任夢露
酵素是以新鮮水果、蔬菜等為原料,經(jīng)過多種有益菌發(fā)酵而成的功能性發(fā)酵產(chǎn)品。富含多種對人體有益的活性物質(zhì),具有抗氧化、抗菌消炎等作用。
現(xiàn)代社會人們生活習慣不規(guī)律,由氧化脅迫、腸道菌群紊亂所導致的各類疾病發(fā)病頻繁。在良好的市場前景的背景下,研究具有抗氧化性、能夠調(diào)理腸胃功能的酵素食品有著重大的意義。
本課題以新疆和田紅棗為原料,經(jīng)過清洗、復水、切塊、發(fā)酵獲得酵素原液;通過pH計測定其pH判斷其發(fā)酵終點;測定酵素原液的脂肪酶活力、超氧化物歧化酶活力;以響應面分析確定紅棗酵素加工的最優(yōu)工藝。本課題將為新疆紅棗的應用拓展一種新的方向。
材料與方法
材料。紅棗、檸檬、冰糖:市售;
實驗方法。
(1)工藝流程
紅棗→復水→清洗→去核→切塊→加糖→加檸檬→發(fā)酵→過濾→水果酵素原液
(2)操作要點
①原料預處理
選取個體均一、無霉爛、無機械損傷的干紅棗進行復水操作,在40℃下用清水浸泡4h后用清水洗干凈后去核、切塊,檸檬洗凈后切成3mm的薄片。
②水果酵素原液的制取
將紅棗和冰糖一層一層均勻加入發(fā)酵罐中,上層留有頂隙,在24-30℃溫度下發(fā)酵6-10天,每天按時進行攪拌,最后不再有氣體產(chǎn)生pH值為3.5-4.5即判定發(fā)酵結(jié)束,經(jīng)過濾制得水果酵素原液。
(3)紅棗酵素響應面優(yōu)化實驗
以脂肪酶活力和SOD為響應值,采用3因素3水平的響應面法進行紅棗酵素發(fā)酵優(yōu)化實驗。以Design-expert.v8.0.6軟件對實驗進行回歸分析,預測酵素發(fā)酵的最優(yōu)工藝參數(shù)。實驗因素、水平如表1。
酶活力測定。
(1)脂肪酶活力測定
測定按照QB/T 1803-1993 A4進行。
(2)超氧化物歧化酶活力測定
測定方法采用鄰苯三酚終止法,其中SOD活力的計算參照許亞娟的方法。
結(jié)果與分析
響應面分析及優(yōu)化。利用以Design-Expert.V8.0.6軟件進行二次回歸擬合,所得到的二次方程的響應面圖及其等高線如圖1:
由圖1可知,隨著發(fā)酵溫度增加,脂肪酶活力呈緩慢增加后減少的趨勢,而當糖添加量增加時脂肪酶活力呈增加趨勢,繼而趨于平緩,二者交互作用不顯著;SOD活力隨著發(fā)酵溫度和糖添加量的變化都呈先增加后減小的趨勢,后者增大或減小的趨勢較前者明顯,二者交互作用不顯著。由圖2可知,脂肪酶活力隨著發(fā)酵時間和加糖量的增加呈先增后降的趨勢。二者交互作用顯著;SOD活力隨著發(fā)酵溫度和糖添加量的變化都呈先增加后減小的趨勢,二者交互作用不顯著。由圖3可知脂肪酶活力隨著發(fā)酵溫度和發(fā)酵時間的變化都呈先增加后減小的趨勢,二者交互作用不顯著;SOD活力隨著發(fā)酵溫度和發(fā)酵時間的變化都呈先增加后減小的趨勢,二者交互作用不顯著。
響應面驗證實驗。通過Design-expert V8.0.6.1軟件對響應面優(yōu)化得出的最佳發(fā)酵參數(shù)為:糖添加量為209.05g,溫度為27.89℃,時間為8.28d,在此條件下,理論脂肪酶活力為15.6973、SOD活力為57.0311。按照上述條件進行發(fā)酵驗證實驗。鑒于實驗的可操作性,將紅棗酵素的發(fā)酵工藝條件調(diào)整為:糖添加量209g,發(fā)酵溫度28℃,發(fā)酵時間為8d,經(jīng)過三組重復實驗實際測得產(chǎn)品脂肪酶活力為15.64U/g、SOD活力為56.78U/g,預測值的相對誤差為0.808%。
通過響應面優(yōu)化酵素發(fā)酵的工藝條件,得出優(yōu)化發(fā)酵條件參數(shù)為:糖添加量209g,發(fā)酵溫度28℃,發(fā)酵時間為8d。在此條件下產(chǎn)品脂肪酶活力為15.64U/g、SOD活力為56.78U/g。最終工藝所得紅棗酵素原液的液體清亮,有紅棗和檸檬的香氣,脂肪酶活力較低,達不到網(wǎng)傳的減肥效果。具有SOD活力,可以達到一定的抗氧化效果。直接測定酵素原液中功效酶的活力,能為之后酵素的應用奠定更科學的基礎。