抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷中藥復(fù)方的用藥規(guī)律研究

蘇克劍，張 樂(lè)，陸國(guó)紅（上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院南院藥劑科，上海 201112）

抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷中藥復(fù)方的用藥規(guī)律研究

蘇克劍＊，張 樂(lè)，陸國(guó)紅#（上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院南院藥劑科，上海 201112）

目的：探究抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷中藥復(fù)方的用藥規(guī)律。方法：以“實(shí)驗(yàn)性肝損傷”“中藥復(fù)方”“保護(hù)作用”等為主題，檢索中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)、中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)中與抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷中藥復(fù)方用藥規(guī)律有關(guān)的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)納入研究基本信息、中藥分類、單味中藥使用率與共現(xiàn)頻率進(jìn)行描述性分析；采用K-means聚類模型和SPSSModeler中的Apriori算法對(duì)使用率排名前10位的藥物進(jìn)行聚類分析（聚類方與重要性）和關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果：檢索到相關(guān)文獻(xiàn)498篇，最終納入有效文獻(xiàn)70篇，涉及51種中藥復(fù)方，包括111味中藥。用藥種類以清熱藥、補(bǔ)虛藥、活血化瘀藥為主；其中藥物種類最多的是清熱類，有34味；使用頻次最高的是補(bǔ)虛藥，有63次（使用率為25.82%）；使用率最高的單味中藥是柴胡（占總數(shù)的25.49%）；共現(xiàn)頻率最高的藥對(duì)是柴胡-丹參。聚類分析結(jié)果共得到5個(gè)聚類方，即柴胡-丹參-當(dāng)歸-甘草、黃芪-當(dāng)歸-白花蛇舌草、茵陳-郁金-虎杖、柴胡-丹參-茵陳、五味子-甘草；重要性預(yù)測(cè)結(jié)果顯示，在聚類方中五味子最重要、虎杖最不重要。關(guān)聯(lián)分析共得到13條藥組關(guān)聯(lián)規(guī)則，但支持度與置信度均較低。結(jié)論：抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷中藥復(fù)方的組成以清熱藥、補(bǔ)虛藥為主，但是用藥配伍多樣，相互關(guān)聯(lián)度較低。

中藥復(fù)方；抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷；用藥規(guī)律；聚類分析；關(guān)聯(lián)分析

肝損傷是指由各種原因（非外傷因素）導(dǎo)致的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞受損、肝功能降低，繼而引發(fā)肝功能及結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，嚴(yán)重時(shí)可發(fā)展為肝衰竭；其常見(jiàn)病因包括病毒性感染、使用藥物或化學(xué)毒物、酗酒、自身免疫反應(yīng)等[1]。在藥物研究過(guò)程中，常通過(guò)實(shí)驗(yàn)性肝損傷模型來(lái)評(píng)價(jià)藥物的肝保護(hù)效果。中藥復(fù)方抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷主要通過(guò)辨證論治，注重整體觀念，多藥合理配伍，作用在肝損傷發(fā)生的各個(gè)階段，其治療效果日益受到重視[2]。本研究通過(guò)檢索數(shù)據(jù)庫(kù)，整理搜集中藥復(fù)方對(duì)各類實(shí)驗(yàn)性肝損傷保護(hù)作用的文獻(xiàn)，旨在探究其用藥規(guī)律，為臨床合理用藥提供參考。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

計(jì)算機(jī)檢索中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)、中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)。主題詞為“實(shí)驗(yàn)性肝損傷”“中藥復(fù)方”“保護(hù)作用”；檢索時(shí)限設(shè)為“不限”；檢索條件為“模糊”。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）中藥復(fù)方制劑對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝損傷保護(hù)作用的文獻(xiàn)；（2）文獻(xiàn)中列出了中藥復(fù)方的主要組成。1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）綜述、講座等；（2）化學(xué)藥或生物制品對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝損傷保護(hù)作用的文獻(xiàn)；（3）單味中藥或其提取物的相關(guān)文獻(xiàn)；（4）重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)。

1.3 資料處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

嚴(yán)格按照納入與排除標(biāo)準(zhǔn)處理文獻(xiàn)，通過(guò)Excel 2013軟件整理抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷中藥復(fù)方的文獻(xiàn)，利用SPSSModeler 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)。采用描述性分析、聚類分析、關(guān)聯(lián)分析等方法進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 描述性分析結(jié)果

2.1.1 納入研究基本信息 初檢出相關(guān)文獻(xiàn)498篇，依據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)得到有效文獻(xiàn)70篇，合并文獻(xiàn)中相同復(fù)方制劑，最終納入研究的中藥復(fù)方為51種，共包括111味藥材。納入的中藥復(fù)方劑型多樣，其中膠囊劑20種、湯劑7種、沖劑5種、口服液5種、片劑4種、合劑3種、顆粒劑3種、丸劑3種、散劑1種。

實(shí)驗(yàn)性肝損傷模型主要包括四氯化碳（CCl4）致小鼠肝損傷模型、D-氨基半乳糖（D-GalN）致小鼠急性肝損傷模型、硫代乙酰胺（TAA）致小鼠肝損傷模型等[3]。使用的對(duì)照藥物有聯(lián)苯雙酯、水飛薊素、護(hù)肝片、云芝肝泰等保肝藥物。

2.1.2 中藥分類 依據(jù)2014年版《中藥大辭典》的分類標(biāo)準(zhǔn)[4]，將納入的111味中藥進(jìn)行分類，分類情況見(jiàn)表1。

表1 111味中藥分類情況Tab 1 Classification of111Chineseherbalmedicines

由表1可知，藥物種類最多的是清熱類，有34味中藥；使用頻次最高的是補(bǔ)虛藥，使用頻次為63次，使用率為25.82%。

2.1.3 單味中藥的使用頻率 納入的111味中藥中，柴胡的使用頻次最高，共計(jì)13次，使用率為25.49%。使用率在10%以上的中藥有10味，詳見(jiàn)表2。

表2 使用率在10%%以上的中藥Tab 2 Chinese herbalmedicines w ith use frequency more than 10%%

2.1.4 共現(xiàn)頻率 梳理出含有高頻使用藥物的所有處方，利用SPSSModeler 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，考察各藥物之間的共現(xiàn)頻率關(guān)系，結(jié)果見(jiàn)圖1（線條越粗表示鏈接越強(qiáng)，說(shuō)明藥物同時(shí)出現(xiàn)的概率越大）。

圖1 各藥物之間的共現(xiàn)頻率關(guān)系Fig 1 Co-occurrence frequency relation am ong the Chineseherbalmedicines

由圖1可知，在各處方中柴胡-丹參的共現(xiàn)頻率最高，相對(duì)較高的藥對(duì)還包括柴胡-茵陳、茵陳-丹參、丹參-黃芪、黃芪-虎杖。

2.2 聚類分析結(jié)果

2.2.1 聚類方分析 在所有入選的中藥復(fù)方中，對(duì)使用率排名前10位的藥物，構(gòu)建K-Means聚類模型，經(jīng)過(guò)分析得到5個(gè)聚類方，分別為：（1）柴胡-丹參-當(dāng)歸-甘草；（2）黃芪-當(dāng)歸-白花蛇舌草；（3）茵陳-郁金-虎杖；（4）柴胡-丹參-茵陳；（5）五味子-甘草。

2.2.2 重要性分析 預(yù)測(cè)各個(gè)藥物在聚類方組成中的重要性。結(jié)果，五味子最重要，虎杖最不重要，詳見(jiàn)圖2。

2.3 關(guān)聯(lián)規(guī)則分析結(jié)果

對(duì)使用率排名前10位的藥物，采用SPSSModeler軟件中的Apriori算法，構(gòu)建關(guān)聯(lián)規(guī)則模型，參數(shù)設(shè)定為：支持度≥5%，置信度≥50%，挖掘處方中的藥物關(guān)系（前項(xiàng)→后項(xiàng)），即處方中前項(xiàng)與后項(xiàng)關(guān)聯(lián)關(guān)系的強(qiáng)弱。其中，支持度指藥物A與藥物B同時(shí)在一個(gè)處方出現(xiàn)的概率；置信度指在藥物A出現(xiàn)的處方中同時(shí)出現(xiàn)藥物B的概率。結(jié)果，得出藥組的關(guān)聯(lián)規(guī)則13條，詳見(jiàn)表3。

圖2 藥物的重要性預(yù)測(cè)Fig 2 Im portance prediction of the Chinese herbal medicines

表3 高頻使用藥物的藥組關(guān)聯(lián)規(guī)則Tab 3 Drug pair related rules of the high-frequency used Chineseherbalmedicine

3 討論

在抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷的中藥復(fù)方中，藥物使用類別主要以清熱藥、補(bǔ)虛藥、活血化瘀藥為主。中醫(yī)認(rèn)為，肝損傷多伴隨著濕、熱、瘀等病理因素，造成體內(nèi)濕熱積聚、血行不暢。清熱藥具有清熱解毒的功效，可清除體內(nèi)濕熱、排除毒邪[5]；補(bǔ)益藥具有健魄益氣、養(yǎng)血滋陰等作用；活血化瘀藥可改善體內(nèi)氣機(jī)不暢、濕熱內(nèi)蘊(yùn)導(dǎo)致的血瘀狀態(tài)[6]。

本研究結(jié)果顯示，在各中藥復(fù)方中柴胡的使用率最高，與其他藥物的共現(xiàn)概率也較高。柴胡既能透表退熱、疏肝解郁，又可升舉陽(yáng)氣。柴胡皂苷具有保護(hù)肝細(xì)胞溶酶體膜和線粒體的作用，能促進(jìn)毛細(xì)管內(nèi)膽汁的排除，對(duì)肝損傷有顯著的抗損傷作用，使肝內(nèi)蓄積的肝糖原及核酸大部分恢復(fù)正?；蚪咏?，使血清轉(zhuǎn)氨酶活力下降，并可抑制纖維增生，促進(jìn)纖維的吸收而達(dá)到保肝、養(yǎng)肝之目的[7]。

此外，抗實(shí)驗(yàn)性肝損傷的中藥復(fù)方經(jīng)常會(huì)使用到黃芪、茵陳、丹參。黃芪多糖具有多種免疫調(diào)節(jié)作用，黃芪中的黃酮類物質(zhì)具有清除自由基和保肝的作用[8]。此外，黃芪還具有促進(jìn)肝細(xì)胞白蛋白合成、抑制間質(zhì)膠原合成、增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能、改善巨噬細(xì)胞吞噬功能、誘導(dǎo)干擾素生成的作用，能提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，達(dá)到抗肝損傷的目的[9]。

藥理研究表明，茵陳具有保肝、利膽、降血脂、降血壓、擴(kuò)張冠脈、抗腫瘤等作用。茵陳的活性成分主要為揮發(fā)油、蒿屬香豆素、色原酮類、黃酮類、綠原酸等，有促進(jìn)膽汁分泌和排泄的作用。茵陳中的色原酮是強(qiáng)利膽成分，其能抑制β-葡萄糖醛酸苷酶活性，從而使葡萄糖醛酸不被分解，加強(qiáng)肝臟解毒作用[10]。丹參被廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的治療，近年來(lái)也已成為臨床上治療肝病的常用藥。丹參酮能提高血中超氧化物歧化酶的活性，具有較強(qiáng)的抗脂質(zhì)過(guò)氧化和自由基清除作用，從而改善肝細(xì)胞線粒體的功能，穩(wěn)定生物膜，減輕肝細(xì)胞損傷[11]。丹參素能夠抑制和減輕急慢性肝損傷時(shí)肝細(xì)胞的變性、壞死，保護(hù)肝細(xì)胞膜和細(xì)胞器。另外，丹參素還能促進(jìn)肝內(nèi)膠原蛋白的降解，具有改善肝臟血液循環(huán)、抗肝纖維化、防止肝硬化發(fā)生的作用[12]。

聚類分析是一種在沒(méi)有先驗(yàn)知識(shí)的情況下，進(jìn)行的數(shù)據(jù)分析和數(shù)據(jù)挖掘，是一種較為新穎的研究方法[13]。在本次聚類分析中，藥物重要性預(yù)測(cè)排首位的是五味子。五味子能夠可逆性抑制肝細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶活性，五味子素對(duì)肝細(xì)胞有一定保肝作用，并能加速肝組織再生。有研究報(bào)道，五味子有助于肝細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成，從而使線粒體恢復(fù)和增加，相應(yīng)的酶活性增高，肝細(xì)胞得以恢復(fù)和再生，從而發(fā)揮降酶保肝作用[14]。

從藥物的共現(xiàn)情況分析來(lái)看，共現(xiàn)概率最高的藥對(duì)是柴胡-丹參，關(guān)聯(lián)規(guī)則得出的支持度數(shù)據(jù)同樣證實(shí)了此結(jié)果。但是，由于本研究的樣本量不大，而且各中藥復(fù)方的組成豐富多變，在得到的13條關(guān)聯(lián)規(guī)則中，最大的支持度為21.57%（置信度54.55%）＜30%，最高的置信度為75.00%（支持度7.84%）＜80%，支持度和置信度都相對(duì)偏低。

雖然依據(jù)篩選標(biāo)準(zhǔn)最終入選的中藥復(fù)方僅為51種，研究樣本量較小，給出的數(shù)據(jù)參考價(jià)值有限，但是研究將數(shù)據(jù)挖掘的技術(shù)應(yīng)用到了中藥復(fù)方配伍中，可以獲得更加全面、深層次及潛在的循證藥學(xué)依據(jù)[15]，有利于相互借鑒、優(yōu)化處方組成，從而提高藥物療效。

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（編輯：劉明偉）

Study on the M edication Rules of TCM Com p lex Form ulas for Anti-experimental Liver In jury

SU Kejian，ZHANG Le，LU Guohong（Dept.of Pharmacy，South Branch of Renji Hospital，School of Medicine，Shanghai Jiaotong University，Shanghai201112，China）

OBJECTIVE：To explore themedication rules of TCM complex formulas for anti-experimental liver injury.METHODS：Using“experimental liver injury”“TCM complex preparations”“protection effect”as themes，related literatures aboutmedication rules of TCM complex formulas for anti-experimental liver injury in CJFT，Wanfang database and VIP database were retrieved，and general information，distribution，use frequency and co-occurrence frequency of single herbalmedicine were descriptively analyzed.K-means clustering model and Apriori in SPSSModeler were adopted for cluster analysis（clustering side and importance）and correlation analysis inmedicinesw ith top 10 use frequency.RESULTS：498 related literatureswere retrieved，and 70 valid literatures were involved totally，including 51 TCM complex formulas and 111 Chinese herbalmedicines.It wasmainly drug for clearing heat，restoring vital energy and blood circulation.Drugs for clearing heat weremost w idely used（34 varieties），drugs for restoring vital energy showed the highest use frequency，w ith 63 times（25.82%）；Prunella vulgaris had the highest frequency in single herbalmedicines（accounting for 25.49%）；and P.vulgaris-Salvia miltiorrhiza had the highest co-occurrence frequency in drug pairs.5 clustering sides were obtained in clustering analysis，which were P.vulgaris-S.miltiorrhiza-Angelica sinensis-Glycyrrhiza uralensis，Astragalusmembranaceus-A.sinensis-Hedyotis diffusa，Artemisia scoparia-Curcuma wenyujin-Plygonum cuspidatum，P.vulgaris-S.miltiorrhiza-A.scoparia，Schisandra chinensis-G.uralensis.Importance prediction showed，S.chinensis was the most important and P.cuspidatum was the least important.13 drug pair ruleswere obtained from correlation analysis，and both support and confidence degrees were low.CONCLUSIONS：The TCM complex formulas for anti-experimental liver injury aremainly based on drugs for clearing heat and restoring vital energy，while the compatibility is varied，and correlation degree is relatively low.

TCM complex formulas；Anti-experimental liver injury；Medication rules；Cluster analysis；Correlation analysis

R917

A

1001-0408（2017）16-2292-04

2016-08-26

2017-03-31）

＊主管藥師。研究方向：醫(yī)院藥學(xué)。電話：021-34506113。E-mail：sukejian@renji.com

#通信作者：主任藥師。研究方向：醫(yī)院藥學(xué)。電話：021-34506151。E-mail：luguohong@renji.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.16.37