• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    高良姜粗多糖體外降膽固醇效果研究

    2017-06-29 06:09:39廖坤梅白天禾陳楚華鐘曉婷李澤清諶素華
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2017年10期
    關(guān)鍵詞:高良姜膽酸蒸餾水

    廖坤梅,白天禾,陳楚華,鐘曉婷,張 鵬,李澤清,諶素華

    (廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院,廣東湛江524088)

    高良姜粗多糖體外降膽固醇效果研究

    廖坤梅,白天禾,陳楚華,鐘曉婷,張 鵬,李澤清,*諶素華

    (廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院,廣東湛江524088)

    采用熱水浸提法提取高良姜粗多糖,采用不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇沉淀高良姜粗多糖,并以高良姜粗多糖得率作為評(píng)價(jià)指標(biāo),確定粗多糖最佳醇沉體積分?jǐn)?shù),結(jié)果表明使用無(wú)水乙醇得到的高良姜粗多糖得率最高約為1.58%;采用體外模擬腸道超聲波乳化法制備膽固醇膠束,按照膽固醇試劑盒法檢測(cè)高良姜粗多糖結(jié)合膽固醇膠束能力,結(jié)果表明高良姜粗多糖對(duì)膽固醇膠束的結(jié)合率最高約為76.09%;使用紫外分光光度法測(cè)定高良姜粗多糖結(jié)合膽酸鹽能力,結(jié)果表明其對(duì)?;悄懰徕c的結(jié)合率約為70.18%,對(duì)水合膽酸鈉的結(jié)合率約為79.55%,對(duì)甘氨膽酸鈉的結(jié)合率約為83.04%。由此可見(jiàn),高良姜粗多糖具有較好的體外降膽固醇效果。

    高良姜;粗多糖;膽固醇膠束;膽酸鹽

    高良姜為姜科植物高良姜(Alpinia officinarum Hance)的干燥根莖,別名風(fēng)姜、小良姜、高涼姜、良姜等,為衛(wèi)生部認(rèn)定的藥食同源物之一。高良姜營(yíng)養(yǎng)成分豐富,含有豐富的糖類、蛋白質(zhì)、微量元素等,現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明高良姜具有抗菌、抗病毒、抗氧化等功效[1-2]。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)高良姜的研究主要集中于黃酮、芳香油等化學(xué)成分,以及抑菌、抗腫瘤、降血脂等藥理功能上[3],對(duì)高良姜多糖的研究較少。關(guān)于春砂仁、莪術(shù)等其他姜科植物多糖的研究發(fā)現(xiàn),多種姜科植物多糖都具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化等作用。廣東省湛江市徐聞縣是“高良姜之鄉(xiāng)”,高良姜種植總面積為4 690 hm2,居全國(guó)之首,產(chǎn)量占全國(guó)總產(chǎn)量的90%以上[4-7]。

    近年來(lái),隨著我國(guó)人民生活水平的提高,人均膽固醇水平也有了顯著增高,導(dǎo)致冠心病、腦血栓等一系列心腦血管疾病的增多,亟待尋找和開(kāi)發(fā)天然高效的降膽固醇物質(zhì)。高良姜多糖是一種具有極大開(kāi)發(fā)潛力的活性物質(zhì),其體外結(jié)合膽固醇效果的研究目前尚未見(jiàn)報(bào)道。

    試驗(yàn)采用熱水浸提法提取高良姜粗多糖,并通過(guò)體外結(jié)合膽固醇膠束試驗(yàn)及結(jié)合膽酸鹽試驗(yàn),評(píng)價(jià)其體外降膽固醇效果,旨在為加大高良姜的開(kāi)發(fā)利用提供一定科學(xué)依據(jù),以便于高良姜粗多糖能盡快作為保健食品進(jìn)入市場(chǎng),幫助高膽固醇人群降低膽固醇水平。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    高良姜:取自徐聞縣,用蒸餾水洗凈后去皮,切片,于60℃恒溫箱中干燥4 h,質(zhì)量恒定后粉碎。過(guò)60目篩,干燥保存待用。

    無(wú)水乙醇、三氯甲烷、正丁醇、氯化鈉、氫氧化鈉等,均為分析純,廣東光華科技股份有限公司提供;油酸、L-α-卵磷脂,均為分析純,Sigma-Aldrich公司提供;甘氨膽酸鈉水合物、?;悄懰徕c、水合膽酸鈉,均為分析純,Aladdin公司提供;膽固醇,為分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供;膽固醇試劑盒,南京建成生物工程研究所提供。

    1.2 儀器與設(shè)備

    FD8508型真空冷凍干燥機(jī),韓國(guó)Ilshin公司產(chǎn)品;Varioskan Flash型全自動(dòng)酶標(biāo)儀,Therom公司產(chǎn)品;HH S21-6型水浴鍋,上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品;JYL-C020E型料理機(jī),杭州九陽(yáng)股份有限公司產(chǎn)品;DD5M型低速冷凍離心機(jī),湖南赫西儀器裝備有限公司產(chǎn)品;N-1000D-W型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,上海愛(ài)朗儀器有限公司產(chǎn)品;DC12H型氮吹儀,上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司產(chǎn)品。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 高良姜粗多糖的提取

    采用熱水浸提法[8]:稱取20 g高良姜粉,用860 mL蒸餾水溶解,于95℃條件下加熱4 h,期間每隔20 min攪拌1次,使多糖盡量溶出。粗多糖提取液以轉(zhuǎn)速4 600 r/min離心10 min,過(guò)濾去除姜粉殘?jiān)?。將粗多糖溶液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,在4℃冰箱中醇析12 h,再次離心,取其沉淀,并用無(wú)水乙醇洗滌3次并晾干。Sevage法脫蛋白6次,冷凍干燥48 h得到高良姜粗多糖粉末。

    1.3.2 高良姜粗多糖提取的最適乙醇體積分?jǐn)?shù)測(cè)定

    分別取3份100 mL濃縮后的高良姜粗多糖提取液,分別加入60%,70%,80%,90%乙醇及無(wú)水乙醇100 mL,按1.3.1中的方法操作提取多糖,計(jì)算最終的高良姜粗多糖得率。

    1.3.3 高良姜粗多糖總糖含量的測(cè)定

    采用蒽酮比色法:稱取0.01 g標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶于100 mL蒸餾水中,配制成葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。取7支具塞試管分別加入上述標(biāo)準(zhǔn)溶液0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.6,0.8 mL,并加蒸餾水補(bǔ)至1 mL。再于冰水浴中加入蒽酮試劑4 mL,管口加蓋,沸水浴10 min。冰水浴冷卻至室溫,于波長(zhǎng)620 nm處測(cè)其吸光度,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    再取適量質(zhì)量濃度的高良姜粗多糖溶液1 mL,以同樣方法測(cè)定其吸光度,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出高良姜總糖含量。

    1.3.4 高良姜粗多糖含量的測(cè)定

    采用苯酚硫酸法:稱取0.01g葡萄糖溶解于100 mL蒸餾水中,取10支試管分別加入0,0.1~0.9 mL葡萄糖溶液并補(bǔ)充蒸餾水到1 mL,再加入6%苯酚溶液1 mL和濃硫酸5 mL,冷卻10 min后搖勻。在室溫下放置20 min,于波長(zhǎng)490 nm處測(cè)OD值。以葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    再取適量質(zhì)量濃度的高良姜粗多糖溶液1 mL按上述方法測(cè)量其OD值,并對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出粗多糖含量。

    1.3.5 高良姜粗多糖結(jié)合膽固醇膠束試驗(yàn)

    膽固醇膠束溶液配制參考文獻(xiàn)[9],并稍作改動(dòng)。稱取0.058 g膽固醇(最終質(zhì)量濃度0.5 mmol/L),0.267 g卵磷脂(最終質(zhì)量濃度2.4 mmol/L),0.085 g油酸(最終質(zhì)量濃度1.0 mmol/L)溶解于100 mL甲醇中,超聲波處理5 min,輸出功率84 W(70%),使其充分溶解。氮?dú)獯蹈珊蠹尤?9.8 mmol/L牛磺膽酸鈉溶液、396 mmol/L氯化鈉溶液、pH值7.4磷酸緩沖液各100 mL,然后超聲波處理2次,每次4 min,輸出功率108 W(90%)。處理后的溶液在37℃條件下培養(yǎng)12 h,以形成膽固醇膠束溶液。

    取上述膽固醇膠束溶液,加入不同量的高良姜粗多糖溶液,在37℃恒溫?fù)u床上培養(yǎng)2 h,以轉(zhuǎn)速10 000 r/min離心20 min。用膽固醇試劑盒測(cè)定膽固醇含量,即分別取每個(gè)樣品2.5 μL滴于96孔板上,并取2.5 μL蒸餾水,2.5 μL校準(zhǔn)液于孔板中,然后分別加入250 μL工作液,混勻,在37℃條件下孵育10 min,用酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)510 nm處測(cè)定各孔板的吸光度。每個(gè)樣品做3個(gè)重復(fù)。

    1.3.6 高良姜粗多糖結(jié)合膽酸鹽試驗(yàn)

    試驗(yàn)參考文獻(xiàn)[10],并稍作改動(dòng)。準(zhǔn)確稱取?;悄懰徕c0.032 g(最終濃度0.3 mmol/L),甘氨膽酸鈉0.029 g(最終濃度0.3 mmol/L),水合膽酸鈉0.026 g(最終濃度0.3 mmol/L),分別溶于200 mL pH值7.6的磷酸緩沖液中,作為母液。

    取上述母液0,0.1,0.5,1.0,1.5,2.0 mL于10 mL具塞比色管中,加入pH值為7.6的磷酸緩沖液補(bǔ)至2 mL,再加入5 mL硫酸,于70℃條件下水浴20 min,取出后冰水浴5 min,用紫外分光光度計(jì)于波長(zhǎng)387 nm處測(cè)量其吸光度。以膽酸鹽質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo),分別繪制3種膽酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    分別取2,4,6,8,10 mL高良姜粗多糖溶液,加入蒸餾水補(bǔ)至10 mL,并分別加入2 mL模擬胃液(HCl濃度0.1 mol/L),在37℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)2 h,以0.1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7.6。每份樣品中加入膽酸鹽母液4 mL,在37℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)2 h。將混合物轉(zhuǎn)入離心管,以轉(zhuǎn)速4 000 r/min離心20 min,取上清液按上述方法測(cè)定膽酸鹽含量。每個(gè)樣品做3個(gè)重復(fù),1個(gè)底物空白,1個(gè)膽酸鹽空白。對(duì)照膽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定得出其膽酸鹽含量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 醇析中乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)高良姜粗多糖得率的影響不同乙醇體積分?jǐn)?shù)提取高良姜粗多糖結(jié)果見(jiàn)圖1。

    圖1 不同乙醇體積分?jǐn)?shù)提取高良姜粗多糖結(jié)果

    由圖1可知,在試驗(yàn)的條件下以60%,70%,80%,90%乙醇進(jìn)行醇析,高良姜粗多糖得率分別為0.77%,0.93%,1.29%,1.46%;以無(wú)水乙醇進(jìn)行醇析,高良姜粗多糖得率為1.58%。因此,確定以無(wú)水乙醇進(jìn)行醇析為最佳方案。

    2.2 高良姜粗多糖中總糖及多糖含量測(cè)定結(jié)果

    總糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:

    Y=0.010 7X-0.013 9,R2=0.997 2;

    多糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:

    Y=1.041 5X+0.003 4,R2=0.993 8。

    對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得高良姜粗多糖中總糖含量約為58.68%,多糖含量約為34.22%。

    2.3 高良姜粗多糖結(jié)合膽固醇膠束能力測(cè)定

    高良姜粗多糖膽固醇膠束結(jié)合率見(jiàn)圖2。

    由圖2可知,隨著高良姜粗多糖溶液體積的增加,與膽固醇膠束結(jié)合率呈上升趨勢(shì),并在加入10 mL高良姜粗多糖溶液(約含有7.5 mg高良姜多糖)后曲線趨于平緩,結(jié)合率最高約為76.09%。說(shuō)明高良姜粗多糖能夠有效地結(jié)合膽固醇,降低膽固醇質(zhì)量濃度。

    2.4 高良姜粗多糖結(jié)合膽酸鹽試驗(yàn)

    牛磺膽酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:

    Y=17.744X+0.025 8,R2=0.996 8,

    水合膽酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:

    Y=12.252X+0.012 2,R2=0.996 4,

    甘氨膽酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:

    Y=15.422X+0.028 3,R2=0.996 4.

    高良姜粗多糖膽酸鹽結(jié)合率見(jiàn)圖3。

    圖2 高良姜粗多糖膽固醇膠束結(jié)合率

    圖3 高良姜粗多糖膽酸鹽結(jié)合率

    由圖3可知,隨著高良姜粗多糖溶液體積的增加,與3種膽酸鹽的結(jié)合率均呈上升趨勢(shì)。在加入8 mL高良姜粗多糖溶液(約含有6 mg高良姜多糖)后上升趨勢(shì)減緩,在加入10 mL高良姜粗多糖溶液(約含有8 mg高良姜多糖)時(shí)基本達(dá)到最高的結(jié)合率,此時(shí)粗多糖對(duì)牛磺膽酸鹽的結(jié)合率約為70.18%,對(duì)水合膽酸鹽的結(jié)合率約為79.55%,對(duì)甘氨膽酸鹽的結(jié)合率約為83.04%??梢?jiàn),高良姜粗多糖有一定的結(jié)合膽酸鹽能力。

    3 結(jié)論

    (1)采用熱水浸提法提取高良姜粗多糖,采用不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇沉淀高良姜粗多糖,并以高良姜粗多糖得率作為評(píng)價(jià)指標(biāo),確定粗多糖最佳醇沉體積分?jǐn)?shù)。結(jié)果表明,使用無(wú)水乙醇得到的高良姜粗多糖得率最高,約為1.58%。

    (2)采用體外模擬腸道超聲波乳化法制備膽固醇膠束,并用試劑盒測(cè)定其結(jié)合膽固醇膠束能力,在加入10 mL高良姜粗多糖溶液時(shí),膽固醇結(jié)合率最高,約為76.09%,證明高良姜粗多糖有較好的體外結(jié)合膽固醇膠束能力。

    (3)使用分光光度法測(cè)定其結(jié)合膽酸鹽能力,結(jié)果表明在加入10 mL高良姜粗多糖時(shí),對(duì)?;悄懰猁}的結(jié)合率約為70.18%,對(duì)水合膽酸鹽的結(jié)合率約為79.55%,對(duì)甘氨膽酸鹽的結(jié)合率約為83.04%??梢?jiàn),高良姜粗多糖有較好的體外結(jié)合膽酸鹽效果。

    [1]安寧,楊世林,鄒忠梅,等.高良姜黃酮類化學(xué)成分的研究[J].中草藥,2006(5):663-664.

    [2]李洪福,李永輝,王勇,等.高良姜化學(xué)成分及藥理活性的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2014(7):236-244.

    [3]Zhang Beibei,Dai Yuan,Liao Zhixin,et al.Three newantibacterial active diarylheptanoids from Alpinia officinarum[J].Fitoterapia,2010,81(7):948-952.

    [4]劉華強(qiáng).高良姜走勢(shì)分析[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥,2011(12):63.

    [5]楊全,嚴(yán)寒靜,龐玉新,等.南藥高良姜藥用植物資源調(diào)查研究[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào),2012(4):382-386.

    [6]胡佳惠,閆明.高良姜的研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009(10):2 544-2 546.

    [7]呂瑋,蔣伶活.高良姜的化學(xué)成分及藥理作用[J].中國(guó)藥業(yè),2006(3):19-21.

    [8]鄭義,王衛(wèi)東,李勇,等.高良姜多糖提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性[J].食品科學(xué),2014(2):126-131.

    [9]Kirana C,Rogers P F,Bennett L E,et al.Naturally derived micelles for rapid in vitro screening of potential cholesterol-lowering bioactives[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2005(5):4 623-4 627.

    [10]劉靜娜.殼聚糖降脂作用機(jī)理研究[D].無(wú)錫:江南大學(xué),2008.◇

    Research on the Effect of Cholesterol Lowering in Vitro of Alpinia officinarum Hance Crude Polysaccharide

    LIAO Kunmei,BAI Tianhe,CHEN Chuhua,ZHONG Xiaoting,ZHANG Peng,LI Zeqing,*CHEN Suhua
    (College of Food Science and Technology,Guangdong Ocean University,Zhanjiang,Guangdong 524088,China)

    This article used the hot water extraction method to extract the crude polysaccharide of Alpinia officinarum Hance,and determined the best alcohol precipitation concentration by measuring crude polysaccharide of Alpinia officinarum Hance in different alcohol precipitation concentration.The result indicates that by using absolute alcohol,the experiment got the highest crude polysaccharide extraction rate(around 1.58%).The article used simulated intestinal environment and ultrasonic emulsification method to preparation cholesterol micelle,and uses cholesterol reagent kit to determination the ability of cholesterol micelle combination.In the measuring range of this experience the highest cholesterol micelle combination is about 76.09%. The article also uses ultraviolet spectrophotometric method to determination the ability of bile salt combination.Result shows that the sodium taurocholate combination rate of Alpinia officinarum Hance crude polysaccharide is 70.18%,while the figure for hydration sodium cholate and sodium glycocholate is around 79.55%and 83.04%.It is demonstrate that the crude polysaccharide of Alpinia officinarum Hance has preferable ability of cholesterol lowering in vitro according to this experiment.

    Alpinia officinarum Hance;crude polysaccharide;cholesterol micelle;cholate salt

    R284

    A

    10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2017.05.029

    1671-9646(2017)05b-0004-03

    2017-04-25

    大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(CXXL2014025)。

    廖坤梅(1990—),女,在讀本科,研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)與工程。

    *通訊作者:諶素華(1973—),女,碩士,高級(jí)實(shí)驗(yàn)師,研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)與工程專業(yè)教學(xué)與科研。

    猜你喜歡
    高良姜膽酸蒸餾水
    高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方胰酶片中膽酸和?;秦i去氧膽酸的含量
    Analysis of Wastewater Membrane Pollutants in Joint Station and Research on Biological Control Technology
    治脾胃虛寒
    婦女生活(2018年12期)2018-12-14 06:43:30
    治胃寒痛
    婦女生活(2017年8期)2017-09-05 13:53:16
    應(yīng)用rbcL條形碼鑒別高良姜及其偽品大高良姜
    治胃寒痛
    婦女生活(2016年9期)2016-09-08 10:11:48
    血清甘膽酸測(cè)定在急性心肌梗死時(shí)對(duì)肝臟損傷的診斷價(jià)值
    痰熱清注射液中熊膽氧化成分的推測(cè)
    中成藥(2014年4期)2014-04-01 08:43:42
    熊去氧膽酸治療重度慢性乙型肝炎伴膽汁淤積的療效觀察
    用于蒸餾水機(jī)高溫測(cè)量的DPI系列智能測(cè)量?jī)x表
    亚洲天堂av无毛| 少妇人妻久久综合中文| 黑人高潮一二区| 国产精品女同一区二区软件| 国产乱来视频区| 在线观看免费视频网站a站| 久久久久久久久久人人人人人人| av播播在线观看一区| 国产成人精品婷婷| 99久国产av精品国产电影| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 成人黄色视频免费在线看| 91久久精品国产一区二区三区| 99久国产av精品国产电影| videos熟女内射| 少妇高潮的动态图| 日本色播在线视频| 一区二区三区精品91| 一级爰片在线观看| 99热这里只有是精品50| 国产精品国产av在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 国产成人精品久久久久久| 亚洲av中文av极速乱| av福利片在线| 国产精品无大码| 精品国产乱码久久久久久小说| 日本与韩国留学比较| 日本午夜av视频| 日本色播在线视频| av免费在线看不卡| 日韩强制内射视频| 久久 成人 亚洲| 老司机亚洲免费影院| 丝袜脚勾引网站| 国产精品久久久久久久久免| 乱码一卡2卡4卡精品| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久久久国产网址| 国产免费一级a男人的天堂| 欧美日韩在线观看h| 精品久久久久久电影网| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 美女国产视频在线观看| 精品久久久久久久久av| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 午夜福利影视在线免费观看| 久久精品夜色国产| 亚洲图色成人| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 在线观看av片永久免费下载| 精品久久久久久久久亚洲| 啦啦啦在线观看免费高清www| 免费大片18禁| 国产 精品1| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 日日爽夜夜爽网站| 久久精品国产亚洲av涩爱| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲怡红院男人天堂| 黄色一级大片看看| 丝瓜视频免费看黄片| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产精品伦人一区二区| 精品亚洲成a人片在线观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 成人综合一区亚洲| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 寂寞人妻少妇视频99o| 在线观看免费日韩欧美大片 | 哪个播放器可以免费观看大片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 青青草视频在线视频观看| 久久国内精品自在自线图片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 国产毛片在线视频| 亚洲av日韩在线播放| 久久精品国产自在天天线| 各种免费的搞黄视频| 国模一区二区三区四区视频| h视频一区二区三区| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲精品国产色婷婷电影| 一级黄片播放器| 人妻一区二区av| 亚洲美女黄色视频免费看| 校园人妻丝袜中文字幕| 狠狠精品人妻久久久久久综合| av有码第一页| 黑人高潮一二区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 欧美激情国产日韩精品一区| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲国产色片| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产淫语在线视频| av网站免费在线观看视频| 国产视频首页在线观看| 午夜精品国产一区二区电影| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 在线精品无人区一区二区三| 一级毛片 在线播放| 亚洲综合精品二区| 日韩成人伦理影院| 日本vs欧美在线观看视频 | 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产精品久久久久久av不卡| 精品一区二区三卡| 国产一区二区三区av在线| 91久久精品国产一区二区成人| 乱人伦中国视频| 全区人妻精品视频| 97在线视频观看| 人妻系列 视频| 99国产精品免费福利视频| 最新中文字幕久久久久| 一本一本综合久久| 在线播放无遮挡| 69精品国产乱码久久久| 日本欧美国产在线视频| 免费看光身美女| 日韩制服骚丝袜av| 曰老女人黄片| 亚洲在久久综合| 成人国产麻豆网| 亚洲四区av| 久久久精品免费免费高清| 在线观看免费日韩欧美大片 | 久久精品国产a三级三级三级| 插逼视频在线观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 性色av一级| 成人免费观看视频高清| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲精品第二区| 久久精品国产亚洲av涩爱| 99热网站在线观看| 午夜激情福利司机影院| 黑丝袜美女国产一区| 一边亲一边摸免费视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 18禁动态无遮挡网站| 国产av精品麻豆| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 丰满饥渴人妻一区二区三| 伦理电影大哥的女人| 亚洲精品乱久久久久久| 超碰97精品在线观看| 免费av不卡在线播放| 一边亲一边摸免费视频| 欧美丝袜亚洲另类| 久久毛片免费看一区二区三区| 一个人免费看片子| 久久久久精品性色| 纯流量卡能插随身wifi吗| 欧美变态另类bdsm刘玥| 我的老师免费观看完整版| 日韩大片免费观看网站| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 欧美+日韩+精品| 久久99精品国语久久久| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产精品久久久久久精品电影小说| 亚洲av成人精品一区久久| 老司机影院毛片| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲av综合色区一区| 欧美人与善性xxx| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产色爽女视频免费观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 久久 成人 亚洲| 久久狼人影院| 草草在线视频免费看| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲,欧美,日韩| 桃花免费在线播放| 久久精品久久久久久久性| 大陆偷拍与自拍| 国国产精品蜜臀av免费| 国产伦在线观看视频一区| 精品久久久久久电影网| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 麻豆成人午夜福利视频| 成人免费观看视频高清| 久久午夜综合久久蜜桃| 在线观看一区二区三区激情| 欧美日韩在线观看h| 国产精品久久久久成人av| 在线播放无遮挡| 女人精品久久久久毛片| 国产精品伦人一区二区| 午夜日本视频在线| 99久国产av精品国产电影| 在线精品无人区一区二区三| 午夜久久久在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产成人精品婷婷| 欧美丝袜亚洲另类| 中文天堂在线官网| 精品久久久精品久久久| 18+在线观看网站| 国产永久视频网站| 偷拍熟女少妇极品色| 久久精品国产亚洲av天美| av有码第一页| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 能在线免费看毛片的网站| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产成人免费观看mmmm| 99热全是精品| 欧美日韩综合久久久久久| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| av在线app专区| 亚洲欧美精品专区久久| 国产成人aa在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 伦理电影免费视频| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产成人aa在线观看| 老司机影院毛片| 亚洲情色 制服丝袜| tube8黄色片| 午夜av观看不卡| 女性被躁到高潮视频| 国产精品.久久久| 久久ye,这里只有精品| 久久久a久久爽久久v久久| 午夜av观看不卡| 亚洲国产色片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲色图综合在线观看| 97超碰精品成人国产| 成人国产av品久久久| 一级爰片在线观看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲av中文av极速乱| 我要看黄色一级片免费的| 免费看光身美女| 免费av中文字幕在线| 十八禁高潮呻吟视频 | 91成人精品电影| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲国产色片| 制服丝袜香蕉在线| 午夜老司机福利剧场| 国产伦在线观看视频一区| 九色成人免费人妻av| 九九爱精品视频在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看 | 青春草视频在线免费观看| 草草在线视频免费看| 久久精品久久久久久久性| 天天操日日干夜夜撸| 精品少妇内射三级| 国产一区二区三区综合在线观看 | 一区二区av电影网| 国产亚洲精品久久久com| 国产又色又爽无遮挡免| 这个男人来自地球电影免费观看 | 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲国产欧美在线一区| 水蜜桃什么品种好| 边亲边吃奶的免费视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 久久精品夜色国产| 亚洲欧美日韩东京热| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产在线视频一区二区| 十分钟在线观看高清视频www | 亚洲性久久影院| 视频区图区小说| 下体分泌物呈黄色| 亚洲精品久久午夜乱码| 如何舔出高潮| 色网站视频免费| 十分钟在线观看高清视频www | 免费看日本二区| 国产成人精品福利久久| 少妇人妻 视频| 高清欧美精品videossex| 人人妻人人看人人澡| 五月伊人婷婷丁香| 国内精品宾馆在线| 熟女av电影| 成人国产麻豆网| 成年人午夜在线观看视频| 97超碰精品成人国产| 人人妻人人澡人人看| 亚洲精品日本国产第一区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 一本大道久久a久久精品| 99久久精品一区二区三区| 日本午夜av视频| 五月天丁香电影| 中国美白少妇内射xxxbb| 有码 亚洲区| 三级国产精品欧美在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 久久久久久久久久成人| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 久久这里有精品视频免费| 国产男人的电影天堂91| 美女中出高潮动态图| 久久久久视频综合| 亚洲精品一区蜜桃| 七月丁香在线播放| 亚洲图色成人| 国产成人免费观看mmmm| 涩涩av久久男人的天堂| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲真实伦在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 欧美丝袜亚洲另类| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲三级黄色毛片| 日本黄大片高清| 久久久国产一区二区| 水蜜桃什么品种好| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 色吧在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 午夜激情久久久久久久| 免费看日本二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久久久久久精品精品| 丝袜喷水一区| 中文欧美无线码| 一区二区三区乱码不卡18| 午夜免费男女啪啪视频观看| 视频区图区小说| 久久久久国产精品人妻一区二区| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 久久久久久久大尺度免费视频| 伊人亚洲综合成人网| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 日本-黄色视频高清免费观看| 婷婷色综合www| 全区人妻精品视频| 久久久久网色| 男的添女的下面高潮视频| 曰老女人黄片| 国产黄色免费在线视频| 欧美3d第一页| 久久久久精品久久久久真实原创| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | av.在线天堂| 久久国内精品自在自线图片| 91久久精品电影网| 丝袜脚勾引网站| 亚洲精品aⅴ在线观看| 丝袜脚勾引网站| a级毛片在线看网站| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲真实伦在线观看| 日本黄色片子视频| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲美女搞黄在线观看| 中国三级夫妇交换| 成年女人在线观看亚洲视频| 日韩强制内射视频| 免费看光身美女| 中文字幕av电影在线播放| 五月开心婷婷网| 嫩草影院入口| 亚洲第一区二区三区不卡| 女性被躁到高潮视频| 中文天堂在线官网| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 婷婷色麻豆天堂久久| 天堂俺去俺来也www色官网| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 春色校园在线视频观看| 交换朋友夫妻互换小说| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 欧美精品一区二区免费开放| 成年av动漫网址| 亚洲国产av新网站| 成人美女网站在线观看视频| a级毛片免费高清观看在线播放| 免费看不卡的av| 欧美性感艳星| 久久久久久久久久久免费av| 国产精品久久久久成人av| 亚洲精品aⅴ在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲真实伦在线观看| 免费看av在线观看网站| 搡女人真爽免费视频火全软件| videos熟女内射| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 最近中文字幕高清免费大全6| www.av在线官网国产| 精品卡一卡二卡四卡免费| 精品国产露脸久久av麻豆| 高清欧美精品videossex| 亚洲精品aⅴ在线观看| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美日韩视频精品一区| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 中文字幕人妻丝袜制服| 人妻少妇偷人精品九色| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 另类精品久久| 少妇人妻 视频| 一个人免费看片子| 激情五月婷婷亚洲| 欧美日本中文国产一区发布| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 日韩中字成人| 一个人免费看片子| 伦理电影免费视频| 少妇高潮的动态图| av不卡在线播放| 日韩av在线免费看完整版不卡| 性色av一级| 日韩精品有码人妻一区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产精品三级大全| 国产成人freesex在线| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 人体艺术视频欧美日本| 狂野欧美激情性bbbbbb| 精品久久久久久久久亚洲| 极品少妇高潮喷水抽搐| 精品久久久久久久久av| 不卡视频在线观看欧美| 春色校园在线视频观看| 日日啪夜夜撸| 国产91av在线免费观看| 一级片'在线观看视频| 蜜桃在线观看..| 最近中文字幕高清免费大全6| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲精品,欧美精品| 九九爱精品视频在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 97超碰精品成人国产| 久久 成人 亚洲| 欧美xxⅹ黑人| 国产乱来视频区| 日韩精品有码人妻一区| 男人添女人高潮全过程视频| 偷拍熟女少妇极品色| 波野结衣二区三区在线| 久久久久久伊人网av| 欧美97在线视频| 国产视频首页在线观看| 久久久久久久久久久免费av| 老司机亚洲免费影院| 亚洲真实伦在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 777米奇影视久久| 秋霞伦理黄片| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲成人av在线免费| 2021少妇久久久久久久久久久| 日日啪夜夜撸| 亚洲国产精品国产精品| 黑人猛操日本美女一级片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 热99国产精品久久久久久7| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲精品一区蜜桃| av一本久久久久| 看免费成人av毛片| 一本一本综合久久| 国产精品成人在线| 日本91视频免费播放| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 在现免费观看毛片| 国产亚洲5aaaaa淫片| 老熟女久久久| 黑人猛操日本美女一级片| 免费大片黄手机在线观看| 一本大道久久a久久精品| 国产精品国产三级专区第一集| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲国产欧美在线一区| 国产探花极品一区二区| 春色校园在线视频观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| xxx大片免费视频| 国产伦在线观看视频一区| 插阴视频在线观看视频| 只有这里有精品99| 91成人精品电影| 我要看日韩黄色一级片| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 久久精品夜色国产| 日本wwww免费看| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 精品久久久久久久久亚洲| 国产日韩欧美在线精品| 久久青草综合色| 大话2 男鬼变身卡| 晚上一个人看的免费电影| 国产亚洲91精品色在线| 国产欧美亚洲国产| 简卡轻食公司| 一区二区av电影网| 久久久欧美国产精品| 99九九在线精品视频 | 欧美成人午夜免费资源| 午夜久久久在线观看| 五月开心婷婷网| 水蜜桃什么品种好| 国产伦精品一区二区三区视频9| 一级毛片aaaaaa免费看小| 免费观看性生交大片5| 国产免费一级a男人的天堂| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产成人精品婷婷| 伦理电影大哥的女人| 欧美精品亚洲一区二区| 又大又黄又爽视频免费| 99久久精品一区二区三区| 男男h啪啪无遮挡| 午夜日本视频在线| videos熟女内射| 亚洲情色 制服丝袜| 免费观看在线日韩| 免费看日本二区| 国产亚洲欧美精品永久| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲精品第二区| 一级毛片 在线播放| 高清视频免费观看一区二区| 大香蕉97超碰在线| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久婷婷青草| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产精品国产三级专区第一集| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 丝袜在线中文字幕| 精品久久国产蜜桃| 国产黄片美女视频| 青春草国产在线视频| 亚洲精品色激情综合| 十八禁网站网址无遮挡 | 婷婷色综合大香蕉| 人妻 亚洲 视频| 日韩欧美精品免费久久| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产色婷婷99| 亚洲成人手机| 国产黄频视频在线观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 伦理电影大哥的女人| 深夜a级毛片| 国产91av在线免费观看| 亚州av有码| 人人妻人人看人人澡| 国产黄片视频在线免费观看| 国产在线免费精品| 国模一区二区三区四区视频| 免费观看av网站的网址| 久久精品国产亚洲网站| 99热国产这里只有精品6| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚州av有码| h视频一区二区三区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 日本av手机在线免费观看| av福利片在线观看| 老司机影院成人| 亚洲真实伦在线观看| 久久久久久人妻| 我的女老师完整版在线观看| 免费人成在线观看视频色| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 黄色一级大片看看| 日韩免费高清中文字幕av| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | 国产老妇伦熟女老妇高清| 久久99精品国语久久久| 久久久久久人妻| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 天堂8中文在线网| 国产av精品麻豆| 国产中年淑女户外野战色| 成人国产麻豆网|