不同程度小兒手足口病患兒的炎癥因子水平及免疫功能比較

陶麗靜，胡碧英，王 帥

(惠州市第二婦幼保健院，廣東 惠州 516001)

手足口病(hand foot-mouth disease，HFMD)是由多種腸道病毒引發(fā)的傳染性疾病，5歲以上嬰幼兒較為常見(jiàn)，輕度HFMD臨床癥狀以發(fā)熱、手、足、口腔部位皰疹或皮疹為主，多數(shù)患兒可自愈，少數(shù)進(jìn)展為重度HFMD，引發(fā)心肌炎、肺水腫、腦膜炎等癥狀，若不及時(shí)治療，可引發(fā)小兒死亡[1]。超敏反應(yīng)蛋白(Hs-CRP)是一種炎性反應(yīng)蛋白，其在感染、創(chuàng)傷、手術(shù)后明顯上升，有報(bào)道[2]顯示，Hs-CRP在小兒手足口病可作為病情程度及預(yù)后的重要參考指標(biāo)。免疫功能在HFMD疾病進(jìn)展及治療中起到重要作用，研究[3]發(fā)現(xiàn)，輕度HFMD患兒進(jìn)展為重度HFMD患兒伴有明顯的細(xì)胞學(xué)改變及免疫失衡。本文分析了不同程度小兒手足口病的炎癥因子水平及免疫功能變化，期望為臨床分析小兒HFMD病情及輔助治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將我院2016-01—2016-12間收治的小兒手足口病356例作為研究對(duì)象，均符合國(guó)家衛(wèi)生部制定的《手足口病預(yù)防控制指南(2010年版)》以下簡(jiǎn)稱(chēng)《指南》相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，均經(jīng)排除其他免疫抑制性疾病。按照《指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)分為輕度組(n=302)與重度組(n=54)，輕度組小兒中男169例，女133例，年齡1～6歲，平均年齡(2.8±1.3)歲，發(fā)病時(shí)間1～5 d，平均發(fā)病時(shí)間(1.6±0.6)d；重度組小兒中男29例，女25例，年齡1～6歲，平均年齡(2.6±1.4)歲，發(fā)病時(shí)間1～6 d，平均發(fā)病時(shí)間(1.8±0.7)d。兩組患兒在年齡、性別、發(fā)病時(shí)間等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

所有患兒于次日晨抽取空腹靜脈血3 mL，分裝2個(gè)EDTA抗凝管中，分別測(cè)定Hs-CRP、免疫球蛋白及T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平。(1)hs-CRP、WBC、免疫球蛋白測(cè)定:測(cè)定儀器為雅培全自動(dòng)生化分析儀雅培c16000hs-CRP，免疫球蛋白檢測(cè)方法為免疫比濁法，WBC測(cè)定經(jīng)生化分析儀直接讀??；(2)免疫功能:采用免疫酶法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群中的CD3+、CD4+、CD8+及 CD4+/ CD8+水平。上述檢驗(yàn)操作均嚴(yán)格遵循相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)規(guī)范。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 不同程度小兒的HFMD Hs-CRP及WBC水平比較

重度小兒HFMD的Hs-CRP及WBC水平均顯著高于輕度HFMD(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1 不同程度小兒的HFMD Hs-CRP及WBC水平±s)

2.2 不同程度小兒HFMD免疫球蛋白及補(bǔ)體水平比較

重度小兒HFMD的IgA 水平顯著低于輕度HFMD；重癥小兒HFMD的IgG、C3及C4水平均顯著高于輕度小兒HFMD(P<0.001)。見(jiàn)表2。

表2 不同程度HFMD免疫球蛋白及補(bǔ)體水平±s) g/L

2.3 不同程度小兒HFMD細(xì)胞免疫功能比較

重度小兒HFMD的CD3+水平、CD4+水平及CD4+/CD8+比值均顯著低于輕度小兒HFMD，重度小兒HFMD的CD8+水平顯著高于輕度小兒HFMD(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 不同程度小兒HFMD細(xì)胞免疫功能±s) %

3 討論

3.1 不同程度小兒的HFMD hs-CRP及WBC水平

本組數(shù)據(jù)顯示，重度小兒HFMD的Hs-CRP及WBC水平均顯著高于輕度小兒HFMD，說(shuō)明隨著HFMD疾病進(jìn)展，小兒炎癥反應(yīng)明顯增加。CRP是由干細(xì)胞合成的急性反應(yīng)蛋白，正常人群CRP水平較低，一般為0～3 mg/mL，當(dāng)人體處于炎癥反應(yīng)狀態(tài)下，血中CRP水平通常在6～8 h出現(xiàn)上升，24～48 h達(dá)到峰值。有研究[5]發(fā)現(xiàn)，hs-CRP水平與WBC水平可更好地反映HFMD的炎癥反應(yīng)程度。本組數(shù)據(jù)中重度小兒HFMD的Hs-CRP及WBC水平與輕度小兒HFMD比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，暫不能說(shuō)明hs-CRP在輔助判斷小兒HFMD程度方面有更好的特異性，需大樣本采樣分析后方可得出結(jié)論。

3.2 體液免疫與手足口病程度

HAMAGUCHIT[6]報(bào)道了1例小兒在感染EV71病毒后，由于自身免疫功能低下，疾病快速進(jìn)展為重癥HFMD，引發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)功能損傷，說(shuō)明自身免疫系統(tǒng)可能與HFMD發(fā)病后進(jìn)展程度密切相關(guān)，自身免疫能力差的更易遭受病毒侵襲后進(jìn)展為重度HFMD。本組研究結(jié)果顯示，重度小兒HFMD的IgA 水平顯著低于輕度HFMD；重度小兒HFMD的IgG、C3及C4水平均顯著高于輕度HFMD小兒。說(shuō)明重度小兒HFMD的體液免疫與輕度HFMD存在明顯的差異，輕度小兒體液免疫損傷程度低于重度HFMD小兒。HFMD發(fā)病后伴有的另一明顯特征為體液免疫功能紊亂，陳大宇[7]對(duì)HFMD患兒分為伴神經(jīng)源肺水腫重度HFMD、未合并神經(jīng)元肺水腫重度HFMD、輕度HFMD，分別測(cè)定體液免疫指標(biāo)后對(duì)比發(fā)現(xiàn)，HFMD普遍伴隨體液免疫功能性紊亂，重度小兒HFMD IgG、C3、C4顯著高于輕度小兒HFMD。體液免疫是由體內(nèi)B淋巴細(xì)胞分泌的抗體，單抗體有特定靶細(xì)胞，病原入侵后攜帶靶細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞與之結(jié)合，殺滅抗原，該過(guò)程中部分B淋巴細(xì)胞分化為記憶B細(xì)胞，待下次該病毒再次入侵后發(fā)回二次免疫應(yīng)答作用[8]。B淋巴細(xì)胞分泌IgA、IgG、lgM，C3、C4補(bǔ)體共同發(fā)回免疫應(yīng)答功效,正常情況下IgA水平低于IgG，高于IgM，炎癥反應(yīng)后，IgA吞噬抗原，導(dǎo)致數(shù)量下降，IgG為血中含量最多的體液免疫細(xì)胞，IgG的功能作用主要在機(jī)體免疫中起保護(hù)作用，抗原或體內(nèi)炎癥反應(yīng)下，B淋巴細(xì)胞分化IgG數(shù)量顯著增加，發(fā)揮免疫保護(hù)作用。重度小兒HFMD血中IgG 、C3、C4顯著增高可能與機(jī)體在抗原及炎癥反應(yīng)狀態(tài)下，B淋巴細(xì)胞大量分化為IgG，同時(shí)C3及C4補(bǔ)體上升協(xié)助完成免疫保護(hù)功能，IgA顯著降低與IgA和抗原大量結(jié)合，撲滅抗原，消耗較多有關(guān)。

3.3 細(xì)胞免疫與手足口病程度

細(xì)胞免疫與體液免疫具有協(xié)同作用，腸道病毒感染后，體液免疫發(fā)揮抗病毒，阻止病毒在體內(nèi)傳播，但病毒侵襲至宿主細(xì)胞后，細(xì)胞免疫將發(fā)揮重要功效，細(xì)胞免疫是由效應(yīng)T細(xì)胞與靶細(xì)胞結(jié)合，引發(fā)靶細(xì)胞通透性變化，滲透壓下降，引發(fā)靶細(xì)胞變性、裂解、死亡。小兒病毒侵襲后，免疫細(xì)胞啟動(dòng)，T淋巴細(xì)胞處于異常狀態(tài)，CD3+細(xì)胞代表總T淋巴細(xì)胞，T細(xì)胞在腸道病毒感染的免疫應(yīng)答中發(fā)揮介導(dǎo)性作用，其數(shù)量明顯下降，往往預(yù)示著細(xì)胞免疫功能降低，CD4+細(xì)胞為T(mén)輔助細(xì)胞，CD8+為T(mén)抑制細(xì)胞，CD4+/CD8+的變化功能維持了免疫球蛋白的平衡，CD4+/CD8+比值的下降可引發(fā)血清中免疫球蛋白出現(xiàn)異常。

本研究結(jié)果顯示，重度小兒HFMD的CD3+水平、CD4+水平及CD4+/CD8+比值均顯著低于輕度小兒HFMD，重度小兒HFMD的CD8+水平顯著高于輕度小兒HFMD。說(shuō)明重度小兒HFMD存在更為嚴(yán)重的細(xì)胞免疫功能下降及紊亂問(wèn)題，上述差異的原因可能為：腸道病毒侵入宿主細(xì)胞后，直接攻擊T細(xì)胞，導(dǎo)致T細(xì)胞數(shù)量降低，CD3+、CD4+水平降低(細(xì)胞免疫下降)，CD8+卻未出現(xiàn)明顯下降，間接引發(fā)CD4+/CD8+下降，細(xì)胞免疫紊亂。

綜上，本研究說(shuō)明，重癥hs-CRP及WBC水平均顯著高于輕度HFMD，具有一致性，重度小兒HFMD與輕度小兒HFMD比較，存在明顯的體液免疫及細(xì)胞免疫功能下降、紊亂，臨床醫(yī)師在治療時(shí)應(yīng)重視對(duì)小兒HFMD的免疫調(diào)節(jié)。

[1] 耿蓉娜，劉會(huì)玲，王偉秀.重癥手足口病的流行特征分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(17)：3763-3765.

[2] 張婷.血清心肌酶譜、肌鈣蛋白和超敏 C-反應(yīng)蛋白在手足口病患兒中的臨床意義[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2014,18(8):1255-1257.

[3] 周冠寅.不同程度手足口病患兒血清細(xì)胞因子及免疫球蛋白水平變化探討[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017,38(6)：799-802.

[4] 國(guó)家衛(wèi)生部.手足口病診療指南(2010年版)[J].柳州醫(yī)學(xué)，2012,25(2)：140-143.

[5] 周清華,陳娟.手足口病患兒早期檢查免疫功能及超敏C反應(yīng)蛋白的臨床意義[J].臨床薈萃,2016,31(8):893-896.

[6] HAMAGUCHI T,FUJISAWA H,Sakai K,etal.Acute encephalitis caused by intrafamilial transmission of enterovirus 71 in adult[J].Emerging Infectious Diseases,2008,14(5):828.

[7] 陳大宇，覃培栩，鄭敏.兒童手足口病免疫球蛋白與T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)與價(jià)值[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35(7)：928-929.

[8] 李軍，葉冰，張偉，等.手足口病 61 例細(xì)胞免疫功能分析[J].中國(guó)實(shí)用兒科雜志，2012,27(4)：306-308.