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      稀有鮈鯽作為化學(xué)品生態(tài)毒性測試魚類模式生物的標(biāo)準(zhǔn)化實踐

      2017-06-27 08:12:54梁藝懷張京佶石利利劉濟(jì)寧楊海榮趙榆楊鴻波李俊趙玉艷殷浩文
      生態(tài)毒理學(xué)報 2017年2期
      關(guān)鍵詞:斑馬魚魚種化學(xué)品

      梁藝懷,張京佶,石利利,劉濟(jì)寧,楊海榮,趙榆,楊鴻波,李俊,趙玉艷,殷浩文,*

      1. 上海市檢測中心生物與安全檢測實驗室,上海 2012032. 環(huán)境保護(hù)部南京環(huán)境科學(xué)研究所,南京2100423. 沈陽化工研究院有限公司測試評價中心,沈陽1100214. 貴州省分析測試研究院,貴陽 5500025. 蘇州華測安評化學(xué)品技術(shù)服務(wù)有限公司,蘇州 215121

      稀有鮈鯽作為化學(xué)品生態(tài)毒性測試魚類模式生物的標(biāo)準(zhǔn)化實踐

      梁藝懷1,張京佶1,石利利2,劉濟(jì)寧2,楊海榮3,趙榆3,楊鴻波4,李俊4,趙玉艷5,殷浩文1,*

      1. 上海市檢測中心生物與安全檢測實驗室,上海 2012032. 環(huán)境保護(hù)部南京環(huán)境科學(xué)研究所,南京2100423. 沈陽化工研究院有限公司測試評價中心,沈陽1100214. 貴州省分析測試研究院,貴陽 5500025. 蘇州華測安評化學(xué)品技術(shù)服務(wù)有限公司,蘇州 215121

      魚類模式生物在化學(xué)品生態(tài)毒性測試中占有重要地位,中國尚沒有合適的標(biāo)準(zhǔn)化本土實驗魚種。國家環(huán)境保護(hù)部第7號令《新化學(xué)物質(zhì)環(huán)境管理辦法》對本土受試生物用于生態(tài)毒性測試提出了要求。稀有鮈鯽(Gobiocypris rarus)是一種我國特有的小型淡水鯉科魚類,具有成為標(biāo)準(zhǔn)試驗魚種的潛能。首個以稀有鮈鯽為標(biāo)準(zhǔn)供試生物的化學(xué)品魚類急性毒性試驗國家標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)發(fā)布實施,其他測試方法的標(biāo)準(zhǔn)化工作正在持續(xù)進(jìn)行中。本文闡述了研發(fā)稀有鮈鯽為標(biāo)準(zhǔn)供試生物的依據(jù),對相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)化研究工作進(jìn)行了分析、歸納和總結(jié),并提出了未來工作的方向和需求。

      化學(xué)品;稀有鮈鯽;生態(tài)毒性;模式生物;標(biāo)準(zhǔn)化

      魚類模式生物是生命科學(xué)基礎(chǔ)研究的實驗材料之一,是藥物、食品、化學(xué)品等安全性評價和效果試驗的活試劑[1]。動物實驗的目標(biāo)是追求能準(zhǔn)確反映實驗過程的可靠數(shù)據(jù)。無論是科學(xué)研究、環(huán)境監(jiān)測還是毒性檢測,實驗動物的質(zhì)量是實驗數(shù)據(jù)可重復(fù)性(repeatability)、再現(xiàn)性(reproducibility)和可比性(comparability)的基石。在化學(xué)品安全管理中,高質(zhì)量的數(shù)據(jù)更是有效執(zhí)法的依據(jù)。

      某一種模式生物要成為實驗動物,并得到廣泛認(rèn)可和應(yīng)用必然要經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化研究。這也是實驗動物區(qū)別于其他類動物的本質(zhì)特征。魚類模式生物中最為人所知的當(dāng)屬斑馬魚(zebrafish,Danio rerio),其在生態(tài)毒理學(xué)評價中應(yīng)用廣泛,已成為僅次于小鼠的第二優(yōu)先脊椎模式生物[2],得到國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(International Organization for Standardization,ISO)、經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(Organization for Economic Co-operation and Development,OECD),以及歐洲化學(xué)工業(yè)生態(tài)學(xué)與毒理學(xué)中心(European Chemical Industry Ecology and Toxicology Center,ECETOC)等權(quán)威組織認(rèn)可。斑馬魚在遺傳學(xué)控制、微生物學(xué)控制、環(huán)境控制、營養(yǎng)學(xué)控制等方面的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)化工作已經(jīng)取得了諸多進(jìn)展[3]。在這方面,中國起步較晚,近10年來我國在環(huán)境科學(xué)研究領(lǐng)域有較多的本土物種參與到對環(huán)境質(zhì)量、風(fēng)險評估的應(yīng)用研究中,包括稀有鮈鯽(Gobiocypris rarus)、鯉魚(Cyprinus carpio)、草魚(Ctenopharyngodon idellus)、鰱魚(Hypophthalmichthys molitrix)、鳙魚(Aristichthys nobilis)、麥穗魚(Pseudorasbora parva)等本土獲取的魚種[4-5],但是這些研究絕大部分是集中在生態(tài)學(xué)和生態(tài)毒理學(xué)層面,對本土實驗魚種的實驗室內(nèi)模式物種的標(biāo)準(zhǔn)化研發(fā)和應(yīng)用尚在起步階段。由于我國化學(xué)品管理法規(guī)的需求,我國本土魚種稀有鮈鯽是目前標(biāo)準(zhǔn)化前景較好的魚種,已經(jīng)在化學(xué)品毒性測試領(lǐng)域中累積了較多的實踐經(jīng)驗,但要成為一種化學(xué)品測試普遍認(rèn)可的模式生物還需深入開展與物種特征鑒定、飼養(yǎng)規(guī)范、毒性響應(yīng)的穩(wěn)定性、實驗條件的適宜性、毒物敏感性等一系列標(biāo)準(zhǔn)化研究與驗證工作。本文旨在闡述研發(fā)稀有鮈鯽為化學(xué)品測試的標(biāo)準(zhǔn)供試生物的依據(jù);承前啟后,對已開展的實驗室內(nèi)和實驗室間的相關(guān)的質(zhì)量與測試技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化工作進(jìn)行分析、歸納和總結(jié),提出未來工作的方向和需求。

      1 以本土魚種作為模式生物應(yīng)用于化學(xué)品生態(tài)毒性測試的必要性(The necessity of native fish species as model organism used in chemical ecotoxicity testing )

      魚類作為水生生態(tài)毒性試驗體系中的頂級脊椎動物,在化學(xué)品生態(tài)毒性試驗體系中有著不可替代的作用。因此,發(fā)達(dá)國家早在化學(xué)品安全管理體系建立之初,就通過大量標(biāo)準(zhǔn)化研究推出符合管理要求、具有科學(xué)基礎(chǔ)的代表性試驗魚種。國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)在20上世紀(jì)80年代即推薦斑馬魚(Danio rerio)、黑頭軟口鰷 (Pimephales promelas)、藍(lán)鰓魚(Lepomis macrochirus)、虹鱒(Oncorhynchus mykiss)和青鳉(Oryzias latipes)等魚種作為為毒性試驗材料魚。這些標(biāo)準(zhǔn)化工作為發(fā)達(dá)國家在化學(xué)品安全管理全球化的過程中爭得了絕對的主導(dǎo)權(quán),并將管理體系和標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)的優(yōu)勢延伸擴(kuò)大到化學(xué)品生產(chǎn)、國際貿(mào)易等經(jīng)濟(jì)活動方面。

      目前全球化學(xué)品測試體系基本上以經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)發(fā)布的《化學(xué)品測試指南》系列技術(shù)指南文件(TGD)為框架。從測試方法到生物物種,歐美占了絕對的主導(dǎo)地位(表1)。生態(tài)保護(hù)上的特異性是全球公認(rèn)的,我們需要有符合我國環(huán)境保護(hù)特點(diǎn)的試驗魚種。2010年10月15日國家環(huán)境保護(hù)部頒布實施《新化學(xué)物質(zhì)環(huán)境管理辦法》(第7號令)[6],其中第十條規(guī)定新化學(xué)物質(zhì)的“生態(tài)毒理學(xué)特性測試報告,必須包括在中國境內(nèi)用中國的供試生物按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定完成的測試數(shù)據(jù)”。這從行政管理上奠定了保護(hù)我國生態(tài)環(huán)境安全的基礎(chǔ),也為后續(xù)生態(tài)毒性測試技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化的突破預(yù)留了空間。

      在世界貿(mào)易組織(WTO)框架下,工業(yè)產(chǎn)品安全性數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)已成為各國保護(hù)本國環(huán)境和經(jīng)濟(jì)的關(guān)鍵技術(shù)手段。作為化學(xué)品進(jìn)出口和生產(chǎn)大國,強(qiáng)調(diào)在與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌的同時,也應(yīng)該關(guān)注我國本土的特點(diǎn),尤其在具有地域性特征的生態(tài)問題上。通過制定我國特有魚種的標(biāo)準(zhǔn)系列,不僅能夠提升我國化學(xué)品安全管理的水準(zhǔn),切實落實管理上要求的用中國特有的供試生物進(jìn)行測試,還能推動我國標(biāo)準(zhǔn)化戰(zhàn)略從遵從國際標(biāo)準(zhǔn)向兼容并蓄中國自主標(biāo)準(zhǔn)的方向轉(zhuǎn)化。

      表1 OECD化學(xué)品測試指南中的魚類測試方法及推薦魚種Table 1 Fish tests and recommended species in OECD guidelines for chemical testing

      稀有鮈鯽(Gobiocypris rarus)是我國特有的一種小型鯉科魚類。因其性成熟時間短、繁殖季節(jié)長、產(chǎn)卵量較大,可常年人工繁殖,具有成為標(biāo)準(zhǔn)試驗魚種的潛能[17]。因其生物學(xué)特征研究已較為系統(tǒng),國內(nèi)許多科研單位、測試機(jī)構(gòu)使用稀有鮈鯽開展生命科學(xué)研究或生態(tài)毒性檢測[18-20]。正因為稀有鮈鯽存在的諸多優(yōu)勢和工作基礎(chǔ),它成為我國化學(xué)品魚類測試方法標(biāo)準(zhǔn)化的首選受試魚種。

      2 稀有鮈鯽種群建立與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究(Rare minnow resource and quality standards)

      數(shù)量充足、質(zhì)量合格的稀有鮈鯽胚胎、幼魚或成魚的供應(yīng),是順利進(jìn)行各類毒性試驗的前置條件。只有實現(xiàn)稀有鮈鯽的實驗室規(guī)范化養(yǎng)殖,才能為相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)的研制和實施提供保障。

      中國科學(xué)院水生生物研究所王劍偉研究員通過國家科技支撐計劃項目“實驗動物新品種的種群建立與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究” (2011BAI15B01),建立了稀有鮈鯽普通級和清潔級資源保存基地,制定了微生物、寄生蟲、遺傳、病理、飼料、環(huán)境等6個實驗稀有鮈鯽質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)條件控制標(biāo)準(zhǔn),以及飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)范、生物學(xué)特性描述規(guī)范、數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)范,還完成了實驗稀有鮈鯽分子遺傳標(biāo)記檢測、4種細(xì)菌多重PCR檢測、致病性嗜水氣單胞菌等5種病原細(xì)菌檢測、分枝桿菌檢測、寄生蟲檢測等技術(shù)操作規(guī)程的編制[21-23]。這些工作的完成,為稀有鮈鯽成為符合化學(xué)品環(huán)境管理要求的生態(tài)毒性測試受試生物奠定了基礎(chǔ)。

      3 稀有鮈鯽國家標(biāo)準(zhǔn)的研制以及在其他毒性測試方法適用性研究(Development of national standards related to rare minnow and research on its applicability to other toxicity testing methods)

      在經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)化學(xué)品測試指南生物系統(tǒng)效應(yīng)部分中,涉及魚類的測試方法占了將近1/4。在我國現(xiàn)行有效的化學(xué)品測試方法國家標(biāo)準(zhǔn)中,無論是試驗程序還是試驗生物,幾乎都是對OECD指南的等同轉(zhuǎn)化,鮮有技術(shù)創(chuàng)新。而遵循國際規(guī)范,驗證稀有鮈鯽的適用性并使之標(biāo)準(zhǔn)化,對完善我國的化學(xué)品生態(tài)毒性測試技術(shù)體系、落實環(huán)保部第7號令,具有重要意義。目前,已有一項稀有鮈鯽的化學(xué)品測試國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實施,另一項國家標(biāo)準(zhǔn)正在研制過程中。另外,為了應(yīng)對國際上日趨嚴(yán)格的脊椎動物動物使用限制,以稀有鮈鯽胚胎為材料的替代試驗標(biāo)準(zhǔn)化基礎(chǔ)研究已經(jīng)啟動;而管理部門對篩查新化學(xué)物質(zhì)中潛在內(nèi)分泌干擾物的技術(shù)需求,也使得稀有鮈鯽在該領(lǐng)域的適用性研究具有現(xiàn)實意義。

      3.1 國家標(biāo)準(zhǔn)《化學(xué)品 稀有鮈鯽急性毒性試驗》的研制

      我國化學(xué)品管理法規(guī)要求,魚類急性毒性試驗是必須在中國境內(nèi)完成的測試項目之一[6]。通過試驗可獲得化學(xué)品對中國受試生物的急性毒性數(shù)據(jù),并為后續(xù)毒性試驗的設(shè)計和觀察提供依據(jù)。同時,急性毒性試驗由于時間短、易操作、試驗條件便于控制等特點(diǎn),成為我國化學(xué)品管理規(guī)定的生態(tài)毒性試驗中最基礎(chǔ)層面的數(shù)據(jù)要求。

      首個以稀有鮈鯽為標(biāo)準(zhǔn)供試生物的國家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 29763-2013化學(xué)品 稀有鮈鯽急性毒性試驗》[24]已經(jīng)由上海市檢測中心聯(lián)合原環(huán)境保護(hù)部化學(xué)品登記中心、中國科學(xué)院水生生物研究所、中國檢驗檢疫科學(xué)研究院、環(huán)境保護(hù)部南京環(huán)境科學(xué)研究所、沈陽化工研究院有限公司安全評價中心5家單位共同研制完成,并正式頒布實施。在此之前,有關(guān)稀有鮈鯽的研究大多是將稀有鮈鯽作為科學(xué)研究的材料,尚未見標(biāo)準(zhǔn)化方面的報道。生態(tài)毒理學(xué)應(yīng)用研究較少,尤其在標(biāo)準(zhǔn)化基礎(chǔ)研究方面。

      為解決上述標(biāo)準(zhǔn)化過程中的短板,上海市檢測中心生物與安全檢測實驗室在多年應(yīng)用稀有鮈鯽進(jìn)行毒性實驗的基礎(chǔ)上于2009年啟動了為期2年的標(biāo)準(zhǔn)化專項研究,并延續(xù)一年補(bǔ)充數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和完成實驗室間的比對驗證,完成了稀有鮈鯽急性毒性試驗結(jié)果的重復(fù)性和再現(xiàn)性論證,并進(jìn)一步開展了與現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)魚種的可比性和敏感性研究。

      (1) 稀有鮈鯽急性毒性試驗結(jié)果的重復(fù)性和再現(xiàn)性研究

      研究選擇重鉻酸鉀和3, 4-二氯苯胺為參比物。結(jié)果表明,同一實驗室內(nèi)部相同試驗條件下,不同體長稀有鮈鯽對同一化學(xué)品的敏感性略有差異。同一實驗室內(nèi)6次重復(fù)試驗比較顯示,2種參比物對稀有鮈鯽 96 h半數(shù)致死濃度(96 h-LC50)值在質(zhì)量控制范圍之內(nèi),不同體長的稀有鮈鯽試驗結(jié)果體現(xiàn)了較好的重復(fù)性。同時,6個實驗室間的比對結(jié)果顯示,稀有鮈鯽的急性毒性試驗結(jié)果在不同實驗室間具有良好的再現(xiàn)性[25]。

      (2) 稀有鮈鯽與斑馬魚試驗結(jié)果的可比性

      通過實驗數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)分析2種方式獲得稀有鮈鯽和斑馬魚(現(xiàn)行國際標(biāo)準(zhǔn)魚種之一)對化學(xué)品敏感性特征數(shù)據(jù)集合(表2)。結(jié)果顯示,受試化學(xué)品對稀有鮈鯽與斑馬魚的96 h-LC50數(shù)值接近,基本處于同一數(shù)量級,提示2種試驗魚對受試化學(xué)品毒性響應(yīng)的差異不大。因此,稀有鮈鯽作為一種中國本土的試驗魚種,具有敏感性與國際主流的標(biāo)準(zhǔn)魚種斑馬魚相近的特點(diǎn),適宜作為魚類急性毒性試驗的標(biāo)準(zhǔn)魚種。

      3.2 國家標(biāo)準(zhǔn)《化學(xué)品 稀有鮈鯽幼體生長試驗》的研制

      通過《化學(xué)品 稀有鮈鯽急性毒性試驗》國家標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布和實施,稀有鮈鯽成為了化學(xué)品生態(tài)毒性測試領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)實驗魚種,然而,僅依據(jù)急性毒性數(shù)據(jù)來進(jìn)行化學(xué)品的危害評估和風(fēng)險評估是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。化學(xué)品在對試驗生物長期重復(fù)暴露時可能產(chǎn)生與急性毒性試驗不同的毒作用,而動物的生長衰老也可能影響毒作用的性質(zhì)和程度。與急性毒性數(shù)據(jù)相比,慢性毒性數(shù)據(jù)能夠提供更多的效應(yīng)終點(diǎn),在進(jìn)行某一化學(xué)品毒性的種間外推時慢性毒性數(shù)據(jù)具有較小的不確定性和評估因子,能夠優(yōu)化風(fēng)險評估的結(jié)論。因此,必須持續(xù)推動我國標(biāo)準(zhǔn)試驗魚種用于化學(xué)品生態(tài)毒性測試的標(biāo)準(zhǔn)化戰(zhàn)略,開展稀有鮈鯽在化學(xué)品慢性毒性試驗方法的標(biāo)準(zhǔn)化研究。2014年9月國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會批準(zhǔn)了由上海市檢測中心牽頭,環(huán)境保護(hù)部固體廢物與化學(xué)品管理技術(shù)中心、中科院水生生物研究所、中國檢驗檢疫科學(xué)研究院、南京環(huán)境保護(hù)研究所、浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所共同參與的《化學(xué)品 稀有鮈鯽幼體生長試驗》國家標(biāo)準(zhǔn)編制任務(wù)(項目編號20140324-T-469),該慢性毒性試驗標(biāo)準(zhǔn)的研制,有助于我國特有試驗魚種測試標(biāo)準(zhǔn)的系列化,為稀有鮈鯽最終成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)試驗魚種創(chuàng)造條件。

      表2 化合物對稀有鮈鯽和斑馬魚的急性毒性(96 h-LC50)比較Table 2 Comparison of acute toxicity (96 h-LC50) between Gobiocypris rarus and Danio rerio

      目前,標(biāo)準(zhǔn)研制團(tuán)隊以重鉻酸鉀和3,4-二氯苯胺為參比物質(zhì),開展稀有鮈鯽幼體生長試驗結(jié)果的重復(fù)性研究,這項參比物研究匯集了國內(nèi)5家同類實驗室,共同開展比對試驗,以期對試驗結(jié)果的再現(xiàn)性進(jìn)行評價。這些工作成果將成為《化學(xué)品 稀有鮈鯽幼體生長試驗》國家標(biāo)準(zhǔn)的重要依據(jù),為2017年底前完成標(biāo)準(zhǔn)草案的編制和送審奠定基礎(chǔ)。

      3.3 利用稀有鮈鯽進(jìn)行魚類相關(guān)替代試驗的適用性研究

      歐美國家的動物福利法規(guī)對采用脊椎動物作為實驗材料提出了越來越嚴(yán)格的限制。比如,歐洲動物福利法要求科學(xué)研究遵從3R(replacement, reduction and refinement)原則,盡可能地減少脊椎動物的使用,開發(fā)和驗證出可替代整體生物的試驗方法(如,細(xì)胞、組織、胚胎)[36-37]。其中,首選用于替代魚體暴露的方法為胚胎暴露。目前,OECD已頒布多個有關(guān)魚類胚胎毒性試驗的方法,如魚類胚胎急性毒性試驗(OECD TG 236)[15]、魚類早期生活階段毒性試驗(OECD TG 210)[9]、魚類胚胎-卵黃囊吸收階段短期毒性試驗(OECD TG 212)[10]。隨著國際上化學(xué)品毒性測試技術(shù)的升級換代,我國則剛完成傳統(tǒng)意義上的化學(xué)品安全測試體系框架建設(shè),在體外活體替代試驗的測試技術(shù)、驗證和標(biāo)準(zhǔn)化等關(guān)鍵環(huán)節(jié)上還存在空白,相關(guān)工作大多還停留在毒性效應(yīng)研究階段[18,38-43]。因此,需要緊跟國際大趨勢,在稀有鮈鯽急性、慢性毒性試驗標(biāo)準(zhǔn)的研制基礎(chǔ)上,開展該魚種的替代潛力研究,進(jìn)行胚胎毒性試驗關(guān)鍵技術(shù)攻關(guān),為魚類替代試驗的標(biāo)準(zhǔn)化積累數(shù)據(jù),實現(xiàn)相關(guān)替代試驗技術(shù)的革新。

      3.4 利用稀有鮈鯽篩查內(nèi)分泌干擾物質(zhì)的適用性研究

      環(huán)境中的許多化學(xué)物質(zhì)可能與人體和野生生物的內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生相互作用,從而導(dǎo)致某些不良影響,比如損害動物體和人體的生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)。就管理部門而言,對內(nèi)分泌干擾物質(zhì)的進(jìn)行有效監(jiān)管的前提是正確識別,而傳統(tǒng)的測試方法已難以滿足這方面的需求。1998年OECD便啟動了優(yōu)先工作計劃,開發(fā)了一組魚類測試方法(229魚類短期繁殖試驗[12],230雌激素、雄激素活性與芳香化酶活性抑制魚類21天短期篩選試驗[13]、234魚類性發(fā)育試驗[14]以及240青鳉擴(kuò)展一代繁殖試驗[16]),用于篩選并測定對魚類內(nèi)分泌系統(tǒng)具有干擾效應(yīng)的活性物質(zhì)。上述方法推薦的試驗用魚包括黑頭軟口鰷(Pimephales promelas)、日本青鳉(Oryzias latipes)、斑馬魚(Danio rerio),主要采用卵黃蛋白原(VTG)和第二性征作為觀測指標(biāo),或伴有繁殖力的檢測,甚至性腺組織病理學(xué)分析。由于內(nèi)分泌干擾物質(zhì)對環(huán)境和人類健康的潛在危害和風(fēng)險,此類物質(zhì)的篩查和評價終會成為我國化學(xué)品安全管理的一個重點(diǎn)。近10年來,國內(nèi)學(xué)者利用稀有鮈鯽作為受試生物,開展了各類環(huán)境污染物的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)研究[44-54]。然而,對于OECD魚類內(nèi)分泌干擾物篩查試驗,有關(guān)稀有鮈鯽的適用性驗證工作才剛剛起步,需要國內(nèi)的科研和測試機(jī)構(gòu)共同努力,為相關(guān)方法建立國家標(biāo)準(zhǔn)積累關(guān)鍵數(shù)據(jù)和技術(shù),也為未來國家職能部門的管理需求進(jìn)行技術(shù)儲備。

      4 展望(Outlook)

      總之,稀有鮈鯽作為特有的本土魚種,在我國多年來的化學(xué)品管理和環(huán)境保護(hù)中具有重要的意義和實踐,已經(jīng)具備了化學(xué)品測試標(biāo)準(zhǔn)化的基礎(chǔ)。相關(guān)的實驗室和研究機(jī)構(gòu)應(yīng)該在遵從與國際一致的標(biāo)準(zhǔn)化原則的前提下,科學(xué)地驗證和評價稀有鮈鯽對化學(xué)品魚類測試方法的適用性,不斷擴(kuò)大稀有鮈鯽作為化學(xué)品測試模式生物的使用范圍,在化學(xué)品測試實踐中累積物種穩(wěn)定性和敏感性數(shù)據(jù),完善物種鑒定要求和飼養(yǎng)條件。這些都是未來稀有鮈鯽標(biāo)準(zhǔn)化工作的需求和研究方向。

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      Standardization ofGobiocyprisrarusas Fish Model Used in Chemical Ecotoxicity Testing

      Liang Yihuai1, Zhang Jingji1, Shi Lili2, Liu Jining2, Yang Hairong3, Zhao Yu3, Yang Hongbo4, Li Jun4, Zhao Yuyan5, Yin Haowen1,*

      1. Bioassay and Safety Assessment Laboratory, Shanghai Academy of Public Measurement, Shanghai 201203, China2. Nanjing Institute of Environmental Sciences of the Ministry of Environmental Protection, Nanjing 210042, China3. Testing Evaluation Center Shenyang Research Institute of Chemical Industry CO., LTD., Shenyang 110021, China4. Guizhou Academy of Testing and Analysis, Guiyang 550002, China5. Centre Testing International (Suzhou), Suzhou 215121, China

      26 November 2016 accepted 20 March 2017

      Fish models play an important role in chemical ecotoxicity testing, but no Chinese native fish species have been fully agreed on in this area. As the Provisions on Environmental Administration of New Chemical Substances (the Order No. 7, released by the Ministry of Environmental Protection of China) require, native test organisms would be preferred in ecotoxicity testing. Rare minnow (Gobiocypris rarus) is one species of small freshwater fish endemic to China, and probably is able to serve as a promising standardized test fish. While the first national standard for fish acute toxicity test adopting rare minnow has been developed and issued in China, other work on standardization of testing methods relevant to rare minnow is still ongoing. This article explained the foundation to develop rare minnow as standardized test fish, analyzed and summarized the related standardization issues, and also pointed out the trend and the demand of research in future.

      chemicals; Gobiocypris rarus; ecotoxicity; model organism; standardization

      上海市科委技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)專項 (15DZ0504100)

      梁藝懷(1981-),男,高級工程師,研究方向為生態(tài)毒理學(xué),E-mail: liangyh@apm.sh.cn;

      *通訊作者(Corresponding author), E-mail: yinhw@apm.sh.cn

      10.7524/AJE.1673-5897.20161126003

      2016-11-26 錄用日期:2017-03-20

      1673-5897(2017)2-002-09

      X171.5

      A

      殷浩文(1959-),男,教授級高級工程師,主要從事化學(xué)品風(fēng)險評價和生態(tài)毒理學(xué)研究,發(fā)表學(xué)術(shù)論文50余篇,專著及合著6部。

      梁藝懷, 張京佶, 石利利, 等. 稀有鮈鯽作為化學(xué)品生態(tài)毒性測試魚類模式生物的標(biāo)準(zhǔn)化實踐[J]. 生態(tài)毒理學(xué)報,2017, 12(2): 2-10

      Liang Y H, Zhang J J, Shi L L, et al. Standardization of Gobiocypris rarus as fish model used in chemical ecotoxicity testing [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2017, 12(2): 2-10 (in Chinese)

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