程中的表達情況，并探討上述3種因素與腎臟損害的關(guān)聯(lián)性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取近年來佛山市多家醫(yī)院兒科確診為HSP的住院患兒58例為研究對象，根據(jù)尿檢結(jié)果分為單純性紫癜組30例和紫癜性腎炎組28例。58例患兒中，男25例，女33例；年齡：單純性紫癜組8.37±2.26歲，紫癜性腎炎組7.89±3.38歲；另設(shè)健康對照組20例。

1.2 分組及入選標準

健康對照組20例，為本院一般性體檢小兒，均無腎臟、風濕及哮喘疾病史；單純性紫癜組30例，包含皮膚型、腹型、關(guān)節(jié)型以及混合型。診斷標準按《實用兒科學(xué)》第7版所列1990年美國風濕病協(xié)會制定標準[6]；紫癜性腎炎組28例，即過敏性紫癜病程中伴有血尿和（或）蛋白尿。

1.3 方法

1.3.1 標本制備 入院24 h內(nèi)抽取靜脈血6 mL，離心分離血清，-20 ℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 標本檢測 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法。IL-18、MMP2、TIMP2試劑盒均購自廣州齊云生物技術(shù)公司，均為美國進口分裝產(chǎn)品，操作由本院檢驗科專人完成，操作步驟按試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)資料以均值±標準差表示，統(tǒng)計學(xué)采用SPSS 12.0.1軟件進行，兩組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IL-18檢測

單純性紫癜組IL-18檢出值顯著高于健康對照組（t=32.23，P＜0.01）；紫癜性腎炎組IL-18檢出值顯著高于健康對照組（t=91.07，P＜0.01）；紫癜性腎炎組的IL-18檢出值明顯高于單純性紫癜組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=8.55，P＜0.05，表1）。

2.2 MMP-2檢測

單純性紫癜組MMP-2檢出值顯著高于健康對照組（t=21.29，P＜0.05）；紫癜性腎炎組MMP-2檢出值顯著高于健康對照組（t=46.04，P＜0.01）；紫癜性腎炎組的MMP-2檢出值明顯高于單純性紫癜組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=10.36，P＜0.05，表1）。

2.3 TIMP-2檢測

單純性紫癜組TIMP-2檢出值顯著高于健康對照組（t=16.82，P＜0.05）；紫癜性腎炎組TIMP-2檢出值顯著高于健康對照組（t=9.27，P＜0.05）；單純性紫癜組與紫癜性腎炎組相比，TIMP-2的表達水平?jīng)]有顯著性差異（t=2.69，P＞0.05，表1）。

表1 3組樣本IL-18、MMP-2、TIMP-2檢出量的差異比較

3 討論

HSP是以壞死性小血管炎為主要病理改變的全身性疾病[7]，腎臟受累是影響HSP治療及預(yù)后的重要因素。IL-18有重要的免疫調(diào)節(jié)和保護功能，可與許多細胞因子相互作用，在感染性疾病、腫瘤性疾病、自身免疫性疾病中的表達情況對疾病的發(fā)生發(fā)展有重大意義。IL-18的升高可以引起組織損害、加重疾病，甚至可誘發(fā)疾病的產(chǎn)生。

活性形式MMPs的活性降低時可減少細胞外基質(zhì)降解，導(dǎo)致細胞外基質(zhì)積聚[8-9]。研究證明MMP-2在不同組織類型的腎臟疾病或同一類型疾病的不同病理階段，發(fā)揮不同的致病機制[10-11]。在炎癥性腎病中，MMP-2可能通過兩種機制導(dǎo)致腎小球損傷：（1）誘導(dǎo)系膜細胞由靜止表型轉(zhuǎn)變?yōu)檠装Y表型，出現(xiàn)快速增殖，合成細胞外基質(zhì)增多，導(dǎo)致系膜基質(zhì)堆積；（2）可降解基底膜，破壞細胞與基質(zhì)的正常連接，致腎小球正常結(jié)構(gòu)破壞，影響腎小球細胞外基質(zhì)的重塑[12,16-17]。在腎臟組織的病變過程中，TIMP-2起調(diào)節(jié)抑制作用[13,18]。

本文研究結(jié)果顯示，IL-18與MMP-2的檢測結(jié)果非常相似，單純性紫癜組、紫癜性腎炎組的檢出值均明顯高于健康對照組；紫癜性腎炎組的檢出值明顯高于單純性紫癜組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。顯示IL-18與MMP-2在HSP患兒血中有較高的表達，伴有腎臟損害時，二者升高尤其明顯，提示二者的升高與腎臟損害高度相關(guān)。本文IL-18的高水平檢出與Faust[14]、劉華鋒等[1,3]的報道基本相同；MMP-2的檢測結(jié)果則支持了羅克勤等[15]的動物實驗結(jié)果，MMP-2大量產(chǎn)生的結(jié)果，破壞了腎小球的正常結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生了紫癜性腎臟損害。

本文對TIMP-2的檢測結(jié)果顯示，單純性紫癜組、紫癜性腎炎組TIMP-2檢出值均高于健康對照組（P＜0.05）。結(jié)果提示HSP患兒在表達高水平MMP-2的同時，TIMP-2的表達水平也較正常兒童升高。而單純性紫癜組與紫癜性腎炎組相比，TIMP-2的表達水平并沒有顯著性差異。

與以往單因素研究結(jié)果不同的是，本文對IL-18、MMP-2以及TIMP-2的綜合檢測及對比分析，顯示了此3種因素對HSP病情發(fā)展及腎臟損害過程均有明顯相關(guān)，其中IL-18、MMP-2的升高與紫癜腎的病情發(fā)展有正相關(guān)，二者相互間是否相關(guān)尚有待進一步研究證實，而病患組TIMP-2的檢測值較對照組雖也有明顯升高，但紫癜腎組與單純性紫癜組的檢測值差異沒有顯著性意義。該結(jié)果提示：（1）合并腎功能損害的HSP患兒不能產(chǎn)生較單純紫癜患兒更高的TIMP-2；（2）HSP患兒TIMP-2的升高并不足以阻止MMP-2對腎小球結(jié)構(gòu)的破壞；（3）也許影響紫癜腎發(fā)生發(fā)展的其他因素的作用比TIMP-2的作用更重要。

參考文獻：

[1]劉華鋒, 陳孝文, 吳 平, 等. 狼瘡腎炎患者腎組織白細胞介素-18表達的研究[J]. 中華風濕病學(xué)雜志, 2002, 6(2)： 91-3.

[2]胡國華, 易著文, 黨西強, 等. 小兒紫癜性腎炎血白細胞介素10、白細胞介素18、腫瘤壞死因子α水平變化及雷公藤多苷干預(yù)的影響[J]. 臨床薈萃, 2011, 26(11)： 986-8.

[3]劉華鋒, 陳孝文, 吳 平. 原發(fā)性腎病綜合癥患者IL-18的血漿水平及其在腎組織的表達[J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2002, 3(10)： 570-2.

[4]Wong CK, Ho CY, Li EK, et al. Elevated production of interleukin-18 is associated with renal disease in patients with systemic lupus erythematosus[J]. Clin Exp Immunol, 2002, 130(2)： 345-51.

[5]陳香美. 細胞外基質(zhì)降解酶系統(tǒng)在腎臟疾病中作用的研究[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2001, 26(12)： 861-3.

[6]胡亞美, 江載芳. 諸福棠實用兒科學(xué)[M]7版. 北京： 人民衛(wèi)生出版社, 2002： 689-90.

[7]劉 冰, 何威遜. 兒童紫癜性腎炎治療研究現(xiàn)狀[J]. 臨床兒科雜志, 2006, 24(6)： 534-7.

[8]朱清義, 蔣玉紅, 谷照敏. 基質(zhì)金屬蛋白酶-2與腎疾病關(guān)系研究進展[J]. 實用醫(yī)學(xué)雜志, 2006, 22(6)： 722-4.

[9]趙 剛, 王靈臺. 基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子[J]. 實用肝臟病雜志, 2000, 5(3)： 182-5.

[10]傅思瑩, 陶 瑜. MMP2與腎臟疾病[J]. 國外醫(yī)學(xué)：泌尿系統(tǒng)分冊,2003, 23(4)： 466-9.

[11]袁發(fā)煥, 王海燕, 李驚子. ECM,MMPs/TIMPs及其調(diào)節(jié)研究進展[J]. 國外醫(yī)學(xué)：生理,病理科學(xué)與臨床分冊, 2000, 20(2)： 9-96.

[12]陶雪芬, 胡永洲. 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)抑制劑的研究概況[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué), 2001, 18(5)： 339-41.

[13]楊 荊, 白云凱. 基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子與腎臟疾病[J]. 云南醫(yī)藥, 2005, 26(1)： 60-2.

[14]Faust J, Menke J, Kriegsmann J, et al. Correlation of renal tubular epithelial cell-derived interleukin-18 up-regulation with disease activity in MRL-Faslpr mice with autoimmune lupus nephritis[J].Arthritis Rheum, 2002, 46(11)： 3083-95.

[15]羅克勤, 黃鋒先, 關(guān)偉明, 等. MMP2, MMP9在大鼠氨基核苷腎病腎組織中的表達及作用探討[J]. 中山大學(xué)學(xué)報： 醫(yī)學(xué)科學(xué)版, 2004,25(3)： 97-9.

[16]劉 靜, 陸 彪. 過敏性紫癜臨床特征及腎臟損害危險因素Logistic回歸分析[J]. 寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2011, 33(6)： 528-31.

[17]夏 沫, 王 吉, 張思瑾. 過敏性紫癜患兒腎臟損害的相關(guān)因素的分析[J]. 中國實驗診斷學(xué), 2011, 15(12)： 2117-8.

[18]黃巖杰, 李玉蕊, 趙麗麗, 等. 過敏性紫癜患兒血清和尿液sICAM-1、sVCAM-1水平檢測[J]. 鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版), 2013, 48(2)：179-81.

Relationship between the content of interleukin 18, matrix metalloproteinases-2 and its organization inhibitors in serum of children with henoch-schonlcin purpura and kidney damage

HU Xuewen, ZHANG Guohua, WU Yanhong
Department of Pediatrics, the First Hospital of Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510080, China

ObjectiveTo test serum level of interleukin 18(IL-18), matrix metalloproteinases-2(MMP-2) and its organization inhibitors (TIMP-2) in children with Henoch Schonlcin purpura(HSP), and then discuss the relationship to kidney damage.MethodsFifty-eight cases were divided into pure purpura of 30 cases, merger of renal damage group of 28 cases according to the clinical urine test results, and healthy controls of 20 cases. Serum level of IL-18, MMP-2 and TIMP-2 were detected respectively using double antibody enzyme linked sandwich immunoassay method (ELISA).ResultsThe content of 3 items in pure purpura group and merger renal damage group were significantly higher than that in the health control group. The content of IL-18(t=8.55, P＜0.05), MMP-2(t=10.36, P＜0.05) in merger renal damage group is higher than in the pure purpura group. But there was no significant difference between the pure purpura group and the merger renal damage group comparing the content of TIMP-2(t=2.69, P＞0.05).ConclusionThe contents of IL-18, MMP-2 and TIMP-2 in blood of children with Henoch-Schonlcin purpura are higher. IL-18 and MMP-2 are relationship to the patient's kidney damage.

henoch Schonlcin purpura; interleukin 18; matrix metalloproteinases-2; matrix metalloproteinases-2 organization inhibitors;kidney damage

2017-02-06

胡學(xué)文，E-mail： 915228@163.com；