超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測定蔬菜中多殺霉素等4種農(nóng)藥殘留研究

新的時(shí)代中，多種因素對(duì)植物產(chǎn)生了重要的影響，主要包括氣候、種植制度和生態(tài)環(huán)境等，植物的病蟲害發(fā)生的次數(shù)不斷增多，其危害的程度不斷加深，對(duì)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。尤其是，在設(shè)施農(nóng)業(yè)不斷發(fā)展的過程中，很多的新型的設(shè)施病蟲害不斷發(fā)生。目前，對(duì)于人們來說，食品安全是非常重要的一個(gè)問題，高效低毒低殘留農(nóng)藥的推廣必定成為新的趨勢。

實(shí)驗(yàn)部分

試劑與材料。標(biāo)準(zhǔn)品：多殺霉素、氟硅唑、茚蟲威（純度>99.0%）。

試劑：氯化鈉，甲醇、乙腈、甲酸，Milli-Q高純水，十八烷基鍵合硅膠吸附劑，N-丙基乙二胺吸附劑，石墨化炭黑吸附劑，無水硫酸鎂，石墨碳黑-氨基串聯(lián)固相萃取柱，氨基固相萃取柱，十八烷基鍵合硅膠固相萃取柱，弗羅里硅土固相萃取柱。

儀器。Agilent1290 UPLC-Agilent 6460 MS超高效液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀：配ESI源；T25DS25高速勻漿分散器；GB11240-89電熱恒溫水浴鍋；AC-40氮吹濃縮器；國華SHAC恒溫振蕩器；TDL-5-A離心機(jī)；Milli-Q制水機(jī)。

樣品前處理。對(duì)樣品進(jìn)行定量選取，所選取的樣品的數(shù)量不能少于1000g，完成其中的雜質(zhì)的去除工作，從中選取能夠食用的部分，將樣品進(jìn)行相應(yīng)的濃縮，使其濃縮至500g，經(jīng)制樣機(jī)處理之后密封，使其在4℃冷藏保存。

（1）樣品提取。蔬菜樣品：對(duì)樣品進(jìn)行稱取，基本的重量是10g，將其加入到100mL的離心管中，并且將20mL 的乙腈加入其中，高速勻漿1min，以5000r/min離心5min，上清液轉(zhuǎn)移至加入3-5g NaCl的50mL離心管中，劇烈振搖1分鐘，室溫下靜置1小時(shí)。

（2）樣品凈化?？招牟恕⑶鄄?、豇豆、黃瓜樣品：移取上清液5mL到50mL小燒杯中，在50℃水浴溫度下氮吹至大約1mL。在進(jìn)行上樣之前，首先需要用5mL乙腈-甲苯預(yù)淋PC/NH2串聯(lián)柱，棄去；當(dāng)液面到達(dá)填料頂部的時(shí)候，需要在最短的時(shí)間中將樣品濃縮液轉(zhuǎn)移到凈化柱上，然后再用5mL乙腈-甲苯洗滌樣液燒杯，同時(shí)，將洗滌液轉(zhuǎn)移到凈化柱中，重復(fù)4次洗滌轉(zhuǎn)移，收集上述25mL洗脫液于100mL燒杯中，50℃水浴溫度下氮吹至干。加入2.5mL乙腈混勻定容，經(jīng)0.22?g微孔有機(jī)濾膜過濾后，供超高效液相色譜=質(zhì)譜測定。

結(jié)果與討論

凈化條件的優(yōu)化。蔬菜樣品基質(zhì)中含有較多的有機(jī)酸、維生素以及脂肪等，這些物質(zhì)帶來的基質(zhì)效應(yīng)將會(huì)嚴(yán)重影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。為降低或消除基質(zhì)效應(yīng)，選擇合適的樣品前處理方法至關(guān)重要。本研究對(duì)固相萃?。⊿PE） 與基質(zhì)固相分散萃取法兩種凈化技術(shù)進(jìn)行了比較。

采用 SPE 柱進(jìn)行凈化時(shí)，選擇了 NH2，F(xiàn)lorisil，C18，PC /NH2 4 種固相萃柱，并選擇不同的淋洗液進(jìn)行洗脫。NH2- SPE： 二氯甲烷 + 甲醇（ 95 + 5 ） 4 mL 預(yù)淋，10 mL 洗脫； Florisil-SPE： 丙酮 + 正己烷（ 10 + 90） 4 mL淋，10 mL 洗脫； C18- SPE： 乙腈 + 甲苯（ 3 + 1） 5 mL 預(yù)淋，10 mL 洗脫； PC /NH2- SPE： 乙腈 + 甲苯（ 3 + 1） 5 mL預(yù)淋，10 mL 洗脫，收集第 1 瓶（ 墨化碳易吸附農(nóng)藥，所以洗脫液又增加 15 mL，收集第 2 瓶） ； 分別收集洗脫液，吹干，定容，待測。

采用基質(zhì)固相分散萃?。?類似 Qu ECh ERS） 凈化法時(shí)，選擇 3 種不同的凈化填料進(jìn)行篩選： Qu E1（ 0.1g PSA-0. 3 g MgSO4） ； Qu E2（ 0.1g PSA-0.3g MgSO4-0.05 g Carb） ； Qu E3（ 0.3g MgSO4-0.1g C18- 0.1g PSA） 。

其他步驟參照文獻(xiàn)。

以基質(zhì)較復(fù)雜、色素較深的空心菜為例，添加 100μg /kg 的混標(biāo)至空心菜空白樣品中，重復(fù)測定 3次，以純標(biāo)計(jì)算得到的回收率結(jié)果。

通過以上方法的比較，并綜合去除色素效果和回收率結(jié)果，發(fā)現(xiàn)淋洗液 10+15 mL既能保證方法回收率，又能除去色素等雜質(zhì)，有利于保護(hù)色譜柱、離子源等，延長色譜柱、儀器的壽命。超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定蔬菜中多殺霉素等 4 種農(nóng)藥殘留，根據(jù)上述試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)淋洗液用乙腈-甲苯混合溶劑，空心菜樣品中 5 種化合物的回收率和雜質(zhì)的去除效果最佳。

對(duì)此種方法進(jìn)行有效的應(yīng)用。對(duì)市售多種蔬菜共100個(gè)樣品進(jìn)行隨機(jī)抽檢。在空心菜、芹菜等12個(gè)樣品中檢出茚蟲威，茼蒿、莧菜和芹菜三個(gè)樣品中檢出噻蟲嗪，莧菜等2個(gè)樣品中檢出氟硅唑。對(duì)國標(biāo)等對(duì)噻蟲嗪等4種農(nóng)藥在相應(yīng)蔬菜上最大的殘留限量值進(jìn)行查詢和參照，在本次抽檢的100個(gè)蔬菜樣品中，有2個(gè)莧菜樣品超標(biāo)，需要對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格、謹(jǐn)慎的應(yīng)用。

作者簡介：

鄒敏（1983-），女，江西南昌人，江西省食品檢驗(yàn)檢測研究院工程師，主要從事食品檢驗(yàn)檢測技術(shù)工作。