血清同型半胱氨酸測(cè)定在糖尿病腎病中的臨床意義

王冬梅，張秋波

茂名石化醫(yī)院，廣東 茂名 525011

血清同型半胱氨酸測(cè)定在糖尿病腎病中的臨床意義

王冬梅，張秋波

茂名石化醫(yī)院，廣東 茂名 525011

目的探討分析糖尿病腎病中血清同型半胱氨酸（Hcy）的變化和其炎癥因子的相關(guān)性。方法選取2012年2月～2016年8月于我院就診的2型糖尿病腎病患者共160例，根據(jù)尿白蛋白排泄率和血肌酐水平分為單純糖尿病組（DM組）、早期糖尿病腎病組（EDN組）、糖尿病腎病組（CDN組）和腎功能衰竭組（CRF組），以40例健康體檢者作為對(duì)照組，比較各組患者的Hcy值及生化指標(biāo)，分析Hcy其糖尿病腎病患者炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α和hsCRP的相關(guān)性。結(jié)果5組患者比較，其GLU、HbA1c、UREA、Cr、TP、ALB、TCH和TG差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；Hcy差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=27.452，P＜0.01）；hsCRP、TNF-α、IL-1和IL-6差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；血清Hcy水平和hsCRP存在顯著的正相關(guān)（r=0.624，P＜0.01）、和TNF-α存在正相關(guān)（r=0.557，P＜0.01）、和IL-1存在顯著正相關(guān)（r=0.568，P＜0.01）、和IL-6存在顯著正相關(guān)（r=0. 417，P=0.017）。結(jié)論Hcy在糖尿病腎病中病情進(jìn)展中具有重要作用，可作為糖尿病腎病患者腎血管損傷及病情進(jìn)展評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)，且與hsCRP、IL-1、IL-6和TNF-α具有顯著的相關(guān)性。

血清同型半胱氨酸；糖尿病腎??；白介素1；白介素6；腫瘤壞死因子α

糖尿病腎病是糖尿病主要微血管病變之一，也是導(dǎo)致腎功能不全的重要原因[1]。由糖尿病引起的腎臟的病變包括腎微血管的損傷、腎小球?yàn)V過膜的破壞嚴(yán)重加快了糖尿病腎病患者的病情進(jìn)展[2]。對(duì)于糖尿病腎病患者，如何對(duì)早期腎微血管損傷進(jìn)行有效地診斷和評(píng)估，目前仍是臨床研究的難點(diǎn)[3]。有研究指出，在糖尿病腎病中，特別是血液中的炎癥因子與糖尿病腎病的病情進(jìn)展具有密切的相關(guān)性[4]，其中各種炎癥因子可參與促使腎小球基底膜的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致基底膜發(fā)生增厚，進(jìn)一步導(dǎo)致了2型糖尿病患者的病情進(jìn)展[5]。血清同型半胱氨酸（Hcy）是目前臨床中用于評(píng)價(jià)心腦血管病變的重要指標(biāo)之一，Hcy也與糖尿病的病情進(jìn)展具有密切的關(guān)系[6]。但其能否作為糖尿病腎病患者中的血管病變程度的評(píng)價(jià)指標(biāo)，同時(shí)其與糖尿病腎病中的炎癥因子具體的相關(guān)性如何，目前研究比較少。因此，本研旨在探討糖尿病腎病中Hcy的變化和其炎癥指標(biāo)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用前瞻性研究，選取2014年6月～2016年10月于本院就診的糖尿病腎病患者共160例，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，并確診病程2年以上；（2）年齡于18～70歲；排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）外傷所導(dǎo)致的急性腎損傷患者；（2）合并慢性腎炎患者；（3）合并急性尿道感染的患者；（4）合并自身免疫性疾病患者；（5）慢性肝炎或肝功能嚴(yán)重受損的患者；（6）合并惡性腫瘤患者；（7）1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)全身感染性疾病的患者。本研究均獲得患者知情同意和醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 分組方法

根據(jù)尿白蛋白排泄率（UAER）和血肌酐（Scr）水平分為單純糖尿病組（DM組），早期糖尿病腎病組（EDN組），糖尿病腎病組（CDN組），腎功能衰竭組（CRF組）。DM組為UAER＜30 mg/24 h；EDN組為UAER30～300 mg/24 h；CDN組為腎UAER＞300 mg/24 h，CRF組為Scr＞133 μmol/L，所有指標(biāo)均至少在3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行2次以上檢測(cè)，取平均值進(jìn)行判斷，其中160例患者中，DM組共有42例，EDN組共有47例，CDN組共有44例，CRF組27例，對(duì)照組40例。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

一般資料記錄：記錄所有患者的年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)，記錄糖尿病患病時(shí)間。血液樣本采集：所有患者于禁食12 h后空腹抽取靜脈血，樣本用真空采血管采集，采集后迅速用離心機(jī)離心，血清和血漿樣品檢測(cè)前在-80 ℃冰箱進(jìn)型保存。所有患者檢測(cè)的指標(biāo)包括：空腹血糖（GLU）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、尿素（UREA）、肌酐（Cr）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、超敏C反應(yīng)蛋白（hsCRP），采用貝克曼BXC600全自動(dòng)生化分析儀。

Hcy、腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-1（IL-1）和白介素-6（IL-6）的檢測(cè)均采用酶聯(lián)免疫吸附定量試驗(yàn)法（ELISA），檢測(cè)試劑盒購自北京晶美生物科技，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS24.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，連續(xù)變量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差或中位數(shù)和四分位間距表示，正態(tài)分布資料多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步組間比較采用SNK檢驗(yàn)，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)多組數(shù)據(jù)間比較采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，組間比較采用Bonferroni法校正后采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢測(cè)，進(jìn)一步采用Fisher精確檢驗(yàn)。采用Spearman相關(guān)分析方法分析血清Hcy水平與各項(xiàng)炎癥指標(biāo)的相關(guān)性，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較

納入研究的5組患者之間年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2.42, P=0.121），性別比例差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.755，P=0.944），體質(zhì)量指數(shù)比較差異也沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.137，P=0.314），其中4組不同分期的患者之間的患病時(shí)間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=9.447，P＜0.05），CRF組患者顯著高于DM、EDN和CDN組（P＜0.05），CDN組顯著高于DM和EDN組（P＜0.05，表1）。

表1 5組患者之間的一般資料對(duì)比

2.2 生化及炎癥指標(biāo)比較

5組患者中，TCH和TG的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.427, P=0.186；F=2.785, P=0.118），GLU、HbA1c、UREA、Cr、TP、ALB、TCH和TG的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），Hcy差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=27.452,P＜0.01），其中CRF組患者顯著高于DM、EDN、CDN和對(duì)照組，CDN組顯著高于EDN、DM和對(duì)照組，EDN顯著高于DM和對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。5組患者中的炎癥指標(biāo)，hsCRP、TNF-α、IL-1和IL-6差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，表2）。

2.3 Hcy與炎癥指標(biāo)的相關(guān)性分析

血清Hcy水平和hsCRP存在顯著的正相關(guān)（r=0.624, P＜0.01），血清Hcy水平和TNF-α存在正相關(guān)（r=0.557, P＜0.01），血清Hcy水平和IL-1存在顯著的正相關(guān)（r=0.568，P＜0.01），血清Hcy水平和IL-6存在顯著正相關(guān)（r=0. 417，P=0.017，表3）。

3 討論

糖尿病腎病是由于長期的高血糖狀態(tài)導(dǎo)致腎臟血流動(dòng)力學(xué)異常，同時(shí)也影響了腎臟的局部代謝，導(dǎo)致腎小管和腎小球受損，引起腎功能障礙[8]。糖尿病腎病患者存在持續(xù)的炎癥反應(yīng)狀態(tài)，其中炎癥因子在糖尿病腎病的病情進(jìn)展中具有的促進(jìn)作用[9]。同時(shí)，唐代謝的紊亂直接導(dǎo)致了糖尿病腎病患者的糖基化終末產(chǎn)物升高，加快了腎小球基底膜、系膜纖維化轉(zhuǎn)變，再結(jié)合長期存在的炎癥因子，導(dǎo)致了腎小球的進(jìn)一步硬化和功能不全[10]。Hcy是蛋氨酸脫甲基代謝的產(chǎn)物之一，其在正常的情況下經(jīng)腎臟代謝，在糖尿病腎病的代謝紊亂情況下，Hcy轉(zhuǎn)化障礙進(jìn)入血中，其可促進(jìn)氧自由基的產(chǎn)生和影響內(nèi)皮功能，導(dǎo)致腎微小血管損傷[11]。研究[12]指出，Hcy與各種大血管病變具有顯著的相關(guān)性，Hcy與糖尿病腎病患者的微血管病變也具有密切的聯(lián)系，但對(duì)于Hcy與不同病情嚴(yán)重程度的患者是否存在相關(guān)性，同時(shí)Hcy與糖尿病腎病患者中的炎癥因子的關(guān)系目前研究得比較少，因此，本研究旨在探討其中的關(guān)系。

表2 5組患者之間的生化及炎癥指標(biāo)對(duì)比

表3 Hcy與炎癥指標(biāo)的相關(guān)性分析

本研究中通過對(duì)納入研究的糖尿病腎病患者根據(jù)其病情進(jìn)行分組，在一般資料對(duì)比中，可以明確患病時(shí)間是糖尿病腎病病情惡化的一項(xiàng)重要的因素。同時(shí)比較5組患者的生化指標(biāo)，包括GLU、HbA1c、UREA和Cr均提示了5組患者長時(shí)間的血糖控制狀況和腎功能之間的差異，同時(shí)5組患者之間的TP、ALB、TCH和TG比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表明糖尿病腎病患者慢性病情中尿蛋白排泄增多，因此總的蛋白、白蛋白均顯著下降，這也直接反應(yīng)了5組患者之間的病情嚴(yán)重程度[13]。TCH和TG是糖尿病患者脂代謝異常的表現(xiàn)，其主要表現(xiàn)在長期蛋白尿下的TCH、TG和LDL-C增高、HDL-C下降，脂肪代謝異常后，容易導(dǎo)致脂肪在腎小球的沉積，導(dǎo)致腎小球硬化加重[14]。而腎臟是代謝Hcy的主要場(chǎng)所，難以排出的Hcy進(jìn)一步引起微血管平滑肌增殖，也導(dǎo)致Hcy的排泄惡性循環(huán)導(dǎo)致進(jìn)一步升高[15]。因此在本研究結(jié)果中顯示，根據(jù)糖尿病腎病患者的病情嚴(yán)重Hcy水平趨勢(shì)是顯著升高的，研究[16]指出，Hcy能借助活性氧物質(zhì)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞組織發(fā)生氧化應(yīng)激，導(dǎo)致內(nèi)皮損傷，這表明Hcy水平升高不但反映了腎小球不斷損傷，同時(shí)Hcy水平也直接反映了糖尿病腎病的病情變化。

IL-1和IL-6是直接由于炎癥細(xì)胞誘發(fā)的細(xì)胞功能因子，同時(shí)在IL-1和IL-6的刺激下，TNF-α也會(huì)進(jìn)行一步釋放，導(dǎo)致NO的增加，促進(jìn)糖尿病腎病患者的炎癥反應(yīng)，影響糖尿病腎病血管內(nèi)皮的功能[17]，進(jìn)一步導(dǎo)致腎功能受損。對(duì)于糖尿病腎病患者，其慢性炎癥因子是長期存在的[18]，本研究結(jié)果顯示，對(duì)于病情越重的患者，其IL-1、IL-6和TNF-α也會(huì)升高，而且與病情的嚴(yán)重程度具有一定的相關(guān)性。hsCRP是反映慢性炎癥的敏感性指標(biāo)，本研究結(jié)果顯示隨著病情嚴(yán)重程度的增加，其也呈逐漸上升的趨勢(shì)。進(jìn)一步分析Hcy水平和hsCRP、IL-1、IL-6和TNF-α的相關(guān)性，結(jié)果均顯示Hcy水平和該四項(xiàng)炎癥指標(biāo)具有顯著的相關(guān)性，表明Hcy也參與了糖尿病腎病中的炎癥反應(yīng)，其具體的機(jī)制可能為Hcy促進(jìn)了血管內(nèi)皮的氧化應(yīng)激所產(chǎn)生的中間產(chǎn)物，參與了血管的炎癥進(jìn)展，這也提示了慢性炎癥中Hcy參與其中并發(fā)揮了媒介的作用[19]。對(duì)于具體Hcy如何參與其中的具體機(jī)制，仍需要一步進(jìn)行深入研究。

綜合上述，Hcy在糖尿病腎病中病情進(jìn)展中具有重要作用，其可作為DN患者腎血管損傷及病情進(jìn)展評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)，且與hsCRP、IL-1、IL-6和TNF-α具有顯著的相關(guān)性。

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Clinical significance of serum homocysteine detection in diabetic nephropathy

WANG Dongmei, ZHANG Qiubo
Maoming Petrochemical Industry Hospital, Maoming 525011, China

ObjectiveTo study the serum homocysteine (Hcy) level in diabetic nephropathy patients and the its correlation of the inflammatory factors.MethodsFrom February 2012 to August 2012, a total of 160 patients with type 2 diabetic nephropathy were selected in our hospital, according to the urinary albumin excretion rate and serum creatinine level, which is divided into diabetes mellitus group (DM group), early diabetic nephropathy (EDN) group, diabetic nephropathy group(CDN) and renal failure (CRF) group, 40 cases of healthy physical examination as the control group, comparing the patients’Hcy level and their biochemical index in the five group patients, to analyze the correlation between the Hcy level and the inflammatory factor, such as IL-6, IL-1 TNF-α and hsCRP.ResultsGLU、HbA1c、UREA、Cr、TP、ALB、TCH and TG in the five group patients had no significant difference (P＜0.01), the five patients of Hcy comparative differences were statistically significant (F=27.452, P＜0.01), the inflammation indicator in the five patients, including hsCRP, TNF-α, IL-1 and IL-6 comparison had significant difference (P＜0.01), the serum Hcy levels had significant positive correlation with hsCRP (r=0.624,P＜0.01), the serum Hcy levels had significant positive correlation with TNF-α (r=0.557, P＜0.01), the serum Hcy levels had significant positive correlation with IL-1 (r=0.568, P＜0.01), serum Hcy levels had significant positive correlation with IL-6 (r=0.417, P=0.017).ConclusionHcy plays a great important role in the progression of diabetic nephropathy, it can be used as the important indexes for evaluation of renal vascular injury and disease progression in DN patients, and has significant positive correlation with hsCRP, IL-1, IL 6 and TNF-α.

serum homocysteine; diabetic nephropathy; interleukin 1; interleukin 6; tumor necrosis factor-α

2017-02-06

王冬梅，E-mail： dongmei0118@126.com；